Universidad del Mar Campus (Puerto Angel)

Anlisis del efecto de la morfologa foliar sobre la eficiencia de absorcin de luz de las hojas del pasto marino Syringodium filiforme

T E S I S
Que para obtener el grado acadmico de Licenciado en Biologa Marina

P r es e n t a

Miguel Angel Prez Castro

Directora de tesis: Dra. Susana Enrquez Domnguez

Agradecimientos y dedicatoria

Agradezco a mis padres por todo el apoyo que me proporcionaron, porque en los momentos de dificultad estn siempre pendientes, porque me guiaron sabiamente e impulsaron mis habilidades y mi desempeo escolar hacindome posible culminar esta etapa de mi vida. Gracias mam por tus oraciones, por tu entrega, por tus consejos, pero sobre todo por tu gran amor incondicional, que con ese ejemplar sentimiento que tienes has formado un carcter especial en mi vida. Gracias pap por tus palabras puntuales y oportunas, porque apoyas y orientas mis inquietudes, porque confas en m y me recordaste lo que es ser un Capitn de mi vida, A ti hermana gracias por todo lo que hiciste por m durante esta tesis, por tu especial amor, compaa y conocimiento. A ti especialmente te dedico esta tesis para que en tu carrera como arquitecta te inspiren los diseos de esta sabia naturaleza. A mis Tos les agradezco por su cario y por hacerme un poco ms cmoda mi estancia en Puerto Morelos. A la Dra. Susana Enrquez por transmitirme su conocimiento, por su gran apoyo y por escuchar mis inquietudes. A mis compaeros de laboratorio por hacer ms placentero el trabajo. Y a las personas que compartieron experiencias nicas conmigo y me apoyaron de alguna u otra manera en el desarrollo de esta tesis. Al CONACYT por haber financiado este trabajo de tesis con el proyecto 104643 en la convocatoria 2008

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Resumen
Los pastos marinos descendieron de plantas terrestres y recolonizaron el ambiente marino hace 90-120 m.a. Al colonizar los ambientes bentnicos de las aguas costeras han tenido que competir con la gran diversidad de macroalgas ya presentes y lo han hecho exitosamente, pues se encuentran en las aguas costeras de todos los continentes excepto de la Antrtida. En ste estudio se evalu el efecto de la morfologa foliar en la capacidad y eficiencia de absorcin de luz del pasto marino Syringodium filiforme para conocer las ventajas o desventajas que adquiere la estructura cilndrica de este pasto marino sobre las hojas laminares que presenta Thalassia testudinum en la habilidad de absorber la luz. Tales propiedades pticas constituyen uno de los abundancia y distribucin espacial. Los modelos obtenidos indicaron que variaciones en el grosor de las hojas de S. filiforme generan los mayores cambios en la capacidad de absorcin de luz, y que la densidad de la hoja (mg PS cm ) provoca las mayores cadas en la eficiencia de absorcin de luz de la clorofila a (a*Chla) de los pigmentos (a*pigm) y de la biomasa (a*M). Al comparar el patrn de reduccin de a*Chla en funcin del aumento del contenido de clorofila a o pigmentos por rea proyectada result que las hojas de S. filiforme son ms eficientes absorbiendo luz que las de T .testudinum. El examen morfolgico indic que lo consiguieron gracias a desarrollar unas hojas gruesas (un orden de magnitud mayor que la hoja laminar), pero tambin del gran aumento del volumen de los espacios de aire del sistema lacunar (3 veces), as como de su disposicin radial del mismo. Estas caractersticas en conjunto le otorgaron a S. filiforme una mayor habilidad de dispersar la luz en su estructura interna y de esta manera aumentar significativamente el paso ptico de la luz, que aunado a la amplia distribucin de sus cloroplastos en el interior de su hoja cilndrica, la probabilidad de absorber un fotn por una molcula de pigmento es mayor que dentro de la hoja laminar de T. testudinum que tiene restringido los cloroplastos en la epidermis. Por lo tanto la ventaja adaptativa que presentan las hojas cilndricas de S. filiforme sobre las hojas laminares de T. testudinum, result en este estudio de un aumento en un 15% de la capacidad mxima de absorcin de luz, y tambin un significativo incremento de la eficiencia de absorcin de luz tanto por los pigmentos y tanto ms por la biomasa. La respuesta fotoaclimatativa de las hojas de S. filiforme se observ claramente en el contenido de pigmentos, absorptancia y a*pigm. Mientras que las variables morfolgicas fueron menos claras en dicha respuesta, sin embargo los resultados indicaron que las variaciones morfolgicas (grosor, densidad y contenido de pigmentos) actan conjuntamente para regular la capacidad y eficiencia de absorcin de luz. Adems en este anlisis preliminar las hojas de S. filiforme resultaron tener una alta plasticidad fotoaclimatativa a nivel morfolgico y bioqumico, lo cual est en funcin de las demandas o necesidades de absorcin de luz.
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factores

reguladores del crecimiento de los organismos fotosintticos y que son claves para entender su

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ndice

I.

Introduccin

1.1 Importancia y caractersticas de los pastos marinos.

Los pastos marinos son las nicas plantas con flores y frutos que viven en el mar, son, adems, el nico ejemplo de plantas superiores terrestres que regresaron al ocano para vivir totalmente sumergidas hace 90-120 millones de aos (den Hartog 1970). Los pastos marinos se distribuyen en las aguas costeras y estuarinas de todos los continentes del mundo, excepto en la Antrtida. Este grupo tiene relativamente pocas especies, sin embargo su compleja estructura fsica y la alta productividad de estos ecosistemas les permite mantener una biomasa considerable y servir de alimento y/o refugio para una gran diversidad de especies asociadas (Green & Short 2003). Constituyen el hbitat de numerosas especies marinas de diverso tamao y en diferentes fases de desarrollo (larvas, postlarvas, juveniles, adultos), por lo que juegan un papel fundamental en los ecosistemas costeros para preservar la biodiversidad marina (Romeu 2005). Despus de cinagas, marismas y de bosques tropicales y templados, la pradera submarina es uno de los ecosistemas ms productivos del planeta, se ha estimado que son responsables de fijar un 15% del carbono orgnico neto total producido en el ocano, a pesar de que slo ocupan una pequea fraccin (0.1-0.2%) de su superficie (Duarte & Chiscano 1999). Adems secuestran alrededor de 3700 kilogramos de carbn atmosfrico por ao (83 gr. de carbn por metro cuadrado al ao), de sta manera ayudan a reducir considerablemente los gases de efecto invernadero. Los servicios que aportan las praderas submarinas en relacin a otros hbitats marinos y terrestres han sido valorados como uno de los ms altos (Costanza et al. 1997). Entre estos servicios destacan su importancia en la produccin pesquera, en la estabilizacin del sustrato y en la proteccin de la erosin costera (Green & Short 2003).

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Aunque todos los pastos marinos son monocotiledoneas, las especies que conforman este reducido grupo no tienen un origen evolutivo comn. Son un grupo polifiltico definido por el particular nicho ecolgico que habitan. A pesar de la diversidad filtica, hay clara evidencia de la convergencia evolutiva en varias de sus estructuras y funciones, como lo es el extensivo sistema de rizomas que por su expansin horizontal (implicado a un crecimiento clonal), hace posible la construccin de verdaderas praderas submarinas. (Green & Short 2003). Los pastos marinos actuales tienen varias modificaciones morfolgicas y anatmicas, las cuales los diferencian de las dems plantas terrestres. Sin embargo, muchas de estas adaptaciones tambin estn presentes en otras plantas acuticas de ambientes dulceacucolas o salobres (Arber 1920; Sculthorpe 1967 in Kuo & den Hartog 2006) y deberan ser interpretados como adaptaciones al ambiente acutico. Estos rasgos incluyen: hojas con cutcula delgada; pequeas clulas de la epidermis con gruesas paredes; concentracin de cloroplastos en la epidermis; ausencia de estomas; un mesfilo transformado en un aernquima que rodea grandes espacios intercelulares; y una reduccin del xilema (Kuo & den Hartog 2006). Varias de estas adaptaciones de la anatoma foliar parecen encaminadas a favorecer la fotosntesis en el ambiente marino y sumergido (Larkum et al. 2006). Los pastos marinos comparten con otras plantas acuticas ciertas caractersticas que varios autores han identificado como fundamentales para asegurar su superviviencia en el medio marino. Entre ellas destacan: (1) crecer totalmente sumergidos, (2) sistema eficiente de anclaje, y (3) ser capaz de osmorregular y (4) tener un mecanismo hidroflico de polinizacin (Kuo & Den Hartog 2000; Green & Short 2003). Adems de estas caractersticas se ha reseado la necesidad de considerar una quinta para explicar el xito evolutivo de este grupo en los ecosistemas costeros de la mayor parte del los continentes del planeta, que es ser capaz de competir exitosamente con las dems macrfitas marinas presentes en los distintos ambientes costeros (Kuo & Den Hartog 2000; Green & Short 2003) como lo estn las macroalgas del genero Halimeda, Penicillum, Udote etc. Teniendo en cuenta que la luz es el factor principal que determina la densidad, distribucin, abundancia y productividad de los organismos fotosintticos, (Kirk 1994), sta ltima caracterstica est ligada a la habilidad de los pastos marinos para absorber luz y a la eficiencia cuntica en el uso fotosinttico de la luz absorbida para soportar el crecimiento de la planta (Enrquez 2005; Cayabyab & Enrquez 2007). Los requerimientos mnimos de luz estimados para los pastos marinos indican que tienen altas demandas de luz, entre el 5% y el 37% de la irradiancia superficial (%Es)

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(Duarte, 1991; Dennison et al. 1993; Olesen & San-Jensen 1993 in Zimmerman 2006) mucho mayores que las estimadas para las macrfitas y el fitoplancton del orden de 0.1 al 1% de la irradiancia superficial (%Es), lo que probablemente est relacionado con su mayor complejidad estructural (Dennison et al. 1993; Cayabyab & Enrquez 2007). La informacin de la que se dispone hasta la fecha sobre los requerimientos mnimos de luz de los pastos marinos, proviene bsicamente de descripciones empricas del lmite de distribucin en profundidad de una determinada especie y del ambiente lumnico que corresponde a ese lmite (Denisson et al. 1993). La variabilidad interespecfica observada entre las macrfitas podra explicar diferencias significativas entre especies en su habilidad para colonizar reas ms profundas y/o para superar largos periodos de reduccin de luz, pero es mnima la informacin con la que se cuenta todava sobre los mecanismos fisiolgicos que explican estas observaciones empricas (Ralph et al. 2007; Cayabyab & Enrquez 2007), y en general de la variacin de los requerimientos mnimos de luz de los productores primarios bentnicos de ambientes acuticos. Los pastos marinos, son particularmente sensibles a las disminuciones de la disponibilidad de luz, pues pequeos decrementos pueden causar significativas declinaciones en su crecimiento y abundancia, as como en su distribucin espacial (Ralph et al. 2007). Al ser organismos bentnicos, la luz disponible para la fotosntesis de estas fanergamas marinas, suele estar fuertemente atenuada por la columna de agua, el dosel de la pradera submarina, y finalmente tiene que atravesar la capa de epfitas localizadas en la superficie de la hoja antes de entrar en la epidermis que es donde se encuentran la mayor parte de los pigmentos fotosintticos en las hojas laminares de pastos marinos (Dalla Via et al. 1998). En esta delgada capa de la epidermis, es donde la luz es principalmente absorbida y se integra en el proceso fotosinttico de la hoja (Tomilson 1980, Enrquez 2005). Durante todo este trayecto la luz est afectada fuertemente por procesos de absorcin y esparcimiento, lo que condiciona tanto la intensidad como la variacin espectral de la energa lumnica que ser absorbida por la hoja. Por tanto, la luz y el conjunto de procesos que la atenan hasta llegar a la hoja tienen una considerable influencia sobre la productividad y la estructura de la comunidad de macrfitas bentnicas que predominan en el ecosistema (Kirk 1994). Para poder entender los mecanismos que explican la estructura de una determinada comunidad algal o pradera submarina, los posibles cambios de fase que estn sufriendo o que potencialmente les pueden afectar en un futuro, adems de conocer las caractersticas del ambiente lumnico en la columna de agua, en el dosel de la pradera

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y el posible efecto de la cobertura de epfitos, es necesario conocer tambin la variacin de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas mismas, y los lmites de su adecuacin ambiental. Por tanto, describir estas dos propiedades pticas de las hojas: la capacidad de absorcin de luz o absorptancia (A, fraccin de luz incidente absorbida), y la eficiencia de absorcin de luz o coeficiente especfico de absorcin (a*, m2 mg-1 Chl a), as como su plasticidad y los mximos valores que pueden alcanzar, se convierte en uno de los primeros retos en este campo de investigacin. La capacidad de absorcin de luz determina la magnitud de la energa lumnica que se incorpora en el aparato fotosinttico de un organismo, y que tiene el potencial de ser fijada como energa qumica orgnica. Por tanto este parmetro permite estimar la dosis de luz absorbida y los lmites del crecimiento y productividad de una determinada especie o poblacin. Por otro lado, la habilidad para colectar luz y para transformar la energa absorbida en biomasa y crecimiento, establecen los requerimientos mnimos de luz de un organismo (MQR, mnimum quantum requirements). Este descriptor funcional (MQR) es de enorme importancia para definir el lmite de distribucin en profundidad de una especie o morfotipo, y su habilidad para competir exitosamente con otras especies (Cayabyab & Enrquez 2007; Ralph et al. 2007). Para determinar MQR es crtico conocer la habilidad de la especie o poblacin para colectar luz y para transformar la energa absorbida en biomasa y crecimiento a travs del mecanismo de la fotosntesis. La variabilidad de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas depende de los cambios en el contenido de pigmentos pero tambin de los cambios estructurales de su anatoma interna (Enrquez & Sand-Jensen 2003, Enrquez 2005, Legaria-Moreno 2008). Los pastos marinos tienen una anatoma foliar muy homognea resultado de su adaptacin al ambiente acutico (den Hartog 1970), a partir, probablemente, de un mesfilo bifacial tpico (i.e. parnquima de empalizada y mesfilo esponjoso) de una hoja de planta terrestre, sin embargo las fanergamas marinas cambiaron esta anatoma desarrollando un aernquima, un nuevo tejido resultado del mesfilo que ha perdido una gran cantidad de pigmento (en algunos casos como Thalassia testudinum sin ninguna pigmentacin) y unos amplios espacios intercelulares conocidos como lacunae, esta caracterstica novedosa se asume que fue desarrollada para incrementar los espacios internos de gas de las plantas acuticas ya que ellas suelen crecer en substratos pobres de oxigeno (Tomlinson 1980, Kuo y den Hartog 2006)

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Una delgada epidermis constituye el volumen celular que concentra la mayor parte de la pigmentacin fotosinttica de la hoja y representa a menudo slo el 20% del volumen foliar total (Tomlinson1980). Estudios recientes han determinado una significativa variacin del grosor de la epidermis en las hojas de la especie Thalassia testudinum desde un valor mnimo de 8.7 m hasta un valor mximo de 18.25 m (Legaria-Moreno 2008). Esta variacin es independiente de la variabilidad del grosor de la hoja (entre 110 y 410 m) y supone una variacin entre un 3% y un 11% del volumen total pigmentado, claramente inferior al reportado por Tomlinson (1980). Estos datos confirman que el volumen pigmentado de la hoja representa una fraccin muy pequea del volumen total y que, por tanto, la alta concentracin de pigmentos que contiene este pequeo volumen podra afectar fuertemente la capacidad y eficiencia de absorcin de la hoja debido al efecto de autosombra de los pigmentos

1.2 Absorcin de luz y fotosntesis

La fotosntesis es el proceso por el cual las plantas y los dems organismos fotosintticos capturan la energa solar en las membranas tilacoidales de los cloroplastos, y la transforman en energa qumica que posibilita la sntesis de molculas orgnicas, libera oxgeno y soporta el desempeo del organismo, es decir, su crecimiento y adecuacin al ambiente (Horton et al; 1996; Falkowski & Raven, 1997; Blankenship, 2002). La fotosntesis involucra el acoplamiento de mltiples reacciones. Se divide en cuatro fases. En la primera se agrupan todos los procesos relacionados con la absorcin de luz y la transferencia de la energa absorbida en las antenas hacia el centro de reaccin. En la segunda ocurre la transformacin qumica de la energa lumnica (fotoqumica) y se genera el flujo de electrones y la protonizacin de la membrana fotosinttica. La tercera fase consiste en la estabilizacin de la energa por procesos secundarios. Por ltimo, en la cuarta fase se produce la sntesis de productos estables de la fotosntesis y su exportacin al citosol o almacenamiento en el cloroplasto como almidn (Blankenship 2002) En la actualidad la comunidad cientfica cuenta con un modelo molecular muy slido para explicar tanto la estructura como el funcionamiento del aparato fotosinttico de plantas superiores. As mismo, se ha avanzado mucho en el conocimiento de la bioqumica y la complejidad de reacciones enzimticas involucradas tanto en la fijacin de

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carbono como en la sntesis de una gran diversidad de compuestos orgnicos fundamentales para el metabolismo fotosinttico y respiratorio celular vegetal. Tambin est aumentando rpidamente la informacin disponible sobre las caractersticas biofsicas y estructurales de las estructuras supramoleculares encargadas de absorber la luz (antenas) formados por complejos de pigmentos-protenas. En las antenas se colecta la luz y se conduce la energa de excitacin al centro de reaccin fotoqumico, que es donde ocurre la transformacin de la energa lumnica en energa qumica y se encuentran los primeros donadores de electrones (P680 y P700) y los primeros aceptores de electrones. Las antenas y los centros de reaccin conforman los fotosistemas I y II (Blankenship 2002). A pesar del rpido aumento del conocimiento cientfico del proceso fotosinttico a nivel supramolecular (ej., absorcin de luz, transferencia de la excitacin, fotoqumica, cadena de transporte de electrones, etc..), poco se conoce todava sobre la variacin de una funcin bsica como es la absorcin de luz en niveles de organizacin superior como el celular, el tejido fotosinttico (hoja o talo) y/o el dosel de la comunidad. Desde el punto de vista fsico, la absorcin de luz es el proceso por el cual un electrn es conducido a un estado excitado, debido a que la absorcin de un fotn induce un cambio en el estado de la energa de sus tomos o molculas (Falkowski & Raven, 1997). En los organismos fotosintticos, la absorcin de luz, se refiere a la capacidad de un sistema de complejos pigmentos-protenas llamados antenas, especializados en colectar luz y transferir esta energa al centro de reaccin fotosinttico (Horton et al 1996) Las antenas fotosintticas han evolucionado como avenidas de transmisin de excitones hacia el centro de reaccin fotoqumica para facilitar el proceso fotoqumico y permitir un flujo continuo de electrones. El gran esfuerzo evolutivo invertido en maximizar la eficiencia cuntica de la reaccin fotoqumica se ha conseguido gracias a una eficiente transmisin de la excitacin de las antenas hacia los centros de reaccin. Sin embargo, este logro requiere de una gran proximidad de los pigmentos en las membranas fotosintticas y por tanto de una alta concentracin molar (la probabilidad de la transmisin de la excitacin de una molcula a otra es inversamente proporcional a la sexta potencia de la distancia para espectros de emisin y absorcin compatibles). Como consecuencia, los pigmentos in vivo experimentan un fuerte efecto de autosombra en las membranas, cloroplastos, clulas y tejidos fotosintticos (Enrquez 2005b) Este fenmeno se conoce con el nombre de efecto paquete y fue descrito por primera vez para suspensiones de algas, y, posteriormente para poblaciones naturales del fitoplancton. El efecto paquete explica, por tanto, la prdida de eficiencia de los pigmentos fotosintticos

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en su capacidad de absorber luz cuando estn empaquetados en estructuras funcionales vivas. Para cuantificarlo se han utilizado diferentes metodologas. Dos de ellas lo estiman a partir de un descriptor F del paso ptico calculado o bien comparando diferencias entre los espectros de absorcin en el rango de luz visible de clulas intactas y rotas, o comparando la absorcin in vivo, con la absorcin de una concentracin similar de pigmentos extrada en un solvente orgnico. La ms comn propuesta por Morel & Bricaud (1986) para clulas del fitoplancton utiliza como descriptor del efecto paquete el coeficiente especfico de absorcin (a*, m2 mg-1 pigm) que se define como la absorcin de luz efectiva por unidad de pigmento colector (Enrquez 2005). Los organismos fotosintticos han podido contrarrestar el efecto paquete y mejorar significativamente la eficiencia de absorcin de luz de sus pigmentos gracias al esparcimiento mltiple de la luz en el interior de la estructura fotosinttica. Evidencias de la existencia de esparcimiento mltiple en el interior de hojas de plantas terrestres ya han sido proporcionadas al medirse en el interior de la hoja intensificaciones de hasta dos y tres veces la intensidad lumnica externa. La cantidad de luz que es capaz de absorber o colectar la clula o estructura fotosinttica depende del tamao ptico efectivo de los sistemas colectores de luz o antenas. El tamao ptico efectivo depende: 1) del tamao de la antena de cada centro de reaccin; 2) del grado y nmero de conectividad de los centros de reaccin, es decir, de la organizacin de la membrana fotosinttica; 3) de la distribucin de los pigmentos dentro de la estructura fotosinttica; y 4) de la forma de la estructura fotosinttica. Estas caractersticas pticas son fundamentales para determinar no slo la dosis de luz que un organismo es capaz de colectar sino tambin de la eficiencia cuntica del proceso fotosinttico. La eficiencia cuntica de la fotosntesis es la habilidad con la que el proceso fotosinttico transforma la energa lumnica absorbida en energa qumica (Iglesias Prieto & Trench, 1994, 1997). La absorcin ptica efectiva (a*) de la unidad fotosinttica es una medida del tamao de la unidad funcional que abastece al centro de reaccin durante el proceso fotoqumico primario de la fotosntesis (Falkowski & Raven 1997). La seccin transversal de pigmentos que requiere esta absorcin efectiva es dependiente del tipo de antena del organismo, pero involucra una cantidad ms o menos conocida de pigmentos. Para organismos unicelulares la absorcin transversal efectiva (effective absorption cross-section) es dependiente de la magnitud del efecto paquete que afecta a la clula, y es, por tanto, muy variable entre diferentes tipos celulares. Morel & Bricaud

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(1986) propuesieron, sin embargo, la existencia de una relacin general entre la absorcin transversal efectiva (a*) y la seccin transversal de pigmentos que est bsicamente determinada por la variacin del contenido intracelular [Ci] de pigmentos y del dimetro celular [d]) para el fitoplancton (Anexo 1). En los organismos pluricelulares la seccin transversal de pigmentos (contenido de pigmentos por rea proyectada) no refleja la variacin de la seccin transversal de absorcin de luz efectiva (effective absorption cross-section) cuantificada a travs del coeficiente especfico de absorcin de luz (a*, m2 mg Chla-1) La razn es que su variacin no est nicamente determinada por el efecto paquete, sino tambin por la presencia de estructuras dispersivas como cristales, tipos celulares o tejidos que favorecen el esparcimiento mltiple de la luz y contrarrestan en menor o mayor grado el efecto paquete mejorando la eficiencia de absorcin de luz. Considerando el amplio repertorio de anatomas de los tejidos fotosintticos que la evolucin ha generado, desde los talos de las macroalgas a las hojas y tallos de plantas con flores, y la gran variacin que existe en la distribucin de los pigmentos dentro de dichos tejidos, es altamente probable que exista una gran variacin de la seccin transversal de absorcin de luz efectiva entre distintas estructuras fotosintticas (Vogelmanm et al. 1991, 1996).

II.

Antecedentes

Sobre las propiedades pticas de las hojas de los pastos marinos existen pocos trabajos. Los primeros reportes fueron de Enrquez et al. (1992) y Enrquez et al. (1994). Estos autores recolectaron diversas especies de pastos marinos y talos de macroalgas localizados en distintas partes del mundo, y realizaron un anlisis comparativo de la variacin de sus propiedades pticas. Estos autores encontraron que la eficiencia de absorcin de luz decrece conforme incrementa la densidad de pigmentos, es decir, determinaron que los pigmentos dentro de las hojas de pastos marinos estn empaquetados y que considerando el mayor rango de variacin morfolgica de las macrfitas marinas, la capacidad de absorber luz est fuertemente afectada por el grosor de la estructura fotosinttica aunque Enrquez et al. (1992) no encontraron ningn efecto del grosor de las hojas de pastos marinos sobre la variacin de las propiedades de absorcin de luz de stos.

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Estudios ms recientes Cummings & Zimmerman (2003) analizaron la variacin de la absorptancia y del coeficiente de absorcin de pigmentos, en las hojas de los pastos marinos Thalassia testudinum y Zostera marina, estos autores encontraron una variacin entre el 48 y 56% de la absorptancia y determinaron la existencia de un gran empaquetamiento debido a que la hoja restringe los cloroplastos en sus delgadas epidermis, sin embargo estos autores no consideran que esta prdida de eficiencia de absorcin de luz de las hojas de pastos marinos tengan consecuencias en su supervivencia y fotoaclimatacin. A pesar de que ya haba sido advertido hace varias dcadas de que las muestras altamente dispersivas tenan la capacidad de intensificar hasta 10 veces la absorcin de luz , slo recientemente, los estudios de Enrquez & Sand-Jensen (2003), Enrquez (2005) y Enrquez et al. (2005) han prestado atencin al efecto del esparcimiento mliple sobre la variacin de la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos y sus implicaciones biolgicas. Enrquez & Sand-Jensen (2003) examinan por primera en un organismo pluricelular (Mentha aquatica), la absorcin transversal efectiva mediante el coeficiente especfico de absorcin, encontrando una relacin similar a la encontrada por Morel & Bricaud (1986), es decir que los pigmentos y clorofila tambin estn afectados por el efecto paquete y que la habilidad del tejido pluricelular en dispersar la luz, no contrarresta la perdida de la eficiencia de absorcin de luz. En un anlisis posterior Enrquez (2005a) hace un estudio comparativo sobre la eficiencia de absorcin de luz de las hojas de Thalassia testudinum y las compara con otros 12 pastos marinos de distintas partes del mundo y tambin la compara con Mentha aqutica y encontr que las hojas de Thalassia testudinum son menos eficientes para absorber luz que las de la especie Mentha aquatica, pero tambin indica que no se puede concluir que esto sea consecuencia de la nueva anatoma foliar de este grupo taxonmico, pues las hojas de otras especies de ambientes templados con similar anatoma no parecen ser tan ineficientes como las hojas ms pigmentadas de Thalassia testudinum. En las hojas de la planta anfibia Mentha aquatica, los pigmentos se localizan en los dos tipos de mesfilo, parnquima de empalizada y/o mesfilo esponjoso, ocupando, por tanto un volumen similar al que presenta la hoja, mientras que el volumen que ocupan los pigmentos en las hojas del pasto marino Thalassia testudinum estn restringidos en las clulas epidrmicas, ocupando un volumen entre el 6 y 22% (LegariaMoreno 2008). Estas diferencias estn asociadas con una disminucin en promedio del 38% de la eficiencia de absorcin de luz en las hojas de Thalassia testudinum (Enrquez

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2005a), si embargo las hojas menos pigmentadas de T. testudinum muestran una alta eficiencia de absorcin (Anexo 1). Las estructuras fotosintticas ms eficientes para absorber luz descritas hasta la fecha son los corales escleractneos (Enrquez et al. 2005). Estos autores llegan a esta conclusin analizando la variacin de la absorptancia (A) y a* en la especie Porites branneri, y observaron que la eficiencia de absorcin de luz de los dinoflagelados simbiontes dentro del tejido intacto de coral aumentada hasta 5 veces en relacin a la eficiencia que muestra una suspensin de clulas con similar seccin transversal de pigmentos. Adems encontraron que esta eficiencia se consigue gracias a la capacidad del esqueleto de coral de dispersar la luz, por lo que aumenta el paso ptico efectivo de la luz dentro del tejido y la probabilidad de que un fotn encuentre en su paso un pigmento fotosinttico. Es especialmente interesante este estudio porque el gnero del pasto marino Syringodium filiforme presenta una seccin transversal cilndrica, nica en el grupo de las fanergamas marinas. Estas hojas son ms gruesas (un orden de magnitud > 2000 m) y encierran en su interior unos espacios areos de mayor tamao que los lacunae de hojas laminares como Thalassia testudinum. Las hojas de los pastos marinos no presentan el mesfilo bifacial de hoja de planta terrestre, sino un mesfilo especializado o aernquima, que forma grandes espacios intercelulares o lacunae. La hoja de la planta anfibia Mentha aquatica tambin consigue crear espacios areos en el interior de la hoja, sobre todo del mesfilo esponjoso, pero nunca tan grandes como los de pastos marinos (Fig.1). Este cambio anatmico de S. filiforme va a generar cambios significativos en la capacidad y en la eficiencia de absorcin de luz que no han sido cuantificados todava, y con importantes consecuencias probablemente para el establecimiento de los requerimientos mnimos de luz de la especie y para su fotobiologa.

a)

b)

c)

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Fig. 1. Diferencias anatmicas de la seccin transversal de una planta anfibia a) Mentha aquatica proporcionada por Enrquez S.y de los pastos marinos b) Thalassia testudinum y c) Syringodium filiforme.

En este proyecto se propone abordar el estudio del efecto especfico de la morfologa foliar sobre la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas del pasto marino Syringodium filiforme. Esta especie junto con Thalassia testudinum constituyen las dos fanergamas marinas dominantes en las praderas submarinas del Caribe y Golfo de Mxico donde conviven en numerosas ocasiones pero tambin forman praderas monoespecficas cada una de ellas. Conocer los factores reguladores del crecimiento de estas dos especies es clave para entender su abundancia y distribucin espacial, pero tambin su posible respuesta diferencial a la variacin ambiental. Las praderas submarinas son adems ecosistemas comunes en las costas del Caribe Mexicano donde constituyen junto con los humedales dominados por el bosque de mangle y la comunidad coralina una de los tres ecosistemas claves del sistema arrecifal. Profundizar en el conocimiento de los mecanismos que regulan el crecimiento de estas especies va a permitir adems conocer ms de la respuesta de este importante ecosistema costero tropical a la variacin ambiental, pero incluso contar con posibles bioindicadores de cambios en las condiciones ambientales del sistema y/o de cambios de fase. El objetivo de esta tesis es examinar el efecto especfico de la morfologa foliar sobre la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas del pasto marino Syringodium filiforme. Cambios en estas propiedades pticas de absorcin de luz van a tener importantes consecuencias sobre la actividad fotosinttica de estas hojas, pero sobre todo en la eficiencia cuntica de la fotosntesis y en los requerimientos mnimos de luz de las hojas y de la poblacin de haces de la pradera.

III. Hiptesis:
La anatoma interna foliar del pasto marino Syringodium filiforme modula la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de sus hojas.

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IV.

Objetivos

4.1 General:
Analizar el efecto de la morfologa foliar sobre la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos en las hojas de Syringodium filiforme.

4.2 Particulares:
1. Describir la variabilidad del contenido de pigmentos, morfologa foliar y propiedades pticas de las hojas de S. filiforme en varias praderas de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, situadas a lo largo de un gradiente de luz en profundidad. 2. Examinar las asociaciones de variacin y determinar patrones (relaciones alomtricas) entre los descriptores morfolgicos, los de contenido de pigmentos y los descriptores funcionales de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas de S. filiforme. 3. Analizar la plasticidad fotoaclimatativa de las hojas de S. filiforme y de su patrn de variacin con los cambios observados en la disponibilidad de luz.

V.

rea de estudio:

5.1 Descripcin del rea de estudio:

El estudio se llevo a cabo en el mar Caribe del estado de Quintana Roo, en dos grandes ambientes: la laguna arrecifal de Puerto Morelos localizada en la costa noroeste de la Pennsula de Yucatn a 21 0000 y 20 4833 latitud Norte (N) y 86 5314.40 y 86 4638.94 longitud Oeste (O) y en Punta Herrero localizada al sur del estado en la reserva de la biosfera Sian kaan a 191918.30N y 87 2740.88O (Fig. 2). La zona costera del estado se caracteriza por presentar un relieve muy escaso y por la ausencia de ros superficiales, resultado de la naturaleza Krstica del terreno. Por

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esta caracterstica y la escases de suelos, el agua de lluvia se filtra rpidamente a travs de la roca calcrea hacia el acufero, por lo que el drenaje es bsicamente subterrneo. La acumulacin de agua pluviales en la matriz rocosa de la pennsula, ocacionan una diferencia de niveles hidrostticos que determinan un flujo subterrneo de tierra al mar. El promedio actual de descarga de agua subterrnea en la pennsula de Yucatn, por encima de los 20 latitud norte se ha estimado en 8.6 millones de m3 por km de costa al ao. Sn embargo por la escaces de solidos de suspensin la influencia terrgena sobre el arrecife es mnima (INE-SEMARNAT 2000) El tipo de clima de la regin es Ax (wo) iw, clido subhmedo, con lluvias importantes entre verano e invierno. La temperatura promedio del aire es de 26.9 C, con un mximo de 33.5 C registrada en el verano y mnimo de 12.7 C registrada en el invierno. La precipitacin anual varia ampliamente entre aos (Merino & Otero 1991) La laguna de Puerto Morelos tiene una profundidad entre 1.5 y 5 m y est delimitada por un arrecife barrera que se encuentra a una distancia de la costa entre 450 y 1800 m. El sedimento est formado por arenas no consolidadas de carbonato de calcio sobre las que se asienta la pradera submarina. La pradera est compuesta por diversas especies entre las que destacan las fanergamas marinas Thalassia testudinum, Syringodium filiforme y Halodule wrightii y numerosas especies de algas bentnicas arrecifales (INE-SEMARNAT 2000). La pradera submarina de Punta Herrero, situada en la reserva ecolgica de Sian Kaan, al sur del estado, presenta mucho menor impacto antropognico que las situadas al norte, y est tambin dominada por Thalassia testudinum..

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Fig. 2. rea de estudio. Laguna arrecifal de Puerto Morelos y Punta Herrero. Mapa tomado de lvarez-Filip, L (2003). Las imgenes obtenidas de Google Earth.

5.2 Caracterizacin de las praderas:

Se seleccionaron para este estudio comparativo morfo-funcional, hojas de Syringodium filiforme recolectadas en siete praderas, cinco de ellas localizadas en: la laguna arrecifal de Puerto Morelos y solo una en Punta Herrero. Se describieron las caractersticas de la poblacin de 5 praderas, cuatro en Puerto Morelos y una en Punta Herrero. En las otras dos praderas se seleccionaron o bien slo pices o bien slo bases de la hoja para completar la base de datos del estudio comparativo, por lo que estos segmentos no se consideraron representativos para describir las caractersticas de las praderas. Las praderas difirieron en profundidad, abundancia y composicin de la comunidad. La primera de ellas, se localiza a 51 0814.50 latitud N, y 86 5153.17 latitud O. aproximadamente a 20 m al noreste del muelle de la Unidad Acadmica Puerto Morelos (UASA-UNAM), se caracteriz por ser una pradera extensa con una alta ocupacin del espacio, un 85%, conviviendo en sus extremos con Halodule wrightii y con diversas especies de macroalgas aisladas de los gneros Halimeda, Penicilus, Udotea y Caulerpa. Esta pradera estaba situada a una profundidad de 1.5 m, y S. filiforme present hojas entre 10 y 20 cm de longitud. La segunda 51 0323.21 latitud N, y 86 5154.13 O pradera se localiz aprox. a 20 metros al suroeste del muelle de la UNAM, a una profundidad de 2 m. En esta pradera T. testudinum tiene una menor cobertura (entre el 30 y 40%) y convive con

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S. filiforme adems de con varias especies de macroalgas de los gneros Penicilus, Halimeda y Rhipocephalus. La tercera pradera muestreada se encuentra en las coordenadas 20 52 16.94 N y 86 5155.15O a una profundidad de 2.5 m y ms hacia el centro de la laguna. Es una pradera tambin muy extensa, presenta una ocupacin del espacio del 90%, y S. filiforme se caracteriza por tener haces relativamente grades y gruesos. La cuarta est localizada a 51 0814.50 latitud N, y 86 4640.86 latitud O pradera muestreada se localiza en el arrecife posterior de la laguna arrecifal a una profundidad de 3 m. Por ltimo, la quinta pradera se muestre en Punta Herrero aproximadamente a 20 m al norte del muelle de Punta Herrero (19 1918.30N y 87 2740.88O). Esta pradera era una pradera somera situada entre 0.8 y 1 m de profundidad, en donde S. filiforme forma diferentes parches en los que domina sobre T. testudinum, aunque esta especie crece en una pradera extensa. Adems de caracterizar las hojas de las poblaciones de S. filiforme de estas cinco praderas, se seleccionaron segmentos de hojas de otros dos lugares de la laguna arrecifal de Puerto Morelos para completar la base de datos con observaciones submuestreadas. Por ejemplo, en el costado izquierdo del Muelle del Hotel Ceiba del Mar, a una profundidad de 1.6 m se seleccionaron segmentos poco pigmentados de la parte apical de las hojas. As mismo en varias praderas cercanas al muelle de la Unidad Acadmica Sistemas Arrecifales (UASA) de la UNAM se seleccionaron segmentos poco pigmentados en la base de las hojas.

VI.

Materiales y Mtodos:

6.1 Colecta de las hojas de Syringodium filiforme

Mediante buceo libre y con un cuchillo de buceo (creo), se cortaron hojas del pasto marino Syringodium filiforme desde la parte ms basal, cerca del sedimento y se depositaron en bolsas de plstico hermticas. Posteriormente las muestras se depositaron en un recipiente de plstico con agua de mar para transportarlas al laboratorio de fotobiologa de la unidad acadmica de Puerto Morelos del Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa, en donde se mantuvieron con bobeo de aire, as como a temperatura ambiente (}25 C). El material biolgico se utiliz inmediatamente para las determinaciones espectroscpicas, aunque en algunas ocasiones, se utiliz hasta dos das despus de la colecta.

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6.2 Determinaciones espectroscpicas.

La caracterizacin de las propiedades pticas de las hojas se realiz espectrofotomtricamente de acuerdo al protocolo descrito por Enrquez (2005) que utiliza la tcnica de opal glass desarrollada por Shibata (1959). Los espectros de absorcin de luz o absorbancia, D, se determinaron para segmentos de hoja con longitud entre 2 y 3 centmetros. Como blanco o lnea de base de referencia (i.e. correccin por la absorcin de la hoja sin pigmentos) se utilizaron segmentos de hojas blanqueadas (sin pigmentos) de grosor similar al que se estaba midiendo. Las hojas se dejaron blanquear con cloro al 5% por 5 a 8 horas y las medidas de grosor se hicieron con un vernier (Fig. 3). Los segmentos se colocaron en celdas de plstico de 3 ml (paso ptico = 1cm) y se inmovilizaron con un soporte de plstico diseado especialmente para ello (Fig. 4). Las celdas se llenaron con agua de mar previamente filtrada. El espectro de absorcin de luz se determin a intervalos de un nanmetro entre 350 y 750nm en un espectrofotmetro Aminco, DW2 (USA), controlado por un sistema colector de datos (OLIS, USA). Se utilizaron dos descriptores de la absorbancia: i) el promedio de la absorcin de luz para el rango entre 400 y 700nm (PAR, luz fotosintticamente activa) y ii) el valor a 680nm, que corresponde al pico de absorcin en el rojo de la clorofila a, donde la interferencia con los pigmentos accesorios es mnima. Los valores de absorbancia (DO) obtenidos fueron corregidos restando los valores de absorbancia a 725 nm para excluir la dispersin residual.

Fig.3 Hojas y segmentos con y sin pigmentos de Syringodium filiforme

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Fig. 4 Determinaciones con un de la absorbancia con un espectrofotmetro AMINCO (DW2). Detalle del sistema de medicin: colimador y soporte de la hoja.

A partir de la absorbancia, D, se determin la capacidad de absorcin de luz (Absorptancia, A) utilizando la expresin: A = 1 -10-D (1)

Este valor fue posteriormente corregido por la reflectancia, R (fraccin de luz incidente reflejada por la superficie de la hoja) A = 1 -10-D -R (2)

La reflectancia de las hojas de S. filiforme se determin siguiendo la metodologa descrita en (Enrquez 2005), colectando en un ngulo de 45 con una fibra ptica de 300 m de grosor unida a un espectrmetro porttil Ocean Optics USB2000, la luz difusa reflejada por la superficie de la hoja

6.3 Determinaciones del contenido de pigmentos.

Los segmentos de las hojas a los que se les midi previamente su espectro de absorcin de luz, se congelaron a -70C para su posterior anlisis. La extraccin de sus pigmentos (clorofila a+ b+ carotenoides-xantofilas) se realiz utilizando un mortero y nitrgeno lquido, para facilitar el rompimiento de las paredes y membranas de las clulas y cloroplastos de los segmentos. Una vez triturados se colocaron con una esptula en tubos ependorf y se agregaron 3 ml de acetona al 80% en el mortero para recoger los residuos del tejido triturado. Los pigmentos extrados se mantuvieron protegidos de la luz con papel aluminio y en refrigeracin a 4 C durante 24 h para asegurar la extraccin completa. Una vez transcurrido este periodo, las muestras se centrifugaron (centrifuga Eppendorf, 5810R) a 4C durante 20 minutos a 4000 rpm, para separar el sobrenadante que contiene

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los pigmentos del pellet, constituido por los residuos del tejido. Las lecturas de las extracciones de pigmentos fotosintticos se realizaron en un espectrofotmetro (Elyptica2000-Instrumentacin Electro-ptica, Ensenada, Mxico- con doble haz de luz), a tres longitudes de onda: 663, 646 y 470nm que corresponden a la absorcin de la clorofila a, b y carotenoides-xantofilas, as como, a 725nm cuyo valor de absorbancia se substrae a los dems valores para corregir por la dispersin residual de la solucin. Como blanco de referencia se utiliz acetona al 80%. El contenido de clorofila a, b y carotenoidesxantofilas se calcul de acuerdo a las frmulas de Lichtenthaler & Wellburn (1983).

6.4 Determinacin del coeficiente especfico de absorcin (a*)

Combinando las mediciones de la absorbancia y los clculos del contenido de pigmentos, se determin el coeficiente especfico de absorcin de los pigmentos, un descriptor de la seccin transversal efectiva de absorcin de luz de la hoja o de la eficiencia de absorcin por unidad de pigmento (a*, m2 mg pigmento-1). Estas determinaciones se hicieron de acuerdo a Enrquez et al. (2005): a* = D ln 10 / V Donde a*pigm= coeficiente especfico de absorcin de los pigmentos (m2 mg pigmentos-1) a*Chla =coeficiente especfico de absorcin de la clorofila a (m2 mg Chla-1) D= Absorbancia en el promedio de la luz visible (PAR) para a*pigm, o en el pico de la clorofila a (}677nm) para a*Chla = Seccin transversal de pigmentos, en (mg pigmentos. m-2) y en (mg Chla. m-2) respectivamente ln 10= Factor de conversin de base 10 (el valor de la absorbancia) a base e. D es la absorbancia y [mg . m-2] es la seccin transversal de pigmentos, y ln 10 es el factor (3)

de conversin de base 10 (el valor de la absorbancia) a base e.

6.5 Determinaciones de los descriptores morfolgicos de las hojas.

A cada segmento de hoja se le determin su rea proyectada (longitud x dimetro), el grosor y su peso seco (PS). Para las determinaciones de peso seco, las muestras se secaron en una estufa (Riossa, rango de temperatura 0-120C) a 60C durante 24h,

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posteriormente se enfriaron en un desecador y se pesaron en una balanza analtica (OHAUS 0.0001g). Todas estas determinaciones se hicieron sobre los mismos segmentos analizados espectrofotomtricamente. Con las determinaciones del peso seco de la hoja y el rea proyectada se determin el peso especfico (LMA, mg PS cm-2). Con las de peso y volumen (rea por longitud del segmento), se determin adems la densidad de la hoja o contenido de peso por unidad de volumen (mg PS cm-3). Las determinaciones anatmicas se midieron con un vernier en todos los segmentos medidos en el espectrofotmetro y en algunos segmentos se midieron y observaron con un microscopio ptico compuesto (Olympus CH-2), a partir de cortes transversales (<1mm de ancho) realizados con navajas de rasurar y se observaron al microscopio con los objetivos de 10, 40 y 60X. Adems se us la tcnica de epifluorescencia utilizando el mismo microscopio ptico para verificar la distribucin de los cloroplastos en las hojas de Syringodium filiforme. Tambin se realizaron cortes de Thalassia testudinum y se observaron en el microscopio (Olympus CH-2).

6.6 Determinacin del coeficiente especfico de absorcin de la biomasa (aM*).

Combinando las descripciones pticas y las estimas del peso especfico (LMA, mg PS cm ) de las hojas se determin el coeficiente especfico de absorcin por unidad de masa foliar (aM*) de acuerdo a (Enrquez & Sand-Jensen., 2003). Este parmetro describe la eficiencia de absorcin de la biomasa foliar (a*, cm2 mg PS-1).
-1

a*M = D ln 10 /LMA
donde D es la absorbancia y LMA [mg . cm-2] es el peso especfico de la hoja. a*M= coeficiente especfico de absorcin de la biomasa foliar (a*, cm2 mg PS-1).

(4)

D= Absorbancia en el promedio de la luz visible (PAR) para a*pigm, o tambin utilizado en el pico de la clorofila a (}677nm). LMA= Peso especfico ln 10= Factor de conversin de base 10 (el valor de la absorbancia) a base e.

6.7 Metodologa estadstica para el anlisis alomtrico.

Para describir la variacin de los descriptores pticos, morfolgicos y del contenido de

- 21 -

pigmento de la base de datos generada, se utilizaron grficos de box utilizando el software Kaleidagraph 4.0, estos grficos permiten describir la mediana y la distribucin de variacin alrededor de esta mediana para cada parmetro. Las asociaciones de variacin entre parmetros se describen con el coeficiente de correlacin de Pearson, r (que determina el tipo, positiva o negativa, y grado de asociacin entre dos variables). Los parmetros fueron previamente transformados logartmicamente para normalizar su distribucin de variacin y permitir la descripcin de funciones alomtricas entre variables (y = a * Xb). Este anlisis alomtrico permite describir la relacin forma-funcin entre los cambios morfolgicos y de pigmentos con los cambios asociados a la capacidad y eficiencia de absorcin de luz en las hojas de Syringodium filiforme. Las relaciones alomtricas (de escala), son asociaciones de variacin determinadas empricamente para establecer la relacin morfo-funcional de dos o mas variables biolgicas, y ofrecen un modelo explicativo o hiptesis de potenciales asociaciones mecansticas causa-efecto (Niklas 1994). Para este tipo de anlisis fue necesario realizar regresiones lineales simples a partir de los valores en escala logartmica. log Y= log + logX. De esta manera se pudieron hacer modelos con la funcin de poder (Y= X ) y obtener el factor de escala , el cual se corrigi con el anlisis Reduced Major Axis (RMA) propuesto por Niklas (1994). Este anlisis a diferencia de la regresin lineal simple asume que las dos variables, dependiente Y, e independiente X tienen errores asociados a su determinacin y consecuentemente X no es tomada como una variable completamente independiente. Por lo tanto se consideran las dos incertidumbres para establecer estimaciones ms confiables del factor de escala. Debido a que las variables que se consideraron en este trabajo mantienen un error independiente de determinacin y variacin, se consider el RMA anlisis como el ms acertado. Siguiendo el anlisis de Niklas (1994), el factor de escala puede ser recalculado a partir de los resultados del anlisis de regresin lineal simple a partir de: FERMA= FELS/ FERMA = Factor de escala del anlisis RMA FELS = Factor de escala de la regresin lineal simple R2 = Coeficiente del anlisis de regresin. El factor de escala puede adquirir diversos valores: 1) FE es 1, Y1 es directamente proporcional a Y2 (relacin isomtrica o linear). (5)

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2) FE >1, Y1 incrementa proporcionalmente ms rpido que Y2. 3) Cuando el FE < 1, Y2 incrementa proporcionalmente ms rpido que Y1, y el cociente de Y1 a Y2 decrece con valores altos de Y2. En la bsqueda de los modelos que mejor describen la variabilidad de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz se realizaron tambin regresiones mltiples descomponiendo la seccin transversal de pigmentos en sus diferentes descriptores morfolgicos (grosor y pigmentos por unidad de volumen), y a su vez la concentracin de pigmentos por unidad de volumen en los suyos (densidad de la hoja y pigmentos por unidad de peso). Dada la colinealidad encontrada entre los distintos descriptores se aplic un anlisis de rutas para distinguir entre los efectos directos e indirectos de las asociaciones de variacin encontradas. La multicolinealidad entre variables dificulta la separacin del efecto individual de cada variable X sobre la variable Y, y este anlisis separa la significacin y magnitud de las asociaciones directas derivadas de las colinealidades con otras variables (indirectas) (William et al. 1990). Las correlaciones de Pearson, y las regresiones simples y mltiples se realizaron utilizando el programa estadstico Statistica 7.0

6.8 Metodologa estadstica para el anlisis de la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de Syringodium filiforme
La variabilidad entre praderas se represent con grficos de barras mostrando los promedios + el error estndar (E.E). Para probar si las diferencias observadas eran significativas, se aplicaron anlisis de variacin de una va (donde las praderas son el factor fijo con cinco niveles). Cuando se obtuvieron diferencias significativas entre las praderas se aplic la prueba de comparaciones mltiples de Tukey que determina que pradera (s) es (son) distinta (s) del resto. Finalmente, se analizaron las asociaciones de variacin entre la profundidad de las praderas y los descriptores pticos, morfolgicos y de pigmentos con el coeficiente de correlacin de Pearson. El anlisis de la varianza y la prueba de comparaciones mltiples de Tukey se realizaron con el programa estadstico Statistica 7.0

- 23 -

VII. Resultados
Los resultados se integran en cuatro apartados, el primero de ellos correspondiente a los espectros de absorcin y reflectancia, el segundo a las observaciones morfolgicas en el microscopio ptico y el tercer apartado corresponde al anlisis alomtrico, en donde se utilizan todos los parmetros calculados para examinar relaciones de la forma-funcin entre los cambios morfolgicos que presenta la hoja de Syringodium filiforme con los cambios asociados en su capacidad y eficiencia de absorcin de luz. Con ello se intenta conocer las ventajas o desventajas que trajo el desarrollo de una hoja cilndrica entre los pastos marinos que presentan hojas laminares para el proceso de absorcin de luz. Por ltimo se presenta un anlisis de la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de S. filiforme en dos gradientes lumnicos, en profundidad y a lo largo de la hoja, con el fin de conocer su plasticidad entre diferentes ambientes lumnicos.

7.1 Determinaciones espectroscpicas

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En total se analizaron espectroscpica y morfolgicamente 193 segmentos de hojas de Syringodium filiforme. En la figura 11 se muestran espectros de absorcin de las hojas de S. filiforme, en el primer grfico se presentan los espectros de segmentos con poca absorcin de luz, correspondientes a las puntas de hojas jvenes (15 cm) de la pradera de Puerto Morelos de 1.5 m de profundidad y en siguiente grfico se muestran segmentos con alta absorcin de luz, correspondientes a las hojas grandes y robustas de la pradera de Punta Herrero.

a)
1.2 1

b)
1.5

1.2

Absorbancia ( .O)

0.6

0.4

0.2

0 350

400

450

500

550

600

650

700

750

Longi

de onda (nm)

Fig.5. Espectros de absorcin de luz de hojas de Syringodium filiforme. a) segmentos apicales de hojas jvenes. b) Segmentos medios de hojas robustas.

En estos espectros de absorcin de luz, se observa que las hojas de Syringodium filiforme tienen poca absorcin en la regin del verde (}550 nm). Tambin se observa un mayor desequilibrio en los picos de absorcin de la clorofila a, en la regin del azul (400 nm) y el rojo (680 nm) en las hojas de segmentos apicales con baja concentracin de pigmentos (a) y son ms similares en las hojas gruesas y maduras con alta concentracin de pigmentos (b). La reflectancia se midi en 30 segmentos de las hojas pertenecientes a las praderas con mayor esfuerzo de muestreo, la uno y la dos. El promedio de la reflectancia en el PAR result de (5.31%) y se utilizo en todas los clculos de la absorptancia. En la figura 5 se muestran las variaciones espectrales ms representativas que se obtuvieron de las mediciones.

0.8

Absorbancia ( .O)

0.9

0.6

0.3

0 350

400

450

500

550

600

650

700

750

Longi d de onda (nm)

- 25 -

15

Reflectancia (%)

10

0 40 0 45 0 50 0 55 0 00

50

70 0

75 0

Longitud de onda (nm)

Fig. 6. Espectros de reflectancia de las hojas de Syringodium filiforme. Promedio 5.31 1.6, n=30.

7.2 Mediciones morfolgicas

Las observaciones en el microscopio permitieron conocer la mayor complejidad
estructural de las hojas de Syringodium filiforme, pero adems las diferencias en magnitud de la seccin transversal de la hoja con respecto a la de Thalassia testudinum, pues mientras sta midi 170micras =0.17mm la de la hoja cilndrica de Syringodium

filifrome present un promedio de 1540 micras =1.54mm (Fig. 7). Otra diferencia observada entre estas dos hojas fue la distribucin de los cloroplastos, confirmando que las hojas de Thalassia testudinum tienen restringidos los pigmentos en la
epidermis, en cambio las imgenes de epifluorescencia mostraron claramente la

amplia distribucin de los cloroplastos desde la epidermis hasta las clulas del aerenquima en las hojas de Syringodium filiforme. Con el objetivo de 40X, se observ
que la clulas de la epidermis presentan una alta concentracin de cloroplastos (Fig.8).

- 26 -

Fig. 7. seccin transversal de las hojas de Syringodium filiforme yThalassia testudinum

Epidermis Mesfilo

Aerenquima

Fig. 8. Micrografa de epifluorescencia mostrando la seccin transversal de una hoja de Syringodium filiforme y la amplia distribucin de los cloroplastos (puntos rojos).

- 27 -

7.3 Anlisis alomtrico de la relacin forma-funcin entre la morfologa foliar y la variacin de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas de Syringodium filiforme.
La variabilidad natural encontrada en la base de datos indica que los descriptores ms variables fueron los del contenido de pigmentos (C.V. > 40%, Fig. 9b) y de la eficiencia de absorcin de los pigmentos (a*, C.V. = 42.1%, Fig.9a). De los tres descriptores del contenido de pigmentos el ms variable fue la seccin transversal de pigmentos (contenido por unidad de rea proyectada, C.V. = 46.6%, Fig. 9b). Entre los parmetros que variaron menos se encontraron la absorptancia (C.V. = 11%, Fig. 9a) descriptores morfolgicos (C.V. <20%, Fig. 9c): a) b) c) y los

Fig.9. Grficos de Box para describir la variabilidad de la base de datos a escala logartmica. Los grficos describen la mediana y los intervalos que integran el 25% y el 75% de la variabilidad (caja) y el 5% y el 95% de la variabilidad (lneas). Los crculos ilustran los puntos que salen de estos lmites de distribucin de la variacin.

La mayor parte de estos descriptores mostraron asociaciones de variacin significativas (Tabla I), aunque las ms fuertes se observaron entre a* y los descriptores del contenido de pigmentos. Tanto los descriptores pticos como los descriptores morfolgicos de la hoja mostraron fuertes colinealidades entre s, es decir, un aumento de la absorptancia est asociado a una disminucin de la eficiencia de absorcin de los pigmentos (a*pigm) r = -0.51, P < 0.05; Tabla I) pero tambin a un aumento de la eficiencia de absorcin por unidad de peso (a*M) r = 0.72, P < 0.05; Tabla I). Por otro lado, las hojas con mayor capacidad de absorcin de luz (A), tienden a ser las ms gruesas (r = 0.59, P < 0.05; Tabla I), y las hojas gruesas tienden a ser poco densas (r = -0.63, P < 0.05; Tabla I). Estas intercorrelaciones (colinelidad) son frecuentes en la variacin natural y afectan la correlacin individual en las distintas asociaciones de variacin. Para resolver este

- 28 -

problema de colinealidad se utiliz el anlisis de vas (path analysis, Williams et al. 1990) que permiti distinguir entre los efectos directos e indirectos en cada asociacin de variacin.
Tabla I: Correlaciones de Pearson (r) entre los descriptores utilizados en este anlisis comparativo. ns indica la asociacin de variacin no significativa (P > 0.05).
Absorbancia de pigmentos (cla+b) en el rango PAR a* PAR (m /mg Cla+b) a*MPAR(m /gPS) Densidad de cla + b [mg/m2] Concentr. de cl a+b [Qg/cm3] Conten. cla + b [mg/gPS] Dens. de hoja (mgPS/cm3] Peso especfico LMA (gPS/m2) Grosor (mm)
2 2

Absorptancia PAR -0.51 0.72 0.76 0.67 0.73 -0.31 0.25 0.59 Absorptancia 680 -0.15 0.86 0.74 0.63 0.71 -0.32 0.12ns 0.47

a* Cl a +b 1 -0.24 -0.95 -0.93 -0.9 0.14ns -0.32 -0.45

a*MPAR

Densidad cl a +b

Concent. cl a +b

Cont. cl a +b

Densidad hoja

LMA

1 0.45 0.4 0.63 -0.67 -0.48 0.32 1 0.95 0.95 -0.22 0.34 0.57 Densidad de cl a 1 0.92 -0.02ns 0.28 0.28 Concent. cl a +b 1 -0.41 0.05ns 0.5 Cont. cl a +b 1 0.54 -0.63 Densidad hoja 1 0.32

Absorbancia de cla a 680nm a*680 (m /mg Cla) a*M680 (m /gPS) Densidad de cla [mg/m2] Concentr. de cl a [Qg/cm3] Conten. de cla [mg/gPS] Dens. de hoja (mgPS/cm3] Peso especfico LMA (gPS/m2) Grosor (mm)
2 2

a*cl a 1 -0.05ns -0.77 -0.78 -0.7 0.01ns -0.23 -0.22

a*M680

LMA

1 0.59 0.52 0.74 -0.6 -0.38 0.33 1 0.92 0.93 -0.23 0.25 0.49 1 0.89 0.02ns 0.15 0.11ns 1 -0.43 -0.12ns 0.38 1 0.54 -0.63 1 0.32

7.3.1 Anlisis de la morfologa foliar sobre la capacidad de absorcin de luz (Absorptancia) de las hojas de S. filiforme
La absorptancia present una relacin positiva pero no linear con la seccin transversal de pigmentos (pigmentos por unidad de rea), tanto en el promedio del PAR (400-700 nm) como para el pico de absorcin de la clorofila a a 680 nm. Estas relaciones las describen las siguientes ecuaciones: APAR= 101.47+ 0.02 * Densidad de clorofila (a+b)0.16+ 0.01 R2= 0.58, n=193, p< 0.0001, SE= 0.054 A680= 101.41+0.03 * Densidad de clorofila a 0.23+0.016 R2= 0.52, n=193, p< 0.0001, SE= 0.041 (5)

(6)

- 29 -

y los siguientes grficos:

90 90

Absorptancia % (680 nm)

Absorptancia % (PA )

80 70 60 50 40

86%
80 70 60

76%

50

100

200

300

400
-2

500

40 0 50 100 150 200 250 300

-2

350

Densdidad de Chl a+b (mg m )

Densdidad de Chl a (mg m )

Fig.10.Asociacin de variacin entre la absorptancia y la seccin transversal de pigmentos. En el promedio del PAR (400-700 nm) y en el pico de absorcin de la clorofila a (680 nm).

En estas grficas se observa que la mxima capacidad promedio de absorcin de luz de las hojas de S. filiforme es de 76.12% + 2.59 en el promedio del PAR, y del 85.83% + 3.12 en el pico de clorofila a (680nm). Este mximo se alcanza a una densidad de pigmentos de 300 mg de clorofila (a+b) por m2 para el promedio de absorcin de luz en el PAR, pero el pico de absorcin de la clorofila a con mnima interferencia con otros pigmentos accesorios (680 nm) alcanza el mximo de absorcin a slo 100 mg Chla m-2. A partir de estas densidades de pigmento(s) el incremento de la absorptancia ya no es significativo. Corregidos los factores de escala con el anlisis RMA (Mdelo II de regresin: reduced major axis regression, Niklas, 1994), se confirma que la absorptancia a 680nm aumenta ms rpido al aumentar la densidad de clorofila a (Factor de escala =0.31) en comparacin con el conjunto de pigmentos (Factor de escala=0.21). Tambin se observa en las graficas de la figura 13 que hay un porcentaje muy importante de la variacin de la absorptancia que no la explica la variacin de la seccin transversal de pigmentos. Esta incertidumbre no slo es consecuencia de que a partir de un cierto valor del contenido de pigmentos no hay cambios significativos en la absorptancia, sino que en todo el rango examinado una misma cantidad de pigmentos pueden resultar en una variabilidad de la absorptancia superior al 20%. Esto sugiere que cambios en la morfologa y distribucin de pigmentos dentro de las hojas de Syringodium filiforme pueden afectar a su capacidad y eficiencia de absorcin de luz. Para determinar que parmetros son ms importantes para explicar la variacin de la

- 30 -

capacidad de absorcin de luz(A), se analiz la contribucin de los distintos descriptores de la hoja que afectan a la seccin transversal de pigmentos (pigmentos por rea proyectada); los cuales resultan de la descomposicin matemtica de este descriptor ver figura 11.

Fig. 11. Diagrama que muestra las variables que resultan de la descomposicin matemtica de la seccin transversal de pigmentos. Se sigui el mismo protocolo descrito en Enrquez y SandJensen 2003.

En primer lugar, la seccin transversal de pigmentos puede variar a partir de dos fuentes de variacin: cambios en el contenido de pigmentos por unidad de volumen (concentracin de pigmentos) y cambios en el grosor del tejido. Los cambios en la concentracin de pigmentos tambin dependen de cambios en el contenido de pigmentos por unidad de peso y en los cambios de densidad del tejido. Tanto los cambios en la densidad del tejido como los cambios en el grosor determinan los cambios en el peso especfico de la hoja. Todas estas variables se pueden considerar en modelos de regresin mltiple para analizar su diferente capacidad de explicar la variacin de la absorptancia de la hoja de Syringodium filiforme y, por tanto, la incertidumbre encontrada en la asociacin de variacin entre la seccin transversal de pigmentos y la absorptancia. Estos mismos modelos mltiples se van a utilizar posteriormente para examinar las asociaciones de variacin entre la seccin transversal de pigmentos y las eficiencias de absorcin de luz. Tanto para los modelos mltiples como para los simples se utilizarn los parmetros transformados logartmicamente para evitar problemas de heteroscedasticidad (Draper & Smith 1966). De acuerdo a la figura 11 se realizaron las regresiones mltiples para encontrar los modelos y las variables que mejor explican la variacin la absorptancia de las hojas de Syringodium filiforme. En la tabla II se muestran los resultados de dichas regresiones.

- 31 -

Tabla II. Modelos explicativos de regresin mltiple de la variacin de la absorptancia, tanto el promedio en el PAR [A(PAR)] como en el pico de absorcin a 680 nm [A(680)]. Los parmetros han sido transformados logartmicamente.
Log-log pendiente) A(PAR) []cl a+b (mg/cm3) grosor(mm) 0.133047 0.280538 SE 0.0115 0.0306 0.6108 151.6689 0.0000 0.0289 R2 F(2,190) P SE

A(680)

[]cl a (mg/cm3) grosor(mm)

0.208684 0.324137

0.017412 0.038893 0.5514 119.0212 0.0000 0.0381

A(PAR)

Cont. cl a+b (mg/gPS) densidad grosor

0.1353 0.2596 0.1073

0.0118 0.0401 0.0336 0.6101 101.1572 0.0000 0.0289

A(680)

Cont. cl a (mg/gPS) grosor densidad

0.213231 0.254914 0.116849

0.017360 0.049675 0.045066 0.5449 77.6401 0.0000 0.0387

A(PAR)

Contenido cl a (mg/gPS) LMA (gPS*m2)

0.160560 0.155090

0.010517 0.032956 0.5756 131.1960 0.0000 0.0302

A(680)

Cont. cl a (mg/gPS) LMA (gPS*m2)

0.236967 0.171041

0.015874 0.042353 0.5270 107.9637 0.0000 0.0394

Los modelos mltiples que describen mejor la variacin de la absorptancia son:

APAR = 101.48+0.06 x Concentracin de pigmentos (pigm/ volumen)0.133+0.012 x grosor (log/log, R2= 0.61, n=193, E.E= 0.028, p < 0.001) APAR = 101.54+0.06 x Contenido de pigmentos (pigm/ peso)0.135+0.01 x grosor 0.26+0.04x densidad hoja 0.11+0.03 (log/log, R2= 0.61, n=193, E.E= 0.06, p < 0.001) (8)
0.28+0.03

(7)

Estos modelos indican que el factor que ms afecta a la variacin de la capacidad de absorcin de la luz de las hojas de Syringodium filiforme es el grosor de la hoja. En ambas ecuaciones el coeficiente del modelo mltiple log/log (exponente) del - 32 -

grosor es dos veces mayor que el de los dems (grosor = 0.26+ 0.04 y 0.28+0.03; contenido de pigmentos = 0.135+0.01; y densidad de la hoja = 0.11+0.03). Es decir que los cambios de grosor inducen cambios mayores en los valores de la absorptancia que los cambios en el contenido de pigmentos y/o en la densidad de la hoja. Sin embargo en ambos modelos el parmetro que explica la mayor parte de la variabilidad de la absorptancia es el descriptor de los pigmentos, ya sea por unidad de volumen o por unidad de peso. Para el segundo modelo (ecuacin 8) realizado por pasos, el grosor fue la siguiente variable capaz de explicar un mayor porcentaje de la variacin de la absorptancia, incrementando en un 7% la variabilidad explicada, y por ltimo la densidad de la hoja contribuy a explicar solo un 2% ms. Este descriptor, aunque contribuye muy poco a explicar la variabilidad encontrada en la absorptancia, su contribucin en este modelo es significativa y positiva, es decir un aumento de la densidad de la hoja contribuye a mejorar su capacidad de absorcin de luz.
En la figura 15 se comparan las relaciones entre la densidad de clorofila a+b y el grosor con la absorptancia de las hojas de S. filiforme. Esta ultima descrita por la siguiente ecuacin: Absorptancia = 101.75 x grosor 0.38 (log/log, R2= 0.34, n=193, E.E= 0.037, p < 0.001 El factor de escala corregico con el anlisis RMA, Niklas, 1994), fue de 0.65, muy superior al de la densidad de pigmentos de 0.33.

- 33 -

90 90
PAR

80 70 60 50 40

Absorp ancia % PAR

80 70 60 50 40
0.8 1 1.2 1.4 1.6

Absorp ancia %

}20%

100

200

300

400
 

500

Densdidad de chl a+b mg m

-2

Grosor mm

Fig. 12. Relacin entre el la densidad de pigmentos y el grosor con la Absorptancia

Estas grficas demuestran que los cambios en el grosor genera mayores cambios en la capacidad de absorcin de las hojas de Syringodium filiforme que los cambios en la seccin transversal de pigmentos. De hecho los cambios de la seccin transversal de pigmentos dependen en cierta medida de los cambios de grosor, pues implica mayor nmero de clulas. En cuanto a la densidad de hoja a diferencia del modelo mltiple, no present una correlacin significativa con la absorptancia (Tabla 1) .Para entender esta

discrepancia entre el modelo y la correlacin de Pearson, se analiz el posible efecto de la colinealidad entre parmetros sobre sus asociaciones de variacin. Al observar las correlaciones de las 4 variables (contenido de pigmento, grosor, densidad de la hoja y la absorptancia) podemos notar que estn significativamente intercorrelacionadas (tabla 1). Es decir, hojas con mayor capacidad de absorcin de luz (A), tienden a ser las ms gruesas (r = 0.59) y menos densas (r= -0.31), y las hojas gruesas tienden a ser mas pigmentadas (r=0.5) y poco densas (r = -0.63). Debido a esta colinealidad, el efecto individual de cada descriptor sobre la absorptancia, es decir, los coeficientes de correlacin de cada parmetro con la absorptancia, no representan el efecto directo de cada descriptor con esta variable ptica. Por lo que se procedi a realizar el anlisis de vas para distinguir entre los efectos directos y los indirectos resultado de sus respectivas colinearidades, entre los distintos descriptores (contenido de pigmento, grosor y densidad de la hoja) y la variacin de la absorptancia (Fig. 13) Este anlisis permiti adems explicar los resultados del modelo mltiple, ya que - 34 -

Punta Herrero

1.8

2.2

2.4

la importancia relativa de los efectos directos permiti reconocer los parmetros ms fuertemente asociados con la variacin de la absorptancia: primero los pigmentos, luego el grosor de la hoja y por ltimo la densidad. Esto se observa en los efectos directos que mostraron estas variables: pigmentos por unidad de peso (68.8%); grosor de la hoja (48.7%); densidad de la hoja (27.2%). A pesar de la poca contribucin de la densidad de la hoja en el modelo mltiple, esta fue positiva y significativa. Con este anlisis se descubri que el efecto positivo que guarda esta variable con la absorptancia esta enmascarado por la fuerza de la colinealidad negativa que tiene con el grosor y el contenido de pigmentos. Esta suma de los dos efectos indirectos, explica la correlacin negativa entre la densidad de la hoja y la capacidad de absorcin. Con este anlisis se lleg a la conclusin de que hojas ms pigmentadas y ms gruesas son las que presentan una mayor capacidad de absorber luz, aunque tambin lo haran las hojas ms densas si no fuera porque las hojas ms gruesas y pigmentadas son adems las menos densas. De todos modos para un mismo contenido en pigmentos y un mismo grosor de la hoja, el modelo mltiple indica que un aumento de la densidad permite tambin aumentar la absorptancia. Pigmento por unidad de peso 0.73 =
68.8% (+) efecto directo 22.6% (+) efecto indirecto (grosor) 8.6% (-) efecto indirecto (Dens hoja)

0.50 -0.41 -0.63

Grosor de hoja 0.59 = Absorptancia

48.7% (+) efecto directo 37.% (+) efecto indirecto (pigm) -14.3% (-) efecto indirecto (Dens hoja)

-0.31= Densidad de la hoja

27.2% (+) efecto directo 36.2 %(-) efecto indirecto (pigm) 36.6% (-) efecto indirecto (grosor)

Fig. 13. Diagrama de rutas que describe la relacin entre la absorptanciaPAR con los pigmentos por unidad de peso, grosor y densidad de hoja. Los nmeros al costado de las flechas indican los valores de correlacin de Pearson. Se presentan adems los efectos directos e indirectos de cada descriptor sobre la absorptancia.

- 35 -

Para entender mejor estos resultados se realizaron dos simulaciones de la variabilidad de la absorptancia vs. la variacin del contenido de pigmentos por unidad de peso, a partir del modelo obtenido (ecuacin 8). En la primera simulacin se mantuvo fijo el valor de la densidad de la hoja en el promedio de la base de datos analizada y en la segunda, se mantuvo fijo el valor del grosor de la hoja tambin en el promedio de la base de datos (Fig. 14). La variacin utilizada en cada simulacin de las otras dos variables se mantuvo siempre dentro del rango de variacin natural observado en la base de datos. Usando el modelo
APAR = 10
1.54+0.06

(8)

x pigm/ peso0.135+0.01 x grosor de hoja0.26+0.04x densidad hoja 0.11+0.03

Y el promedio de la densidad de la hoja = 53.47mgPS/cm3 y del grosor= 1.52mm, se obtuvieron las dos simulaciones que ilustran los siguientes grficos:
1mm 1.5mm 2mm 2.5mm 30mgPS/cm3 50mgPS/cm3 70mgPS/cm3 0mgPS/cm3

50

Contenido de pigmentos (mg cla+b/gPS)

Figura 14. Comparaciones de los efectos positivos del grosor y densidad de la hoja sobre la variabilidad de la absorptancia.

Con estas imgenes queda claro el efecto positivo que tiene la densidad sobre la absorptancia, pero tambin la diferencia de poder que tiene con respecto al grosor para mejorar la absorptancia de la hoja.

60
  

70
! 

'

80
& % $

80

70


60

50

Contenido de pigmentos (mg cla+b/gPS)

)  ( " #   

 ( ' " #    & % $  

- 36 -

7.3.2 Anlisis de la morfologa foliar sobre la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos: La eficiencia de absorcin de luz por unidad pigmento (a*PAR (m2/mg Cla+b) y a*
680(m2/mg

Cla) ), son unos parmetros tiles para cuantificar la eficiencia de las

estructuras colectoras de luz en absorber energa, y comparar cmo distintas estructuras o respuestas morfolgicas de la hoja (fotoaclimatativas) pueden mostrar grandes diferencias en la eficiencia de absorcin. En la Tabla I se observa que este parmetro est negativamente asociado a la variacin de la absorptancia, mucho ms para el promedio en el PAR (r = -0.51, P < 0.05) que para el pico de la clorofila a a 680 nm (r = -0.15, P < 0.05). Es decir, las hojas que absorben ms luz, son menos eficientes en absorberla por unidad de pigmento. Con respecto a los otros descriptores morfolgicos de la hoja, las asociaciones de variacin ms fuertes se observaron con los descriptores del contenido de pigmentos (Tabla I), pero tambin se observaron asociaciones significativas y negativas con el grosor de la hoja y con el peso especfico (LMA, Tabla I). No se observ ninguna asociacin significativa con la densidad de la hoja (Tabla I). La asociacin de variacin ms fuerte de la eficiencia de absorcin de luz se present con la seccin transversal de pigmentos. Se observ entre ellos una asociacin no linear y negativa, descrita por las siguientes ecuaciones: a*PAR=10 -0.53 0.04 * Densidad de clorofila (a+b) -0.71 0.02) R2= 0.89, n=193, p< 0.0001 E.E= 0.05 (8) a*680= 10 -0.76 0.06 * Densidad de clorofila a -0.50 0.03 R2= 0.59, n=193, p< 0.01 (9) y los siguientes grficos (Fig. 15): E.E 0.08

- 37 -

Fig.15. Asociacin de variacin entre el coeficiente especfico de absorcin de luz (a*, m2 mg pigm1 ) y la seccin transversal de pigmentos, tanto para el promedio en el PAR (400-700 nm) como para el pico de absorcin de la clorofila a a 680 nm. Se muestran tambin los ajustes a una funcin alomtrica (y = a * Xb).

Estos resultados muestran que la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos decrece no linealmente al aumentar la seccin transversal de pigmentos en las hojas de Syringodium filiforme (Factor de escala de -0.75 para a*pigm y -0.65 para a*chla, corregido con el con anlisis RMA, modelo II de regresin: reduced major axis regression, Niklas, 1994) de forma similar a lo descrito previamente para el pasto marino dominante del Caribe y Golfo de Mxico, Thalassia testudinum (Enrquez 2005), para la planta anfibia, Mentha aquatica (Enrquez & Sand-Jensen 2003) y para el coral hermatpico Porites branerii (Enrquez et al. 2005). Esta reduccin es consecuencia del efecto paquete o autosombra que sufren los pigmentos dentro del tejido que ms adelante se discutir. La teora ptica desarrollada para el fitoplancton dice que la absorcin especfica de los pigmentos depende del tamao celular (que se encuentra en funcin de su dimetro) y de la concentracin intracelular de pigmentos (kirk 1994, Niklas 1994) Los equivalentes descriptores en tejidos multicelulares son el grosor del tejido fotosinttico y la concentracin de pigmentos (pigmentos/volumen). Estos descriptores mostraron correlaciones significativas y negativas con la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos (P < 0.05; Tabla I). El grosor present un coeficiente de correlacin negativo y significativo con la eficiencia de absorcin de los pigmentos (r= -0.45, P <0.001) - 38 -

Estas relacin est descrita por el siguientes modelo y grfico:

Coeficiente especfico de absorcin de pigmentos 0.03

0.025

a*PAR = 10-1.93+0.02 x grosor -1.053+0.15 (log/log, R2= 0.2, n=193, E.E= 0.147, p < 0.001

m mg pigm

0.02

-1

0.015

a*

pigm,

0.01

0.005

0 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 2.4

Grosor (mm)

Fig. 16. Relacin entre el grosr y a* pigmentos.

Por su parte la concentracin de pigmentos present un fuerte valor de correlacin de -0.93 similar al de la seccin transversal de pigmentos (pigmentos/rea). La relacin la describe la siguiente ecuacin: a*PAR = 10-0.36+0.05 x pigmentos/volumen-0.81+0.02 (log/log, R = 0.87, n=193, E.E= 0.06, p < 0.001 El factor de escala de esta relacin corregido con el anlisis de regresin RMA fue de -0.87. Este valor llama la atencin puesto que es significativamente superior al factor de escala de la relacin de a*PAR y pigmentos/area (-0.75), es decir que los cambios en la concentracin de pigmentos (pigmentos/volumen) tienen un mayor efecto sobre la habilidad de absorber luz de los pigmentos que los cambios en la seccin transversal de pigmentos o (pigmentos/rea proyectada). Al analizar conjuntamente la asociacin de la eficiencia de absorcin de luz con la concentracin de pigmentos y el grosor, el modelo mltiple mejora slo un 4% la capacidad de explicar la variabilidad del coeficiente especfico de absorcin (a*) gracias a considerar los cambios en el grosor, es decir, la mayor parte de la variacin la puede explicar nicamente los cambios en el contenido de pigmentos por unidad de volumen. El modelo mltiple tambin permiti determinar que el grosor tiene un efecto tambin negativo sobre la eficiencia de absorcin de los pigmentos, pero menor que el aumento del contenido de pigmentos por volumen, ya que el coeficiente del modelo mltiple log/log (exponente) del grosor result - 39 2

(10)

significativamente menor que el de la concentracin de pigmentos. a*PAR = 10-0.39+0.04 X pigmentos/volumen-0.76+0.02 X grosor -0.47 (log/log, R2= 0.91, n=193, E.E= 0.051, p < 0.001 En resumen estos resultados indican que al incrementar la concentracin de pigmentos resulta en un autoensombramiento de los mismos, reduciendo su eficiencia de absorcin de luz. As mismo el aumento del grosor tambin contribuye a este autoensombrado o prdida de la eficiencia de absorcin de los pigmentos, pero en menor medida. La concentracin de pigmentos no es un parmetro comnmente utilizado para describir el contenido de pigmentos de estructuras multicelulares, pero s es ms comn utilizar el contenido de pigmentos por unidad de peso. Para conocer la contribucin de este otro descriptor del contenido de pigmentos a la habilidad de absorber luz de las hojas de Syringodium filiforme, se examinaron otros modelos de regresiones mltiples utilizando las variables que resultan de la descomposicin de la concentracin de pigmentos (Fig. 11) y de esta manera se examin la contribucin de los descriptores morfolgicos (densidad de la hoja, contenido de pigmento y grosor) sobre la variacin de la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos de las hojas de Syringodium filiforme. a*(pigm) = 10-0.332+0.11 X pigmentos por peso-0.76+0.02 X densidad de la hoja X grosor de la hoja -0.50+0.07 (log/log, R2= 0.90, n=193, E.E= 0.051, p < 0.001 Este modelo realizado por pasos, revel que el contenido de pigmentos es capaz de explicar por s solo el 81% de la variabilidad de la eficiencia de absorcin de luz; la siguiente variable en entrar al modelo fue la densidad de la hoja la cual mejor el poder explicativo del modelo en un 7%, y por ltimo el grosor contribuy con un 2% a explicar la variacin de (a*pigm). Este modelo adems indica que la densidad de la hoja y el contenido de pigmentos son las variables que ms influencia tienen sobre los cambios de la eficiencia de absorcin de la luz de las - 40 -0.79+0.06

(10)

(11)

hojas de Syringodium filiforme, coeficiente del modelo mltiple log/log de la densidad de la hoja es (-0.79+ 0.021), y del contenido de pigmentos es (0.76+0.02); y que el grosor de la hoja es el descriptor morfolgico que en menor grado contribuye a empaquetar los pigmentos en el tejido (-0.50+0.03). Al analizar las correlaciones individuales de las variables del modelo con respecto al coeficiente especfico de absorcin (Tabla I), se puede observar en el caso del contenido de pigmentos (pigm/gPS), que tiene una fuerte correlacin negativa con a*, pero ligeramente inferior a los otros descriptores de pigmentos. El factor de escala de esta relacin corregido con el modelo II (RMA, de Niklas 1994) mostr sin embargo un mayor valor (0.79) que el de los pigmentos por rea proyectada (0.75), pero menor que el de la concentracin de pigmentos (0.87). Por su parte la densidad de la hoja no present una correlacin significativa con a* PAR (m2/mg Cla+b). Nuevamente esta discrepancia entre el modelo mltiple y la correlacin de Pearson con respecto a la densidad se aclar con el anlisis de vas, el cual confirm que el contenido de pigmentos y la densidad son los principales factores asociados a la variacin de la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos (a*pigm m2 mg Cla+b-1) de las hojas de S. filiforme. El anlisis de vas indica tambin que el contenido de pigmento es el factor que induce cambios ms grandes en a*pigm. Adems este anlisis confirma que las hojas ms gruesas sufren un mayor autoensombramiento de los pigmentos, resultando en una reduccin de su eficiencia para absorber luz, aunque este efecto es menor que el que sufren las hojas muy pigmentadas y muy densas. Los efectos indirectos resultado de la colinearidad entre la densidad de la hoja, el contenido de pigmentos y el grosor de la hoja, explican la ausencia de correlacin entre la densidad de la hoja y la absorcin especfica de los pigmentos (p> 0.05). Estos resultados indican que las hojas menos pigmentadas son las ms eficientes en absorber luz, as como las ms delgadas, sin embargo la fuerte relacin positiva del contenido de pigmentos con el grosor, es la responsable de la correlacin significativa y negativa encontrada entre el grosor y la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos, mayor en apariencia que la correlacin entre - 41 -

(a*PAR, m2/mg Cla+b) y la densidad de la hoja, pero slo en apariencia y fruto de la colinearidad entre variables, pues el efecto directo de la densidad de la hoja sobre a*pigm. es mucho mayor que el del grosor. Por su parte las hojas menos densas no muestran un significativo aumento de a*pigm. (correlacin de Pearson entre densidad y a*pigm no es significativa), pero lo haran a juzgar por su efecto directo si no fuera porque las hojas menos densas tienen tambin ms contenido de pigmento (ver Tabla I). La falta de asociacin (segn la correlacin de Pearson, p> 0.05, Tabla I), entre la densidad de la hoja y la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos es explicable por los sentidos opuestos de su efecto directo e indirecto. El efecto directo negativo (-42%) de la densidad de la hoja queda contrarrestado por el efecto indirecto positivo (43%) de la covariacin (negativa) que tiene la densidad de la hoja con el contenido de pigmentos, lo que resulta en una ausencia de correlacin entre esta variable morfolgica y a*pigm.(Fig.17).
78.% (-) efecto directo 13.0% (+) efec. indirecto (dens. hoja) 9.2% (-) efec. indirecto (grosor) Pigmento por unidad de peso )

-0.90 -0.41 0.14ns 0.50

Densidad de la hoja a*pigm
42% (-) efecto directo 43% (+) efecto indirecto (pigm) 15% (+) efecto indirecto (grosor)

-0.63

-0.45
Grosor de hoja
23% (-) efecto directo 51% (-) efecto indirecto (pigm) 26% (+) efecto indirecto (Dens hoja)

Fig. 17. Diagrama de rutas que describe la relacin entre la eficiencia de absorcin (a*PAR) con los pigmentos por unidad de peso, grosor y densidad de hoja. Los nmeros al costado de las flechas indican los valores de correlacin de Pearson. Estos efectos se separan en efectos directos e indirectos.

- 42 -

Estos resultados podran explicar la falta de correlacin entre el grosor y la concentracin de pigmentos (Tabla 1), pues al descomponer esta variable de pigmentos (mg Chl a + b cm-3) en las dos variables que causan su variacin independientemente (contenido de pigmentos, mg chl a + b /gPS y densidad de la hoja, mgPS/cm3) se puede observar que estas dos variables tienen una relacin de sentido opuesto con el grosor.
Tabla III. Modelos explicativos de regresin mltiple de la variacin de los coeficientes especficos de absorcin de luz, tanto el promedio en el PAR [a*(PAR)] como en el pico de absorcin a 680 nm [a*(680)]. Los parmetros han sido transformados logartmicamente.
Descriptor funcional a*(Pigm) Descriptor morfolgico chl [a+b] (mg cm ) Grosor (mm)
-3

Coeficiente log-log -0.762903 -0.477841

SE 0.020300 0.054054

R2

F(2,190)

SE

0.9047

912.3390

0.0000

0.0511

a*(Chla)

chl a (mg cm ) Grosor (mm) Cont. chl [a+b] -1 (mg gPS ) Densidad hoja -3 (mgcm ) Grosor (mm) Cont. chl a -1 (mg gPS ) Densidad hoja -3 (mgcm ) Grosor (mm) Cont. chl [a+b] -1 (mg gPS ) LMA (gPS m ) Cont. chl a -1 (mg gPS ) LMA (gPS m ))
-2 -2

-3

-0.568219 -0.226736

0.033297 0.074377 0.6204 157.9208 0.0000 0.0728

a*(Pigm)

-0.760611 -0.792156 -0.501858

0.020805 0.059454 0.070971 0.9043 605.9939 0.0000 0.0512

a*(Chla)

-0.561328 -0.707433 -0.331669

0.033357 0.086592 0.095448 0.6244 107.4133 0.0000 0.0724

a*(Pigm)

-0.711992 -0.700573

0.018755 0.058773 0.8944 814.1988 0.0000 0.0537

a*(Chla)

-0.496726 -0.559942

0.031219 0.083295 0.5892 138.6920 0.0000 0.0757

- 43 -

6.2.3 Anlisis de la morfologa foliar en la eficiencia de absorcin de luz de la biomasa foliar. La eficiencia de absorcin por unidad de biomasa (a*MPAR(m2/gPS), es un parmetro til para cuantificar la eficiencia del retorno de energa por biomasa de hoja colectora de luz. A pesar de que no toda la biomasa foliar est involucrada en la absorcin de luz, este descriptor puede ser til para explicar diferencias entre especies y respuestas fotoaclimatativas de la hoja de una misma especie en la tasa especfica de crecimiento, pues cuantifica la habilidad de producir una nueva hoja por unidad de energa colectada. En la Tabla I se observa que este parmetro a diferencia de la absorcin especfica de los pigmentos, est positivamente asociado a la variacin de la absorptancia. Es decir, las hojas que absorben ms luz, aunque reduzcan la eficiencia de absorcin por unidad de pigmento, aumentan significativamente la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa. Esta asociacin es incluso mayor para la eficiencia de absorcin de la clorofila a (r = 0.72 para APAR y r = 0.82 para A680; Tabla I). Con respecto a los otros descriptores morfolgicos de la hoja, las asociaciones de variacin ms fuertes se observaron con la densidad de la hoja y con el contenido de pigmentos por unidad de peso (Tabla I). En el primer caso se observ una relacin negativa, es decir, un aumento de la densidad de la hoja est asociado a una fuerte disminucin de a*M (r = -0.67 y -0.6, para pigmentos y clorofila a respectivamente, Tabla I), pero en el segundo caso la asociacin de variacin es positiva, es decir, un aumento del contenido de pigmentos por unidad de peso mejora significativamente la eficiencia de absorcin de luz por unidad de peso (r = 0.63 y 0. 74, para pigmentos y clorofila a respectivamente, Tabla I). El resto de los parmetros tambin mostraron relaciones significativas con a*M, aunque menores, negativas para LMA, y positivas para el grosor y para los descriptores de pigmentos (Tabla I). Para analizar cmo la morfologa de la hoja regula la variacin de (a*MPAR,m2/gPS), se compar este parmetro en primera instancia con la seccin transversal o densidad de pigmentos, pues los pigmentos son los que realmente - 44 -

absorben la energa necesaria para el crecimiento y produccin de su biomasa. En conformidad con esta teora, esta relacin mostr una significante y positiva relacin con la seccin transversal o densidad de pigmentos (r=0.45), siendo mayor la relacin con la densidad de Chla (r=0.59). Por otro lado, la comparacin de la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa con la variable que refleja la cantidad de tejido que absorbe luz por unidad de rea proyectada (LMA), present tambin una significativa correlacin pero negativa (r= -0.48 y -0.38 para pigmentos y clorofila a respectivamente). En la figura 18 se muestra esta relacin.
PAR 680n

0.035

Absorcin especfica e bio asa

0.03

bsorcin especfica e bio asa

gPS )

a* ,(

0.015

a* ,(

0.01
0

0.005 40 50 60 70 80 90 100
5

110
-2

120

Fig. 18. Relacin entre la absorcin especfico de la biomasa y el peso especfico en el PAR y a 680nm de las hojas de Syringodium filiforme.

La ecuacin que describen estas relaciones est dada por: a*biomasaPAR= 10-0.50+ 0.16 x LMA -0.66 ( log/log, R2= 0.22, E.E= 0.06, p < 0.001)

a*biomasa680nm= LMA -0.71+ 0.13(R2= 0.14,E.E= 0.06, p < 0.001) La alta incertidumbre que hay en esta relacin a lo largo de todo el rango de variacin del peso especfico (es decir que hojas con el mismo peso especfico, LMA son capaces de absorber mayor cantidad de luz), hace que la posibilidad de estimar el verdadero factor de escala de esta asociacin sea baja. Sin embargo el factor de escala de estas relaciones corregido con el anlisis de regresin RMA, - 45 -

Peso especfico (LMA, g PS

0.02

gPS )

0.025
1

-1

-1

0.06

0.05

0.04

0.03

0.02

0.01

0 40 50 60 70 80 90 100 110
-2

120

Peso especfico (LMA, g PS

Niklas (1994).mostro valores de -1.39PAR y de -1.93680nm. Estos resultados indican que las hojas con mayor biomasa por unidad de rea o ms empaquetada, sufren proporcionalmente mayor reduccin en la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa que las hojas menos menos empaquetadas Al analizar conjuntamente en un modelo mltiple, el efecto del contenido de pigmentos y el peso especfico (LMA), se observ un aumento significativo de la capacidad del modelo de explicar la variabilidad de a*MPAR(m2/gPS) a* M PAR= 10-0.55+0.11 x contenido de pigmentos (Chl a +b/gPS)0.28+0.02 x LMA-0.70+0.06 (log/log, R2= 0.65, E.E= 0.05, p < 0.001 a* M 680= 10-0.65+0.15 x contenido de pigmentos (Chl a + b/gPS)0.50+0.03 x LMA-0.56+0.08 (log/log, R2= 0.63, E.E= 0.08, p < 0.001 Segn este modelo, aunque el aumento de LMA contribuye a reducir la eficiencia de absorcin de luz de la hoja por unidad de masa, un aumento del contenido de pigmentos sirve para neutralizar este efecto y mejorar esta eficiencia de absorcin. Para analizar la contribucin de los descriptores morfolgicos, grosor y densidad de la hoja, sobre la eficiencia de absorcin de luz de la biomasa, se utiliz nuevamente un modelo multivariente, (ntese que el producto de estas variables grosor (cm) y densidad de la hoja (mg PS cm-3) es el peso especfico, LMA mg PS cm-2). El modelo resultante se describe en la siguiente ecuacin: a*M(PAR) = 10-0.332+0.11 X pigmentos por peso0.23+0.02 X densidad de la hoja X grosor de la hoja -0.50+0.07 (log/log, R2= 0.69, E.E= 0.05, p < 0.001)
-0.79+0.06

Este modelo confirm lo que se haba observado en la comparacin de los coeficientes de correlacin de Pearson (Tabla I): indicando en el primer paso, que la densidad de hoja es la que explica el mayor porcentaje (45%) de variabilidad de - 46 -

a*MPAR(m2/g PS), seguida del contenido de pigmentos, que contribuy en mejorar un 15% la capacidad explicativa del modelo y por ltimo el grosor de la hoja que la aument en un 9% ms. Este modelo adems indica que la densidad de la hoja es la variable que ejerce un mayor efecto negativo sobre los cambios de la eficiencia de absorcin por unidad de biomasa (coeficiente del modelo mltiple log/log de 0.79 + 0.06) y despus es el grosor de la hoja -0.50 0.07). Por ltimo el contenido de pigmentos, ejerce un efecto positivo sobre a*MPAR(m2/g PS), contrarrestando en menor medida el de los otros dos (coeficiente del modelo mltiple log/log de +0.23 0.02). El examen de las relaciones individuales de la densidad de la hoja y el contenido de pigmentos por unidad de peso con respecto a la eficiencia de absorcin de la biomasa, confirma que estas variables son las que mejor explican la variabilidad de a*M. (r= -0.67, 0.63 respectivamente para a*M del promedio en el PAR), con similar fuerza pero en sentido contrario. Los siguientes grficos muestran las relaciones individuales de las variables utilizadas en el ltimo modelo mltiple en relacin con la absorcin especfica de la biomasa.

ente especf co de absorcin de biomasa

0.035

0.035

0.035

0.03

0.03

0.03

0.025 a* 680nm,m gPS

@
-

0.025

0.025

0.02

0.02

0.02

Coef

20

60

Densidad de la hoja (mgPS/cm3]

Fig. 19. Relacin entre la absorcin especfica de la biomasa y el contenido de pigmentos, densidad y grosor de las hojas de Syringodium filiforme.

En esta ocasin la correlacin de Pearson y el modelo mltiple slo muestran discrepancias con respecto al grosor como puede verse en la grfica y en el coeficiente de correlacin de Pearson (Tabla I). Segn estos resultados el grosor tiene una asociacin positiva con a*M, pero el modelo mltiple expresa lo - 47 -

98

8 8

0.015

0.015

0.015

0.01

0.01

0.01

0.005

0.005

100

120

0.005 0.8

1.2

1.4

1.6

1.8

2.2

2.4

contenido clor a+b [mg/gPS]

Grosor (mm)

contrario. El anlisis de vas nuevamente nos dejo ver que las colinearidades entre variables, modifican la asociacin de variacin del grosor con a*M y aparentan una relacin positiva.

Densidad de la hoja

-0.67= -0.41
Pigmentos/gPS

59.8% (-) efecto directo 19.1% (-) efec. indirecto (pigm/gPS) 21.1% (+) efec. indirecto (grosor) )

0.63 =

-0.63

a*biomasa (PAR)

0.50

53% (+) efecto directo 27.9% (+) efecto indirecto (densidad) 19.1% (-) efecto indirecto (grosor)

0.32 =
Grosor de hoja

35.5% (-) efecto directo 39.9% (+) efecto indirecto (pigm) 24.6% (+) efecto indirecto (Dens hoja)

Fig. 20. Diagrama de rutas que describe la relacin entre la eficiencia de absorcin de la biomasa (a* biomasa PAR) con los pigmentos por unidad de peso, grosor y densidad de hoja. Los nmeros al costado de las flechas indican los valores de correlacin de Pearson. Estos efectos se separan en efectos directos e indirectos.

Estos resultados demostraron que al incrementar el empaquetamiento de la biomasa ya sea incrementando la densidad de la hoja referida tanto a volumen como a rea (LMA) resulta en una reduccin de la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa; y que un aumento en el grosor tambin contribuye a reducir esta eficiencia. Sin embargo un incremento en el contenido de pigmentos, compensara esta reduccin y ayudara a incrementar a*M.

- 48 -

7.4 Anlisis de la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de Syringodium filiforme

El anlisis de la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de Syringodium filiforme se analiz comparando la variacin de los descriptores pticos, del contenido de pigmentos y los descriptores morfolgicos a lo largo de dos diferentes gradientes lumnicos. 1) uno siguiendo la atenuacin de luz en profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos, comparando hojas procedentes de 5 diferentes praderas; y 2) siguiendo la atenuacin de luz en el interior del dosel de una misma pradera, es decir comparando diferentes segmentos a lo largo de una misma hoja de S. filiforme. Para este ltimo anlisis se utilizaron los segmentos de hoja colectadas en la pradera de 2 m de profundidad. Se incluy en la comparacin una pradera situada a 1 m de profundidad en un rea de menor impacto antropognico que el de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, en las cercanas de la reserva de la Biosfera de SianKan: Punta Herrero. Este anlisis comparativo es una primera aproximacin al examen de la respuesta fotoaclimatativa de Syringodium filiforme, pues no se hizo un estudio muy exaustivo y la base de datos cuenta con un limitado nmero de observaciones en algunas de las praderas.

7.4.1 Variabilidad de la absorptancia y densidad de pigmentos.

La densidad de pigmentos ( clorofilas a+b), vari casi en un orden de magnitud (55.2 a 467 mg chl (a+b) m-2)en toda la base de datos (n = 163). La variacin dentro de cada pradera fue muy diferente pues en alguna pradera se observ un variacin muy pequea (del 9%) mientras que otras variaron hasta un 30.2%. Las hojas de la pradera menos profunda contenan la menor cantidad de pigmentos con valores promedios de 140 mg chl (a+b) m-2). Las praderas ms profundas presentaron las mayores densidades de pigmentos, con valores promedios de 285 y 320 mg chl (a+b) m-2). Observese que las hojas de la pradera de Punta Herrero (la ms somera) presentaron una cantidad similar de pigmentos a las hojas de las praderas ms profundas de la laguna arrecifal de Puerto Morelos (Fig.23.) En la figura 21 se presenta adems la variabilidad de la absorptancia. Debido a la correlacin de estos dos descriptores, la absorptancia present una patrn similar de variacin entre las praderas. Este descriptor ptico vari 1.5 veces, desde un mnimo de 53.1% a un mximo de 80.4%, variacin mucho menor que la observada para la densidad de pigmentos que fue casi de un orden de magnitud. Las hojas de Syringodium filiforme

- 49 -

de las praderas ms someras de Puerto Morelos son las que presentan menores cantidades de pigmentos y menor capacidad de absorcin de luz, La pradera de Sian Kaan, siendo ms somera que las de Puerto Morelos (0,5-1 m) present valores similares a su pradera ms profunda situada a 3 m.
Absorptancia 78 350 80

75

300

75

Densi ad de

Absorptancia(%)

AR
B

250 72 200 69 150

70

Absorptancia

66 100

63

50

60 1.5m 2m 2.5m Puerto Morelos 3m 0.8-1m Punta Herrero

2cm
C

istancia al

Fig.21. Variabilidad de la absorptancia y seccin transversal de pigmentos en distintas praderas de Syringodium filiforme.

Un anlisis de la varianza permiti determinar diferencias significativas entre praderas (ANOVA, p< 0.05, F(4,155)= 78.82) en el contenido de pigmentos, pero slo entre las dos praderas menos profundas de la laguna arrecifal de Puerto Morelos y el resto de las praderas. Las dos praderas ms profundas de Puerto Morelos y la pradera de Punta Herrero no fueron diferentes entre s (anlisis de Tukey, Tabla IV).
Tabla IV. Probabilidad asociada a la densidad de pigmentos (mg m-2), de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey

Tambin

la

absorptancia

vari

significativamente

entre

sitios

(ANOVA,

p<

0.05,.F(4,155)=21.97), pero al igual que en la densidad de pigmentos, las praderas menos profundas de Puerto Morelos fueron las que presentaron las diferencias significativas con

- 50 -

A A

la b

55

50 cm

10-18c

el resto, aunque no entre ellas. Tampoco se observaron diferencias significativas entre las praderas que presentaron la absorptancia ms alta. (anlisis de Tukey, Tabla V).
Tabla V. Probabilidad asociada a la absorptancia(%), de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey

Comparando el valor promedio de las poblaciones y la profundidad a la que estn creciendo a diferente profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos, se encontr una fuerte correlacin positiva y significativa entre la absorptancia y la profundidad (loglog, r = 0.96; P < 0.05, Fig. 25), y entre la seccin transversal de pigmentos y la profundidad aunque sta ltima no fue significativa (log-log, r = 0.93; P > 0.05, Fig. 24). Estas asociaciones de variacin, confirman la existencia de un patrn fotoaclimatativo relacionado con la profundidad en las hojas de Syringodium filiforme, que consiste en un progresivo aumento tanto de la seccin transversal de pigmentos como de la absorptancia al disminuir la disponibilidad de luz con la profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos Sin embargo, la pradera de Punta Herrero, siendo la ms somera(<1 m) no se comport segn este mismo patrn, ya que mostr valores del contenido de pigmentos y de la absorptancia similares a los de las praderas ms profundas de Puerto Morelos, mucho mayores que los de la pradera situada a similar profundidad (Fig. 22a). Por otra parte al examinar la respuesta fotoaclimatativa dentro del dosel de la pradera de 2m, se observ una progresiva reduccin en el contenido de pigmentos y de la absorptancia hacia el pice de la hoja, desde un mximo presentado a pocos centmetros del meristemo basal de la hoja (Fig. 22b). Este patrn coincide con la fuerte extincin de luz que se ha reportado dentro del dosel de la pradera submarina dominada por la especie Thalassia testudinum de esta laguna arrecifal (Enrquez et al. 2002, Enrquez & Pantoja-Reyes 2005).

- 51 -

pig.

76

350

80

Abso ptancia PAR (%)

74

Punta H rr r (1 )

300

75 280 70 240 65 200 160 60 120 55 80 50 2c 6c 10-18c 18c

U U U U

Abso ptanciaPAR

72

250

66 1.5m 2m
Q

100 2.5m 3m

40 Puntas
`

P ofundidad

Distancia al

e iste o

Fig.22. Patrn de variacin de la absorptancia y seccin transversal de pigmentos de las hojas de de Syringodium filiforme en: a) diferentes poblaciones de la laguna arrecifal de Puerto Morelos creciendo a distinta profundidad, y b) en el interior del dosel (a lo largo de las hojas) de la pradera de 2m.

De acuerdo a estos resultados, las hojas de Syringodium filiforme disminuyen su capacidad de absorcin y su contenido de pigmentos en las praderas ms someras y en los segmentos de las hojas situados en las posiciones ms altas del dosel de la pradera, las dos situaciones estn asociadas al aumento de la disponibilidad de luz en un ambiente altamente iluminado como es una laguna arrecifal somera. Sin embargo, otros factores tambin influyen sobre esta respuesta fotoaclimatativa pues las hojas de S. filiforme crecidas en la pradera de Punta Herrero se caracterizaron por una alta pigmentacin y capacidad de absorcin de luz.

7.4.2 Variabilidad de la razn molar Cla/b y del cociente carotenoides/Cl a

La composicin de pigmentos cambia a lo largo de la hoja. En la figura 23 se presenta la variacin de la razn molar Cla/b y el cociente de carotenoides /clorofila a. En la laguna de Puerto Morelos la pradera ms somera present los valores ms altos de estos descriptores. La razn molar Cla/b vari pradera ms somera. Al examinar los valores del cociente carotenoides/clorofila a se encontraron algunos errores en la determinacin del contenido de carotenoides en las praderas ms profundas de la laguna de Puerto Morelos (la de 2.5 y 3m). Estos errores no permitieron ofrecer un 4.6 veces desde un mnimo de 0.62 correspondiente a la pradera ms profunda hasta un mximo de 2.86 correspondiente a la

- 52 -

Q `

68

150

70

200

pig. m

X WV

A sorptancia

T S R R

s rptancia

-2

360

Densidad de cla + b ( g

320

Densidad de cla + b ( g

I H G

estima fiable de este parmetro para la laguna ms profunda de la laguna arrecifal de Puerto Morelos.
3 0.35
h

moles Cla/b

4.5 4

Raz m lar la /

0.2 1.5 0.15 1 0.1 0.05 0 1.5 2 2.5 3 1

Punta Herrero Puerto Morelos

0.5

ista cia al meri

g

Figura 23. Variacin de la razn molar cla/cl b y el cociente carotenoides / cl a en las distintas praderas de Syringodium filiforme

A pesar de este problema metodolgico, se observa un claro incremento del contenido de carotenoides en las praderas ms someras sometidas a mayores niveles de irradiancia, en este caso, la pradera de Punta Herrero tambin muestra valores similares a las ms someras de Puerto Morelos y no tanto a las ms profundas. El anlisis de la varianza seal diferencia significativas entre praderas (ANOVA, p< 0.05,.F(4,155)=704.7) para ambos descriptores, siendo las nicas que no presentaron diferencias significativas entre ellas la pradera situada a 2 m de profundidad en Puerto Morelos y la de Punta Herrero (anlisis de Tukey, Tabla VI).
Tabla VI. Probabilidad asociada a la razn molar y al cociente carotenoides/Cl a, de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey

Para estos dos parmetros que describen la variacin de la composicin relativa de pigmentos se encontraron fuertes correlaciones negativas con la profundidad (r=0.92) aunque no significativas (p> 0.05). Es decir, hay una tendencia a que aumente el contenido relativo de la clorofila b con la profundidad lo que est asociado a un aumento

- 53 -

Raz m lar la /

0.25

2.5
e c b d

0.3

cie te car te
i p i

3.5 3 2.5 2 1.5 1 2cm 6cm 10 18cm

i es /cl a
q

del tamao de la antena en condiciones de menor disponibilidad de luz (la clorofila b es un pigmento accesorio que slo se encuentra en la antena del aparato fotosinttico, mientras que la clorofila a tambin se encuentra en los centros de reaccin). Tambin se observa un patrn similar de variacin, para la razn carotenoides/clorofila a, que aumenta en las zonas ms someras. (Fig. 24). De nuevo esto es una clara respuesta fotoaclimatativa a aumentar los mecanismos de fotoproteccin (aumento de la concentracin relativa de carotenoides) al incrementarse la intensidad de luz en las zonas ms someras de la laguna arrecifal. Este patrn de variacin de los descriptores fotoaclimatativos de las hojas, apoya de nuevo la hiptesis explicativa de que diferencias en la densidad de biomasa de la pradera submarina puedan explicar cambios en el campo lumnico de las hojas que confieran a la pradera de Punta Herrero unas caractersticas distintas a las de Puerto Morelos situadas a su misma profundidad, pues las hojas crecidas en Punta Herrero parecen haber estado expuestas a menores intensidades lumnicas que las le corresponderan en una pradera situada a similar profundidad en Puerto Morelos. Por el otro lado, la variabilidad a lo largo de la hoja tambin present el mismo patrn fotoaclimatativo, mostrando una tendencia a incrementar tanto la proporcin de clorofila a/b como de carotenoides/cl a hacia el pice de la hoja, con un mnimo valor a pocos centmetros del meristemo. Es decir que las zonas de las hojas cercanas al meristemo necesitan menos fotoproteccin y tamaos de antena mayores para colectar ms luz, que las puntas de las hojas que se encuentran ms expuestas a la radiacin solar y por tanto necesitan ms fotoproteccin y menores tamaos de antenas. Estos dos parmetros estuvieron altamente y significativamente correlacionados entre s (r = 0.97; P < 0.05).
azn molar a/b carotenoides/ cl a moles Cla/b caroten/cl a

Razn molar Cla / b

Razn molar Cla / b

2.5

1.5

0.5 1 1.5 2 2.5 3

Fig.24. Patrn fotoaclimatativo de la razn molar clorofila a/b y el cociente carotenoides/clorofila a de las hojas de S. filiforme en: a) diferentes poblaciones de la laguna arrecifal de P. Morelos

0.32

4.5 4 3.5

0.7

Cociente carotenoides /cl a

Cociente carotenoides /cl a

0.256

0.6

0.192

0.5 3 2.5 2 1.5 0.2 1 2cm 6cm 10-18cm 18cm puntas 0.4

0.128

0.3

0.064

0 3.5

Profundidad (m)

Distancia al meristemo

- 54 -

creciendo a distinta profundidad, b) en el interior del dosel (a lo largo de las hojas) de la pradera de 2m.

7.4.3 Variabilidad de la morfologa foliar (grosor, densidad y peso seco)

Los descriptores morfolgicos fueron los que presentaron menor variabilidad. El grosor de la hoja vari desde un mnimo de 1.1mm, hasta un mximo de 2.3mm (2 veces), variacin similar a la de la absorptancia. La pradera que gener hojas ms delgadas fue la de menor profundidad de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, presentando un valor promedio de 1.41mm; aunque esta poblacin no fue significativamente diferente de la de mayor profundidad (1.48mm) pero s de la de profundidad de 2,5 m (Fig. 25a). La pradera con hojas ms gruesas fue la de Punta Herrero con valores promedio de 1.9mm (Fig. 25). Por su parte la densidad de la hoja vari desde un mnimo de 31 mgPS.cm-3, hasta un mximo de 75.7 mgPS.cm-3 (2.4veces). En concordancia al anlisis alomtrico, se observ una tendencia general a que las praderas con hojas ms gruesas fueron las que presentaron las hojas menos densas pero con matices muy significativos. Por ejemplo, las dos praderas que produjeron las hojas ms delgadas de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, situadas en la zona ms somera (1 m) y ms profunda (3 m) se comportaron de forma opuesta en relacin a los cambios de densidad. La pradera ms somera present valores bajos de densidad (53.6 mg PS.cm-3) y similares a los de la pradera que gener las hojas ms gruesas a 2,5 m de profundidad (52.5 mg PS.cm-3), mientras que la pradera ms profunda gener hojas delgadas y densas. Los valores mayores de densidad de biomasa foliar se determinaron en esta pradera de la laguna arrecifal de Puerto Morelos (70.17 mg PScm-3; Fig. 25 b). Punta Herrero mostr un patrn opuesto a esta pradera y similar a la de 2,5 m de Puerto Morelos, aunque con contrastes ms marcados: las hojas de Syringodium filiforme de Punta Herrero fueron las ms gruesas y tambin las menos densas (42.2 mgPS.cm-3; Fig. 25)

- 55 -

-3

-2

) . ( es es ecfic ,
x x y

2
y y v

70 60 50 40 30 20 10 0 1.5m 2m 2.5m

80 70 60 50 40 30 20 10 0

Gr s r (

0.5
u

0 3m 1m

e si a
u

e
u u

Fig.25.a) Variabilidad del grosor y de la densidad de la hoja en las distintas praderas de Syringodium filiforme.

Estas variables morfolgicas no presentaron un patrn de variacin con la profundidad, aunque s mostraron diferencias significativas entre ellas. En los dos casos se diferenciaron claramente las dos reas de estudio: (1) todas las praderas de la laguna de Puerto Morelos produjeron hojas ms delgadas que la pradera de Punta Herrero (Fig. 27a); y (2) todas las praderas de Puerto Morelos produjeron hojas ms densas que la pradera de Punta Herrero (Fig. 27b). Para el caso del grosor (ANOVA, p< 0.05,.F(4,155)=50.06) el anlisis de Tukey indic que las praderas 3 y 5, fueron las nicas que presentaron diferencias significativas del resto y entre ellas (Tabla VII). Para la densidad de la hoja (ANOVA, p< 0.05,.F(4,155)=22.029), el anlisis de Tukey marc claramente las diferencias significativas entre los sitios de Puerto Morelos y Punta Herrero, ya que no se encontraron diferencias significativas entre praderas dentro de la laguna arrecifal de Puerto Morelos (Tabla VII). La pradera ms profunda de la laguna arrecifal de Puerto Morelos que se examin en este estudio, se encontraba mucho ms alejada de la costa y de la zona media de la laguna que las otras tres, pues es una pradera situada en el arrecife posterior. Excluyendo esta pradera del anlisis comparativo, se pudo observar una tendencia a aumentar el grosor de la hoja con la profundidad en un gradiente costa-laguna media (Figura 25a). El hecho de que tanto la poblacin del arrecife posterior como la poblacin de Punta Herrero se salgan de esta tendencia indica que adems de la luz, otros factores ambientales tienen que ser tenidos en cuenta para explicar los cambios morfolgicos que experimental la hoja de Syringodium filiforme en el ambiente arrecifal.

Puerto

orelos

Puerto

P.

errero

ja (
x

1.5
t t

.c

s s

1.5m

2m

2.5m

3m

1m

1.5m

orelos Profundidad (m)

P.

errero

- 56 -

Tabla VII. Probabilidad asociada al grosor y densidad de la hoja de S. filiforme, de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey

La variable morfolgica que expresa la concentracin de la biomasa por unidad de rea proyectada es el peso especfico, LMA. Este parmetro es un descriptor del grado de empaquetamiento-expansin de la biomasa foliar. LMA vari con magnitud similar a la densidad de la hoja (2.2 veces) Sin embargo vari de forma diferente entre praderas. La pradera con hojas con menor peso especfico fue la ms somera de la laguna de Puerto Morelos (59.1 gPS.m-2), seguida de la pradera de Punta Herrero. Las que presentaron los valores ms altos fueron las praderas ms profundas (72.1 y 71.9 gPS.m-2). El anlisis de la varianza permiti observar diferencias significativas entre praderas para el peso especfico, LMA (ANOVA, p< 0.05,.F(4,155)=13.838).El anlisis de Tukey indic que la pradera mas somera de Puerto Morelos no present diferencias significativas con la pradera de Punta Herrero, y s con el resto de las praderas de la laguna arrecifal de Puerto Morelos. Por su parte la pradera de P. Herrero slo fue diferente de la a 2.5m (Tabla VIII).
80
-2

) Peso especfico, LMA (gPS.

70 60 50 40 30 20 10 0 1.5m 2m 2.5m 3m 1m

Figura 26. Variabilidad del peso especfico de la hoja, LMA, en las distintas praderas de Syringodium filiforme. Y anlisis mltiple de Tukey.

El peso especfico mostr un patrn de variacin espacial similar al grosor en la laguna de Puerto Morelos. Un aumento significativo con la profundidad en un gradiente costa-laguna media. En la pradera ms profunda del arrecife posterior, se encontraron hojas con un LMA similar al de la poblacin de la pradera de 2,5 m de profundidad. Sin

- 57 -

embargo, la poblacin de Punta Herrero no present valores altos del LMA a pesar de producir las hojas ms gruesas, sino que al ser adems las menos densas su LMA fue de similar magnitud que las hojas delgadas y de densidad media de la poblacin ms somera de Puerto Morelos (Figuras 25 y 26). Esta observacin pone en evidencia un patrn de variacin diferente entre las poblaciones de Syringodium filiforme creciendo en la parte ms somera de la laguna arrecifal de Puerto Morelos y en Punta Herrero. Las dos poblaciones producen las hojas de bajo peso especfico (con una alta expansin de su rea foliar o SLA, cm2 g PS-1), pero una poblacin, la de Punta Herrero, lo hace por medio de hojas muy gruesas y muy ligeras (poco densas) y la otra con hojas delgadas pero de densidad media-baja (Puerto Morelos). El aumento de la densidad de las hojas en la poblacin ms profunda de la laguna arrecifal de Puerto Morelos conduce a un alto peso especfico a pesar de que estas hojas son tambin muy delgadas (Figura 25 y 26). El patrn morfolgico de variacin a lo largo de la hoja (Fig. 27b) fue ms claro. La densidad mostr una claro aumento hacia el pice, y el grosor, sin embargo, disminuye hacia la punta de la hoja. Ambas variables presentan sus mnimos y mximos, respectivamente, en los segmentos medios inferiores (6-12cm). Estas variables presentaron una fuerte correlacin negativa y significativa ( r= -0.99;P< 0.05). Como resultado de esta colinearidad, el peso especfico no vari significativamente a lo largo de la hoja, aunque present un leve tendencia a disminuir. La regulacin de esta variacin a lo largo de la hoja tiene un componente ontogentico ms importante que ambiental, pero es interesante que la combinacin de las dos variaciones, grosor y densidad, resulte en un valor bastante constante de la variacin de LMA de la hoja de cada poblacin.
r r nsi l Peso especfico j ( PS/ ( PS/
r{ s{z { m p m o m o ik

]
yv

-2

( PS.

rosor (

Peso especfico,

Punt

rr r

unt

Fig.27. Patrn fotoaclimatativo del peso especfico LMA, de las hojas de Syringodium filiforme en las diferentes poblaciones de la laguna arrecifal de Puerto Morelos creciendo a distinta profundidad. b) patrn de variacin de los descriptores morfolgicos en el interior del dosel (a lo

l k k

l jk j j i h

Prof

( )

ist

ci

eristemo

}m

- 58 -

xv

tv

vu

ru

yq rq

rq v

{zr

p}p ~ wq vq uq tq sq rq p o on m g f e d

ensi el oj ( PS cm )
-

( PS m )

largo de las hojas) de la pradera de 2m.

Como puede observarse en la grfica la pradera de Punta Herrero present unas caractersticas morfolgicas muy contrastantes con el patrn encontrado en la laguna arrecifal de Puerto Morelos, pues son hojas de un grosor mayor, aunque no significativamente distinto al de la pradera de 2.5m, pero mucho menos densas (Fig. 25). Segn estos resultados, la poblacin de Syringodium filiforme de la pradera somera de Punta Herrero, entre 0.8 y 1 m de profundidad, tiene hojas mucho ms gruesas y menos densas, aunque aparentemente con similar LMA, que las hojas de la poblacin que crece en la laguna arrecifal de Puerto Morelos Estas diferencias son an ms contrastantes si se compara con la pradera de Puerto Morelos situada a similar profundidad (1.5 m).

3.1.

Variabilidad

de

la

eficiencia

de

absorcin

de

luz

de

los

pigmentos(a*pigm) y de la biomasa (a*M)

El coeficiente especfico de absorcin de los pigmentos (a*pigm) referido al contenido total de clorofila (Chl a+b) fue uno de los parmetros ms variables que se examinaron en este estudio, despus de la cantidad de pigmentos. Este descriptor, a*pigm vari 5.9 veces, desde un mnimo de 0.0035 hasta un mximo de 0.021 m2 mg-1 cla+b. Los valores ms altos se observaron en la pradera ms somera de la laguna de Puerto Morelos (Fig. 28). Las praderas que generaron las hojas menos eficientes para absorber luz fueron las situadas a mayor profundidad, como consecuencia de la mayor inversin en pigmentos. No obstante la pradera de Punta Herrero siendo la ms somera de todas, pero que tambin present hojas con un alto contenido de pigmentos (Fig. 21) gener hojas con similar eficiencia de absorcin que la de las praderas ms profundas de Puerto Morelos (Fig. 28). El anlisis de la variancia indic que haba diferencias significativas entre las praderas (ANOVA, p< 0.05, F(4,155)= 42.102). Por su parte el anlisis de Tukey indic que slo la pradera 1 fue diferente del resto (Tabla IX). Es decir, la nica pradera que presento valores de la eficiencia de absorcin de los pigmentos claramente por encima del resto fue la pradera ms somera de la laguna arrecifal de Puerto Morelos (Fig. 28). El resto de las praderas no presentaron diferencias significativas entre ellas.

- 59 -

Tabla IX. Probabilidad asociada a la eficiencia de absorcin de los pigmentos (mg cla+b m-2), de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey

En la misma figura 30 se presenta adems la variabilidad del coeficiente especfico de absorcin de la biomasa (peso seco, PS) en las distintas praderas. Este descriptor mostr una variacin menor que la eficiencia de absorcin de los pigmentos (vari slo 2.5 veces), desde un mnimo de 0.013 hasta un mximo de 0.033 m2 g-1 PS. Esta menor variacin es consistente con la menor variabilidad que se observ en los descriptores morfolgicos en comparacin a los cambios observados en los contenidos de pigmentos de las hojas. Como puede verse en la figura 30 la pradera ms eficiente en colectar luz por unidad de biomasa fue la pradera de Punta Herrero, y la menos eficiente fue la pradera de 2 m de la laguna arrecifal de Puerto Morelos. Otra vez la poblacin de Punta Herrero mostr claras diferencias con las de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, pues la eficiencia de absorcin de los pigmentos es similar a la de las poblaciones ms profundas, pero la eficiencia de absorcin por unidad de peso es significativamente mayor a todas ellas (Fig. 28).
entos
0.03 0.01

entos

Coeficiente especfico e absorci n e biomasa

0.018 0.01 0.01

Coeficiente especfico e absorci n e pi

0.025 0.008 0.02

sorci n e pi

m2mg-1

PAR,

a*PAR,

a*

0.004

0.01

0.002

0.005

0.00 0.00

0 1.5m 2m 2.5m 3m 0.8-1m Punta Herrero

2cm

Puerto Morelos Profundidad

Distancia al

Fig. 28. Variabilidad del coeficiente especfico de absorcin de pigmentos y de la biomasa en las distintas praderas muestreadas de Syringodium filiforme.

- 60 -

0.015

Coefi iente especfico e

0.006

0.012 0.01 0.008

a*
2
-1

PAR,

m gPS

-12

A pesar de que la eficiencia de absorcin de la biomasa (a*M gPS. m-2) fue menos variable que la eficiencia de absorcin de los pigmentos, las diferencias significativas entre las praderas fueron mucho ms marcadas (ANOVA, p< 0.05, F(4,155)= 12.27). El anlisis de Tukey indic que las praderas 1, 3 y 4 no presentaron diferencias entre si, pero s fueron significativamente diferentes de (1) la pradera de Punta Herrero, que present valores ms altos; y (2) de la pradera situada a 2m de profundidad en la laguna arrecifal de (Tabla X).
Tabla X. Probabilidad asociada a la eficiencia de absorcin de la biomasa (gPS. m ), de acuerdo a la prueba de comparaciones mltiples de Tukey
-2

Examinando el patrn de variacin de las dos eficiencias de absorcin de luz con la profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos, se encontr una disminucin exponencial de la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos (a*) con la profundidad, aunque no significativa (r = 88, P > 0.05, Fig. 26). La eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa foliar (a*M) no present sin embargo una correlacin significativa con la profundidad (r=0.17, P >0.05), El patrn de variacin a lo largo de la hoja fue muy diferente para cada eficiencia (Fig. 29b). En la zona con menor disponibilidad de luz (la base de la hoja), los pigmentos de S. filiforme presentaron las menores eficiencias de absorcin de luz (a*pigm). Esta eficiencia sigui un claro incremento hacia la parte apical y ms iluminada de la hoja. La variabilidad de la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa foliar present un patrn de variacin opuesto al de la eficiencia de los pigmentos. Esta eficiencia disminuye hacia el pice y hacia la zona ms inmadura de la hoja prxima al meristemo. Sus valores mximos los presentaron los segmentos medios inferiores (6-12cm).

- 61 -

. 1

oeficiente especfico de absorcin de pigmentos

Coeficiente especfico de absorcin de pigmentos

. 18 . 1 . 1 . 1

P. errero a biomasa . 9

a ( PA ) ,m mg 1

PAR,

a*

. 1

. 19

Profundidad (m)

Fig.29. Patrn de variacin en profundidad de los coeficientes especficos de absorcin de luz de los pigmentos (a*) y de la biomasa foliar (a*M) de las hojas de Syringodium filiforme de las diferentes poblaciones de la laguna arrecifal de Puerto Morelos. b) patrn fotoaclimatativo de a*pigm y a* biomasa a lo largo de las hojas de la pradera de 2m.

VIII. Discusin
8.1 Anlisis alomtrico
El inters del estudio de la capacidad de absorcin de luz de una estructura fotosinttica est en que permite cuantificar la energa solar que colecta esta estructura y que potencialmente puede ser utilizada en fijar carbono orgnico por medio del proceso de la fotosntesis. No toda la energa colectada puede ser utilizada en fijar carbono orgnico. En condiciones ptimas, solo entre un 87 y 88% de la energa colectada es capaz de incorporarse en eventos fotoqumicos en plantas superiores (Ehleringer & Bjrkman 1978; Osborne & Garrett 1983). El resto de la energa se disipa como calor o fluorescencia y/o contribuye a generar compuestos altamente oxidantes que tienen que ser desactivados por medio de mecanismos fotoprotectores del aparato fotosinttico. A altas intensidades de luz en donde se alcanzan condiciones saturantes de la fotosntesis (Pmax), esta eficiencia puede caer drsticamente por lo que la mayor parte de la luz absorbida es energa en exceso que tiene que ser disipada por vas alternativas a la fotoqumica. El proceso fotosinttico est saturado y no es capaz de incorporar ms energa. Las plantas superiores entre las que se encuentran los pastos marinos tienen mecanismos de fotoproteccin muy eficientes para disipar este exceso de energa absorbida en sus

1.

3.

cm

1 18

puntas

Distancia al meristemo

Punta errero a pigm

. 7

. 8

. 3

m mg

. 1

. 8

-1

oeficiente especfico de absorcin de biomasa a ( PA ), m gP 1

Coeficiente especfico de absorcin de biomasa

a* PAR, m gPS

2
-1

. 18

. 1

. 1

. 1

- 62 -

membranas fotosintticas como calor (Deming-Adams 1990). Estos mecanismos necesitan el apoyo de un sistema continuo de reparacin del aparato fotosinttico que en ocasiones puede suponer un gasto significativo de mantenimiento. Por ello, ajustar la capacidad de absorcin de luz para colectar suficiente energa, reducir costos de mantenimiento y reparacin, y asegurar el crecimiento de la planta sin comprometer el aparato fotosinttico, es una de las funciones que deben realizar continuamente los productores primarios para aclimatarse a un ambiente lumnico muy variable y asegurar su supervivencia. Por otro lado, mejorar la eficiencia de absorcin de luz tanto por unidad de pigmentos como por unidad de biomasa puede proporcionar beneficios ecolgicos muy importantes a la poblacin, al facilitar su supervivencia en ambientes limitantes o mejorar su habilidad competitiva. Las antenas fotosintticas han evolucionado como avenidas de transmisin de excitones hacia el centro de reaccin para facilitar el proceso fotoqumico y permitir generar un flujo continuo de electrones en las membranas fotosintticas. Como consecuencia de este logro evolutivo dirigido a disear eficientes antenas colectoras de luz, la eficiencia de los pigmentos fotosintticos en absorber luz se ha reducido de forma importante debido a la fuerte autosombra que experimentan dentro de las membranas fotosintticas. La razn es el fuerte empaquetamiento de los pigmentos en las antenas (0.3-0.9 Molar) ya que los pigmentos deben de estar muy prximos para facilitar eficientemente la transmisin de la excitacin. A este fenmeno se le conoce como efecto paquete y ha sido descrito y ampliamente discutido en oceanografa (Kirk 1975) al comparar las propiedades pticas de clulas enteras y clulas rotas, pero tambin diferencias significativas entre distintas especies y poblaciones de fitoplancton. El efecto paquete es un fenmeno menos estudiado en organismos pluricelulares, pero de creciente inters en los ltimos aos. Teniendo en cuenta la amplia variedad de anatomas de estructuras fotosintticas que la evolucin ha generado, desde las pequeas algas unicelulares, los talos de las macroalgas, las hojas y tallos de las plantas superiores hasta las asociaciones simbiticas como los corales y esponjas, es muy probable que exista una gran variacin en la eficiencia de absorcin de luz entre estas estructuras. Aunque la eficiencia de absorcin de luz de las algas unicelulares ha sido estudiada ampliamente por varios autores desde hace varias dcadas (Duysens 1956;Kirk 1975; Morel & Bricaud 1981), este tipo de estudios sobre organismos pluricelulares se ha examinado en la dcada de los noventa (Agust et al. 1994, Enrquez et al. 1994) y

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recientemente en esta misma dcada (Enrquez & Sand Jensen 2003; Cumming & Zimmerman 2003, Enrquez 2005a, Enrquez et al 2005). En los trabajos con suspensiones de algas y fitoplancton se encontr que las clulas de mayor tamao son las que sufren un mayor efecto paquete, y que para contrarrestarlo disminuyen sus concentraciones intracelulares de pigmentos, pues a mayor concentracin intracelular de clorofila tambin el efecto paquete es mayor. Por su parte los autores que examinaron los organismos pluricelulares, encontraron que stos a pesar de ser estructuras altamente dispersivas, tambin son afectados por el efecto paquete. Sin embargo, esta habilidad para dispersar la luz a travs de un fenmeno definido como esparcimiento mltiple puede ser muy variable entre las diferentes estructuras y/o tejidos, pero de cualquier modo sirve en todas ellas para contrarrestar el efecto paquete. La dispersin o esparcimiento mltiple de la luz aumenta el paso ptico de la luz y la probabilidad de que un fotn sea absorbido por una molcula de pigmento. Enrquez & Sand-Jensen (2003) estudiaron por primera vez en las hojas de la planta anfibia Mentha aquatica la importancia del esparcimiento mltiple en reducir el efecto paquete, concluyendo que aunque sus hojas son eficientes trampas de luz gracias a sus tejidos especializados en dirigirla y dispersarla, tambin estn afectadas por el efecto paquete. Vogelmann et al. (1996) previamente, aunque no haban cuantificado directamente los cambios de la eficiencia de absorcin de los pigmentos, s reconocieron el efecto del esparcimiento mltiple al medir por medio de microsensores de luz el campo lumnico en el interior de la hoja de Begonia erythrophylla. Estos autores describieron un campo lumnico intensificado de dos a tres veces en el interior de la hoja con respecto a la intensidad lumnica en el exterior y encontraron que stas son capaces de contrarrestar la autosombra de los pigmentos gracias a la diferenciacin funcional de sus tejidos. Las hojas no pigmentadas de la epidermis actan como lupas que focalizan la intensidad de luz en un punto, las clulas del parnquima de empalizada facilitan la penetracin de la luz hacia el interior de la hoja, y, por ltimo, el esparcimiento de la luz intensificado por los espacios de aire en el mesfilo esponjoso permite maximizar la absorcin de luz en esta seccin de la hoja pero tambin en el parnquima de empalizada. En un estudio reciente Legaria-Moreno (2008) evalu el efecto de los cristales de oxalato clcico contenidos en las clulas de la epidermis del pasto marino Thalassia testudinum, sobre su capacidad para dispersar la luz y reducir el efecto paquete, comparando sus protoplastos con los del pasto marino Syringodium filiforme, que carece

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de estos cristales. Esta autora encuentra que los protoplastos de Thalassia testudinum, los que contienen cristales de oxalato clcico, son ms eficientes en absorber luz por unidad de pigmento, que los de Syringodium filiforme. Estas diferencias deben ser explicadas gracias al esparcimiento mltiple de la luz ocasionado por los cristales. Por otro lado Enrquez et al. (2005) examinaron tambin las propiedades pticas de Porites branerii, un coral escleractneo, estos autores encontraron que la eficiencia de absorcin de luz de los dinoflagelados simbiontes dentro del tejido intacto de coral aumenta entre 1.8 y hasta 5 veces en relacin a la eficiencia que muestra una suspensin de clulas con similar densidad de pigmentos. Estos autores interpretan que estas diferencias son debidas a la gran importancia de la dispersin mltiple que se genera en el esqueleto de coral formado por cristales de aragonita altamente organizados en el arreglo de los septos del coralito. Adems dada la gran diversidad de morfologas, segn el tamao, forma y distancia de los septos en el coralito y segn la presencia o no de coenostum y de su complejidad estructural, sugieren que la luz debe haber sido una de las fuerzas motrices ms importantes en el desarrollo filogentico de los corales escleractneos. Segn Enrquez et al. (2005), los corales son las estructuras ms eficientes para absorber la luz, hasta la fecha examinados. El parmetro que describe el efecto paquete, es el coeficiente especfico de absorcin (a*, m2 mg-1 pigm) que se define como la absorcin de luz efectiva por unidad de pigmento colector. Gracias a la existencia de un pigmento universal, la clorofila a, presente en todos los organismos fotosintticos, y a la posibilidad de medir su absorcin en un rango espectral de mnima interferencia con otros pigmentos accesorios (entre los 677-680nm), es posible comparar la eficiencia de absorcin de luz de un mismo pigmento en diferentes estructuras fotosintticas. El parmetro que mide esa eficiencia es el coeficiente especfico de absorcin de la clorofila a (a* m2 mg-1 chla). Unos de los primeros anlisis comparativos en estructuras pluricelulares lo ofrece Enrquez (2005a) comparando el coeficiente especfico de absorcin de las hojas de Mentha aquatica y de Thalassia testudinum, y Enrquez et al. (2005) comparando la eficiencia de absorcin de las algas simbiontes en suspensin extradas del coral Porites branneri y dentro de la estructura del coral intacto. En el primer estudio se reporta una significativa disminucin de la eficiencia de absorcin de luz en la nueva anatoma foliar desarrollada por la fanergama marina Thalassia testudinum en su adaptacin a la vida sumergida, en comparacin con la anatoma bifacial tpica de una planta terrestre. En el segundo estudio se demuestra que las algas simbiontes de coral

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son capaces de mejorar su eficiencia de absorcin de luz entre 2 y 5 veces cuando viven sobre una estructura tan organizada y dispersiva como es el esqueleto de coral. Estos dos importantes descubrimientos son fruto de la posibilidad de comparar la eficiencia de absorcin de un mismo pigmento en diferentes arreglos pticos generados a lo largo de la evolucin. En el ambiente bentnico los arreglos pticos de las distintas especies de macrfitas (macroalgas y pastos marinos) juegan un papel muy importante en la absorcin de luz. Desde hace ms de un siglo Engelmann (1883) ya haba considerado el importante rol de las propiedades de absorcin de luz de las macroalgas para las determinaciones de su zonacin, adems sugiri que la composicin pigmentaria determinaba las profundidades en donde podan crecer. Sin embargo estudios posteriores (Larkum et al. 1967; Ramus et al. 1978) rechazaron esta hiptesis, pues concluyeron que la cantidad de pigmento era ms importante en regular la habilidad de colectar luz que el tipo de pigmentacin. Adems indicaron que la hiptesis de la zonacin cromtica de Engelmann sobrevaloraba la importancia del la forma del espectro de absorcin sin tener en cuenta que el descriptor crtico es la magnitud de la colecta total de luz. Estudios ms recientes (Enrquez et al. 1994), consideran que la absorcin de luz entre las macroalgas y pastos marinos puede ser modelada en funcin del contenido de pigmentos y el grosor del talo independientemente del grupo taxonmico al que pertenece. Las macroalgas han colonizado por mucho tiempo grandes extensiones de las aguas costeras de los ocanos. La variedad de la constitucin pigmentaria y la variedad de las morfologas de este grupo, les permitieron dominar muchos ambientes marinos y estuarinos. Al evolucionar los pastos marinos, adems de desarrollar una morfologa adecuada al ambiente marino, tuvieron que competir con la gran diversidad de macroalgas. De acuerdo con Enrquez (2005a) el xito ecolgico de los pastos marinos debe estar ligado a su habilidad de absorber luz y a la eficiencia del uso de la luz absorbida para soportar el crecimiento de la planta. Por lo que la variacin de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz entre los macrfitos bentnicos ha podido jugar un importante papel a lo largo de su evolucin, al contribuir a determinar el xito ecolgico y evolutivo de los diferentes grupos. Su anlisis podra ayudar a explicar parte de la variabilidad espacio-temporal presente en la actualidad en el bentos marino. Los pastos marinos tienen una morfologa foliar mucho ms homognea, es adems un grupo taxonmico muy reducido en especies y mucho menos diverso que las

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macroalgas que procede del ambiente terrestre. Los ancestros de los pastos marinos recolonizaron el ambiente marino hace 90-120 millones de aos (den Hartog 1970). Al colonizar los ambientes bentnicos de las aguas costeras han tenido que competir con la gran diversidad de macroalgas ya presentes, y lo han hecho de una forma muy exitosa pues se encuentran en las aguas costeras de todos los continentes excepto de la Antrtida. Las hojas de pastos marinos ya no tienen la anatoma bifacial tpica de planta terrestre. En su adaptacin al medio marino perdieron esta anatoma y desarrollaron un mesfilo muy poco pigmentado con grandes espacios lacunares (aernquima), siendo las clulas de la epidermis en las que se concentra la mayor parte de los pigmentos fotosintticos, en un volumen foliar muy pequeo (< 20% de la hoja segn Tomilson 1980). El posible efecto de esta nueva anatoma sobre las propiedades de absorcin de luz de los pastos marinos ha sido analizado recientemente en un estudio comparativo (Enrquez 2005) enfocado principalmente en el examen de la eficiencia de absorcin de luz de las hojas de Thalassia testudinum pero adems se compararon hojas de 12 especies de pastos marinos colectadas en una gran variedad de ambientes (Mediterrneo, Atlntico, Caribe e Indo-Pacfico). En este estudio se concluy que las hojas de Thalassia testudinum tambin estn afectadas por el efecto paquete y son menos eficientes, en promedio, para absorber luz que las hojas de una planta anfibia, Mentha aquatica, que todava conserva la estructura bifacial de una planta terrestre. Sin embargo, este estudio no concluye que la especial anatoma desarrollada por los pastos marinos sea la responsable de esta reduccin de la eficiencia de absorcin de luz, pues especies de zonas templadas como Posidonia oceanica, Cymodocea nodosa, Zostera marina y Zostera noltii, con similar anatoma foliar que las especies tropicales de hoja plana pero 2.5 veces ms pigmentadas, son tambin ms eficientes en absorber luz que las hojas de Mentha aquatica con similar pigmentacin (Enrquez 2005). Muchas son las estrategias que las plantas han desarrollado para incrementar su capacidad y/o eficiencia de absorcin de luz y de esta manera tener un beneficio ecolgico en su ajuste ambiental, habilidad competitiva o produccin fotosinttica. Niklas (1994) menciona que los organismos fotosintticos que tienen una mayor razn superficie/volumen incrementan la capacidad del tejido fotosinttico para interceptar la luz solar. Enrquez et al. (1994) y Agust et al. (1994) tambin llegan a conclusiones similares pero a partir de la variacin del grosor de la estructura fotosinttica. Segn estos autores, aunque estructuras gruesas o de menor razn superficie/volumen puedan ser capaces de colectar una mayor cantidad de energa solar (> absorptancia), su eficiencia de absorcin

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por unidad de peso se puede ver fuertemente comprometida, ya que son estructuras ms costosas y el retorno de recursos (energa) por unidad de inversin de carbono es menor. Las funciones alomtricas nos permitieron saber las tasas de cambio entre estas variables y sus valores mnimos y mximos que pueden tomar cada una de estas variables con respecto a otra. Aunque los pastos marinos son un grupo muy homogneo en relacin a su morfologa foliar, el gnero al que pertenece la especie estudiada (Syringodium) presenta una anatoma foliar claramente diferenciada. La mayora de las especies presentan hojas laminares, delgadas, pero las hojas de este gnero han evolucionado formando una estructura cilndrica de un orden de magnitud mayor en su seccin transversal (grosor del tejido). Las hojas de Syringodium filiforme es una especie de fanergama marina muy comn en el Caribe y Golfo de Mxico que crece frecuentemente junto con la especie dominante Thalassia testudinum. Enrquez (2005) y Legaria-Moreno (2008) ya han descrito las propiedades pticas de la hoja laminar de T. testudinum y en este estudio se compara por primera vez la propiedades pticas de estas dos arquitecturas foliares tan diferentes. Segn los resultados de Niklas (1994) y Agust et al (1994) y Enrquez et al. (1994), los pastos marinos de hojas laminares como Thalassia testudinum presentaran una ventaja adaptativa frente a los de hojas cilndricas como Syringodium filiforme. Sin embargo, conocer la ventaja adaptativa adquirida por las hojas del gnero Syringodium y saber cul es el beneficio ecolgico y/o evolutivo que ha aportado a este gnero el desarrollado de una hoja cilndrica, ha sido uno de los principales objetivos de este trabajo enfocado en las hojas de S. filiforme. La anatoma interna de las hojas de los pastos marinos es relativamente constante con respecto a la distribucin de cloroplastos concentrada en la mayora de las especies a las dos capas de la epidermis, al volumen lacunar y diferenciacin del mesfilo en un aernquima (Tomlinson 1980). El grosor de las hojas as tambin poco variable siendo Halophila el gnero que presenta las hojas ms delgadas (< 0.1 mm) y Cymodocea y Enhalus los gneros de hojas laminares que presentan las hojas ms gruesas (~ 0.5 mm) (Enrquez et al. 1992, 1994). Las dos especies de pastos marinos del gnero Syringodium, S. filiforme y S. isoetifolium, tienen como principales diferencias anatmicas su estructura cilndrica que les hace aumentar en un orden de magnitud su grosor con respecto a la hoja plana (de n*100 m a n*1000 m). Los espacios lacunares son tambin mayores (ver Fig. 7) y la distribucin de sus cloroplastos no se limita a la epidermis, sino que se extiende hacia el interior de la hoja (mesfilo y paredes del aernquima), por lo que ocupan un volumen

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mucho mayor. La primera consecuencia de estas dos caractersticas que se puede extraer de este anlisis comparativo, es que el contenido de pigmentos por unidad de rea es considerablemente mayor en la hoja cilndrica que en la hoja plana viviendo en el mismo ambiente arrecifal. Las hojas de Syringodium filiforme presentaron un promedio de densidad de pigmentos (seccin transversal de Cl [a +b]) de 197.8 mg m-2, dos veces mayor que el reportado para las hojas de Thalassia testudinum promedio 96.7mg m-2 en esta misma laguna arrecifal (Enrquez 2005). Las hojas de Syringodium filiforme aunque son mas angostas (1.5mm) que las de Thalassia testudinum (1cm), su seccin transversal (grosor) es mucho mayor. En este estudio la seccin transversal o grosor de la hoja se estim que variaba entre 0.98 mm y 2.27 mm, con un promedio de 1.5 mm 0.02. En el estudio de Legaria-Moreno (2008) se determin una variacin del grosor de las hojas de Thalassia testudinum entre 110 y 410 m, que equivalen a 0.11-0.41mm. El anlisis alomtrico que se realiz en este estudio permiti examinar el efecto de cada uno de los descriptores morfolgicos sobre la variacin de las propiedades pticas de las hojas (capacidad y eficiencia de absorcin de luz). Este anlisis se llev a cabo partiendo de la relacin entre la seccin transversal de pigmentos y la capacidad para absorber luz. En la figura 13 se present la relacin entre estos parmetros y pudimos observar una notable diferencia entre la variabilidad de uno con respecto al otro, siendo mayor la variabilidad de la densidad de pigmentos (55-467 mg cl a/m2) que la variabilidad de la absorptancia (53%-80.4%). Comparando estos resultados con los obtenidos por Legaria-Moreno (2008) en las hojas de T. testudinum, se observ que ambas hojas presentan el mismo patrn de asociacin no lineal entre la densidad de pigmentos y la absorptancia. En los resultados obtenidos en este estudio comparativo, a partir de los 80 mg m-2 de chla y alrededor de los 300 mg m2 de clorofilas [a+b] las hojas de Syringodium filiforme alcanzan la capacidad mxima de absorcin de luz (absorptancia) y su incremento ya no es significativo. Cualquier incremento en la densidad de pigmentos no resulta en mejorar la cantidad de energa colectada. Sin embargo en las poblaciones examinadas en este estudio, las hojas de S. filiforme todava incrementaron su contenido en pigmentos hasta 311 mg m-2 de chl a y 467 mg m2 de chl [a+b]. La razn de este comportamiento se debe a que al aumentar la cantidad de pigmento en un cloroplasto, clula, o tejido, no solo se puede modificar la capacidad de absorcin de luz sino que tambin se puede afectar la capacidad de transferencia de la excitacin, la capacidad de fotoqumica y fotosntesis, y tambin la capacidad de regular el ambiente lumnico dentro del tejido. Por tanto, aunque la capacidad colectora de luz del sistema est saturada en un

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valor lmite mximo, la inversin en un mayor contenido de pigmentos puede seguir siendo importante para optimizar la actividad fotosinttica en un determinado ambiente y condicin. En este estudio se estim que la capacidad mxima de absorcin de luz de las hojas de S. filiforme era del 76%, valor superior al reportado para Thalassia testudinum del 61%. Este resultado indica que las hojas cilndricas ms pigmentadas de S. filiforme son capaces de absorber un 15% ms de luz que las hojas laminares de T. testudinum, lo que podra ser explicado por el diferente grado de importancia del efecto paquete en cada morfologa foliar. Concentrar mucho pigmento en un espacio limitado como ocurre en la epidermis de hoja laminar de T. testudinum, reducira significativamente la efectividad de absorber luz por los pigmentos, en comparacin de la mayor distribucin de stos (menor concentracin por unidad de volumen) en el interior de la hoja de S. filiforme. En este estudio comparativo se ha observado que Syringodium filiforme muestra valores ms altos de absorptancia en el PAR (68.9%) que las hojas de Thalassia testudinum (58.9%) reportados por Enrquez (2005). Tambin en el pico de la clorofila a, las hojas de S. filiforme present valores ms altos de absorptancia (83.7%) que las hojas de T. testudinum (60.2%) y otras especies de pastos marinos de hojas laminares como Halphila ovalis (50.9%) Zostera noltii (71%) Cymodocea nodosa (80,5%), y Zostera marina (81.8%), y similares con Enhalus acoroides (83%), y solo inferior con la fanergama del mediterrneo Posidonia oceanica (88%) (Enrquez et al. 1992). Comparando en ese mismo trabajo las densidades de clorofila a, las hojas de Syringodium filiforme presentaron valores inferiores (127mg.m-2) a los reportados para los pastos marinos de ecosistemas templados (Posidonia oceanica, Cymodocea nodosa, Zostera marina y Zostera noltii), pero similares en promedio a los de Thalassia testudinum de 118 mg.m-2. Las diferencias en la magnitud de la absorcin de luz dependen adems del contenido de pigmento, en la talla y complejidad, es decir que aunque los pigmentos sean los principales responsables en la absorcin de la luz y por lo tanto en determinar la absorptancia y reflectancia de las hojas, sus propiedades pticas dependen tambin del complejo arreglo de los pigmentos dentro de los cloroplastos (Zimmerman 2006). Para determinar qu factores podran explicar estas diferencias tan importantes en la absorptancia y su falta de asociacin con la seccin transversal de pigmentos, se realiz un anlisis alomtrico para localizar a los descriptores morfolgicos que mejor explican los cambios en la absorptancia y en la eficiencia de absorcin de los pigmentos. clulas y tejidos

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El parmetro ms fuertemente correlacionado con la absorptancia de las hojas de Syringodium filiforme fue la densidad o seccin transversal de pigmentos (r = 0.76, P < 0.01) y su contenido por unidad de peso (r = 0.73, P < 0.01). Una menor correlacin la mostr con la concentracin de pigmentos por unidad de volumen (r = 0.67, P < 0.01), pero lo interesante es que el siguiente descriptor fuertemente y positivamente relacionado con la variacin de la absorptancia fue el grosor de la hoja (r = 0.59, P < 0.01). Por su parte las hojas de T. testudinum no presentaron correlacin entre el grosor y la absorptancia, pero presentaron una mayor correlacin entre esta ltima y la densidad de pigmentos (93%). Estos resultados sugieren que la morfologa de las hojas de S. filiforme y el arreglo de sus cloroplastos presentan un mayor efecto regulador de la capacidad de absorcin de luz que el reportado hasta ahora para las hojas laminares y delgadas de T. testudinum (Legaria-Moreno 2008), pero tambin para las hojas de una planta anfibia con anatoma bifacial tpica de las hojas de plantas terrestres (Enrquez & Sand-Jensen 2003). El fuerte efecto del grosor qued confirmado en el modelo mltiple obtenido en el anlisis alomtrico (ecuacin 8), que indica que el grosor es la variable que ms afecta los cambios de la absorptancia. Su efecto es incluso mayor que los cambios en el contenido de pigmentos. Es decir, a pesar de que los descriptores del contenido de pigmentos son los que explican la mayor parte de la variabilidad de la absorptancia, los cambios en el grosor del tejido inducen cambios mayores en la absorptancia que los cambios en el contenido de pigmentos. Otro aspecto importante que mostr el mismo modelo mltiple es que un aumento en la densidad de la hoja tambin mejora la absorptancia. Simulaciones hechas a partir de este modelo (ver figura 16) permitieron confirmar una menor contribucin de la densidad de la hoja en el aumento de la absorptancia, en comparacin con el efecto del grosor. Podemos concluir a partir de este anlisis que el grosor es la variable que mayoritariamente explica la variabilidad del }20% de incertidumbre encontrada en la relacin entre la absorptancia y la seccin transversal de pigmentos (Fig. 12). Por tanto, la ventaja adaptativa que presentan las hojas cilndricas de Syringodium sobre las hojas laminares de Thalassia testudinum, es un aumento en un 15% de la capacidad mxima de absorcin de luz, pero tambin la aparicin de la habilidad de regular la energa solar colectada a travs de modificar el grosor de la hoja. Este descubrimiento obtenido en el anlisis comparativo realizado sobre las hojas de S. filiforme es nuevo pues en pastos marinos Enrquez et al. (1992) y Enrquez (2005) no haban encontrado relacin alguna entre el grosor de la hoja laminar y sus propiedades pticas, contrario a los hallazgos de Morel & Bricaud (1981) y Agust (1991) en clulas del

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fitoplancton, y Enrquez et al. (1994) para un amplio espectro de tejidos de macrfitos marinos. Sin embargo Legaria-Moreno (2008), aunque tampoco encuentra correlacin entre el grosor y la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas de T. testudinum, su modelo mltiple coincide con el encontrado en este estudio al reportar que el grosor de la hoja es el parmetro que ms afecta la variacin de la absorptancia. Cabe mencionar que el modelo mltiple desarrollado para las hojas de T. testudinum por Legaria-Moreno (2008) explica un porcentaje menor de la variacin de la absorptancia que la simple correlacin con la seccin transversal de pigmentos, por lo que los descriptores morfolgicos parecen contribuir en menor medida en las hojas laminares a mejorar la variabilidad explicada por la seccin transversal de pigmentos. En este estudio, el modelo mltiple contribuy significativamente a mejorar la explicacin de la variabilidad de la absorptancia. La diferencia encontrada entre la hoja cilndrica y laminar en el efecto de la morfologa sobre su capacidad de absorcin de luz tambin se observa en los efectos directos del anlisis de vas. Para T. testudinum Legaria-Moreno (2008) reporta un efecto directo del 84% atribudo al contenido de pigmentos, 42.7% al grosor y 24.3% a la densidad de la hoja (masa por unidad de volumen). En este estudio, el contenido de pigmentos mostr un efecto directo menor (68.8%) y el grosor (48.7%) y la densidad de la hoja (27%) mayor. La principal diferencia en el funcionamiento de la colecta de luz entre estas dos anatomas es que en la hoja laminar la absorptancia depende principalmente de la inversin de la planta en pigmentos fotosintticos, sin descartar el importante papel que posiblemente jueguen los cristales de oxalato clcico contenidos en las clulas de la epidermis (Dobss et al. 2004, Legaria-Moreno 2008), y en la hoja cilndrica el grosor juega un papel fundamental, al igual quizs que la distribucin de pigmentos y muy posiblemente el tamao y nmero de espacios areos. Ramus (1978) sugiere por primera vez considerar el efecto del grosor del tejido sobre la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de diferentes organismos fotosintticos, comparando los talos de Ulva lactuca y Codium fragile, esta ltima es una especie de talo cilndrico y mucho ms grueso, rdenes de magnitud, que el talo finsimo de Ulva lactuca. Ramus (1978) tambin concluye que la variacin de la capacidad de absorcin de luz de Ulva es dependiente del contenido de pigmentos mientras que Codium tiene maximizada su absorcin y cambios en el contenido de pigmentos apenas se reflejan en cambios en la absorptancia. La habilidad de Codium para absorber la luz es tambin consecuencia de su mayor complejidad de tejido, pues los utrcula pueden actuar como fibras pticas que canalizan

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la luz y reducen el efecto paquete de los pigmentos. Con estos hallazgos podemos concluir que las hojas de Syringodium filiforme consiguen mejorar su absorptancia al tener hojas ms gruesas (} 1 orden de magnitud mayor), pues se incrementa el tamao del paso ptico de la luz y la probabilidad de encontrar un pigmento en su trayectoria. Pero adems el desarrollo de una peculiar simetra radial que se genera en el interior de la hoja con los grandes espacios lacunares, le otorgaron a Syringodium filiforme la cualidad de dispersar en mltiples direcciones la luz incidente, que aunado a la distribucin de los cloroplastos en la epidermis, mesfilo e incluso a las clulas del aerenquima que rodean los espacios lacunares, le permiti a la hoja cilindrica colectar en las tres dimensiones del espacio (3D) y no en dos (2D) como la hoja laminar. Por el contrario la restringida distribucin de los cloroplastos en la epidermis de las hojas de Thalassia testudinum implica una alta concentracin de pigmentos en una capa celular muy delgada, por lo que se encuentran altamente empaquetados. A pesar de ello, las hojas de S. filiforme no estn exentas del efecto paquete como se observa en la relacin no linear encontrada entre la seccin transversal de pigmentos y su eficiencia de absorcin de luz (Fig. 14). Para determinar la habilidad de contrarrestar el efecto paquete mediante el esparcimiento mltiple que se genera en el interior de sus hojas cilndricas y comparar su magnitud con la eficiencia de absorcin de luz de las hojas de T. testudinum se compararon los dos patrones de reduccin de (a*Cla) en funcin del aumento del contenido de clorofila a por rea proyectada (Fig.33). La magnitud del efecto paquete que afecta a las hojas de S. filiforme, es segn estos resultados menor que la descrita por Enrquez (2005) para las hojas de T. testudinum. El valor del factor de escala corregido con el anlisis RMA, Niklas, 1994, fue para las hojas de Syringodium filiforme de (-0.65), mientras que para las hojas de Thalassia testudinum fue de -0.75. Esto quiere decir que la hojas ms pigmentadas de S. filiforme no sufren cadas relativas de absorcin de luz tan grandes como las hojas pigmentadas de T. testudinum (menor pendiente log/log). Lo ms contrastante en esta comparacin no fue el valor de las pendientes log/log, sino que la mayor parte de los segmentos analizados de las hojas de S. filiforme mostraron valores del coeficiente especfico de absorcin de luz de los pigmentos (a*) ms altos que los estimados para las hojas de T. testudinum (Fig. 30, intercepto log/log, t-student, P < 0.01). Legaria- Moreno (2008), reporta valores muy bajos de la eficiencia de absorcin de luz debido a que en su base de datos incluy un gran nmero de segmentos inmaduros. Teniendo en cuenta el tipo de segmentos analizados en este estudio que consider slo los segmentos ya maduros y evit trabajar con la base inmadura de la hoja, creemos que es ms

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comparable con el presente estudio la base de datos ocupada por Enrquez (2005)
bso in fi o d
0.1

) g l

- .75 + 0.05

Co fi i nt

( ,

- .65 + 0.03

0.01

10

100

D nsid d d

lo ofil

( g

Fig. 30. Asociacin de variacin entre el coeficiente especfico de absorcin de luz a 680 nm (a*, 2 -1 m mg Chl a ) y la seccin transversal de clorofila a, tanto para Syringodium filiforme (crculo negro) como para Thalassia testudinum (cuadrado blanco). Se muestran tambin las pendientes b (b) log/log de los ajustes a una funcin alomtrica (y = a * X ) para cada especie.

Este resultado es muy importante pues indica que adems de mejorar la capacidad mxima de absorcin de luz, las hojas cilndricas del gnero Syringodium, han aportado a los pastos marinos una ventaja adaptativa nueva que no tenan las hojas laminares, que consiste en mejorar significativamente la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos fotosintticos. Al comparar la cada de la eficiencia de absorcin de luz (a*Cla) de estos dos pastos marinos con la reportada por Enrquez y Sand Jensen (2003), en la planta anfibia Mentha aquatica (0.85), se encontr que la cada de la eficiencia de absorcin de luz de estos pastos marinos es menor que la de la planta anfibia; es decir, que el efecto paquete es mayor en las hojas de Mentha aquatica pues al aumentar la cantidad de pigmentos estos reducen ms rpidamente su eficiencia de absorcin de luz. Sin embargo, sto no quiere decir que estas hojas sean ms ineficientes en absorber luz, de hecho son ms eficientes que las de Thalassia testudinum, pues a una misma cantidad de pigmentos presentan mayores valores del coeficiente especfico de absorcin de luz (a*Cla, ver Enrquez 2005). Por su parte las hojas de Syringodium filiforme presentan valores similares de (a*Cla), con esta planta anfibia, de hoja plana y delgada pero con una distribucin de pigmentos mucho mayor pues ocupan todo el volumen foliar excepto la fina capa de la epidermis.

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Como ya se mencion anteriormente, la teora ptica desarrollada para algas unicelulares menciona que la absorcin especfica de los pigmentos depende del tamao celular y de la concentracin de pigmentos. Los equivalentes descriptores en tejidos multicelulares son el grosor del tejido fotosinttico y la concentracin de pigmentos (pigmentos/volumen). Al analizar estas variables por separado y en conjunto para determinar sus efectos sobre la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos en las hojas de Syringodium filiforme, se encontr que la concentracin de pigmentos presenta una correlacin muy similar que la encontrada para la seccin transversal de pigmentos (0.93, P < 0.01), el grosor en cambio present una correlacin tambin negativa pero menor con la eficiencia de absorcin de los pigmentos (-0.45, P < 0.01). En el modelo mltiple, el grosor de la hoja fue la variable que menos efecta el empaquetamiento de los pigmentos, lo que concuerda con su mayor efecto sobre la absorptancia. Enrquez y Sand-Jensen (2003) en un anlisis similar sobre las hojas de la planta anfibia Mentha aquatica, interpretan que el grosor de la hoja contribuye en mayor medida a empaquetar los pigmentos (aumentar su seccin transversal) que a desempaquetarlos al incrementar el paso ptico de un fotn a travs del esparcimiento mltiple. Las hojas de M. aquatica son mucho ms delgadas que las de pastos marinos (entre 125 y 175 m) lo que quizs explica la baja contribucin del grosor para mejorar su absorptancia y su mayor contribucin a reducir la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos. A diferencia de M. acuatica, el grosor de la hoja de S. filiforme s contribuye en mayor medida a aumentar su capacidad de absorcin de luz lo que, por tanto, explica su menor contribucin a reducir la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos fotosintticos. El grosor de la hoja de Thalassia testudinum tampoco est correlacionado con la disminucin de la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos, posiblemente debido a la especial distribucin de los pigmentos concentrados en la fina capa de la epidermis, y a que el incremento del grosor de esta hoja es principalmente el resultado del incremento del mesfilo o aernquima que no est pigmentado. Sin embargo el grosor de su epidermis si apareci fuertemente y negativamente asociado con la eficiencia de absorcin de luz. En las hojas de Syringodium filiforme, al comparar el efecto de los tres descriptores del contenido de pigmentos sobre la cada de la eficiencia de absorcin de luz, (se compara el factor de escala corregido con el anlisis RMA, Niklas (1994), la concentracin de pigmentos es el descriptor que present la mayor cada de su eficiencia de absorcin de luz (factor de escala, -0.87); mientras que el del contenido de pigmentos

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por peso (factor de escala, 0.79) y la densidad o seccin transversal de pigmentos presentaron valores menores (factor de escala, -0.75). Este resultado muestra de nuevo claras diferencias entre la hoja cilndrica y la hoja laminar de los pastos marinos, pues Legaria-Moreno (2008) no encontr diferencias significativas en el efecto de estos tres descriptores sobre la variacin de la eficiencia de absorcin de los pigmentos de las hojas de T. testudinum. Al hacer esta misma comparacin con el efecto sobre la absorptancia y con el coeficiente de absorcin especfico referido a biomasa, se encontr tambin que la concentracin de pigmentos es el descriptor que mayor efecto ejerce sobre los cambios de estas otras propiedades pticas de las hojas de Syringodium filiforme. Cabe sealar que la concentracin de pigmentos de esta hoja cilndrica se subestim, pues se consider el volumen total de la hoja sin excluir el volumen de los espacios intercelulares. Por razones prcticas, se asumi considerar el volumen total de la seccin transversal de la hoja para determinar la concentracin de pigmentos pues para la determinacin del volumen de los espacios intercelulares hubiera sido necesario hacerla por segmento caracterizado, lo que hubiera reducido considerablemente la base de datos dado el mayor tiempo que requiere su determinacin a travs de cortes histolgicos y su posterior anlisis en el microscopio ptico. Sin embargo se realizaron al microscopio ptico observaciones de la seccin transversal de la hoja, tanto de la base, parte media como de la punta en las hojas de la pradera en la que se realiz ms esfuerzo de muestreo, algunas de las fotografas tomadas se muestran a continuacin (Anexo 2) para ilustrar la variacin de la anatoma interna en estas secciones de una hoja de longitud de 27cm. Se utilizaron estas imgenes para estimar el rea de la seccin transversal ocupada por los espacios lacunares con el software Autocad (Anexo 2). Se determin que el sistema lacunar ocupa alrededor del 30% del volumen de la hoja por lo que corrigiendo la concentracin de pigmentos, se estim que su valor promedio cambiara de 0.16 mg cm-3 a un valor cercano a 0.24 mg cm-3. Teniendo en cuenta que las hojas de Thalassia testudium y de Mentha aquatica presentan, respectivamente, un valor promedio de 10.7 mg cm-3 y 1.91 mg cm-3 (Enrquez & Sand-Jensen 2003, Enrquez 2005 y Legaria-Moreno 2008), la anatoma foliar cilndrica ha resultado en una disminucin de dos rdenes de magnitud en la concentracin de pigmentos con respecto a las hojas laminares de pastos marinos, pero en un orden de magnitud con respecto a las hojas de sus ancestros, las hojas de plantas terrestres, con un mesfilo especializado en parnquima de empalizada y mesfilo esponjoso. En un estudio realizado sobre un modelo bio-ptico del dosel de la pradera de Syringodium filiforme en Florida, se reporta que la seccin transversal de la

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hoja de esta especie tiene un volumen lacunar que comprende alrededor del 44% del volumen de la hoja, un poco mayor que el determinado en este estudio. Adems considera que el volumen que ocupan los pigmentos (epidermis y mesfilo) representa el 47% del volumen total de la hoja (Mandy 2008), al no considerar como clulas pigmentadas las paredes del aernquima, lo que no es correcto como se ha demostrado en este estudio (Anexo 2), y que representa para las estimas de esta autora alrededor del 9%. Las diferencias del volumen lacunar entre su trabajo con el nuestro es de un 11%. Esta variabilidad llama la atencin y sugiere que las hojas de S. filiforme tienen una alta plasticidad morfolgica que involucra cambios no slo en el grosor sino tambin en la densidad de la hoja y el tamao de los espacios intercelulares (lacunae), seguramente para optimizar la absorcin de la luz y ajustarse funcionalmente a los distintos ambientes en que se encuentre. En este estudio se encontraron diferencias muy contrastantes en la morfologa de la hoja entre las poblaciones de la laguna arrecifal de Puerto Morelos y la de la pradera de Punta Herrero. Al analizar la densidad de la hoja de la poblacin de Punta Herrero, se encontraron unas hojas mucho ms gruesas y mucho menos densas que las de las praderas de Puerto Morelos. Los dos ambientes estn sometidos a muy diferente presin antropognica ya que Punta Herrero se encuentra en las proximidades de un rea protegida, la reserva de la Biosfera de Sian Kaan, y la laguna arrecifal de Puerto Morelos es tambin un rea protegida pero afectada por el fuerte desarrollo turstico del corredor Cancn-Riviera Maya. En este estudio no se ha abordado en detalle la respuesta fotoaclimatativa de la hoja de S. filiforme, pero las diferencias encontradas invitan a considerar el relevante papel que puede jugar la variacin morfolgica de la hoja en el ajuste ambiental de esta especie. Por otra parte Kuo (1993) reporta valores similares del dimetro y rea de la seccin transveral, de las hojas de la otra especie del gnero Syringodium, S. isoetifolium, pero muy diferentes con respecto al porcentaje que ocupan los espacios lacunares, pues indica que ocupan desde un 5.8% hasta el 11.9% del rea total de la seccin transversal. En este estudio se ha determinado para las hojas de Syringodium filiforme, un valor mnimo del espacio que ocupan los lacunae del 23% correspondiente a la punta de una hoja de 12cm de longitud, frente a un valor mximo del 33.1% estimado para la base de una hoja de 27 cm de longitud. Con estas resultados puede decirse que las hojas de S. filiforme parecen ser menos densas que las de S. isoetifolium, al incrementar significativamente el volumen de los espacios de aire. Sera interesante comparar si las propiedades pticas de las hojas de estas dos especies son similares o si, por el contrario, esta variacin en la densidad de la hoja conlleva

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diferencias funcionales significativas, por ejemplo, con respecto a la eficiencia de absorcin de luz por unidad de pigmentos y/o biomasa. Atendiendo a los resultados descritos, parece que resulta contradictorio el papel que juega el grosor de la estructura fotosinttica en la determinacin de sus propiedades pticas. Por un lado, el grosor permite aumentar la seccin transversal de pigmentos y por tanto contribuye a empaquetarlos (a mayor densidad de pigmentos a* disminuye no linearmente), pero a la vez, en este tipo de hojas poco densas de pastos marinos, este aumento del grosor de la hoja no est necesariamente asociado a un aumento significativo de la seccin transversal de pigmentos, en comparacin con las hojas de plantas terrestres, pero s permite que los pigmentos absorban con mayor eficiencia la luz incidente al alargar suficientemente el paso ptico de la luz. Es decir, el papel del grosor puede ser ms importante en la mejora de la capacidad y eficiencia de absorcin que en inducir empaquetamiento de los pigmentos fotosintticos. Esto significara que a diferencia de las hojas de plantas terrestres que deben hacerse ms delgadas al aclimatarse a menores disponibilidades de luz para reducir el efecto paquete de sus pigmentos, las hojas de pastos marinos podran seguir un patrn aclimatativo diferente y favorecer el desarrollo de estructuras ms gruesas en los ambientes menos iluminados como indican Cayabyab & Enrquez (2007) al examinar experimentalmente la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de T. testudinum. Las observaciones y fotografas hechas en el microscopio ptico de diferentes secciones a lo largo de la hoja, permitieron describir lo que pasa en el interior de la hoja cuando aumenta el grosor en su base, o cuando disminuye hacia la punta. En la zona cercana al meristemo el volumen de los espacios de aire (sistema lacunar) es mayor y hacia la mitad de la hoja se reducen, haciendo la hoja ms densa. Sin embargo en esta seccin de la hoja se incrementa considerablemente el nmero de espacios de aire (Anexo 2). En la zona apical vuelve a disminuir el nmero de espacios de aire, pero aumenta su volumen con respecto del segmento medio. (Anexo 2) En el modelo mltiple descrito en este trabajo (Eq, 11), la densidad de la hoja es la variable que ms contribuye al empaquetamiento de los pigmentos (reduccin de a*). Segn las imgenes del Anexo 2 se puede interpretar que Syringodium filiforme es capaz de regular su capacidad y eficiencia de absorcin de luz a lo largo de toda su hoja, mediante cambios en su grosor y su densidad, cambios que estaran fundamentalmente modulados por el nmero de espacios lacunares y su tamao. En estos espacios se favorecera la dispersin mltiple y contrarrestara el efecto paquete. Esta capacidad de

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la morfologa de regular las propiedades pticas de las hojas ya se haba sealado en el estudio de Legaria-Moreno (2008) para las hojas laminares de T. testudinum, pero la hoja cilndrica de S. filiforme parece haber podido desarrollar mucho ms eficientemente esta habilidad. En la base de datos creada y analizada en este estudio comparativo, la densidad promedio de la hoja de S. filiforme fue de 53.5 0.7 mg PS cm-3 frente a un valor promedio de 229.9 2.8 estimado para la hoja de T. testudinum, por Legaria-Moreno (2008). Esto indica que la hoja cilndrica ha conseguido reducir un 77% su densidad con respecto a la hoja laminar. Al analizar la eficiencia de absorcin de luz de la biomasa foliar de Syringodium filiforme, se encontr que las hojas ms densas o empaquetadas, ya sea en unidades de area (gPS/ m2, LMA), o volumen (gPS/ m3, densidad de hoja), presentan una menor eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomasa (a*M, m2 g-1 PS). Este resultado sugiere que las hojas de Thalassia testudinum que son 4 veces ms densas que las de S. filiforme, deben ser menos eficientes colectando luz por unidad de biomasa que las de S. filiforme. Al comparar la distribucin de variacin del coeficiente especfico de absorcin de la biomasa (a*M) entre este estudio comparativo y el de Legaria-Moreno (2008) se encontr que, efectivamente, las hojas de Syringodium filiforme son ms eficientes en colectar luz por unidad de peso, que las hojas de Thalassia testudinum (Fig. 31, t-student, P < 0.05).

Fig.31. Grficos de Box para describir la variabilidad de la base de datos de este estudio y del estudio de Legaria-Moreno (2008). Los grficos describen la mediana y los intervalos que integran el 25% y el 75% de la variabilidad (caja) y el 5% y el 95% de la variabilidad (lneas).Los crculos ilustran los puntos que salen de estos lmites de distribucin de la variacin

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Al aumentar el grosor de la hoja en el gnero Syringodium, se ha podido aumentar tambin la distribucin de pigmentos dentro del mesfilo. Al tener S. filiforme hojas poco densas, este aumento ha conducido a un fuerte incremento del contenido de pigmentos por unidad de peso. Este cambio puede explicar la mejora significativa de la eficiencia de absorcin por peso segn la interpretacin de Enrquez et al. (1994) que reporta por primera vez la existencia de una fuerte asociacin positiva entre a*M y el contenido de pigmentos por peso. Comparando en ambas especies esta asociacin de variacin (Fig. 36), nuestros resultados apoyan de nuevo esta hiptesis explicativa ya que las dos especies muestran una misma asociacin alomtrica de variacin [a*M = 100.01 0.0002* Pigm Peso 0.52 0.015, R2= 0.78, P < 0.01] en donde S.filiforme se sita por encima de T. testudinum en los dos parmetros (Fig. 32).

Fig.32. Asociacin de variacin entre el coeficiente de absorcin de luz de la biomasa, a*M y el contenido de pigmentos (clorofla a+b) por unidad de peso. Se muestra la base de datos generada en este estudio para Syringodium filiforme (en naranja) y la base de datos del estudio de LegariaMoreno (2008) para Thalassia testudinum (en azul).

Esta relacin confirma de nuevo la fuerte asociacin ya descrita con anterioridad entre el contenido de pigmentos por unidad de peso y la variacin de la eficiencia de absorcin de luz de la estructura fotosinttica por unidad de peso o carbono estructural

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invertido en su formacin. Ramus (1990), Enrquez et al. (1994) y Enrquez & Sand-Jensen (2003) explican que a*M, es un parmetro muy til en fotobiologa para comparar la eficiencia de absorcin de luz de diferentes estructuras fotosintticas, porque refleja el retorno de energa por biomasa de hoja colectora de luz. Interpretan que el aumento de a*M podra estar asociado con una mejora potencial de la tasa especfica de crecimiento. Segn estos autores, las hojas cilndricas de S. filiforme le aportaran una significativa mejora en la eficiencia de absorcin de luz por unidad de biomas y, quizs, explicara su mayor crecimiento foliar y tasa de renovacin que la de las hojas laminares de T. testudinum. Sin embargo, no explicaran necesariamente las diferencias entre especies y/o poblaciones en la tasa especfica de crecimiento de toda la planta, pues estas diferencias son ms dependientes de otras caractersticas morfolgicas de la especie como es la magnitud de la biomasa hetertrofa enterrada en el sedimento. T. testudinum es una especie que mantiene mucha mayor biomasa de rizomas y races que S. filiforme. De acuerdo con Legaria-Moreno (2008) si un aumento del grosor de la hoja permite alargar el paso ptico efectivo de la luz y mejorar su absorptancia, estas hojas podran reducir significativamente los costos de inversin en pigmentos, y ahorrar recursos en trminos de nitrgeno y protenas, pues construir mayores antenas requiere de una gran inversin de nitrgeno para formar los complejos pigmento-protenas. Este beneficio del aumento del grosor tiene gran importancia fotoaclimatativa en Thalassia testudinum pues esta especie vive en un ambiente oligotrfico con poca disponibilidad de nutrientes como es el sistema arrecifal, pero adems su gran componente estructural de biomasa subterrnea la obliga a optimizar la colecta de energa para ajustar los balances de carbono de la planta maximizando la eficiencia de la inversin de recursos, pero sin comprometer su capacidad de absorcin de luz. De esta manera de acuerdo con LegariaMoreno sta fanergama marina apostara por hacer hojas ms gruesas en condiciones subptimas de disponibilidad de recursos, ya que cambios en el grosor no implicaran mayores gastos en produccin de antenas ni en tejido estructural, pues sus hojas gruesas son tambin menos densas (r= -0.68). En las hojas de Syringodium filiforme, producir hojas ms gruesas est asociado a una mayor inversin en pigmentos por unidad de rea foliar (r=0.5), ya que los pigmentos se distribuyen en un volmen mayor. Pero el aumento del grosor est principalmente asociado al aumento de los espacios lacunares por lo que la inversin en pigmentos no sera tan costosa como lo es en una hoja de planta terrestre con un mesfilo ms pigmentado. La correlacin encontrada en las hojas de S. filiforme

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refleja fundamentalmente que la base de las hojas es la que tiende a ser ms gruesa y ms pigmentada en comparacin con la parte apical. Una importante diferencia entre la hoja cilndrica de Syringodium filiforme y la de Thalassia testudinum es que la primera ha reducido considerablemente su rea de colecta de luz y requiere de un esfuerzo mucho menor de inversin de la planta en su aparato fotosinttico que el que realiza T. testudinum, con un rea foliar mucho mayor en su dosel. Adems, como se indic anteriormente, en tejido estructural las hojas gruesas de S. filiforme, s son ms econmicas, pues tambin son menos densas (r= -0.63). Comparativamente los costos son mucho ms baratos en las hojas de S. filiforme que en las hojas de T. testudinum, ya que la densidad promedio de sus hojas fue de 53.5 0.7 y 229.9 2.8 mg PS cm-3 respectivamente. El beneficio que proporciona una hoja ms gruesa es de gran relevancia para las hojas de Syringodium filiforme, pues le ha permitido maximizar la capacidad de absorcin de luz con mucho menos inversin de biomasa, aunque la energa total colectada en el dosel es tambin mucho menor (ver Enrquez & Pantoja-Reyes 2005). Por ltimo, otro aspecto diferencial importante que hay que sealar entre la hoja laminar y la hoja cilndrica es que el mayor volumen de las hojas de S. filiforme permite regular de forma ms eficaz el campo lumnico en el interior de la hoja, protegiendo a una fraccin de los cloroplastos de niveles excesivos de luz, lo que le puede dar unas ventajas adaptativas en un ambiente altamente iluminado como es una laguna arrecifal somera del Caribe mexicano. Adems se conoce que esta planta acutica es una especie pionera en colonizar estos ambientes tan iluminados, mientras que T. testudinum es una exitosa especie climax que va remplazando el lugar ocupado por otras macrfitas marinas incluyendo a Syringodium filiforme, pues va generando extensas y densas praderas reduciendo la disponibilidad de luz para estas otras especies. De esta manera, mientras que T. testudinum apuesta por regular el campo lumnico principalmente en el dosel de su pradera (Enrquez & Pantoja-Reyes 2005), lo que requiere una lenta ocupacin del espacio hasta que se instala la comunidad climax, la hoja gruesa de S. filiforme, le permite regularlo principalmente en el interior de la hoja y por tanto independizarse de la fuerte variacin del campo lumnico en la columna de agua y los cambios en la densidad de biomasa en la pradera submarina. La posible relacin entre a*M y la tasa especfica de crecimiento de Syringodium filiforme debe todava ser analizada, pero parece claro que la aparicin de una hoja cilndrica, ms gruesa, en el grupo de las fanergamas marinas ha contribudo a una

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mejora sensible de la eficiencia de absorcin de luz tanto de los pigmentos como de la biomasa foliar. Estas conclusiones no pueden ser extrapolables a la eficiencia de absorcin de luz del dosel de la pradera submarina, pues claramente la hoja laminar de Thalassia testudinum extiende una mayor rea foliar y compite mucho ms exitosamente por luz en el ambiente arrecifal que la hoja cilndrica de Syringodium filiforme (Enrquez & Pantoja-Reyes 2005). Sin embargo, una mayor tasa especfica de crecimiento de la hoja y de la planta, podran explicar por qu S. filiforme es mucho ms exitosa que T. testudinum en colonizar nuevos espacios no ocupados todava por la pradera 8.2 Respuesta fotoaclimatativa Con el anlisis alomtrico se pudo tener un acercamiento a conocer como la planta cambia sus caractersticas pticas en funcin de su morfologa y viceversa. En este anlisis nos adentraremos a explicar cmo esos cambios responden a la variacin del campo lumnico a lo largo de un gradiente en profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos, y quizs tambin a otros condicionantes ambientales asociados a las dos reas que se compararon: la laguna arrecifal de Puerto Morelos y la poblacin de Punta Herrero. Este anlisis nos ha permitido visualizar patrones a lo largo del haz y en las diferentes praderas muestreadas en un gradiente en profundidad, pero tambin la contribucin de otros factores no todava identificados que resultan en ausencia de patrn Los pastos marinos son particularmente sensibles a los cambios en la disponibilidad de luz, ante ello responden eficientemente a distintas escalas espaciales, entre estas estn las respuestas individuales de la hoja, del haz de hojas y a nivel de la estructura de la pradera (Dennison 1987); (Dalla Via et al. 1998) (Olesen et al. 2002). Las hojas de Syringodium filiforme respondieron ante los cambios de la disponibilidad de luz tanto en el gradiente en profundidad de las praderas, como en el gradiente que se genera en el interior de su dosel, es decir a lo largo de su hoja. Esta capacidad de los organismos fotosintticos a responder ante los cambios del campo lumnico es conocida como fotoaclimatacin (Falkowski & La Roche 1991). Estos autores mencionan que la foto aclimatacin se realiza tambin a distintos niveles: morfolgico, expresados en cambios del volumen de las estructuras fotosintticas y en el nmero y densidad de tilacoides; bioqumico, manifestados en el cambio del contenido y composicin de pigmentos y lpidos; y fisiolgicos: cambios en los requerimientos mnimos cunticos para la evolucin del oxgeno fotosinttico, as como en la respiracin y en la tasa de crecimiento. Siendo as, en este anlisis fotoaclimatativo se abarc parcialmente las respuestas fotoaclimatativas de las hojas de Syringodium filiforme a nivel de la pradera y a nivel

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individual de su hoja expresadas a nivel morfolgico y bioqumico. En general las respuestas a nivel de la hoja de Syringodium filiforme fueron un poco ms claras que a nivel de la pradera. A diferencia de Olsen et al. (2002) y de Oliv et al. (2005) que encontraron en las hojas de Posidonea ocenica y Thalassia testudinum una menor respuesta fotoaclimatativa que a nivel de la estructura de la pradera, las hojas de S. filiforme si parecen responder al patrn de variacin esperable a lo largo del gradiente de luz en profundidad examinado de la laguna arrecifal de Puerto Morelos. Las hojas de Syringodium filiforme presentaron una alta y significativa correlacin entre la densidad de pigmentos por unidad de rea con la disponibilidad de luz representada tanto a lo largo de un gradiente de profundidad de las praderas (r=0.93) como a lo largo de la hoja siguiendo el gradiente de atenuacin de luz del dosel de la pradera (Enrquez et al. 2002 y Enrquez & Pantoja-Reyes 2005). Se confirm que la variabilidad de la seccin ptica transversal de pigmentos fotosintticos, es una importante respuesta fotoaclimatativa de los organismos a las variaciones del campo lumnico al que estn expuestos (Falkowski & Raven 1997). Este patrn fotoaclimatativo encontrado consisti en aumentar la seccin transversal o densidad de pigmentos al disminuir la disponibilidad de luz el cual corresponde a la respuesta fotoaclimatativa tpica (Bjrkmann 1981; Falkowski & La Roche 1991). Es pertinente sealar que la pradera de Syringodium filiforme de Punta Herrero no se comport segn el patrn en profundidad de las praderas de Puerto Morelos, ya que siendo la pradera ms somera, present densidades de pigmentos similares a los de las praderas ms profundas de Puerto Morelos, debido a que las condiciones de transparencia de la columna de agua no es la misma, siendo ms turbia la de Punta Herrero por la influencia de las descargas de manglar de la baha del Espritu Santo. Aunque en la pradera de Punta Herrero (la ms somera) se hicieron pocas observaciones en comparacin con las praderas mas someras de Puerto Morelos, en los das en que se exploro la pradera y se recorri la pennsula se encontr menor transparencia en el agua, tanto desde el exterior como dentro de la columna de agua, adems es una pradera mixta, densa y muy extensa dominada por Thalassia testudinum. De acuerdo con (Enrquez & Pantoja-Reyes 2005) el control que el dosel de la pradera submarina ejerce sobre el campo lumnico de las hojas, puede ser mucho ms fuerte que la extincin de luz en la columna de agua. Estas caractersticas en conjunto ha podido condicionar un campo de luz para las hojas de Syringodium filiforme, posiblemente similar al que tienen las hojas de mayor profundidad en Puerto Morelos. Blankenship (2002) menciona que los organismos incrementan la seccin

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transversal a baja luz para facilitar eficientemente la absorcin de energa lumnica y la transferencia de la excitacin entre los pigmentos fotosintticos, mientras que a alta luz, la reducen para disminuir la dosis efectiva y por tanto el fotodao. Ligado a esto se encontr que la composicin de carotenoides aument hacia las zonas ms iluminadas (praderas ms someras y puntas de las hojas), lo cual est relacionado con la principal funcin que realizan los carotenoides, la fotoproteccin, que consiste en disipar como calor el exceso de luz absorbida y evitar la formacin de molculas fuertemente oxidantes (Blankenship 2002). Tambin vari del mismo modo la razn clorofila a/b, disminuyendo este valor hacia las praderas ms profundas y parte basal de la hoja con menor disponibilidad de luz, es decir que se increment el contenido relativo de clorofila b en condiciones de menor iluminacin, lo que est asociado a un aumento del tamao de antena. Estas dos caractersticas de la composicin de pigmentos son una clara respuesta fotoaclimatativa de los organismos fotosintticos al campo lumnico al que estn expuestos, protegindose de los mximos niveles de irradiancia en las zonas ms iluminadas y aumentando los sistemas colectores de luz (antenas) en las zonas menos iluminadas. Al observar los valores de estos descriptores en la pradera de Punta Herrero pudimos confirmar que el campo lumnico de esta pradera no est en la misma funcin en profundidad de las praderas de Puerto Morelos, pues siendo una pradera situada a (}1m) de profundidad present similares cantidades de carotenoides que la pradera de Puerto Morelos situada a 2m de profundidad, aunque en el caso de la razn clorofila a/b present valores ms bajos, lo que al parecer presenta antenas ms grandes que la pradera de 2 m, pero menores que las praderas ms profundas de Puerto Morelos. Cabe sealar que LegariaMoreno (2008) no encontr ningn patrn fotoaclimatativo en las hojas de T. testudinum asociado al contenido y composicin de pigmentos. De acuerdo con Bjrman (1981) y Falkowski & La Roche (1991), las hojas de Syringodium filiforme combinaron la respuesta fotoaclimatativa de la seccin transversal de pigmentos (nivel bioqumico de la hoja) con la respuesta a nivel morfolgico, pero en lugar de seguir el patrn descrito por Bjrkman (1981) para hojas de plantas terrestres, las hojas son ms gruesas en la base en donde hay menor disponibilidad de luz, y se hacen ms delgadas progresivamente hacia la punta, siguiendo el mismo patrn de variacin descrito por Enrquez (2005) y Legaria-Moreno (2008) para las hojas de T. testudinum. Un potencial patrn inverso de respuesta morfolgica en las hojas de pastos marinos ha sido tambin sugerido a partir de los resultados de la aproximacin experimental de Cayabyab & Enrquez (2007), en donde encontraron un mayor grosor en las hojas aclimatadas a

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baja luz. Este mismo patrn de variacin morfolgica de la hoja no se present, sin embargo, tan claramente en los cambios en profundidad entre praderas, ya que las hojas ms gruesas no se observaron en la poblacin de la pradera ms profunda (la del arrecife a 3 m de profundidad), sino en la zona media de la laguna a 2.5 m de profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos. No obstante los valores mayores de igual forma los present la pradera de Punta Herrero. Este mismo patrn de variacin morfolgica de la hoja no se present, sin embargo, tan claramente en los cambios en profundidad entre praderas, ya que las hojas ms gruesas no se observaron en la poblacin de la pradera ms profunda (la del arrecife a 3 m de profundidad), sino en la zona media de la laguna a 2.5 m de profundidad en la laguna arrecifal de Puerto Morelos. No obstante las tres praderas ms cercanas entre s de la laguna arrecifal de Puerto Morelos, s presentaron una tendencia a incrementar su grosor con la profundidad y las hojas ms gruesas de igual forma los present la pradera de Punta Herrero. Tomando en consideracin el anlisis alomtrico, el aumento del grosor y de la densidad de pigmentos son respuestas fotoaclimatativas encaminadas a mejorar la capacidad de absorcin de luz y, quizs tambin, las tasas fotosintticas en condiciones de baja disponibilidad de luz. Otra respuesta importante de las hojas de Syringodium filiforme a nivel morfolgico fue la variacin de la densidad de la hoja, este parmetro se comport de una forma inversa al grosor de la hoja, pues las hojas ms gruesas presentadas por la pradera de 2.5m de la laguna arrecifal de Puerto Morelos y la de Punta Herrero, presentaron las hojas menos densas y las hojas delgadas de la pradera cercana al arrecife de Puerto Morelos present las hojas ms densas. Sin embargo a diferencia del grosor de la hoja, los cambios de densidad de la hoja no se presentaron en funcin de la profundidad entre las tres praderas cercanas. Por otra parte la descripcin del patrn de variacin a lo largo de la hoja fue muy preliminar en este estudio, pues no se realiz un estudio intensivo sobre los cambios de densidad a lo largo de la hoja, no obstante las mediciones de este parmetro a partir del peso seco presentaron una cierta discrepancia con la mediciones sobre el rea del sistema lacunar, ya que las zona ms delgada de la hoja (la parte apical), no present la menor proporcin del rea del sistema lacunar (hojas ms densas) sino que la presento la zona media de la hoja. Adems de que hace falta un estudio ms particular sobre esta respuesta morfolgica a lo largo de la hoja, stas discordancias sugieren que la luz no ha de ser el nico factor que modula la respuesta morfolgica de la hoja, sin embargo, considerando nuevamente el anlisis alomtrico queda claro que los cambios de estas variables morfolgicas estn encaminadas a

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regular la capacidad y eficiencia de absorcin de luz. En este anlisis se pudo observar que los cambios morfolgicos permitieron que a baja disponibilidad de luz ya sea en las praderas ms profundas o en la base de la hoja, la planta optimiza su morfologa (hojas ms gruesas y menos densas) y ajusta su contenido de pigmentos para ser tanto ms capaz y eficiente en absorber la luz. La pradera de Syringodium filiforme de Punta Herrero mostr unas caractersticas distintas a las de las diferentes poblaciones muestreadas en Puerto Morelos. Determinar el/los factores ambientales que explican estas diferencias est fuera de los objetivos de este trabajo comparativo, pero permite considerar la relevancia de otros factores ambientales adems de la luz en la regulacin de la respuesta morfolgica de S. filiforme. De acuerdo con Ruiz & Romero (2001) la morfologa de la hoja cambia para optimizar la fotosntesis de acuerdo al campo lumnico de la pradera. Pero adems los cambios morfolgicos requieren variaciones estructurales del tejido, las cuales son gobernadas por el crecimiento y las tasas de produccin de las especies particulares de pastos marinos, por lo que se sugiere considerar a los nutrientes en los cambios morfolgicos que presentan las praderas de pastos marinos de diferentes sitios ambientales. De las observaciones que se hicieron sobre las caractersticas morfolgicas de las hojas de Syringodium filiforme, la longitud no parece ser funcin de la disponibilidad de luz, sin embargo sus hojas parecen jugar con cambios en la densidad y el grosor, resultando en una variacin significativa y especfica para cada pradera. Valores similares de un descriptor morfolgico muy relevante, el peso especfico (LMA, mg PS cm-2) o su inverso el rea especfica (SLA, cm2 g PS-1), pueden ser el resultado de cambios morfolgicos de la hoja completamente distintos. Por ejemplo las dos poblaciones de Syringodium filiforme creciendo en la parte ms somera de la laguna arrecifal de Puerto Morelos y en Punta Herrero producen hojas de bajo peso especfico (con una alta expansin de su rea foliar o SLA, cm2 g PS-1), pero una poblacin, la de Punta Herrero, lo hace por medio de hojas muy gruesas y muy ligeras (poco densas) y la otra con hojas delgadas pero de densidad media-baja (Puerto Morelos). Este descriptor del grado de empaquetamiento de la biomasa foliar (LMA o SLA) present un patrn similar al encontrado para el grosor, aunque sus valores ms altos no los present la pradera de Punta Herrero. Cabe sealar que la pradera de Puerto Morelos que present hojas de grosor similar a las de Punta Herrero, present los valores ms altos de LMA. Estas diferencias en las respuestas morfolgicas entre los diferentes sitios de muestreo que no pueden ser explicadas en funcin de los cambios del campo lumnico, indican que otros

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factores ambientales como, por ejemplo, la disponibilidad de nutrientes, pueden condicionar o influir en los cambios morfolgicos de las hojas de Syringodium filiforme. Sin embargo y aunque todava se necesita profundizar ms en el conocimiento de los factores ambientales que regulan la morfologa foliar de los pastos marinos, y en concreto de S. filiforme, los resultados indican que sea cual sea el origen de estos cambios, esta variacin est encaminada a regular la capacidad y eficiencia de absorcin de luz de las hojas. A lo largo de sus hojas, Syringodium filiforme expresa diferencias morfolgicas que coinciden en parte con los tres tipos de hoja que la hoja laminar de Thalassia testudinum desarrolla a lo largo de su crecimiento. En la parte ms joven (tejido nuevo) de la hoja se presenta una ligera reduccin del contenido de pigmentos, grosor y densidad de la hoja en comparacin con la zona media que es donde se alcanza la mxima pigmentacin. En la zona superior o apical de la hoja, se presenta de nuevo una reduccin del contenido de pigmentos, grosor y densidad de la hoja con respecto tambin a la zona media, aunque en este caso no es por maduracin pigmentaria de la hoja sino por aclimatacin a las condiciones de mayor iluminacin de la parte superior del dosel, de forma similar a lo descrito para T. testudinum. De acuerdo con Legaria-Moreno (2008), la regulacin de la capacidad y eficiencia de absorcin de luz es una de las propiedades funcionales clave de la respuesta fotoaclimatativa de los organismos fotosintticos y de acuerdo con el anlisis alomtrico, estas propiedades pticas son dependientes de las respuestas morfolgicas, de esta manera pudimos observar que las variables que disminuyeron la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos (a*pgms), fueron las mismas variables que aumentaron la capacidad de absorcin de luz. Sin embargo la densidad de la hoja tuvo mayor efecto negativo sobre la eficiencia de absorcin de luz (a*pigms) y menor efecto positivo sobre la capacidad de absorcin de luz o absorptancia; mientras que el grosor tuvo mayor efecto positivo sobre la absorptancia y mnimo efecto en la disminucin de (a*pigms). Las hojas de la pradera de Punta Herrero siendo las menos densas no fueron, sin embargo, las ms eficientes en absorber luz por unidad de pigmento, ya que de acuerdo a sus otras caractersticas (mucho contenido de pigmento y hojas gruesas) esta eficiencia tambin sufri una significativa reduccin (a*pigms). Sin embargo, si fueron las ms eficientes en absorber luz por unidad de peso, lo que ha podido resultar en importantes beneficios para optimizar su tasa de crecimiento, ya que segn Ramus (1990), Enrquez et al. (1994) y Enrquez & Sand-Jensen (2003), el aumento en la eficiencia de absorcin por unidad de

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peso permite posiblemente una mejora de la tasa especfica de crecimiento. En resumen, el ajuste de la combinacin de estas variables morfolgicas (grosor, densidad y contenido de pigmentos) es lo que determina la eficiencia de absorcin de luz de las hojas, tanto por unidad de pigmentos como por unidad de biomasa.

IX.

Conclusiones

Este estudio ha permitido concluir que las hojas cilndricas de pastos marinos son mejores trampas de luz que la mayora de hojas laminares. La hoja cilndrica de Syringodium filiforme presenta una mayor capacidad de absorcin de luz que las otras dos especies de pastos marinos del Caribe, Thalassia testudinum y Halodule wrightii y que la mayora de los pastos marinos de hojas laminares, gracias principalmente a desarrollar un hoja mucho ms gruesa (un orden de magnitud) El desarrollo de hojas ms gruesas en pastos marinos trae dos tipos de ventajas, a T. testudinum le concedi una ventaja intraespecfica al no incrementar el efecto paquete de sus pigmentos como s lo hacen las hojas ms gruesas de Syringodium filiforme, sin embargo estas ltimas resultan siempre ms eficientes absorbiendo luz que las hojas laminares, por lo que a S. filiforme el desarrollo de una hoja cilndrica ms gruesa que la laminar le otorg una ventaja interespecfica. Estas dos estrategias que presentan estas fanergamas marinas para mejorar la eficiencia de absorcin de luz, es solo una parte del proceso global de la fotosntesis, pues es muy importante considerar la eficiencia del uso de la energa absorbida entre estas especies, es decir la eficiencia con que la luz absorbida se fija en carbono orgnico fotosinttico y luego en crecimiento. Los pigmentos fotosintticos dentro de las hojas cilndricas de Syringodium filiforme resultan ser ms eficientes absorbiendo la luz que dentro de las hojas laminares de Thalassia testudinum gracias a que consiguieron aumentar en un orden de magnitud el grosor de sus hojas, pero tambin al gran aumento del volumen del sistema lacunar (3 veces), as como su disposicin radial. Estas caractersticas en conjunto le otorgaron una mayor habilidad de dispersar la luz en su estructura interna y de esta manera aumentar significativamente el paso ptico, que aunado a la amplia distribucin de sus cloroplastos en el interior de la hoja cilndrica, la probabilidad de absorber un fotn por una molcula de pigmento es mayor que dentro de la hoja laminar que tiene restringido los cloroplastos en la epidermis. La densidad de la hoja de Syringodium filiforme es el parmetro que con mayor

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fuerza contribuye a disminuir la eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos. En las hojas de Thalassia testudinum tambin la densidad est correlacionada significativa y negativamente con esta eficiencia de absorcin. Por lo tanto al presentar la hoja cilndrica en promedio poco menos de de las densidades que presenta la hoja laminar, esta propiedad de las hojas de S. filiforme podra ser la principal razn que explique por que esta estructura cilndrica es ms eficiente en absorber luz que la las hojas de T. testudinum Los organismos fotosintticos han desarrollado diversas estructuras para contrarrestar el inevitable efecto paquete que sufren los pigmentos en sus membranas y por lo tanto prdida de su eficiencia de absorcin de luz. Thalassia testudinum presenta cristales de oxalato clcico en las clulas de la epidermis y Syringodium filiforme presenta un diseo especial de su sistema lacunar, Ambas caractersticas cumplen la funcin de dispersar la luz en el interior de la hoja e incrementar la probabilidad de absorberla por un pigmento. Este tipo de estudios demuestra la importancia que tienen los diseos de las estructura fotosintticas en el proceso de absorcin de luz. El efecto de la luz sobre la variacin de la respuesta fotoaclimatativa de las hojas de Syringodium filiforme se observ claramente en el contenido de pigmentos, absorptancia y eficiencia de absorcin de luz de los pigmentos. Mientras que su efecto sobre las respuestas morfolgicas fueron menos claros y sugieren considerar la importancia de otros factores ambientales (ej. nutrientes) como reguladores tambin de esta variacin. Los ajustes morfolgicos involucran la combinacin de la variacin de los tres descriptores morfolgicos (grosor, densidad y contenido de pigmentos) y estn encaminados a regular la variacin de la absorptancia y eficiencia de absorcin de luz por unidad de pigmentos y de biomasa. Este efecto combinado es mucho ms fuerte que el efecto individual de cada variable morfolgica. Las hojas de Syringodium filiforme tienen una alta plasticidad fotoaclimatativa a nivel morfolgico y bioqumico, lo cual est en funcin de las demandas o necesidades de absorcin de luz, pero tambin de los recursos disponibles para el crecimiento de las hojas y en general de la poblacin. Esta alta plasticidad le hace capaz de regular el campo lumnico en el interior de la hoja y ser exitosa como especie pionera de ambientes altamente iluminados como la laguna arrecifal de Puerto Morelos, en cambio Thalassia testudinum regula el campo lumnico por su alta plasticidad morfolgica a nivel de la pradera y como especie climax va desplazando a Syringodium filiforme.

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X.

Anexo 1

Morel & Bricaud (1986) propone una relacin una relacin general entre la absorcin transversal efectiva (a*) y la seccin transversal de pigmentos. El resultado es una

relacin no lineal que describe la cada de la eficiencia de absorcin de los pigmentos al incrementar su concentracin (Fig. 33)

Fig. 33 . Descripcin de la relacin entre el coeficiente especfico de absorcin de la clorofila a, a*, y la seccin transversal de clorofila a (contenido intracelular [Ci] X dimetro celular [d]) para el fitoplancton propuesta por Morel & Bricaud (1986)

Diferencias estn asociadas con una disminucin en promedio del 38% de la eficiencia de
absorcin de luz en las hojas de Thalassia testudinum
680

0.08

Coeficiente especfico de absorcin -a*

0.06 (m 2 mg chla
-1

) 0.04 0.02 0 0 100 200 300 400

-2

500

Densidad de clorofila

a (mg chla m

Fig. 34. Variacin de la eficiencia de absorcin de luz en Mentha aquatica (Enrquez & SandJensen 2003) y en Thalassia testudinum (Enrquez 2005b), en funcin de la variacin de la seccin transversal de clorofila a (contenido por rea proyectada). ( )corresponden a M. aquatica, ( ) corresponden a T. testudinum

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XI.

Anexo 2

rea total = 1.49 mm2 Espacios de aire= 0.46mm2 30.9%

rea total = 1.59 mm2 Espacios de aire= 0.42mm2 26.8%

rea total = 1.54 mm2 Espacios de aire= 0.51mm2 33.1%

Fig. 35. Diferencias del volumen del sistema lacunar y nmeros de espacios de aire de tres cortes transversales a lo largo de una hoja de Syringodium filiforme de 27 cm de longitud

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XII. Glosario
Absorbancia.- Indica la magnitud de luz absorbida por la muestra y se define como el logaritmo negativo en base 10 de la relacin de la luz transmitida y la luz incidente. La magnitud de luz absorbida est en funcin de la concentracin de la muestra, pero no es lineal Absorcin de luz.- se refiere a la capacidad de un sistema de complejos pigmentos-protenas especializados en colectar luz y transferir esa energa al centro de reaccin fotosinttico. Absorptancia.- Fraccin de luz incidente sobre un cuerpo que es absorbida por el mismo. Refleja la capacidad de absorber la luz Coeficiente especfico de absorcin.- .- es definido como la absorcin de luz efectiva de la seccin transversal y es utilizado como descriptor de la variacin intra e interespecfica de la eficiencia de absorcin de luz. Efecto paquete.- Es el efecto de que tienen los pigmentos fotosintticos en perder su eficiencia de absorcin de luz al aumentar su concentracin en las antenas, membranas tilacoidales, cloroplastos y tejidos. Esparcimiento mltiple.- Es una caracterstica que la evolucin ha proporcionado sobre todo a los organismos pluricelulares para dispersar la luz en el interior de sus tejidos y mejorar de esta manera su habilidad para absorber la luz, adems este fenmeno contrarresta el efecto paquete. Espectro de absorcin.- Representacin grafica que indica la cantidad de luz absorbida en diferentes longitudes de onda (P). Transmitancia.- Indica la fraccin de la luz incidente que es transmitida por la muestra, se define como la relacin entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la cantidad de luz que incidi sobre ella, I0, y se representa generalmente en tanto por ciento

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XIII. Referencias

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