In: Curso de Actualizacin - Manejo Reproductivo del Ganado Bovino, M.A. Asprn (Ed.

) Publisher: International Veterinary Information Service (www.ivis.org), Ithaca, New York, USA.

Curso de Actualizacin - Manejo Reproductivo del Ganado Bovino (2-Apr-2004)

M. A. Asprn Instituto Tecnolgico de Monterrey Campus Quertaro, Universidad Nacional Autonoma de Mxico, Quertaro, Mxico. Objetivo: Actualizar a los profesionistas de la reproduccin bovina en los avances recientes de las tcnicas de manejo reproductivo del ganado vacuno. Temas: 1. Anatoma y fisiologa reproductiva de la vaca 2. Tcnicas de manejo reproductivo de la vaca: Deteccin de celos Palpacin del aparato reproductor Inseminacin artificial Sincronizacin de estros y ovulaciones Descongelacin y transferencia directa de embriones 3. Eficiencia reproductiva del ganado bovino 4. Bibliografa recomendada

Anatoma y fisiologa reproductiva La habilidad de la vaca para cruzarse, concebir y parir exitosamente un becerro sano cada ao es esencial para la produccin rentable de carne o leche. A fin de manejar eficientemente la reproduccin bovina es necesario conocer la anatoma y fisiologa reproductiva de la vaca. En caso de fallas reproductivas es indispensable determinar las causas para solucionar los problemas. Se han desarrollado numerosas tcnicas para la manipulacin de los procesos reproductivos en el ganado bovino que dan al profesionista y al ganadero muchas opciones para obtener las metas de manejo establecidas. Anatoma Dentro de la cabeza de la vaca se localizan tres rganos esenciales para la reproduccin. La glndula pineal capta informacin del mundo que rodea al animal y mediante la secrecin de hormonas (melatonina y arginn vasotocina) controla el funcionamiento del hipotlamo, que a su vez regula varios procesos, entre los que se encuentra la reproduccin. El mantenimiento de la temperatura corporal, de la concentracin de componentes en los fludos corporales y el hambre y la sed son solo algunas de las funciones del hipotlamo, que es una glndula neuroendocrina que enva y recibe seales nerviosas a travs del sistema nervioso y mensajes hormonales por el sistema endocrino. El tercer rgano, la glndula pituitaria o hipfisis, se localiza en la base del cerebro. Solo mide un poco ms de 1 centmetro y pesa 1 gramo. Fisiolgicamente se divide en dos regiones: la hipfisis anterior y la posterior, cada una de las cuales secreta varias hormonas que regulan procesos corporales. Algunas de estas hormonas son responsables del control de eventos reproductivos, mientras las dems regulan el crecimiento, metabolismo y balance hdrico. Los rganos reprodutores de la vaca son los dos ovarios, dos oviductos, el tero (con dos cuernos y un cuerpo), el crvix, la

vagina y la vulva. En la Figura 1 se muestra un esquema de estos rganos, adems de la vejiga urinaria y la uretra, que son parte de otro aparato, el urinario.

Figura 1. Esquema del tracto reproductor de la vaca. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

El ovario, o gnada femenina, es responsable de dos funciones bsicas: 1) produccin del gameto femenino, el vulo, y 2) produccin de hormonas reproductivas, siendo las principales los estrgenos y la progesterona. Los ovarios, ovalados, se localizan en la cavidad abdominal o en la pelviana. Su tamao vara dependiendo del estadio del ciclo estral y la edad del animal, pero generalmente es de 2.5 a 3.5 cm de largo. El oviducto es un tubo que su primera parte tiene forma de embudo y rodea al ovario. Esta porcin se conoce como infundbulo. Cuando ocurre la ovulacin, el vulo es captado por el infundbulo y transportado hacia la segunda parte del oviducto, la ampolla, donde se lleva a cabo la fertilizacin en caso de estar presentes ah espermatozoides viables, ya que el vulo tiene capacidad de ser fertilizado solo durante unas horas. El embrin resultante pasa al istmo y de ah al cuerno uterino aproximadamente 3 a 4 das despus. Si el vulo no es fertilizado hace el mismo viaje pero en vez de continuar con el desarrollo embrionario degenera y desaparece dando oportunidad a que se presente otro celo. El cuerpo del tero es corto, mientras que los cuernos uterinos son relativamente largos. El embrin contina su desarrollo aqu y empieza la formacin de la placenta, que lo cubre mientras se convierte en feto. La placenta proporciona nutricin y oxgeno al producto y le retira desechos y bixido de carbono. No hay mezcla directa de sangre entre el feto y la madre, pero un complejo sistema permite el paso selectivo de ciertas molculas de un lado al otro. El crvix o cuello uterino tiene pared fibroelstica gruesa y un estrecho conducto que se relaja durante el estro para el paso de los espermatozoides depositados en la cpula y para la expulsin del producto al momento del parto. Durante la gestacin se llena con moco viscoso (el tapn cervical), que protege al tero de la entrada de infecciones desde la vagina. Este tapn es eliminado cuando el canal cervical se dilata poco antes del parto. La vagina es el receptculo para el pene del macho durante la monta. El toro deposita el semen en la vagina, cerca del crvix. En la inseminacin artificial el instrumento usado se pasa a travs de la vagina y el crvix para depositar el semen en el cuerpo uterino. La parte posterior de la vagina, conocida como vestbulo, recibe la orina descargada de la vejiga urinaria por la uretra y la elimina al exterior. La abertura externa de la vagina es la vulva, formada por dos labios, derecho e izquierdo, y dos comisuras, superior e inferior. En sta ltima est el cltoris. Fisiologa En la Figura 2 se muestran los eventos ovricos que se presentan en un ciclo estral con duracin tpica de 21 das. El ovario produce el vulo mediante el proceso de ovognesis. A diferencia de la espermatognesis del toro, que es contnua, la ovognesis es cclica. Este ciclo de desarrollo del vulo se conoce como ciclo estral y generalmente dura 20 a 21 das, durante los cuales estn presentes dos estructuras prominentes, el folculo y el cuerpo lteo. Cada estructura tiene una fase de desarrollo e involucin durante el ciclo. Los folculos empiezan como varios miles de folculos primarios, formados por una clula germinal rodeada por una capa de clulas aplanadas. Esta clula germinal tiene el potencial de madurar hasta vulo si el folculo completa la fase de desarrollo. Sin embargo, solo un porcentaje muy pequeo de folculos primarios contina a travs de las fases de folculo secundario y terciario para finalmente culminar con la ovulacin. Los folculos que no completan el desarrollo mueren mediante el proceso apopttico de atresia.

Figura 2. Esquema de los cambios ovricos en un ciclo estral tpico de 21 das que no result en preez. El desarrollo folicular y el desarrollo y regresin del cuerpo lteo son procesos contnuos. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Los relativamente pocos folculos primarios que completan el desarrollo lo hacen a travs de una serie de fases. A la capa de clulas que rodea al ovocito se le aaden muchas otras capas celulares y se forma una cavidad central. El folculo y su cavidad crecen y el ovocito queda unido a un cmulo de clulas en el lado opuesto al futuro sitio de ovulacin. Al continuar el crecimiento folicular, su capa externa se adelgaza. Este es el folculo maduro, dominante o folculo de Graaf. La capa externa se rompe en el momento apropiado despus del celo y el vulo y dems contenido de la cavidad folicular son expulsados. El desarrollo folicular es concomitante con otras funciones reproductivas y conductuales de tal forma que cerca del momento de la ovulacin el tero est preparado para recibir tanto al vulo de la hembra como a los espermatozoides del macho. Despus de la ovulacin las clulas del folculo roto sufren un proceso de diferenciacin, por accin de las hormonas hipofisiarias, llamado luteinizacin que tiene como consecuencia la formacin de la otra estructura ovrica, el cuerpo lteo (abreviado CL), que tiene la importante funcin de secretar la hormona progesterona. El CL tiene un ciclo de maduracin y regresin similar al del folculo. En la cavidad dejada por el folculo roto se forma una estructura similar a un cogulo, el cuerpo hemorrgico que se transforma en CL hacia el da 5 del ciclo (da 0 = estro). El CL es totalmente funcional del da 5 al 15 del ciclo y empieza a involucionar si la vaca no resulta gestante dejando de secretar progesterona mientras contina el desarrollo del folculo que ovular tras el siguiente estro. Al atrofiarse el CL se convierte en cuerpo albicans y permanece visible en el ovario durante varios ciclos subsecuentes. En la Figura 2 se aprecia la dinmica contnua del desarrollo y regresin de los folculos y el cuerpo lteo en la vaca vaca, que se interrumpir cuando resulte preada, ya que no ocurre la regresin del CL. La actividad cclica se reanudar hasta despus del parto. Generalmente la vaca permanece en anestro (ausencia de ciclos estrales), despus de parir, durante un tiempo (15 das en ganado que no amamanta a su cra a 60 das o ms en ganado con cra al pie). La duracin de este periodo puede verse afectada por la nutricin, lactacin, estrs ambiental y muchos otros factores. El manejo para controlar la duracin del anestro es muy importante para la eficiencia reproductiva, ya que para tener un parto al ao la vaca debe quedar gestante a ms tardar a los 85 das posparto. Cualquier condicin que prolongue el periodo en que los niveles sanguneos de progesterona se mantengan altos tendr el mismo efecto que la preez en frenar el ciclo estral normal de 21 das promedio. Ocasionalmente el CL no involuciona en forma normal (CL persistente) incluso aunque la vaca no est gestante. Es necesario hacer el diagnstico diferencial para dar el tratamiento adecuado. Pueden presentarse ciclos estrales anormalmente cortos (7 a 11 das), aparentemente debido a que no se forma el CL o se forma un CL no funcional, permaneciendo bajos los niveles de progesterona. El ciclo puede ser acortado intencionalmente mediante la inyeccin de una hormona llamada prostaglandina que ocasiona la regresin del CL, siendo este uno de los mtodos usados para la sincronizacin estral. La manifestacin del celo (estro o calor) no siempre va acompaada de ovulacin, o la ovulacin acompaada de estro. En el celo sin ovulacin (calor anovulatorio) no puede haber preez aunque haya sido servida la vaca. La ovulacin sin estro (ovulacin silenciosa) no es rara en las vacas, especialmente en las primeras semanas posparto. La hembra no acepta la monta del macho o de otras vacas. Las especies de mamferos que solo tienen un celo en la poca reproductiva se conocen como monostricas. Algunas especies presentan varios calores en la poca reproductiva y se les llama polistricas estacionales. La vaca y la cerda son polistricas no estacionales pues presentan celos durante todo el ao, aunque la duracin de las horas luz del da puede afectar su fertilidad, que baja un poco en los das cortos. Hormonas femeninas de la reproduccin La reproduccin de la hembra est regulada por numerosas hormonas secretadas por glndulas especializadas (endocrinas) que generalmente pasan a la sangre o linfa que las transporta a partes especficas del animal (rgano "blanco") donde producen su funcin. Los estrgenos se producen en el folculo de Graaf y tienen varios efectos: 1) desarrollo y funcin de los rganos sexuales secundarios, 2) receptividad sexual o conducta estral, 3) ritmo y tipo de crecimiento, especialmente depsito de grasa, y 4)

preparacin de la vaquilla prepber y la vaca posparto para el inicio de la actividad sexual cclica. La progesterona es secreteda por el CL y suprime el desarrollo completo de los folculos y la secrecin de estrgenos. Los niveles altos de progesterona y bajos de estrgenos evitan que la vaca presente estro. La progesterona es necesaria para preparar al tero para que reciba al embrin y para mantener el ambiente uterino propicio para que siga la gestacin. Las funciones de estrgenos y progesterona no siempre son antagnicas y en algunos procesos actan juntas. El radio de concentracin estrgenos/progesterona determina el inicio y duracin de la conducta estral. El desarrollo uterino es iniciado por los estrgenos y completado por la progesterona. Los estrgenos causan contraccin uterina cerca del momento del estro y la ovulacin para ayudar al transporte espermtico. La progesterona elimina la contraccin uterina que podra afectar la preez. La produccin de hormonas ovricas est bajo la influencia directa de las hormonas gonadotrpicas producidas en la hipfisis anterior. La Hormona Estimulante de los Folculos (FSH) y la Hormona Luteinizante (LH) se secretan en la pituitaria y viajan por la sangre hasta el ovario. La secrecin de FSH y LH es estimulada por la Hormona Liberadora de Gonadotropinas (GnRH) liberada por el hipotlamo. La FSH estimula el crecimiento, desarrollo y funcin del folculo. La LH causa la ovulacin y el desarrollo y funcin del CL. En la Figura 3 se muestran los cambios cclicos en las concentraciones de las hormonas reproductivas que se repiten cada 20 a 21 das en la vaca que cicla normalmente, cambiando cuando hay gestacin. Despus del parto y el anestro reinician los ciclos estrales.

Figura 3. Concentracin de hormonas reproductivas en un ciclo estral de 21 das. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

El ciclo estral El ciclo reproductivo de la vaca consta de una serie de eventos que ocurren en un orden definido. La duracin promedio del ciclo es de 21 das (rango: 17 a 24 das) y la finalidad es preparar el aparato reproductor para el estro y la ovulacin. La Figura 2 y la Figura 3 muestran los cambios ovricos y hormonales en un ciclo tpico de 21 das en que no hubo gestacin. Das 0 - 1. La vaca est en celo el da 0, en promedio durante 18 horas (rango: 12 a 24 horas). Unas 12 horas despus del final del celo el folculo de Graaf maduro ovula en respuesta a un pico de LH liberado por la hipfisis. Das 1 - 2. Las clulas que formaban el revestimiento interno del folculo se empiezan a convertir en clulas lteas por accin hormonal, principalmente de la LH. Das 2 - 5. El CL crece rpidamente en tamao y funcin. Pueden verse numerosos folculos en el ovario, pero empiezan a involucionar el da 5. Das 5 - 16. El CL contina su desarrollo y alcanza su tamao y funcin mximos hacia el da 10. Secreta progesterona, que inhibe la secrecin de LH por la pituitaria. Los ovarios estn relativamente inactivos excepto por la funcin del CL. Ningn folculo alcanza la madurez y/o ovula debido a los altos niveles de progesterona. Das 16 - 18. El CL involuciona rpido debido a la accin luteoltica de la prostaglandina uterina. Das 18 - 20. El CL deja de funcionar y cesa el efecto inhibidor de la progesterona. Uno de los folculos que comenzaron a crecer se vuelve ms prominente al aumentar sbitamente su tamao y actividad, convirtindose en folculo dominante, que secreta cantidades elevadas de estrgenos e inhibina, ocasionando que los dems folculos que venan creciendo sufran atresia.

Da 21 0. Con el aumento en la secrecin folicular de estrgenos y la correspondiente disminucin de progesterona al desaparecer el CL, se presenta el estro o calor (el ciclo ha retornado al da 0). El elevado nivel de estrgenos en la sangre estimula una gran liberacin de LH cerca del final del celo, que provoca la ruptura del folculo maduro para liberar el vulo y el tejido celular folicular empieza a luteinizarse en respuesta a las hormonas para formar un nuevo CL (el ciclo ha retornado a los das 1 - 2). La progesterona es otra vez la hormona dominante. La cronologa sealada es aproximada y vara dependiendo de la duracin del ciclo. Los eventos mencionados se basan en un ciclo completo en que no ocurri la gestacin. Si el vulo es fertilizado y empieza la preez, el CL no involuciona y contina su funcin de secretar progesterona. No se desarrollan folculos hasta la madurez y no se presenta el celo. La progesterona evita contracciones uterinas para tener condiciones favorables para el desarrollo del feto.

Tcnicas de manejo reproductivo de la vaca Deteccin de celos La deteccin de calores es de gran importancia cuando se emplea la inseminacin artificial (I. A.), ya que el momento ptimo para realilzar esta tcnica se determina con base en la manifestacin del celo de la vaca. La observacin visual directa de los animales para detectar la conducta estral es el mtodo ms ampliamente usado en ganado bovino. Sin embargo, no siempre se realiza en forma correcta, lo que ocasiona que tenga baja precisin y eficiencia. El momento de observacin es muy importante para tener eficacia en la deteccin. Se pierden muchos celos si no se hace la deteccin en los mejores momentos del da. La recomendacin tradicional es observar a las vacas durante 30 minutos al amanecer y otros 30 minutos al atardecer. Se ha determinado que aproximadamente 28% de los celos solo se manifiesta durante las horas de oscuridad. De las 6 a. m. a medio da se manifiestan el 22% de los celos, solo 10% de medio da a las 6 p. m., de las 6 p. m. a media noche 25% y de media noche a las 6 a. m. 43%. Se ha demostrado que si se invierte ms tiempo en la deteccin la eficiencia mejora mucho. La nueva recomendacin de la "deteccin intensiva de calores" require dedicar dos horas a la observacin al amanecer y otras dos al atardecer, adems de una hora extra a medio da. Con esta rutina se obtiene una eficiencia similar a la de los mtodos electrnicos de deteccin (85 - 100% de celos detectados correctamente). Un factor que afecta la precisin de la deteccin es la jerarqua social de las vacas. Los animales dominados generalmente manifiestan poco el celo si estn presentes las vacas dominantes. Una tcnica de manejo que ayuda a detectar el celo de estos animales consiste en continuar la observacin durante al menos 30 minutos ms despus de separar las vacas que ya fueron detectadas en celo. La correcta identificacin del inicio del estro mejora los porcentajes de concepcin y preez. La tasa de concepcin fue de 62% observando estros dos veces al da durante 30 minutos contra 82% con deteccin intensiva. El porcentaje de preez se duplic de 35% a 71% con el programa de deteccin intensiva. Los signos de celo son la clave para identificar correctamente a las vacas en estro. Aunque el nico signo definitivo de estro es el reflejo de inmovilidad cuando el animal es montado por otro, se presentan otros signos que pueden ayudar al observador para encontrar a los animales a los que debe prestar ms atencin para detectarlos en calor. Los signos secundarios de estro son: escurrimiento de moco cristalino por la vulva, moco pegado en miembros posteriores o cola, tratar de montar a otras vacas, seguirlas, colocar su cabeza sobre el dorso, lomo o anca de otra vaca, bramidos, inquietud, caminar a lo largo de los lmites del corral o potrero y caminar ms en bsqueda del toro. A fin de facilitar la deteccin de celos y mejorar su eficiencia se han desarrollado varios mtodos auxiliares para la deteccin de calores. Una de las primeras medidas tomadas para favorecer la deteccin de celos fue el uso de animales celadores, como los toros marcadores imposibilitados para la cpula con el pene desviado, con dispositivos como el Pen-oBlock, vasectomizados, con epididimectoma caudal, vasectoma, penectoma, falectoma, reseccin del msculo retractor

del pene o con mandiles para lograr una marca en la grupa de las hembras que se dejaban montar como consecuencia del estro. En algunos hatos se han utilizado vacas "machorras" (con quistes ovricos crnicos o androgenizadas mediante inyecciones de testosterona). En el Cuadro 1 se muestran algunas opciones de animales celadores, la eleccin de alguno depende de las condiciones particulares de cada hato.

Cuadro 1. Tipos de Animales Marcadores para Deteccin de Celos Animal Toro con Pen-oBlock Procedimiento Colocacin quirrgica de un dispositivo que evita la exteriorizacin del pene Ventajas - Permite la monta normal - Evita la extensin del pene y no hay penetracin ni eyaculado - Ayuda a prevenir enfermedades venreas - Libido normal - Los estmulos de la cpula mejoran la tasa de concepcin con I.A. - Mejor deteccin que con pene bloqueado o vasectoma - Evita enfermedades venreas - No se pierde libido rpidamente - Ciruga relativamente sencilla - Mtodo econmico - Duradera - Ms segura que los toros - Ms barata que ciruga - No se mantienen animales extra fuera del empadre Desventajas - Efectivo solo durante un ao ya que el toro tiende a perder la libido

Toro con vasectoma

Remocin quirrgica de una parte de los conductos deferentes causando esterilidad Redireccin quirrgica del prepucio y el pene hacia un lado evitando que el pene pueda entrar por la vulva

- Disemina enfermedades venreas - No se han notado

Toro con prepucio o pene desviado

Toro con epididimectoma caudal Hembra androgenizada

Remocin quirrgica de cola del epiddimo, el semen no llegan al pene Inyecciones o implantes con testosterona antes del empadre

- Disemina enfermedades venreas - No se han notado

Otra forma de buscar eficientizar la deteccin de celos es el empleo de dispositivos en los animales, que tienen la finalidad de ayudar en la observacin de animales en celo, aunque no sustituyen esta observacin. Existen dispositivos que se colocan en los animales celadores. Uno de los ms usados es el marcador de barbilla (Chin ball), que deja marcada a la vaca en calor con pintura en el lomo y grupa pues se coloca bajo la quijada del animal que monta. Es una ayuda muy efectiva, aunque el costo de la tinta usada puede ser elevado. Tambin se pueden usar dispositivos en los animales a detectar, colocados generalmente en la parte medial de la grupa o el inicio de la cola. Algunos funcionan mediante la aparicin de un colorante cuando la vaca es montada, siendo los ms usados el parche detector de celos Kamar, el Bovine Beacon y el Hot Flash. De manera similar se emplea la aplicacin de crayn o pintura en la lnea media sobre el sacro y la base de la cola. Aqu la desaparicin del colorante es lo que nos indica que la vaca se ha dejado montar.

En el Cuadro 2 hay una lista de las ayudas visuales y la forma de utilizarlas.

Cuadro 2. Ayudas para Deteccin Visual de Celos Tipo Detector Kamar Detector Bovine Beacon Pintura/crayn en base de la cola Marcador Chin-Ball
1

Aplicacin Con adhesivo entre base de la cola y hueso de la cadera sobre el sacro Con adhesivo sobre la base de la cola Lnea de crayn o pintura a lo largo del sacro y la base de la cola Dispositivo debajo de la cabeza del animal celador

Mtodo de deteccin Cambia de blanco a rojo por el peso de la vaca que monta Colorante fluorescente que brilla en la oscuridad liberado por el peso de la vaca que monta Se borra cuando otra vaca monta Al montar deja pintura en el lomo de la vaca montada

Costo aproximado1 $ 15 - 20/vaca $ 15 - 20/vaca Menos de $ 10/vaca $ 2,000 ms la tinta

En pesos mexicanos a precios de julio de 2003.

En un estudio se compar la eficiencia de los parches detectores y las vacas androgenizadas contra la deteccin visual. Los porcentajes de deteccin por observacin aumentaron 13.2, 17.0 y 18.5% con Kamar, Hot Flash y ambos usados simultneamente (separados 2.5 cm). Las vacas androgenizadas y con marcadores de barbilla marcaron 47% de las vacas observadas en calor. La combinacin de marcadores de la grupa y hembras androgenizadas aument el porcentaje de deteccin de calores 1.3 a 6.2% en comparacin con los marcadores solos o las hembras androgenizadas solas. Una gran desventaja de los marcadores de grupa es que se caen con relativa facilidad y se requiere supervisin continua para reinstalarlos. Las prdidas de marcadores han llegado a exceder 40% al momento del calor y 60% en el tiempo total de observacin. La combinacin de varios sistemas de deteccin de estro aumenta la eficiencia de la identificacin de calores, pero el costo de los marcadores de grupa y del mantenimiento de vacas androgenizadas debe considerarse en cualquier programa para aumentar la eficiencia reproductiva. Hay un alto grado de ineficiencia de las hembras androgenizadas o los dispositivos de grupa cuando se usan como nico mtodo de deteccin de calores. En otro estudio, la deteccin visual del calor tuvo exactitud de 68%, con 66% para dispositivos de grupa y 79% para vacas androgenizadas. La combinacin de dos o tres mtodos aument la eficiencia en 20%. Tambin se pueden colocar sobre la grupa dispositivos electrnicos sensibles a la presin, que emiten una seal de radio cuando la vaca est en estro y es montada por una compaera de hato. Esta seal de radio es capturada por un receptor y traducida a una computadora que tiene un programa que proporciona la identidad de la vaca que estuvo en calor, cundo fue montada y la duracin de cada monta. El programa clasifica la informacin e indica si la vaca est en celo, sospechosa de estarlo, no retorno a celo de vacas previamente inseminadas, inactividad o ciclos estrales cortos. El sistema se conoce como "Heat Watch" y empez a usarse en 1994. Las investigaciones realizadas con este sistema demuestran que las vacas deben ser inseminadas entre 5 y 16 horas despus de la primera monta. La ovulacin ocurre alrededor de 28 horas despus de esa monta. Adicionalmente se vi que las vacas que estaban en superficies de tierra promediaron 10 montas por estro contra 3 montas si estaban en piso de cemento. Las vaquillas tuvieron ms montas por estro que las vacas, la duracin del celo fue similar entre vacas y vaquillas, promediando menos de 10 horas. Hubo 50% ms montas en verano que en invierno, aunque los celos fueron de menor duracin en los meses de calor. Casi 60% de las vacas entraron en estro entre 8 p. m. y 2 a. m., cuando generalmente no se observa para detectar estros. Muchas de esas vacas siguieron en estro en la maana, pero el detector permiti un mejor momento de inseminacin en algunas vacas. Los estudios con deteccin electrnica de calores han demostrado un incremento en el porcentaje y nmero de vacas detectadas en estro en comparacin con la observacin visual. Esto refuerza la gran importancia de la deteccin de

calores oportuna, as como la ventaja adicional de una tcnica de este tipo en los programas de inseminacin artificial. Si una vaca monta slo 10 veces en un periodo de 6 a 10 horas, las probabilidades de ver esa actividad son muy bajas. La ventaja de la supervisin electrnica de calores es su potencial para funcionar 24 horas al da.El sistema identifica eficientemente 90 a 100% de las hembras en celo. Otro dispositivo electrnico es el podmetro. Este dispositivo se coloca en una de las patas de la vaca y registra el nmero de pasos que da el animal, lo que es de utilidad pues la actividad de la vaca aumenta cuando est en celo o disminuye cuando est enferma. Los datos recopilados son ledos cuando la vaca entra a la sala de ordea, donde se tiene un lector, que enva esa informacin a la computadora, cuyo programa categoriza los datos y clasifica a las vacas como en celo, sospechosas, inactivas, con ciclos cortos o largos y sin retorno a celo. Esto nos da dos o tres lecturas al da para tomar la decisin para la I. A. Se cuenta tambin con la posibilidad de decidir el momento ptimo de I.A. mediante un dispositivo electrnico que consta de una varilla metlica con electrodos en el extremo y al colocarlo en el fondo de la vagina hace pasar una corriente de electricidad y determina la resistencia elctrica del moco, permitiendo saber si la ovulacin est prxima. Conforme madura el folculo la medida de la resistencia elctrica vaginal se reduce y aumenta de nuevo cuando se acerca la ovulacin. Es en este momento cuando se debe inseminar. El sistema es poco prctico pues se requiere hacer la lectura de la resistencia elctrica por lo menos una vez al da, desinfectando el aparato entre una vaca y otra. La sincronizacin de estros es de mucha utilidad para mejorar la deteccin de calores, ya que en vez de observar a la vaca durante 21 das para detectarla en celo, el tiempo de observacin se puede reducir a unos 5 das, con lo que el porcentaje diario de vacas en calor aumenta de 5 a 20%. Al haber ms vacas en celo en un momento determinado incrementan las posibilidades de que interacten con sus compaeras y sea ms fcil ver cuando se dejan montar. Se ha observado que solo 3% de las vacas sincronizadas manifiestan el celo solo durante las horas de oscuridad, mientras que esto sucede con 28% de las vacas no sincronizadas. La deteccin visual de calores llega a fallar con 20 a 30% de los celos sincronizados y hasta 80% de los no sincronizados. La eficiencia de deteccin aumenta en 10% cuando se sincronizan celos, y puede ser mayor si se emplea la deteccin intensiva de calores. Existen muchos programas para sincronizar estros en ganado bovino, clasificndose en tres grupos: prostaglandinas, progestgenos y GnRH-prostaglandinas, as como combinaciones de estos. Cada uno tiene pros y contras y la eleccin depende del tipo de animales, metas reproductivas, instalaciones y costos. Los registros reproductivos bien llevados son tambin una ayuda para mejorar la eficacia de la deteccin de celos, pues podemos predecir qu vacas deben observarse con mayor atencin si sabemos cuando fue su calor anterior. La revisin reproductiva peridica de los animales mediante la palpacin es otra ayuda pues permite determinar la funcionalidad ovrica, la fase del ciclo estral, infecciones uterinas o problemas ovricos, como los quistes. Un mtodo ms es la determinacin de niveles de progesterona, ya sea en sangre o en leche, ya que las concentraciones elevadas indican que la vaca no est en celo e incluso puede estar gestante, por lo que no debe inseminarse. En el estro los niveles son bajos. Las vacas inseminadas con progesterona elevada en leche tienen slo alrededor de 15% de probabilidades de gestacin contra 65% en las hembras con niveles bajos de progesterona. La medicin de la produccin lctea en cada ordeo es til para sospechar que una vaca est en calor, ya que disminuye durante el celo. Se pueden usar perros entrenados para detectar los olores vaginales y vulvares tpicos de las vacas en celo, o borregos manaderos (criados entre bovinos desde el nacimiento) que detectan las feromonas que emite la hembra en calor. Se ha llegado a emplear la televisin de circuito cerrado durante las 24 horas del da o la medicin de la temperatura corporal o de la leche, que aumenta ligeramente en el celo. La mala deteccin de celos es el principal problema que afecta la eficacia reproductiva en hatos bovinos que usan I.A. Generalmente se usa el porcentaje de preez para evaluar la eficiencia del programa, pero este parmetro est determinado por una combinacin de factores: deteccin correcta de estros, eficiencia del inseminador y fertilidad de las hembras y del semen, de los cuales la deteccin de celos es el ms importante.

Palpacin del aparato reproductor de la vaca En el proceso reproductivo se da mucha atencin a la hembra debido a que es la unidad productora y hay mayor proporcin de hembras que de machos. Al examinar a la vaca no solo lo hacemos usando la palpacin va rectal, sino que debemos conocer su historial reproductivo (partos, servicios, abortos, infecciones), condicin general (mediante inspeccin visual y palpacin externa), comportamiento y su historia de vacunaciones y desparasitaciones. El examen vaginal no se emplea rutinariamente pero es un buen complemento de la palpacin trans-rectal, as que habr de considerarse en algunas condiciones especficas. La palpacin de los genitales internos a travs de la pared rectal es una de las herramientas ms valiosas que se emplean en los programas de manejo reproductivo en el ganado bovino, ya que proporciona informacin til y es muy prctico y econmico. El equipo esencial es el guante de palpacin, que cubre la mano y el brazo del profesionista que realiza el examen reproductivo a fin de protegerlo del contacto directo con la materia fecal de la vaca, donde pueden existir microorganismos causantes de zoonosis. Se recomienda entrenar ambas manos para la palpacin. La anotacin de los hallazgos es tan importante como el examen mismo. El profesionista puede protegerse con overol, botas de hule y mandil para evitar manchas con las heces de la vaca. La lubricacin facilita la dilatacin del esfnter anal y el paso del brazo al recto, reduciendo el riesgo de daar la mucosa rectal. La mano enguantada y lubricada debe cerrarse en forma de cono para dilatar el ao y penetrar al recto. Esto estimula el reflejo de defecacin y deben suspenderse los movimientos de la mano durante la onda peristltica. Si la materia fecal estorba para el examen debe retirarse para que solo quede la pared rectal entre la mano y el aparato reproductor. Esto debe hacerse sin sacar la mano del recto pues de lo contrario entra aire y distiende la ampolla que hace imposible la palpacin. Debe evitarse la manipulacin brusca que daa la mucosa rectal. La palpacin depende del tacto y requiere puntos de referencia para la orientacin en la cavidad plvico-abdominal, como los huesos de la pelvis y el crvix, de consistencia dura y posicin uniforme. Para hacer la palpacin primero se identifica el crvix y se rodea colocando la mano debajo de l. Las dimensiones y ubicacin del rgano son muy variables debido principalmente al nmero de partos del animal. Su forma es cilndrica a semicnica y su soporte por los ligamentos anchos y la vagina permite gran libertad de movimiento. A continuacin deben identificarse los cuernos uterinos, que pueden estar en posicin plvica o abdominal. En este ltimo caso es necesario realizar la retraccin del tero, a menos que el estado de gestacin ya no lo permita. Esta maniobra se realiza jalando hacia atrs el ligamento uterino intercornual ventral con el dedo medio hasta colocar el tero en la cavidad pelviana. La retraccin puede hacerse por dos mtodos. En el mtodo indirecto se jala el crvix lo ms atrs posible, detenindolo con el pulgar y el ligamento ancho se toma con los otros dedos, que estn cerca de la punta del cuerno y el ovario de ese lado. Con movimiento hacia la lnea media se sostiene el cuerno en la palma de la mano y siguiendo en esa direccin se localiza el ligamento intercornual, dirigiendo el rgano hacia atrs, flexionndolo sobre el crvix. La retraccin completa permite ubicar los cuernos uterinos totalmente en la cavidad pelviana. Para la retraccin por el mtodo directo se toma el crvix y se lleva hacia atrs, detenindolo con el pulgar. Se dirigen los dedos sobre los cuernos y se identifica su bifurcacin externa y el ligamento intercornual, que se jala hacia atrs como se describi en el mtodo indirecto. Este mtodo es el indicado en caso de que el tero no se encuentre muy profundo en la cavidad abdominal. Muchos animales presentan el aparato reproductor localizado en su totalidad en la cavidad pelviana, no siendo necesario hacer retraccin en ellos. El peristaltismo rectal puede interferir la retraccin. En caso de contraccin el tero se debe soltar y reiniciar la retraccin al pasar la onda peristltica a fin de evitar lesiones y hemorragias del recto. Terminado el examen se retira la mano del recto sin ser necesario regresar el tero a su posicin original, que es recuperada en cuanto el animal se mueve. La palpacin uterina es til para el diagnstico de gestacin, la involucin posparto, los cambios durante el ciclo estral, anormalidades anatmicas y procesos infecciosos.

La palpacin de los ovarios debe hacerse en el examen rutinario de los animales no gestantes. Para revisarlos no es necesario hacer retraccin, basta con localizar el ligamento ancho y ubicar el ovario, tomndolo en la palma y girando la mano de tal forma que el ovario quede encima de la palma y el ligamento ovrico entre los dedos anular y medio dejando libres pulgar e nice que se pasan por la superficie ovrica para sentir las estructuras presentes, como folculos, cuerpo lteo o quistes ovricos. El folculo se caracteriza por su forma redondeada, con dimetro de 1.0 a 2.5 cm, y su consistencia suave y fluctuante debido al lquido que contiene en su cavidad. Un da despus de la ovulacin se puede palpar la depresin presente en el lugar donde estuvo el folculo. Durante los siguientes 5 a 7 das se palpa el cuerpo hemorrgico, que generalmente tiene una parte que sobresale de la superficie ovrica y es de consistencia crepitante debido al cogulo que lo forma. El cuerpo lteo se presenta del da 7 al 19 en un ciclo de 21 das y tiene dimetro de 2.5 a 3.5 cm, distorsionando el ovario, con consistencia no fluctuante y menos firme que el resto del ovario, generalmente con una parte que sobresale del ovario, conocida como corona, y con una lnea que lo limita del resto del ovario, la cual puede sentirse si se ejerce ligera presin con la punta del pulgar. En muchas ocasiones el CL puede presentar una cavidad interna llena de lquido que la da sensacin fluctuante. Despus de la involucin del CL se puede sentir el cuerpo albicans como un pequeo grnulo de consistencia similar al ovario. La palpacin de estructuras ovricas permite determinar el estadio funcional del ovario, la fase del ciclo estral, anormalidades anatmicas, inflamacin, quistes, tumores y abscesos. Los quistes ovricos pueden ser de dos tipos: 1) Folicular, que puede ser nico o mltiple, similar a un folculo pero de mayor tamao, a veces de 7 ms cm de dimetro, por lo general acompaado de ninfomana o androgenizacin. 2) Lutenico, similar al folicular pero con pared algo engrosada debido a la luteinizacin parcial de las clulas, generalmente nicos, con fluctuacin menos aparentey acompaados normalmente de anestro. El oviducto y la bolsa ovrica no se palpan en el examen rutinario pero es importante revisarlos en casos de infertilidad. Se toma el ovario entre los dedos extendidos, que se tocan en las puntas, y sin girar la mano como se hace en la palpacin ovrica, se abren los dedos dejando libre el ovario y la bolsa ovrica (formada por mesovario y mesoslpinx) queda al rededor de los dedos. El oviducto se reconoce como una estructura acordonada, de 2 a 4 mm de dimetro, que se une a la punta del cuerno uterino. El oviducto y la bolsa deben estar libres de adherencias, quistes (conocidos como paraovricos) e inflamacin. La palpacin es el principal mtodo para hacer el diagnstico de gestacin en el ganado bovino con base en la identificacin de cambios asociados con la preez que solo se encuentran en los animales gestantes, conocidos como signos positivos de gestacin, y cambios que se presentan tambin en animales no gestantes, los signos auxiliares de gestacin. La tcnica para hacer el examen de preez se inicia localizando el rgano de referencia usual, el crvix, determinando su situacin y movilidad. Se intenta hacer la retraccin (posible en animales vacos o en gestantes en los primeros dos meses y medio de preez) y se lleva el tero a la cavidad pelviana. Se revisan ambos cuernos uterinos en su totalidad, sin ejercer presin excesiva ni hacer movimientos bruscos, comparando su tamao y caractersticas. En caso de determinar que el tero no es retrable deber introducirse ms profundo el brazo para palpar el tero delante del crvix y determinar su tamao y caractersticas. Entre los signos auxiliares tenemos la presencia de cuerpo lteo en un ovario, por lo general el del lado del cuerno grvido, aumento de tamao del tero que causa asimetra de los cuernos uterinos, presencia de lquidos que fluctan en el tero, adelgazamiento de la pared uterina ocasionado por la distencin del rgano por acmulo de lquidos, flacidez del rgano por accin de la progesterona, cambio de posicin del tero debido al aumento gradual de peso e hipertrofia de la arteria uterina media al aumentar las necesidades de aporte sanguneo del tero, acompaada de frmito o aumento en la presin sangunea local en cada pulsacin de la arteria. Estos signos se palpan en animales gestantes pero no son suficientes para el diagnstico pues estn tambin en otras condiciones normales o patolgicas. Para hacer el diagnstico definitivo es necesario determinar la presencia de alguno o varios de los signos positivos en el animal preado o la ausencia total de ellos en la vaca vaca. Los cuatro signos positivos se encuentran nicamente en animales gestantes y son 1) deslizamiento de la membrana corioalantoidea, que se detecta desde los 32 das de gestacin comprimiendo el cuerno y dejndolo resbalar entre los dedos a fin de sentir el paso de la banda fibrosa longitudinal de la membrana donde estn contenidos sus vasos sanguneos, 2) vescula amnitica, que contiene al embrin y el lquido

amnitico, palpable como una estructura fluctuante, turgente y ovalada, entre los 30 y 60 das de preez, ejerciendo presin suave a lo largo del cuerno, 3) placentomas, formados por las carnculas endometriales y los cotiledones placentarios, se sienten desde los 65 das como estructuras ovaladas mltiples en la pared uterina y 4) el feto, palpable desde los 50 das cuando la vescula amnitica empieza a perder turgencia; puede palparse directamente o mediante peloteo haciendo movimientos repetidos de la mano contra el tero que provocan el rebote del feto hacia la mano. El clculo de la edad de la preez es de utilidad cuando se utiliza la monta natural en condiciones extensivas, cuando no se cuenta con registros precisos de eventos reproductivos o cuando la vaca ha sido inseminada cuando ya estaba gestante y se requiere determinar cual fue el servicio efectivo. Se realiza mediante la determinacin del tamao de algunas estructuras tanto del tero como del feto y sus membranas, que sufren cambios paulatinos a lo largo de la gestacin. En el Cuadro 3 se presentan las principales caractersticas utilizadas para determinar con bastante aproximacin la edad de la preez. Exiten algunas condiciones patolgicas que requieren un diagnstico diferencial de la gestacin, ya que presentan algunos de los signos auxiliares, pero los positivos estn ausentes. Algunos ejemplos son piometra, mucometra, hidrometra, aplasia uterina segmentaria, linfoma uterino, momificacin y maceracin fetal, aborto, tumores uterinos y ovricos.

Cuadro 3. Caracterticas de las Diferentes Etapas de la Gestacin Das 28 35 42 49 60 70 80 90 100 120 150 180 210 240 270 3.0 5.0 6.0 7.5 10.0 12.0 14.0 17.0 0.75 1.0 1.5 2 2.5 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 Dimetro (cm) cuerno grvido Longitud (cm) vescula amnitica 1.0 1.5 2.5 5.0 Longitud (cm) placentomas Presencia frmito arterial + + + + + Piso abdomen + + + + Ascenso Descenso Comienza descenso Crvix plvico Posicin tero

Finalmente, a continuacin se presentan algunas recomendaciones generales relacionadas con la palpacin: El diagnstico de gestacin debe ser el primer paso en cualquier examen genital. Tener la certeza de estar palpando las estructuras correctas del aparato reproductor o del feto y sus membranas y no otro rgano, como la vejiga, rumen o intestino, o confundir ovarios con placentomas. Manipular con delicadeza la pared rectal y los rganos reproductivos para evitar lesiones en ellos o en el embrin o feto y sus membranas. No debe indicarse ningn tratamiento en caso de duda de existencia de gestacin.

No se puede asegurar que la vaca est vaca si no se palparon ambos cuernos uterinos en su totalidad. No se puede diagnosticar como gestante a un animal si no se detect alguno de los cuatro signos positivos de preez. Al estimar la edad de la gestacin deber tenerse en cuenta que es solo aproximada pues hay variaciones individuales en el tamao de las estructuras utilizadas. La historia reproductiva del animal debe usarse como informacin adicional. Registrar los hallazgos y tratamientos de cada animal identificado en forma individual e inequvoca. En caso de no poder hacer un diagnstico definitivo por las caractersticas del aparato reproductor en ese momento, recomendar la reexaminacin en fecha posterior. Inseminacin artificial en la vaca Es una tcnica de mejoramiento gentico encaminada a obtener mayor produccin de carne o leche, mediante el uso de sementales de alto valor en estos caracteres de inters econmico, logrando un mejoramiento masivo en grandes poblaciones de ganado. Hay muchas quejas y objeciones sobre su adopcin, pero ms del 90% de stas provienen de su mal uso y del desconocimiento de algunos aspectos fundamentales. Las ventajas de la inseminacin artificial (I. A.) incluyen el mejoramiento gentico masivo, uso de semen de alta fertilidad, programacin de cruzamientos, mejor control de vientres, disminucin de peligros e inconvenientes del mantenimiento de toros, mejores programas de reproduccin y paricin y control efectivo de enfermedades venreas. En cuanto a desventajas, generalmente son relativas, como la necesidad de capacitacin del inseminador, costo del semen y el equpo, y necesidad de deteccin de celos por personal capacitado. En el ganado bovino productor de carne, especialmente el mantenido en condiciones extensivas, generalmente se realiza la I.A. en forma de empadres estacionales, en una o dos ocasiones al ao durante 2 3 meses en cada uno, siendo comn el empleo de la sincronizacin estral. En el ganado lechero explotado en condiciones intensivas normalmente se usa la I.A. a lo largo de todo el ao para mantener constante la produccin lctea, generalmente inseminando a celo no sincronizado o con sincronizacin de ovulaciones. Antes de comenzar los trabajos de I. A., se debe acostumbrar al personal y a los animales a los movimientos diarios que debern efectuarse para tal fin. Es esencial llevar actualizado un registro de datos de los animales con los eventos ms importantes desde el punto de vista de la reproduccin, y los datos de genealoga, enfermedades, vacunaciones, trastornos en la reproduccin, observaciones, etc. Los animales deben identificarse individualmente con tatuaje en la oreja y numeracin en aretes, medallas, o a fuego o fro en el cuerpo, que permita la lectura a cierta distancia. Es recomendable llevar un libro donde se asienten diariamente las inseminaciones realizadas. En caso de contar con el manejo electrnico de datos conviene tener un respaldo en tarjetas o libros. Es indispensable tener los animales en buena salud para obtener buenos resultados con la I. A., controlando las enfermedades infecciosas, parasitarias y funcionales del aparato reproductor. Para constatar el estado normal de los rganos genitales debe hacerse la palpacin de los animales destinados a la I.A. Esto permite desechar hembras que nunca llegarn a parir o tardarn en quedar preadas por presentar anomalas genitales, enfermedades o trastornos hormonales. La I.A. no hace milagros, no prea animales improductivos o incapacitados, y no debe culprsele de los fracasos de esta naturaleza. La palpacin permite separar los vientres preados y someter a I.A. solo a los vacos. La buena nutricin es uno de los aspectos ms crticos en la reproduccin. Las deficiencias tienen relacin con mala manifestacin de celos frtiles, mortalidad embrionaria, retencin de placenta, y anestro, que se traducen en baja eficiencia reproductiva. La eleccin de la poca de empadre en explotaciones extensivas es muy importante y depende de la disponibilidad de pasturas. En condiciones intensivas se maneja el periodo de espera voluntaria, que es el tiempo que se deja pasar despus del parto para empezar a inseminar y que generalmente va de 40 a 100 das. La deteccin de celos debe hacerse por lo menos dos veces al da y deber establecerse el momento de I.A. para cada animal con base en el inicio de su celo. Las tcnicas de I.A. existentes son la recto-vaginal y la del vaginoscopio o "torito". En el Cuadro 4 se muestran los resultados comparativos entre ambos mtodos.

Cuadro 4. Eficiencia Comparativa de los Mtodos de Inseminacin Artificial Mtodo Recto-vaginal1 Recto-vaginal2 Vaginoscopio2
1

No. Vientres 757 319 319

% Gestacin 55.0 53.3 37.2

vacas -2 vaquillas

En la tcnica recto-vaginal (ver Figura 4A y Figura 4B) se debe identificar al animal, sujetarlo, limpiar vulva y partes adyacentes con agua y secar con toalla de papel. Se descongela el semen en agua a 35C durante 30 segundos para la pajilla de 0.25 ml 40 segundos para la de 0.5 ml, se seca la pajilla, se corta el extremo sellado y se coloca en el instrumental de I. A., que se cubre con una funda estril. Se coloca una camisa o protector sanitario sobre la funda y se introduce el instrumental en la vagina de la vaca, dirigindolo hacia arriba para prevenir su entrada al divertculo suburetral.

Figura 4A. Mtodo rectovaginal. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Figura 4B. Mtodo del vaginoscopio. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

A continuacin se coloca la mano enguantada con los dedos en forma de cono y se introduce suavemente en el recto, venciendo la resistencia del esfnter anal, se elimina el estircol de la ampolla rectal y se sujeta el crvix. El aplicador de I.A. se enfrenta con la entrada del cuello, conocida como "flor radiada" y se jala un poco la camisa sanitaria para que pase el aplicador al conducto cervical. Se manipula el crvix para que el instrumental pase por los anillos cervicales hasta la porcin final del canal, depositando el semen en el cuerpo uterino. Si es imposible pasar el instrumento a lo largo de todo el crvix se deposita el semen lo ms profundo posible. Una vez expelido el semen se retira el instrumento y se desecha el equipo usado, lavando las manos y limpiando y desinfectando las botas y se llena el registro de I.A. En la tcnica del vaginoscopio (ver Figura 4) se descongela el semen de la forma descrita, se coloca en la vagina de la vaca un instrumento cnico desfinfectado que permite visualizar la flor radiada del crvix, y el aplicador de I.A. se enfrenta con la flor radiada y se introduce lo ms profundo posible en el conducto cervical, depositando el semen ah, se retira el instrumento y se desinfecta antes de usarlo en otro animal. La estimulacin de los genitales despus de la I.A. puede mejorar la fertilidad. En un estudio las vacas que recibieron masaje del cltoris durante 10 segundos tuvieron 58.4% de concepcin, contra 52.1% en vacas no estimuladas. Las vacas que recibieron estimulacin cervical y de cltoris ovularon 4.7 horas ms temprano que las no estimuladas. El semen congelado se conserva en nitrgeno lquido (-196 C) en un tanque metlico con doble pared (ver Figura 5), que soporta el fro extremo ya que entre ambas paredes hay un espacio aislante, al vaco. La tapa es de material aislante y no cierra hermticamente para permitir la evaporacin del nitrgeno.

Figura 5. Corte esquemtico de un tanque para semen. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Sincronizacin de estros y ovulaciones Entre las herramientas de manejo reproductivo que permiten eficientizar la I.A. se encuentran la sincronizacin de celos y la sincronizacin de ovulaciones. Los mtodos hormonales de sincronizacin se basan en el efecto luteoltico de la prostaglandina F2 alfa, el efecto lteo de los progestgenos o el control folicular y lteo con hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) y prostaglandina F2 alfa. Se pueden usar en conjunto con prcticas de manejo de la lactancia como el destete temporal o definitivo y la lactancia controlada. La sincronizacin estral con prostaglandina F2 alfa se basa en que esta destruye el CL. En el protocolo de 2 inyecciones, se inyectan todos los animales y se aplica una segunda dosis 11 - 14 das despus, procediendo a detectar celos e inseminar (am-pm). Este mtodo supone el uso de dos dosis de prostaglandina F2 alfa por cada animal tratado. Una alternativa es la inyeccin de todos los animales inseminando los que se detecten en celo (am-pm) tras la inyeccin. Las hembras no detectadas en celo reciben una segunda inyeccin en 11 - 14 das y se someten a deteccin de celos e I. A., reduciendo el nmero de dosis a 1.5. Una opcin similar consiste en detectar celos durante 6 das e I. A., aplicando una dosis de prostaglandina F2 alfa a las vacas no vistas en celo en ese periodo. En este caso se requieren 0.7 dosis por animal. En la Figura 6 se muestran estas opciones. Figura 6. Sincronizacin estral con prostaglandina F2 alfa. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Se ha llegado a recomendar la I.A. a tiempo fijo despus de la ltima inyeccin de prostaglandina, pero generalmente se obtiene baja fertilidad. La prostaglandina solo funciona en animales ciclando y con CL y son abortivas en animales gestantes. El empleo de progestgenos (progesterona o sus anlogos) se fundamenta en la accin inhibitoria de la progesterona para la manifestacin del celo. Al administrarlos en dispositivos vaginales (durante 7 das), implantes subcutneos (9 das) o por va oral (14 das) actan como un CL artificial y mientras ejercen su accin la vaca no manifiesta estro. Al retirarlos permiten la presentacin del celo. En animales que estn en anestro logran inducir el estro y en animales ciclando funcionan en cualquier etapa del ciclo estral. Se puede emplear la I.A. a tiempo fijo despus de terminar la administracin del progestgeno, pero se obtiene mejor fertilidad si se insemina a celo detectado (am-pm). En animales que probablemente estn en anestro y en vacas lecheras en produccin se recomienda aplicar gonadotropina corinica equina (eCG o PMSG) al momento de retirar el progestgeno para estimular una mejor respuesta al tratamiento. En las vacas lecheras se han observado mejores resultados si se aplica una dosis de prostaglandina 1 2 das antes de suspender el progestgeno (ver Cuadro 5 y Figura 7).

Cuadro 5. Protocolos de Sincronizacin Estral con Progestgenos Tipo de animal Vacas lecheras Vaquillas lecheras Vacas de carne Vaquillas de carne Progestgeno + + + + Prostaglandina + eCG + + +

Figura 7. Sincronizacin estral con progestgenos va subcutnea y vaginal. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

El progestgeno aplicado va oral es el acetato de melengestrol (MGA) usado en esponjas vaginales para sincronizar ovejas. En bovinos su uso original va oral es para suprimir el estro durante la engorda de hembras destinadas al sacrificio. Para sincronizar celos se da con 2 kg de concentrado en dosis de 0.5 mg/cabeza/da por 14 das. El celo se presenta 3 - 5 das despus de suspenderlo, pero no se recomienda inseminar pues hay muy baja fertilidad en este calor. Se aplica prostaglandina F2 alfa 17 - 19 das despus de la supresin del MGA, habiendo celo 5 - 7 das despus y se insemina a calor detectado (am-pm). El xito depende del consumo apropiado de la dosis, deteccin de celos, manejo y condicin corporal, pudiendo tener 50 - 70% de gestacin. El protocolo se presenta en la Figura 8. Figura 8. Sincronizacin de celos con MGA y prostaglandina. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Los esquemas de sincronizacin de ovulaciones han sido desarrollados para resolver el problema de escasa manifestacin del celo en poca de estrs calrico y han dado buenos resultados en hatos con mala deteccin de calores. El protocolo bsico, del que se han desprendido muchas variantes, consiste en la aplicacin de GnRH, seguida 7 das despus por prostaglandina F2 alfa y 2 - 3 das despus se realiza la I.A. a tiempo fijo o a celo detectado (am-pm), con o sin una nueva inyeccin de GnRH. El fundamento fisiolgico de estos tratamientos son las olas de crecimiento de grupos foliculares a lo largo del ciclo estral, en las que crecen rpido muchos folculos chicos y uno de ellos crece ms (hasta 12 - 15 mm de dimetro) y secreta estrgenos e inhibina, los cuales provocan la reduccin de secrecin hipofisiaria de FSH y la consecuente atresia de los otros folculos que venan creciendo, por lo cual a este se le llama "folculo dominante". Si este folculo alcanza la dominancia en presencia de un CL activo sufre tambin atresia y da paso a una nueva ola, cuyo folculo dominante llegar a ovular si el CL ya no es funcional. Por lo general se presentan 2 3 olas foliculares en cada ciclo estral (Figura 9).

Figura 9. Olas de desarrollo folicular en la vaca. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Al destruir el CL con la prostaglandina el folculo dominante que est presente en ese momento puede ovular. Al usar nicamente prostaglandina para sincronizar celos el estadio de desarrollo folicular al momento de aplicarla afecta el intervalo al estro. Si el folculo dominante est en crecimiento el celo se presentar en 2 - 3 das, pero si ya termin su maduracin o est en proceso de atresia el calor tardar 4 - 6 das en manifestarse (ver Figura 10).

Figura 10. Olas foliculares y efecto de la prostaglandina F2 alfa. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

La inyeccin de GnRH al inicio del tratamiento provoca un "pico" de LH que hace que el folculo dominante ovule o se luteinice y en 2 - 3 das inicia el crecimiento de una nueva ola folicular "sincronizada". El CL o el folculo luteinizado podr ser destruido en 7 das al aplicar la prostaglandina y el resultado es una mejor sincronizacin del celo y de la ovulacin, con lo que resulta factible la I.A. a tiempo fijo con mejor fertilidad (ver Figura 11). A veces la GnRH no luteiniza suficientemente el folculo (5 - 10% de las vacas) y se presenta el estro antes del da 6 7, en cuyo caso se hace la I.A. (ampm) y se suspende el tratamiento. Estos tratamientos son menos efectivos en vaquillas, aunque funcionan bien si se sustituye la GnRH con gonadotropina corinica humana (hCG).

Figura 11. Olas foliculares y efecto de la GnRH . - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Existen varios protocolos de sincronizacin de estros y ovulaciones con GnRH y prostaglandina. Uno de ellos es el Ovsynch (abreviatura de Ovulation Synchronization), que es muy usado en bovinos lecheros para inseminar a tiempo fijo sin detectar celos. El esquema es: GnRH - (7 das) - PGF2 alfa - (2 das) - GnRH - (8 - 18 horas) - I.A. (ver Figura 12). La segunda GnRH provocar la ovulacin del folculo dominante sincronizado. En general se obtiene 30 - 40% de gestacin contra 25% si hay 50% de deteccin de celos y 50% de fertilidad. Con este mtodo hay 100% de vacas inseminadas, que con 40% de fertilidad nos da 40% de gestacin sin deteccin de estros. La fertilidad mejora si se hace una "presincronizacin" (Presynch) para tener a las vacas en fase ltea temprana al iniciar el Ovsynch: PGF2 alfa - (14 das) PGF2 alfa - (12 - 14 das) - Ovsynch (ver Figura 12). Hasta un 20% de las vacas puede presentar celo los das 6 - 9 del Ovsynch, se inseminan (am-pm) y se suspende el tratamiento. Figura 12. Protocolos de Presincronizacin y Sincronizacin de Ovulacin. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . A fin de simplificar un poco el Ovsynch se desarroll el protocolo Cosynch (Coordinated Synchonization), en el que se reduce de 4 a 3 el nmero de veces que se maneja el ganado al realizar la inseminacin al mismo tiempo que se aplica la segunda GnRH: GnRH - (7 das) - PGF2 alfa - (2 das) - GnRH + I.A. (ver Figura 13). Se usa ms en ganado productor de carne, aunque se puede emplear en ganado lechero, con o sin presincronizacin. Los resultados son similares al Ovsynch, siendo posible obtener 40 - 45% de gestacin en ganado de carne. En Ovsynch y Cosynch la fertilidad es mejor con I.A. a calor detectado (am-pm). Figura 13. Sincronizacin coordinada de ovulacin e inseminacin artificial. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . El mtodo Selectsynch (Selective Synchronization) se desarroll con base en los resultados obtenidos al inseminar a calor detectado las vacas sometidas a los tratamientos anteriores. El protocolo es: GnRH - (7 das) - PGF2 alfa - I.A. al calor detectado (am-pm). La observacin para deteccin de celos se hace desde desde 24 - 48 horas antes de la prostaglandina y se contina por 5 - 7 das. Si hay estro antes de la prostaglandina se debe suspender el tratamiento e inseminar (am-pm). Como algunas hembras no manifiestan el celo despus del tratamiento la alternativa para estos casos es la de detectar celos hasta 48 - 60 horas despus de la PGF2 alfa, inseminar las que manifiesten celo y las que no lo hicieron se inseminan a las 60 - 72 horas aplicndoles GnRH al momento de la I. A., convirtiendo el tratamiento en un Cosynch con unas horas ms entre la prostaglandina y el servicio. En la Figura 14 se presentan las dos alternativas de este mtodo.

Figura 14. Sincronizacin Selectiva de Estros y Ovulaciones. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

En el Cuadro 6 se muestran los resultados obtenidos con las dos opciones de Selectsynch inseminando a celo detectado o con inseminacin a tiempo fijo con o sin la aplicacin de GnRH a la I.A. Los mejores resultados se obtuvieron con calor observado y despus cuando se insemin en forma fija a 72 horas.
Cuadro 6. Resultados Obtenidos con Diversas Opciones de Selectsynch Opcin de Inseminacin A celo detectado (am-pm) Fija a 72 horas con GnRH Fija a 72 horas sin GnRH Fija a 80 horas con GnRH Fija a 80 horas sin GnRH Gestacin 61% 54% 55% 39% 47%

El Selectsynch es ms sencillo y barato que Ovsynch y Cosynch, pues solo 30 - 40% de las vacas reciben la segunda inyeccin de GnRH, pero requiere deteccin de celos. La mayora de las vacas muestran calor 2 - 4 das despus de la prostaglandina. Con presentacin de celos de 70 - 75% y fertilidad de 60 - 70% (mayor que en los otros mtodos por el hecho de inseminar en un mejor momento) se obtiene 45 - 50% de gestacin. El Servicio Programado Modificado (Figura 15) es una variante de Presynch (solo se aplica una prostaglandina) combinado con Selectsynch (o Cosynch u Ovsynch). El protocolo consiste en: PGF2 alfa - (14 das) - Selectsynch, Ovsynch o Cosynch. Figura 15. Servicio Programado Modificado. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . Es factible el empleo de otros mtodos combinados, como el uso de progestgenos con Ovsynch, Cosynch o Selectsynch. El protocolo en estos casos sera: Insertar dispositivo vaginal e inyeccin de GnRH - (7 das) - remover dispositivo e inyectar prostaglandina, continuando con el mtodo respectivo de sincronizacin de ovulaciones. En el ganado bovino productor de carne se tienen los esquemas de MGA-Selectsynch, con el progestgeno a largo o corto plazo. El mtodo de MGA largo plazo - Selectsynch (ver Figura 16) est recomendado para vacas con poco tiempo de paridas y consiste en: MGA por 14 das - (12 das) - selectsynch - I.A. al calor, detectando celos durante 5 - 7 das despus de la prostaglandina (opcin 1) o I.A. a 72 - 80 horas a las no detectadas (opcin 2). Con este tratamiento se resuelve el anestro y se induce el estro subfrtil antes de iniciar el empadre. El MGA hace una presincronizacin para optimizar el Selectsynch. Con este mtodo y buen manejo se obtiene 50 - 65% de gestacin; con I.A. a tiempo fijo los resultados bajan un poco. No se recomienda inseminar si hay calor en los 10 das siguientes al retiro del MGA. Figura 16. Sincronizacin Estral con MGA a Largo Plazo y Selectsynch. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . Una excelente opcin para las vacas que parieron al final de la poca de partos y no encajan en el protocolo de largo plazo es el MGA corto plazo - Selectsynch (ver Figura 17), que consiste en: Selectsynch (GnRH el da 0 y PGF2 alfa el da 7) y la aplicacin simultnea de MGA desde el da 1 (da siguiente a la GnRH) hasta el da 6 (da anterior a la prostaglandina). Se resuelve el anestro y se evitan celos tempranos. Solo se detectan calores de las 24 a las 60 horas posteriores a la PGF2 alfa y se inseminan (am-pm) las vacas detectadas. A las 60 - 72 horas se inseminan las no vistas en celo y se inyectan con GnRH . Puede bajar el porcentaje de vacas en celo pero el porcentaje total de gestacin tiende a mejorar al aumentar la fertilidad de la I.A. fija a 60 - 72 horas. Se obtiene igual o mejor fertilidad que con solo Selectsynch pero con menos tiempo de deteccin de celos. Figura 17. Sincronizacin estral con MGA a corto plazo con selectsynch. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Otra buena opcin para vacas que parieron tarde y no se adaptan al MGA a largo plazo o cuando no se puede dar MGA por alguna razn, es el Selectsynch Plus que consiste en: GnRH - (7 das) - selectsynch (ver Figura 18). El GnRH inicial da oportunidad de resolver el anestro y mejora la sincrona del desarrollo folicular, no evita los celos tempranos pero mejora hasta 15% la gestacin al aumentar la fertilidad de las vacas inseminadas a 72 horas. Figura 18. Sistema Selectsynch Plus. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

Recientemente se ha desarrollado un nuevo esquema llamado Heatsynch (abreviatura de "sincronizacin de calores"), que es similar al Ovsynch pero se utiliza estradiol (1 mg) en vez de la segunda aplicacin de GnRH . El esquema es: GnRH - (7 das) - PGF2 alfa - (1 da) - estradiol - (2 das) - I.A. (ver Figura 19). En el mtodo Ovsynch la segunda GnRH estimula el pico de LH que provoca la ovulacin; en condiciones fisiolgicas la secrecin de GnRH que va a causar el pico ovulatorio de LH se produce por retroalimentacin del estradiol producido en el folculo dominante. La razn para utilizar el estradiol es que es mucho ms barato que la GnRH , pero su efecto es ms lento. Mientras que la GnRH provoca el pico de LH una hora despus de su aplicacin, el estradiol tarda 40 horas en ejercer el mismo efecto, por lo cual se aplica solo 24 horas despus de la prostaglandina y la inseminacin se hace hasta 48 horas despus de inyectarlo. Figura 19. Mtodo Heatsynch precedido de Presynch. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . Como el estradiol por si mismo provoca la conducta de receptividad sexual hay mayor proporcin de vacas que manifiestan celo que con Ovsynch. Si el celo se presenta antes de las 48 horas de aplicado el estradiol se procede a inseminar (am-pm). Se han logrado mejores porcentajes de gestacin cuando el Heatsynch es precedido de Presynch. El Ovsynch es ms efectivo en vacas con quistes y el Heatsynch en vacas con celo unos das antes del tratamiento. La combinacin de los mtodos hormonales con el manejo de la lactancia en vacas productoras de carne que entran a empadre con cra mejora los resultados en los programas de sincronizacin de celos y ovulaciones. El anestro lactacional es de duracin variable y depende de varios factores aparte del amamantamiento. El destete suprime este factor inhibidor de la ciclicidad estral y termina el anestro en caso de no haber otra causa. La causa del anestro lactacional es que el amamantamiento de la cra, adems de estimular la liberacin de oxitocina por la hipfisis posterior para la "bajada" de la leche y de prolactina por la hipfisis anterior, induce la secrecin de endorfinas en el hipotlamo, las cuales inhiben la liberacin de GnRH . Al no haber GnRH no se van a producir y liberar en cantidades suficientes y en el momento oportuno la FSH y la LH y por lo tanto no habr en ovarios un efecto estimulante del crecimiento, diferenciacin, maduracin y ovulacin del folculo. Conforme crece el becerro empieza a ingerir otros alimentos aparte de la leche y ya no se amamanta tan frecuentemente. La disminucin de la frecuencia de amamantamiento hace que se liberen menos endorfinas y paulatinamente se quita la inhibicin que ejercen sobre el hipotlamo y se va liberando GnRH en pulsos cada vez ms amplios y frecuentes, lo que hace que se liberen FSH y LH, que viajan al ovario y estimulan el proceso completo de foliculognesis culminando con la ovulacin, con lo que se reinicia la actividad ovrica posparto. Como el amamantamiento de la cra no es el nico factor involucrado en el anestro lactacional, a veces el reinicio de actividad ovrica se da hasta el destete o despus del mismo, en ocasiones bastante despus debido principalmente a mala condicin fsica de la vaca por deficiencias nutricionales, infestaciones parasitarias o enfermedades infecciosas o metablicas. Existen varias prcticas de Manejo de la Lactancia que pueden usarse para sincronizar o inducir celos. El Destete Definitivo se hace tradicionalmente a los 7 - 8 meses de edad de la cra, lo cual resulta muy tardo para lograr la meta del intervalo entre partos de un ao. Se ha usado el Destete Precoz a los 2 meses, que resulta muy efectivo para terminar con el anestro y gestar pronto a las vacas, pero es imprctico pues los becerros deben criarse artificialmente. El Destete Temporal, que consiste en retirar la cra (con edad de por lo menos un mes) durante 2 - 4 das tras los cuales se regresa con la madre, es bastante efectivo y solo requiere atender a los becerros durante unos das. En la Figura 20 se

muestra la combinacin del Ovsynch con Destete Temporal. Figura 20. Uso conjunto de Sincronizacin Estral Hormonal (Ovsynch) y una prctica de Manejo de la Lactancia (Destete Temporal). - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . En el Cuadro 7 se muestran los resultados comparativos de dos mtodos hormonales y su combinacin con Destete Temporal durante 48 horas.
Cuadro 7. Comparacin de Mtodos Hormonales de Sincronizacin de Ovulacin con y sin Destete Temporal Tratamiento Ovsynch Ovsynch + destete 48 horas Cosynch Cosynch + destete 48 horas Gestacin 52% 62% 55% 63%

Los mejores resultados se obtienen cuando se usa la Lactancia Controlada, que es la restriccin, desde el momento del nacimiento, del amamantamiento a solo unas horas diarias en vez de que la cra est las 24 horas con su madre. La disminucin consecuente de la frecuencia de amamantamiento es el factor determinante para que se reinicie pronto la actividad ovrica posparto y prcticamente no se presenta el anestro lactacional (siempre y cuando la vaca est sana y en buena condicin fsica). La eleccin del mtodo de sincronizacin de estros o de ovulaciones depender de las condiciones climticas, de manejo, econmicas y sanitarias particulares de cada explotacin, a fin de aprovechar al mximo los beneficios de la sincronizacin estral y las mltiples ventajas que ofrece la inseminacin artificial. Descongelacin y transferencia directa de embriones La Transferencia de Embriones (T.E.) es otra tcnica para el mejoramiento gentico del ganado, que consiste en provocar que una vaca o vaquilla "donadora", mediante un tratamiento hormonal e inseminacin con un toro probado con un alto valor gentico, produzca varios embriones que siete das despus le son extrados para ser transferidos a otras hembras "receptoras", que previamente fueron sincronizadas con el calor de la "donadora". La receptora no transmite ninguna caracterstica gentica a la cra y slo sirve para mantenerla hasta el parto y durante la lactancia. En condiciones normales, cada vaca produce una sola cra al ao, lo cual significa que cuando mucho producir 6 a 8 becerros durante su vida. A travs de la I.A. se pueden obtener miles de cras de un toro; con la transferencia de embriones se han llegado a tener ms de cien cras de una vaca durante su vida productiva, lo cual facilita el mejoramiento gentico, con el consecuente incremento de la produccin de carne y/o leche. Entre las ventajas de la T.E. podemos citar: Seleccin gentica rigurosa por el lado materno para lograr mayor progreso. Se pueden obtener cras de vaquillas que an no alcanzan la edad y peso para cargarse, ya que ser la receptora quien se encargue de mantener la preez y parir la cra. Es posible obtener becerros de vacas de alta calidad que por enfermedad o edad avanzada ya no son capaces de producir por si mismas una cra. Con la ayuda de la biparticin de embriones se pueden obtener partos gemelares y aumentar la cosecha de becerros, sin el riesgo de obtener hembras estriles ya que ambas cras, por proceder del mismo embrin, sern del mismo sexo. Es una excelente ayuda para evaluar la capacidad fertilizadora de los sementales, as como para determinar si son portadores de algunos defectos hereditarios.

A travs del congelamiento de embriones y la fertilizacin en el laboratorio se pueden tener cras de donadoras que ya murieron. Como desventajas podemos mencionar las siguientes: Se requiere una fuerte inversin inicial debido al costo de hormonas, equipo y mano de obra, as como de la alimentacin de donadoras y receptoras. El procedimiento tiene infinidad de detalles que deben realizarse a la perfeccin para lograr buenos resultados, por lo que se requiere personal altamente capacitado. La principal desventaja es la imposibilidad para predecir los resultados, ya que hay mucha variacin en la produccin de embriones por cada donadora; adems de que muy fcilmente una pequea falla en el proceso reduce drsticamente el porcentaje de gestacin. El procedimiento de la T.E. est formado por los siguientes puntos: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Seleccin de donadoras, sementales y receptoras. Superovulacin e I.A. de las donadoras. Sincronizacin estral donadora - receptoras. Recoleccin y evaluacin embrionaria. Transferencia a la receptora. Congelacin, refrigeracin y microciruga embrionaria.

La donadora debe ser un animal sobresaliente en produccin de carne y/o leche, con buenos antecedentes reproductivos, presentando ciclos estrales normales, con buena fertilidad, libre de enfermedades, sometida a un programa de vacunacin y desparasitacin y en perfectas condiciones fsicas. Deben emplearse toros probados, en produccin y tipo, para garantizar la calidad de las cras. Las receptroras pueden ser de cualquier raza o cruza, sin importar su produccin, jvenes, sanas, con buen desarrollo corporal, buena fertilidad, en perfecto estado nutricional, dciles, fciles de manejar, vacunadas, desparasitadas y con produccin lctea suficiente para criar hasta el destete al becerro. La superovulacin es la induccin de ms de una ovulacin (que es lo que sucede normalmente), mediante la aplicacin de hormonas que estimulan los ovarios de la vaca, con la finalidad que al inseminarla produzca ms de un embrin. Para esto se usan FSH y LH (inyectadas cada 12 horas durante 4 das a partir del da 10 del ciclo estral) que, al contrarrestar los efectos de los estrgenos e inhibina, hacen que en ambos ovarios de la vaca se desarrollen varios folculos dominantes, los cuales ovulan despus de que la donadora sale en calor al aplicarle prostaglandina dos das despus de haber empezado el tratamiento. Tambin puede utilizarse para inducir la superovulacin la gonadotropina srica de yegua gestante (eCG o PMSG) que por su larga vida media se aplica en una sola inyeccin el da 10 del ciclo seguida de prostaglandina dos das despus. La eCG adems de su fcil manejo tiene la ventaja de ser ms barata que la FSH-LH, pero la gran desventaja de que, tambin por su larga vida media, estimula exageradamente los ovarios y por lo general se obtienen menos embriones y algunas donadoras desarrollan quistes ovricos persistentes. Normalmente se emplea la I.A. de la donadora, dando un servicio a las 12 horas y otro a las 24 horas de detectado el celo. Esta doble inseminacin se debe a que el perodo de ovulacin puede llegar a ser de hasta 24 horas en las donadoras superovuladas. En casos especiales, como en ganado de lidia o cuando se tiene un semental que su semen no se puede congelar, se usa la monta natural y se recomienda que el toro permanezca con la donadora desde la aplicacin de la prostaglandina hasta que finalice el celo a fin de que tenga la oportunidad de darle varios servicios. Para sincronizar los estros entre la donadora y las receptoras se pueden utilizar prostaglandina, progestgenos o sincronizacin de ovulaciones (GnRH y prostaglandina), utilizando de preferencia el Selectsynch (opcin sin la segunda GnRH) para no inhibir el celo de la receptora, pues es esencial detectar el celo para determinar el momento ptimo de la T.E. Las receptoras deben estar en celo al mismo tiempo que la donadora o cuando mucho un da antes o uno despus que ella; si lo manifiestan en otro da no se podrn usar para la T.E. pues su medio ambiente uterino "asincrnico" no ser favorable para la supervivencia del embrin. Los embriones se recolectan mediante un lavado no quirrgico del tero de la donadora, empleando para ello una solucin

salina amortiguada con fosfatos, a la que se adicionan albmina srica y antibiticos. Se le aplica anestesia epidural (ver Figura 21) en la base de la cola para evitar las contracciones del recto. Con la tcnica recto-vaginal se introduce hasta el tero una sonda de ltex que se fija mediante el inflado de un globo que tiene cerca de la punta; con mangueras de hule se introduce la solucin al tero, por palpacin se da masaje a los cuernos uterinos para desprender los embriones y se extrae la solucin hacia un filtro que retiene a los embriones, dejando pasar slo el lquido (el filtro tiene una malla con orificios de 75 micras mientras que el embrin, junto con su zona pelcida, mide 200 micras). El proceso se repite varias veces hasta agotar un litro de solucin para tener la seguridad de que salieron los embriones.

Figura 21. Analgesia Epidural para Donadoras y Receptoras. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

El filtro se vaca una caja de Petri y se enjuaga a presin con la misma solucin usada para el lavado, los embriones se localizan en un microscopio estereoscpico a 15 aumentos y se van pasando con una micropipeta a otra caja de Petri ms pequea que contiene la misma solucin pero con ms albmina y se procede a hacer su evaluacin, observndolos ahora a 40 ms aumentos. Slo sirven para transferencia aquellos que estn en un estado de desarrollo de mrula o blstula, que es lo normal a los 7 das despus de la fecundacin. Los vulos que no fueron fecundados y los embriones de escaso desarrollo son desechados. Los embriones transferibles pueden tener ciertas diferencias en su desarrollo y en sus caractersticas morfolgicas, por lo que se les clasifica de la siguiente manera: Calidad 1. Excelente, sin ningn defecto. Calidad 2. Bueno, con defectos leves. Calidad 3. Regular, con defectos mayores, pero apto para ser transferido. Calidad 4. No transferible, muerto o con defectos que hacen que no sea apto para la transferencia. Todos estos embriones pueden ser transferidos en "fresco" (inmediatamente) o refrigerados (a 4C hasta por 24 - 48 horas), pero slo los de calidad 1 y 2 pueden ser congelados, ya que los de calidad 3 no resisten la congelacin. Desde hace unos 15 aos ya no es necesario operar a las receptoras para transferir el embrin, se usa el mtodo no quirrgico, parecido a una I.A. Se introduce el embrin en una pajilla de 0.25 ml similar a las empleadas para el semen, se coloca en el aplicador de embriones con su funda y su protector vaginal y, previa anestesia epidural de la receptora (Figura 21), se introduce con el mtodo rectovaginal hasta la parte ms profunda de el cuerno uterino del mismo lado donde se encuentra el CL (palpado previamente), responsable de mantener la gestacin. Se transfiere un solo embrin, ya que si depositan dos se corre el riesgo de que sean macho y hembra y sta puede resultar estril, adems del riesgo de las mltiples complicaciones que se pueden presentar en una gestacin gemerlar. La refrigeracin permite tener viables los embriones hasta por 24 - 48 horas en un refrigerador casero o de laboratorio, a temperatura de 4C (sobre cero). Para la congelacin, que mantiene viables a los embriones durante aos, se requiere aadir un crioprotrctor, que durante mucho tiempo fue el glicerol. Actualmente se usa el etiln gicol, con lo que se ha logrado simplificar el proceso de transferencia hasta hacerlo casi tan sencillo como la I.A. Antes de congelar, el embrin se coloca en una pajilla previamente identificada con los datos de la donadora y del embrin, y con la ayuda de una congeladora manual o computarizada se enfra hasta -7C (bajo cero), se provoca que empiece a formarse hielo en la solucin (induccin de la cristalizacin), luego se enfra ms lentamente hasta -30C y finalmente se pasan las pajillas al tanque con nitrgeno lquido a -196C, donde se almacenarn hasta ser descongelados y transferidos. Los embriones se descongelan sacando la pajilla del tanque y colocndola a temperatura ambiente por 12 segundos y en bao mara a 35C durante otros 12 segundos. Cuando se usa glicerol (an hay embriones congelados con este crioprotector) se debe extraer el embrin de la pajilla y, observndolo al microscopio, se pasa por varias soluciones con concentraciones decrecientes de sacarosa para retirarle el glicerol y para que se rehidrate (en la congelacin hay una marcada deshidratacin para que no se congele agua dentro de las clulas), se vuelve a evaluar su calidad y se transfiere. Con el etiln glicol no es

necesario retirarlo de la pajilla y solo se descongela el embrin y se transfiere directamente a la receptora. Esta es la tcnica conocida como transferencia directa de embriones congelados. Con esta nueva tcnica, el embrin se rehidrata en la receptora, no se requiere microscopio ni embrilogo y se hace a nivel de campo, a celo natural o sincronizado, cuando existan las condiciones ptimas para lograr altas tasas de preez, para lo cual debe tenerse muy buen manejo y mucha atencin a los detalles. Con la simplificacin del mtodo se estn capacitando los inseminadores para hacer las transferencias. Las habilidades necesarias para hacerlo son pasar el crvix con el aplicador hasta el cuerno uterino y palpar el CL en el ovario para hacer la T.E. al cuerno uterino de ese lado, ya que si se deposita en el otro baja mucho la tasa de preez. La sola presencia del CL no es criterio suficiente para hacer la T.E. directa de un embrin congelado. Si la receptora, an habiendo sido sometida a sincronizacin estral, no se detect en celo en el momento justo (7 dias antes de descongelar el embrin) no se descongela el embrin y ser necesario hacer otra sincronizacin o detectar el celo natural para realizar la T.E. en fecha posterior. Para la transferencia directa de embriones es aconsejable aplicar anestesia epidural a la receptora (Figura 21) antes de descongelar el embrin, para eliminar las contracciones rectales durante el procedimiento. Se requiere mucha atencin a detalles como mantener al mnimo el tiempo entre descongelar y transferir, descongelar el embrin cerca de la receptora, no exponer embrin descongelado a calor o frio extremos (lo ideal es descongelar en un lugar con temperatura entre 15 y 30C), ya que fuera de este rango hay efectos negativos sobre la tasa de gestacin. La limpieza es de extrema importancia, se debe usar siempre protector vaginal sobre el aplicador. Debido al auge que est alcanzando el empleo de la transferencia directa de embriones congelados, a continuacin tenemos un resumen de los pasos para llevarla a cabo: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. La receptora debe haber sido detectada en celo 7 das antes de la transferencia. Palpar ovarios para hallar el CL funcional antes de descongelar el embrin. Aplicar la anestesia epidural antes de descongelar el embrin. Colocar todos los implementos necesarios cerca de la receptora. Identificar el embrin por el rtulo en el bastn. Sacar la pajilla del termo de nitrgeno lquido y mantenerla al aire 12 segundos. Colocar la pajilla en agua a 35C por 12 segundos. Sacar pajilla del agua y secarla. Cortar la punta sellada de la pajilla en ngulo recto a unos 3 mm del extremo. Colocar la pajilla en el aplicador de T.E.11. Colocar la funda sobre el aplicador, apretando para asegurar la pajilla. Colocar sobre la funda un protector vaginal o camisa sanitaria. Pasar el aplicador por vulva, vagina y crvix hasta el cuerno uterino del lado del CL. Desenrollar el cuerno y depositar el embrin de 12 a 18 cm dentro del cuerno.

La biparticin embrionaria consiste en dividir los embriones de calidad 1 2 por la mitad para formar dos hemiembriones y aumentar as el nmero de cras de cada donadora. Se efecta con un aparato llamado micromanipulador, que permite sujetar el embrin para cortarlo con una micronavaja. Las dos mitades pueden transferirse una a cada receptora o las dos a la misma, ya que ambas cras sern del mismo sexo. Con el empleo de la transferencia de embriones podemos esperar estos resultados: 4 5 embriones transferibles por donadora superovulada. 33% de las donadoras superovuladas no producen embriones. 65 a 70% de gestacin con embriones frescos o refrigerados calidad 1 y 2. 30 a 35% de preez con embriones frescos o refrigerados calidad 3. 50 a 60% de gestacin con embriones congelados. 50 a 65% de gestacin con embriones bipartidos. 3 4 superovulaciones seguidas a cada donadora (con intervalo de 60 a 90 das), antes de gestarla para darle un ao de descanso reproductivo. En resumen, la T.E. es una tcnica reproductiva para acelerar el mejoramiento gentico de los hatos aprovechando los vientres de animales de menor calidad para llevar a trmino gestaciones de becerros con alto potencial gentico. Es una

tcnica que bien aplicada puede significar un gran avance en el progreso gentico de los hatos ganaderos y que actualmente tiene la ventaja de poder realizarse completamente a nivel de campo, sin necesidad de operar a los animales y en forma casi tan sencilla como una I.A. al emplear embriones congelados para transferencia directa.

Eficiencia reproductiva del ganado bovino El evaluar el trabajo reproductivo de un hato bovino representa la culminacin del proceso. Cuando se realiza en forma manual es un evento un cuanto fastidioso, pero los beneficios que aporta son muy grandes. Afortunadamente existen muchos programas computacionales para facilitar esta labor. Solo mediante la evaluacin sistemtica del proceso reproductivo se pueden detectar fallas que normalmente pasaran desapercibidas. Los registros reproductivos son la base de la evaluacin de la eficiencia reproductiva. Deben ser lo ms sencillos que se pueda, captar la informacin necesaria, ser flexibles para que se aumente o disminuya con facilidad el nmero de datos o animales, y objetivos, duraderos y econmicos. Los registros electrnicos debern respaldarse siempre con registros en papel. Cada vaca debe tener un nmero individual de identificacin. Para cada animal existir una tarjeta electrnica y una fsica en las que se anotarn, usando generalmente abreviaturas, sus eventos reproductivos. En la Figura 22 se muestra la tarjeta fsica que comnmente se usa, que es sumamente sencilla. Las tarjetas fsicas se pueden ordenar por nmero de identificacin progresivo del animal o por eventos reproductivos como vacas paridas, vacas a servir, vacas gestantes y vacas secas. Los programas de cmputo manejan la informacin individual en un gran nmero de formas.

Figura 22. Tarjeta de Registro Reproductivo en Ganado Bovino. - To view this image in full size go to the IVIS website at www.ivis.org . -

En las tarjetas fsicas la informacin se puede anotar usando tinta de diferentes colores, adems de jinetillos de colores que se insertan sobre la porcin de la tarjeta donde se sealan los meses del ao. En el Cuadro 8 se presentan los colores de tinta y jinetillos ms usados, mientras que en el Cuadro 9 se muestran las claves ms utilizadas.

Cuadro 8. Asignacin de Colores para Diferentes Eventos Reproductivos Color Rojo Verde Amarillo Azul Negro Blanco Anotacin Parto Gestante Revisin Vaca Jinetillo Parto Gestante Servida Problema Seca

Cuadro 9. Claves Reproductivas de Uso Ms Frecuente Abreviatura X P A DG IA MD 1S, 2S, etc... TE U UN UE UT PIO MET OD OI CL CH DOV F Q RP SALP CERV NEI OL G (+) V (-) CSS ADH Tx SO Palpacin va rectal Parto Aborto Diagnstico de gestacin Inseminacin artificial Monta directa Primero, segundo servicio, etc. Transferencia de embriones tero tero normal tero edematoso tero turgente Piometra Metritis Ovario derecho Ovario izquierdo Cuerpo lteo Cuerpo hemorrgico Depresin ovulatoria Folculo Quiste Retencin de placenta Salpingitis Cervicitis Ninguna estructura identificable Ovarios lisos Gestante Vaca Calor sin servicio Adherencias Tratamiento Superovulacin Descripcin

Aunado a la tarjeta de control reproductivo, existen otros formatos colaterales que son de una enorme utilidad, como la hoja de control reproductivo y la de transporte de datos. La primera consiste en un listado de todas las vacas con su nmero, fecha del ltimo parto, estado reproductivo actual (gestante, servida o vaca) y la produccin de leche. Esta hoja permite detectar animales que deben ser revisados y es conveniente obtenerla cuando menos cada 15 das.

La hoja de transporte se llena antes de efectuar el examen reproductivo, cuyos resultados se anotan a nivel de campo y se pasan a las tarjetas de control y a la computadora. Tambin se debe llevar un listado mensual de servicios, anotando nmero de la vaca, nmero de servicio, inseminador, toro utilizado y fecha del servicio. Se complementa con el diagnstico de gestacin para obtener las tasas de fertilidad. Existen muchos parmetros reproductivos a evaluar, por lo que se debe determinar cuales se van a usar en cada hato. En el Cuadro 10 se presentan algunas metas de reproduccin, asi como la forma de calcular los parmetros usados.
Cuadro 10. Principales Parmetros y Metas Reproductivas Utilizados para Evaluar la Eficiencia Reproductiva del Ganado Bovino Lechero Parmetro Edad a primer servicio Peso a primer servicio Edad a primer parto Peso a primer parto Intervalo parto - 1er celo Intervalo parto - 1er servicio Das abiertos Intervalo entre partos Servicios por concepcin Fertilidad Gestacin Gestacin Efectiva Vacas gestantes al DG Desecho por reproduccin Gestantes con < 3servicios Retencin placentaria Abortos Desecho involuntario Desecho total Forma de calcular edad a 1er servicio/total de vaquillas peso a 1er servicio/total de vaquillas edad a 1er parto/total de vaquillas peso a 1er parto/total de vaquillas das a primer celo/total de vacas das a primer servicio/total de vacas dias parto a concepcin/total de vacas das entre dos partos/total de vacas servicios preadores/total de servicios vacas preadas/vacas servidas x 100 vacas gestantes/expuestas x 100 % celos detectados x % fertilidad gestantes al DG/diagnosticadas x 100 desecho reproduct./total desecho x 100 gestantes < 3 servicios/total gest. x 100 vacas con retencin/total partos x 100 abortos/total preeces x 100 desecho involuntario/total vacas x 100 desecho total/total vacas x 100 Meta Menor a 15 meses Mayor a 340 Kg 24 meses 545 Kg Menos de 45 das Menos de 60 das Menos de 100 das Menos de 380 das Menos de 2.0 Mayor a 50% Mayor a 50% Mayor a 50% Mayor a 85% Menor a 6% Mayor a 85% Menor a 10% Menor a 6% Menor a 15% 25 - 30%

En el Cuadro 11 se presentan los criterios para evaluar los principales parmetros utilizados al determinar la eficiencia reproductiva del ganado bovino lechero.

Cuadro 11. Evaluacin de los Principales Parmetros Reproductivos del Ganado Bovino Lechero Parmetro/Evaluacin Das parto - 1er servicio Fertilidad Das abiertos Vacas problema1 Vacas con < 100 DA2 Vacas problema > 100 DA2 IEP 3 (meses)
1

Malo > 71 < 35% > 131 > 7% > 46% > 5% > 13.6

Bueno 61 - 70 36 - 45% 116 - 130 5 - 6% 31 - 45% 3 - 4% 12.9 - 13.5

Muy bueno 56 - 60 46 - 55% 101 - 115 3 - 4% 26 - 30% 2% 12.5 - 12.8

Excelente < 55 > 56% < 100 < 2% < 25% < 1% < 12.4

con > 21 das de EV sobre la meta y sin servicio -2 Das abiertos - 3 Intervalo entre partos

Los signos que indican un comportamiento reproductivo deficiente en el ganado lechero y que deben alertar para solucionar problemas existentes son: > 12.5 a 13.0 meses de intervalo entre partos < 60% de becerros nacidos del primer servicio < 92% de vacas con cra viva con < 3 servicios > 10% de vacas vacas totales < 50% vacas con primer celo a < 50 das posparto > 1.75 servicios/concepcin para lograr 92% de partos > 10% vacas con ciclos estrales de < 18 > 24 das < 70% vacas gestantes a los 100 das en leche < 92% vacas preadas a los 150 das en leche Existen varios ndices para evaluar la eficiencia reproductiva de un hato. A continuacin se mencionan tres de valor prctico y fciles de calcular. El estado reproductivo del hato se calcula as HRS = 100 - [DAVP x VP/TV)1.75], en donde: HRS = Estado reproductrvo del hato, DAVP = Das abiertos para vacas problema, VP = Vacas problema con ms de 100 das abiertos y TV = Total de vacas en el hato. La meta es que sea mayor a 80 dias. Los das perdidos por falta de deteccin de calores se calculan con la siguiente frmula DP = PDA - EV - 11 - [(S/C - 1) 21], en donde: DP = Das perdidos por falta de deteccin de calores, PDA = Promedio de das abiertos del hato, EV = Espera voluntaria en das antes de realizar el primer servicio, 11 = 11 das correspondientes a medio ciclo estral y S/C = Servicios por concepcin. Este ndice tiene diversas aplicaciones. Con l se puede saber el porcentaje de celos que son observados; para esto los das perdidos por falta de deteccin son divididos entre 21 das; esto representa el nmero de servicios que no se dieron por falta de deteccin. Si estos se suman a los servicios por concepcin da el total de servicios potenciales. Si se dividen los servicios por concepcin entre el total de servicios y se multiplican por cien se obtendr el porcentaje de celos detectados.

Para el ndice de deteccin de celos primero se calcula el nmero de celos posibles con la frmula: CP = [PDA - (EV + 10)] / 21, en donde: CP = Nmero de celos posibles, PDA = Das abiertos promedio del hato y EV = Espera voluntaria antes del primer servicio. Con esto se calcula el ndice de deteccin de celos: IDE =(S/C / CP) x 100, en donde: IDE = ndice de deteccin de celos, S/C = Servicios por concepcin y CP = Nmero de celos posibles. La meta es que sea mayor al 75%. En el ganado bovino productor de carne el manejo es con base a los empadres estacionales, por lo cual es imposible aplicar algunos de los parmetros indicados para el ganado lechero. Normalmente se hace el diagnstico de gestacin despus de cada empadre y los vientres se dividen en gestantes y vacas. Las preadas se manejan por separado en el grupo de vacas cargadas y las vacas entran al siguiente empadre, tras el cual se hace la respectiva palpacin para diagnosticar gestacin, separando nuevamente las gestantes y las vacas. Un buen criterio para eliminar animales de baja fertilidad es desechar aquellas vacas que resulten vacas en dos empadres consecutivos, ya que pudo haber tenido cra al pie en el primero pero en el segundo debe haber estado ya desahijada. La meta general de lograr intervalos entre partos de 12.5 a 13.0 meses es posible cuando hay buena alimentacin, manejo de la lactancia, tratamientos hormonales y empadres cortos controlados. En el Cuadro 12 se muestran los criterios de evaluacin de los parmetros principales en este tipo de ganado. Con el criterio de seleccin mencionado la meta puede resumirse con lograr una gestacin en 1 2 empadres.

Cuadro 12. Evaluacin de los Principales Parmetros Reproductivos del Ganado Bovino Productor de Carne Parmetro / Evaluacin Fertilidad M.N. I.A. Gestacin M.N. IEP2 (meses) Paricin
1

Servicio1 I.A.

Malo < 29% < 45% < 29% < 39% 18 - 24

Bueno 30 - 45% 46 - 60% 30 - 40% 40 - 50% 16 - 17

Muy bueno 46 - 55% 61 - 75% 41 - 50% 51 - 60% 14 - 15

Excelente > 56% > 76% > 51% > 61% < 13

3 - 5% menor a la gestacin por abortos

I.A. - inseminacin artificial, M.N. - monta natural; 2 Intervalo entre partos

Bibliografa
Libros 1. Asprn, PMA ed. Memorias del Curso de Actualizacin Transferencia de Embriones en el Ganado Bovino. Mxico: Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, U.N.A.M., 1985. 2. Austin CR, Short RV, eds. Reproduction in Mammals. 2a. ed. Cambridge: Cambridge University Press, 1983. 3. Bearden J, Fuquay J, eds. Applied Animal Reproduction. 5th ed. New Jersey: Ed. Prentice Hall, 1999. 4. Cupps PT, eds. Reproduction in Domestic Animals. 4th ed. San Diego: Academic Press, 1991. 5. Curtis JL, ed. Cattle Embryo Transfer Procedure. San Diego: Academic Press, 1991. 6. Elsden RP, Seidel GE Jr, eds. Procedures for Recovery, Bisection, Freezing and Transfer of Bovine Embryos. Fort Collins: Colorado State University, 1985. 7. Gorlach A, ed. Transferencia de Embriones En El Ganado Vacuno. Zaragoza: Ed. Acribia, 1999. 8. Hafez ESE, Hafez B. ed. Reproduction in Farm Animals. 7th. ed. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000. 9. Hoards Dairyman. Fertilidad y Esterilidad en Ganado Lechero. Milwaukee: W.D. Hoard & Sons Co, 1996. 10. King GJ, ed. Reproduction in Domesticated Animals. New York: Elsevier Science, 1993. 11. Meredith MJ, ed. Animal Breeding and Infertility. Oxford: Blackwell Science, 1996. 12. Mitchell JR, Doak GA, eds. Artificial Insemination and Embryo Transfer of Dairy and Beef Cattle, 9th ed. New Jersey: Prentice Hall, 2003.

13. Noriega SR, Martnez S, Flores R, eds. Tcnicas de Procesamiento de Embriones para la Transferencia en Bovinos. Mxico: Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, U.N.A.M., 1995. 14. Penner P, Empringham RE, Watson PA, eds. Bovine Artificial Insemination Technical Manual. Ontario: Canadian Association of Animal Breeders, 1990. 15. Peters AR, Ball PJH, Pineda MH, et al, eds. McDonald's Veterinary Endocrinology & Reproduction. 5th. ed. Ames: Iowa State University Press, 2002. 16. Seidel GE Jr, Seidel SM, eds. Training manual for embryo transfer in cattle. Roma: FAO Animal Production and Health Paper 77, 1991. 17. Senger PL, ed. Pathways to Pregnancy and Parturition. Pullman: Current Conceptions, Inc. Pullman, 2003. 18. Thibault C, Levasseur MC, Hunter RHF, eds. Reproduction in Mammals and Man. Ellipses, 1993. 19. Yaun SJ , Walter JK, eds. Manual de Inseminacin Artificial. 2a ed. DeForest: American Breeders Service, 1986. 20. Zemjanis R, ed. Reproduccin Animal. Diagnstico y tcnicas teraputicas. Mxico: Editorial Limusa, 1987. Revistas peridicas 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. Animal Breeding Abstracts Animal Production - Pubmed Animal Reproduction Science - Pubmed Biology of Reproduction - Pubmed Canadian Journal of Animal Science Fertility and Development Fertility and Sterility - Pubmed Journal of Animal Science - Pubmed Journal of Dairy Science - Pubmed Journal of Reproductive Immunology - Pubmed Reproduction - Pubmed Reproduction in Domestic Animals - Pubmed Research in Reproduction - Pubmed Tcnica Pecuaria en Mxico Theriogenology - Pubmed Veterinaria Mxico

Sitios en Internet 1. American Breeders Service [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: http://www.absglobal.com 2. Biblioteca Universidad Autnoma Metropolitana Xochimilco [online]. [Down]. Available from: cueyatl.uam.mx/biblioteca. 3. Bioniche Salud Animal [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.bionicheanimalhealth.com 4. Colegio de Agricultura, Universidad de Virginia Occidental [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.caf.wvu.edu 5. Colegio de Agricultura, Universidad Estatal de Carolina del Norte [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.cals.ncsu.edu 6. Colegio de Medicina Veterinaria, Universidad de Cornell [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.vet.cornell.edu 7. Colegio de Medicina Veterinaria, Universidad Estatal de Kansas [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.vet.ksu.edu 8. Colegio de Veterinaria, Universidad Estatal de Washington [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.vetmed.wsu.edu 9. Commonwealth Scientific & Industrial Research Organisation [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: csiro.au 10. Communications in Theriogenology. ctheriogenology [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: lsu.edu/ct 11. Departamento de Ciencia Animal. Universidad A & M de Texas [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: animalscience.tamu.edu 12. Departamento de Ciencia Animal. Universidad de Florida [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.animal.ufl.edu

13. Departamento de Ciencia Animal. Universidad de Wisconsin [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.ansci.wisc.edu 14. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, U.N.A.M [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.fmvz.unam.mx 15. Fisiologa de la Reproduccin. Universidad de Murcia [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.um.es/grupo-fisiovet 16. Hipertextos de la Universidad Estatal de Colorado [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: arbl.cvmbs.colostate.edu 17. Instituto de Investigacin y Desarrollo Lechero Babcock [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: babcock.cals.wisc.edu 18. Instituto Nacional de Investigaciones Agronmicas [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.inra.fr 19. Instrumentos de Medicina Veterinaria [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.imvtechnologies.com 20. Minitube [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.minitube.com 21. Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y Alimentacin [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.fao.org 22. Portal Veterinaria [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: portalveterinaria.com 23. Produccin Animal [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.puc.cl/sw_educ/prodanim 24. Produccin Bovina [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.produccionbovina.com 25. Publicaciones de la Universidad Estatl de Oklahoma [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: pearl.agcomm.okstate.edu y www.ansi.okstate.edu 26. Red de Informacin Veterinaria [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: miveterinario.net 27. Select Sires [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.selectsires.com 28. Servicio Internacional de Informacin Veterinaria [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.ivis.org 29. Sociedad para el Estudio de la Reproduccin [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.ssr.org 30. Universidad de Calgary [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.ucalgary.ca 31. Universidad de Purdue [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.purdue.edu 32. Universidad del Sur de Illinois [online]. [accessed 2003, jan. 27]. Available from: www.siu.edu Derechos Reservados. Este documento est disponible en www.ivis.org. Documento No. C0601.0404.ES.