PERGUNTAS PARA FIXAO DO ASSUNTO DE AULA EXTRAO DE DNA: Data: .............................. Turma:............................ Turno:.................................. Aluno:................................................................................................................... 01.

Qual a funo de cada reagente usado na extrao simplificada do DNA explanada nesta aula prtica? Do sal

Do detergente

Do lcool

02. O que se consegue ver seria o DNA puro?

03. Como se sabe que os filamentos so molculas de DNA?

04. Se fosse RNA seria possvel enrol-lo como foi feito para o DNA? Por qu?

Tpicos para discusso 1. Sobre as estruturas celulares e qual a sua composio As membranas, celular e nuclear so compostas principalmente por lipdeos. As protenas encontramse aprisionadas na bicamada lipdica. Os organismos celulares so compostos por protenas, cidos nuclicos (DNA e RNA), envolvidos por uma membrana. As paredes celulares das clulas vegetais so compostas essencialmente por polissacardeos. As pequenas estruturas celulares so compostas por substncias com diferentes propriedades qumicas, pelo que os procedimentos experimentais devem ser definidos de modo a separar um determinado constituinte celular das restantes partes, sem causar muitos danos. 2. Onde se encontra o DNA na clula Cerca de 99% do DNA encontra-se no ncleo da clula, o restante encontra-se em locais especficos como exemplo, nas organelas (mitocndria e os cloroplastos possuem o seu prprio DNA). Apesar dessas organelas terem o seu prprio cromossomo elas no podem contar somente com a sua informao contida neles, elas necessitam de genes especiais situados em noutras organelas e, na maioria dos casos, nos cromossomos nucleares. 3. Sobre a funo dos reagentes usados na experincia 3.1. Sal A adio do sal (NaCl) no incio da experincia proporciona ao DNA um ambiente favorvel. O sal contribui com ons positivos e negativos. Os positivos neutralizam a carga negativa do DNA, e os negativos as histonas, permitindo que o complexo DNA+Histonas no se repila mais e ento se enovele. Se no fosse a presena do sal, ele poderia desintegra-se. Um outro fato, que o sal aumenta a densidade do meio, o que facilita a migrao do DNA para o lcool. 3.2. Detergente O detergente afeta a permeabilidade das membranas, que so constitudas, em parte, por lipdeos. Com a ruptura das membranas os contedos celulares, incluindo as protenas e o DNA, so liberados e dispersam-se na soluo. A funo de algumas dessas protenas manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada. 3.3. lcool O DNA no se dissolve no lcool. Como resultado, o DNA precipita-se. Ele aparece superfcie da soluo porque menos denso que a gua e a mistura aquosa dos restos celulares. 4. Como se sabe que os filamentos so molculas de DNA? Porque, a partir de estudos das propriedades qumicas dos filamentos sabe-se que estes tm as mesmas propriedades das molculas de DNA. Por exemplo, o RNA no se enrolaria no palito, o DNA no solvel em lcool, menos denso que a gua, tem grande absoro de luz UV, quando corado com brometo de etdio mostra-se fluorescente em luz UV.