Processos gerais e sntese de aminocidos; Rui Fontes

Processos gerais no metabolismo proteico e sntese de aminocidos

1Um determinado nmero de molculas de cada protena endgena sofre hidrlise durante um dia mas, nos indivduos adultos saudveis, um nmero equivalente sintetizado. A percentagem de molculas afectadas por este processo de renovao depende principalmente da protena em anlise sendo muito baixa no caso do colagnio (cerca de 0,2% de renovao diria), relativamente modesta no caso das protenas dos msculos esquelticos (2%/dia), elevada no caso das protenas das vsceras (7-15%/dia) e elevadssima no caso de enzimas reguladas por transcrio/traduo (renovao total em horas). Considerando o conjunto das protenas de um adulto (cerca de 10-12 kg de protenas num adulto normal com 70 kg) cerca de 300 g de protenas sofrem hidrlise por dia e um valor idntico sofre re-sntese o que representa uma taxa de renovao de cerca de 3% (em mdia, 1 cadver novo por ms). Apesar da sua modesta taxa de renovao, porque as protenas dos msculos constituem cerca de metade da massa total de protenas do organismo, a sua taxa de renovao (cerca de 120g/dia) contribui com 40% para a taxa global. Em geral, um indivduo adulto saudvel mantm constante a quantidade total de protenas endgenas. De facto, a massa de protenas endgenas flutua ao longo de um dia aumentando no perodo ps-prandial e diminuindo durante o jejum. No entanto, tendo em conta a massa total de protenas, as variaes percentuais so mnimas e, alm disso, considerando um perodo de 24h (ou mais) pode dizer-se que a velocidade de hidrlise , no adulto, igual de sntese. Um indivduo que est nestas condies diz-se em equilbrio azotado (ou que tem um balano azotado nulo). A hidrlise das protenas endgenas catalisada por protases e a dos polipeptdeos formados por peptdases acabando na libertao dos aminocidos constituintes. No caso das protenas citoplasmticas ou do retculo endoplasmtico, nomeadamente as que tm taxas de renovao elevada (caso das enzimas reguladas por transcrio/traduo) ou alteraes estruturais, estes processos hidrolticos envolvem protases do citoplasma que esto integradas numa estrutura proteica designada de proteossoma. As protenas que vo ser degradadas no proteossoma so previamente conjugadas com a ubiquitina (um protena) numa reaco em que se consome ATP. As protenas extra-celulares ou associados membrana so sobretudo degradadas nos lisossomas por protases designadas catepsinas. Os componentes intracelulares que so degradadas nos lisossomas so previamente reunidos em estruturas rodeadas de uma membrana constituindo os vaculos autofgicos. As protenas segregadas para o lmen do tubo digestivo ou que resultam da descamao do epitlio so, juntamente com as protenas da dieta, hidrolisadas pelas protases e peptdases digestivas. A esmagadora maioria dos aminocidos formados durante a hidrlise das protenas endgenas (cerca de 300g/dia) reutilizada na sntese de novas molculas proteicas mas uma parte no reutilizada. Alguns dos aminocidos libertados no catabolismo das protenas endgenas so transformados de tal forma que ficam excludos do ciclo de reutilizao. Esta perda obrigatria de aminocidos endgenos (cerca de 25 g/dia no adulto)1 , em grande parte, uma consequncia da presena, nas clulas, de enzimas que tm como substratos aminocidos e catalisam transformaes catablicas irreversveis incluindo desaminaes e oxidaes. O azoto dos aminocidos que sofrem catabolismo maioritariamente transformado em ureia (que se perde na urina) enquanto o seu esqueleto carbonado (a parte desprovida de azoto) pode ser oxidado a CO2, em ltima anlise contribuindo para a sntese de ATP. O azoto das protenas no se perde apenas na forma de ureia. A urina contm outros compostos azotados que, em ltima anlise, tambm provm do metabolismo dos aminocidos; dentre estes destacaramos a creatinina, o cido rico, o io amnio e, embora em quantidades muito mais pequenas, aminocidos (modificados ou no) e catabolitos de hormonas e neurotransmissores que tiveram aminocidos na sua gnese. Tambm se perdem aminocidos endgenos nas fezes pois uma parte das protenas do epitlio intestinal que descama, das mucinas secretadas (sobretudo do intestino grosso) ou mesmo das enzimas digestivas no so completamente digeridas. O facto de, em mdia, 16% da massa das protenas ser azoto permite estabelecer uma relao entre a massa de azoto perdida nas excrees e a massa de protenas que essa massa de azoto representa. Assim, para converter a massa do azoto excretado em equivalentes de

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A perda obrigatria de aminocidos (obligatory aminoacids losses) pode, na prtica, ser determinada avaliando as perdas de azoto do organismo num indivduo que tem uma dieta equilibrada sob todos os pontos de vista excepto um: no ingere protenas. Porque a ureia , no rim e no intestino, reabsorvida para ser de novo re-excretada, necessrio esperar vrios dias antes de se tornarem patentes as consequncias (diminuio da excreo de ureia) da excluso das protenas da dieta.

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massa de protenas (ou aminocidos) multiplica-se a massa do azoto excretado por 6,25 (100/16=6,25). Cerca de 70% do azoto correspondente s perdas obrigatrias de aminocidos perde-se na urina (50% na forma de ureia e 20% na forma de creatinina, amnio e outros compostos) e cerca de 20% nas fezes; os restante 10% correspondem s perdas de protenas inteiras na pele que descama, nas unhas e cabelos que crescem, nas secrees nasais, no fluxo menstrual ou na ejaculao e ureia do suor. 4Poderia pensar-se que, para repor as perdas obrigatrias de 25 g de aminocidos/dia, bastaria ingerir uma quantidade equivalente de protenas mas no isso que acontece. A absoro de aminocidos no intestino, leva a um aumento transitrio da sua concentrao nas clulas e a um aumento da velocidade do seu catabolismo: uma parte substancial dos aminocidos ingeridos fica sujeita aco das enzimas catablicas sofrendo, junto com os libertados na hidrlise das protenas endgenas, oxidao e desaminao irreversvel. Alm disto, uma parte das protenas ingeridas no chega a ser absorvida e perde-se nas fezes. Os trabalhos experimentais com seres humanos adultos saudveis apontam para valores da ordem dos 50 g/dia como o mnimo de protenas a ingerir para repor as perdas obrigatrias de aminocidos [1]. Nas situaes em que a massa de protenas endgenas est a aumentar diz-se que h um balano azotado positivo; na condio contrria diz-se que o balano azotado negativo; o balano azotado nulo quando no h aumento nem diminuio da massa proteica. Porque uma boa aproximao realidade considerar que a massa de aminocidos livres (cerca de 150 g) estacionria, quando o balano azotado positivo (negativo, nulo) a massa de azoto ingerido superior (inferior, igual) de azoto excretado; caso exista uma diferena entre os valores da sntese e da hidrlise de protenas esse valor reflecte-se numa diferena equivalente entre o azoto ingerido e excretado. Poderia pensar-se que a massa de protenas ingeridas seria um importante factor na definio da variao da quantidade de protenas do organismo. A massa de gordura do organismo aumenta quando o valor calrico da dieta superior despesa energtica mas, no caso do azoto, o sistema funciona de forma diferente. A massa de protenas endgenas baixa (balano azotado negativo) se a ingesto for inferior quantidade necessria para repor as perdas obrigatrias (25g/dia) e fazer face ao acrscimo de perdas resultante da ingesto (outros 25g/dia) mas uma ingesto de protenas acima do montante necessrio para cobrir as necessidades (50g/dia) resulta apenas no catabolismo dos aminocidos excedentrios e num aumento da produo de ureia. Ao contrrio do que acontece com a massa de gordura, a quantidade de cada uma das protenas do organismo s depende da dieta na medida em que (i) esta pode constituir um factor limitador da sua sntese e (ii), acessoriamente, na medida em que o aumento da massa de gordura acompanhado pela formao de vasos sanguneos, de adipcitos e de tecidos de suporte. A quantidade total de protenas do organismo aumenta (balano azotado positivo) nos indivduos (i) em fase de crescimento (crianas e adolescentes), (ii) que esto a engordar, (iii) que esto a recuperar aps um perodo de balano azotado negativo ou (iv) que, atravs de exerccio fsico (ou ingerindo esterides anabolizantes), esto a aumentar a sua massa muscular. O contrrio (balano azotado negativo) acontece normalmente (i) a partir dos 40-50 anos de idade, (ii) quando se diminui a actividade fsica ou (iii) quando se emagrece voluntariamente, (iv) em consequncia de m nutrio ou (v) em situaes de doena. Contudo, num indivduo adulto saudvel que mantm constante a sua massa muscular, a quantidade total de protenas mantm-se tambm sensivelmente constante porque os aminocidos excludos do ciclo de reutilizao so repostos por ingesto e incorporados nas protenas sintetizadas. Poderia pensar-se que cada uma das molculas de cada um dos aminocidos que se perde para o ciclo de reutilizao teria de ser substituda por uma molcula igual mas esta ideia, s parcialmente, verdadeira. (i) Alguns dos aminocidos excludos do ciclo no podem ser sintetizados pelo organismo humano pois no dispomos das enzimas indispensveis para o processo e nestes casos os aminocidos dizem-se nutricionalmente indispensveis (ou essenciais). Para substituir um determinado aminocido nutricionalmente indispensvel que sofreu catabolismo necessrio ingerir esse aminocido. Ou seja, no caso dos aminocidos nutricionalmente indispensveis, cada molcula perdida tem de ser substituda por uma igual. (ii) Alguns dos aminocidos excludos do ciclo podem ser repostos por sntese endgena a partir de intermedirios do metabolismo da glicose e, nestes casos, os aminocidos dizem-se nutricionalmente dispensveis (ou no essenciais). No entanto, deve notar-se que, embora o esqueleto carbonado provenha da glicose, o grupo azotado vem de outros aminocidos que tero de ser ingeridos em quantidade suficiente para colmatar as perdas de azoto. A esqueleto carbonado da alanina, por exemplo, pode ser sintetizada a partir do piruvato mas o azoto da alanina tem de vir doutro

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aminocido. (iii) Um terceiro grupo de aminocidos (cistena e tirosina) forma-se a partir de aminocidos indispensveis (metionina e fenilalanina, respectivamente) e podero classificar-se como semiindispensveis2 [2, 3]. 7No caso dos aminocidos sintetizados a partir de intermedirios do metabolismo da glicose (serina [3C,1N,1OH], glicina [2C,1N], alanina [3C,1N], aspartato [4C,1N], asparagina [4C,2N], glutamato [5C,1N], glutamina [5C,2N], prolina [5C,1N] e arginina [6C,4N]) embora o esqueleto carbonado possa ser formado a partir da glicose, os grupos azotados (amina, amida ou guanidina) resultam da transferncia directa ou indirecta de grupos amina (ou amida) de aminocidos para esses intermedirios. Para que um indivduo adulto tenha a capacidade de manter constante a massa das suas protenas precisa de absorver, na forma de aminocidos, tantos tomos de azoto como os que perde na urina, nas fezes, nos genitais, nas secrees nasais ou nos tegumentos. Se a quantidade total de azoto ingerido (na forma de protenas) no for suficiente para colmatar o azoto excretado o indivduo fica em balano azotado negativo. Em geral, a deficincia de aminocidos nutricionalmente dispensveis corresponde a uma ingesto quantitativamente inadequada de protenas: na presena de azoto aminoacdico em quantidade suficiente para formar os grupos azotados o organismo pode sintetizar um aminocido nutricionalmente dispensvel a partir de intermedirios do metabolismo glicdico e, nesta sntese, todos os outros aminocidos so, em ltima anlise, potenciais dadores de azoto. Atravs da aco cataltica de variadas enzimas os aminocidos podem libertar o azoto do seu grupo amina (ou de outros grupos azotados) na forma de amnio (NH4+). O io amnio a forma protonada do amonaco (NH3); o seu pKa cerca de 9,3, predominando, por isso, a forma protonada quer no meio interno quer na urina. A maioria do amnio (azoto inorgnico) formado d origem a ureia que se perde na urina, mas uma parte pode ser recuperado para o metabolismo por aco cataltica (i) da desidrognase do glutamato (ver equao 1) e (ii) da sinttase da glutamina (ver equao 2). Por aco destas enzimas o azoto inorgnico do amnio pode ser convertido em azoto aminoacdico. O glutamato [5C,1N] um aminocido dicarboxlico com 5 carbonos e difere do -cetoglutarato por ter, em vez do grupo cetnico, um grupo amina no carbono 2. A glutamina [5C,2N] difere do glutamato porque, em vez do grupo carboxlico em C5, tem um grupo amida nesse carbono. -cetoglutarato + NH4+ + NADPH glutamato + NADP+ + H2O glutamato + NH4+ + ATP glutamina + ADP + Pi 9(1) (2)

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Para alm de poder ter origem na aco da desidrognase do glutamato (ver equao 1), a sntese de glutamato tambm tem lugar em reaces de transaminao (ver equao 3) em que diversos aminocidos cedem o grupo amina (azoto orgnico) ao -cetoglutarato gerando glutamato e os cetocidos correspondentes. Assim, o glutamato e a glutamina (via sinttase da glutamina; ver equao 2) podem formar-se endogenamente a partir de um intermedirio do ciclo de Krebs (o -cetoglutarato); sabendo-se que os intermedirios do ciclo de Krebs se podem formar a partir da glicose (via gliclise e carboxlase do piruvato) conclui-se que o glutamato e a glutamina so aminocidos nutricionalmente dispensveis. -aminocido X + -cetoglutarato glutamato + -cetocido X (3)

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A alanina [3C,1N] difere do piruvato porque, em vez do grupo cetnico no carbono 2, tem um grupo amina; o aspartato [4C,1N] difere do oxalacetato pela mesma razo. A sntese de alanina e aspartato o resultado da transferncia do grupo amina do glutamato para os -cetocidos correspondentes: o piruvato e o oxalacetato, respectivamente. A transamnase da alanina (ver equao 4) e a transamnase do aspartato (ver equao 5) catalisam, respectivamente, a formao de alanina e aspartato mas, como estas reaces so fisiologicamente reversveis, tambm intervm nos processos em que estes aminocidos perdem o grupo -amina para o -cetoglutarato. Existem muitas transamnases com especificidades distintas relativamente a um dos substratos mas o outro substrato (quase) sempre o glutamato/-cetoglutarato (ver equao 3). Dependendo do sentido em que a reaco esteja a ocorrer

Quem classifica faz um exerccio de organizao dos conhecimentos da forma que lhe d mais jeito. Tambm frequente chamarem cistena e tirosina condicionalmente indispensveis porque s so indispensveis se a dieta for pobre em metionina e fenilalanina, respectivamente.

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uma reaco de transaminao pode servir para formar um determinado aminocido custa da converso do glutamato em -cetoglutarato ou para formar glutamato custa da converso de um determinado aminocido no seu -cetocido correspondente. Uma caracterstica comum a todas as transamnases (e a muitas outras enzimas envolvidas no metabolismo aminoacdico) a presena de fosfato de piridoxal (derivado da vitamina B6) como grupo prosttico3. glutamato + piruvato -cetoglutarato + alanina glutamato + oxalacetato -cetoglutarato + aspartato 11(4) (5)

A serina [3C,1N,1OH] um aminocido que contm 3 carbonos e um grupo hidroxilo em C3. A glicina [2C,1N] o aminocido mais simples e contm apenas 2 carbonos. Transamnases com diferentes especificidades intervm no processo de sntese da serina a partir de 3-fosfoglicerato (um intermedirio da gliclise) e da glicina a partir de glioxilato (contm um grupo aldedo em vez do grupo amina no carbono ). No processo de sntese da serina a partir do 3-fosfoglicerato intervm primeiro uma desidrognase que converte o grupo hidroxilo do carbono 2 num grupo cetnico levando formao do 3-fosfohidroxipiruvato (ver equao 6) que substrato da transamnase da fosfoserina (ver equao 7). A fosfoserina (formada aps a reaco de transaminao) hidrolisada por uma fosftase com a consequente formao da serina (ver equao 8). O glioxilato (aceitador de grupos amina em reaces de transaminao em que a alanina o dador da amina; ver equao 9) pode resultar da oxidao do glicolato (que existe em muitas plantas comestveis) por aco da oxdase do glicolato (ver equao 10)4. 3-fosfoglicerato + NAD+ 3-fosfohidroxipiruvato + NADH glutamato + 3-fosfohidroxipiruvato -cetoglutarato + fosfoserina fosfoserina + H2O serina + Pi alanina + glioxilato piruvato + glicina glicolato + O2 glioxilato + H2O2 (6) (7) (8) (9) (10)

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A reaco catalisada pela hidroximetiltransfrase da serina (ver equao 11) para alm de permitir a sntese de glicina a partir de serina (e o inverso) tambm permite a metilao do tetrahidro-folato (H4folato): o N5,N10-metileno-H4-folato formado nesta reaco indispensvel na sntese de timina e portanto do DNA. O facto de a glicina se poder formar a partir da serina (ver equao 11) e de esta poder gerar-se a partir de um intermedirio da gliclise (3-fosfoglicerato; ver equaes 6-8) permite compreender que quer a serina quer a glicina sejam aminocidos nutricionalmente dispensveis. serina + H4-folato glicina + N5,N10-metileno H4-folato (11)

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A prolina [5C,1N] o nico aminocido em que o grupo amina uma amina secundria (que liga os carbonos 2 e 5). A arginina [6C,4N] contm 6 carbonos mas um deles faz parte da estrutura do grupo guanidina [1C;3N] que se liga ao carbono 5. Quer a prolina quer a arginina podem ser sintetizadas a partir do glutamato. O glutamato pode, por reduo do grupo carboxlico C5, originar o semialdedo do glutamato e este composto pode seguir dois destinos distintos: (i) num deles (por reduo dependente do NADPH) d origem prolina e (ii) no outro origina a ornitina e, posteriormente, a arginina. A converso do semialdedo do glutamato em ornitina catalisada por uma transamnase (ver equao 12). glutamato + semialdedo do glutamato -cetoglutarato + ornitina (12)

No decurso do ciclo cataltico o piridoxal-fosfato que est, no incio do ciclo, ligado ao grupo 6-amina de um resduo de lisina da transamnase, converte-se em piridoxamina-fosfato, mas, no final do ciclo, regenera-se a forma original. 4 A glicina tambm pode formar-se a partir da colina. Nesta via metablica a colina oxidada no grupo hidroxilo formando-se betana (trimetilglicina). A betana dadora de um metilo homocistena formando-se dimetilglicina (betana + homocistena dimetilglicina + metionina) que por sua vez pode ceder os dois restantes metilos ao tetrahidrofolato (H4-folato) gerando-se a glicina (dimetilglicina + H4-folato sarcosina + N5,N10-metileno-H4-folato; sarcosina + H4folato glicina + N5,N10-metileno-H4-folato).

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A arginina sintetizada no ciclo da ureia [1C,2N] a partir de ornitina [5C,2N] e esta pode formar-se (via semialdedo do glutamato) a partir do glutamato. A ureia apenas sintetizada no fgado pois neste rgo que existe a argnase, uma hidrlase que catalisa a formao de ureia a partir da arginina. No entanto, as enzimas que levam, a partir da glutamina (via glutamato) formao de ornitina e converso desta em citrulina [6C,3N] tambm existem nos entercitos. A citrulina formada nos entercitos passa para o plasma sanguneo e pode ser captada pelo fgado mas tambm pelo rim. As enzimas do ciclo da ureia que catalisam a converso sequenciada de citrulina em arginino-succinato e deste em arginina (sinttase do arginino-succinato e arginino-succnase) existem nestes dois rgos e levam formao de arginina. As enzimas do ciclo da ureia, para alm do seu papel no catabolismo de todos os aminocidos tambm tm um papel anablico: a sntese de arginina. A velocidade de formao lquida de arginina (massa formada subtrada da parte que se converte em ureia e ornitina) , contudo, inadequada nos indivduos em crescimento ou em situaes em que, aps um perodo em que o indivduo perdeu protenas endgenas (por doena ou/e por m nutrio), este se encontra em fase de convalescena a recuperar as protenas perdidas. Do ponto de vista nutricional, Stipanuk [2, 3] classifica a arginina como um aminocido condicionalmente indispensvel. A asparagina [4C,2N] difere do aspartato [4C,1N] porque, em vez do grupo carboxlico em C4, tem um grupo amida nesse carbono. De forma semelhante ao que acontece no caso da glutamina e do glutamato, a asparagina forma-se a partir do aspartato por aco cataltica da sinttase da asparagina (ver equao 13). No entanto, ao contrrio do caso da sntese da glutamina em que o azoto incorporado azoto inorgnico, na sntese da asparagina, o dador do azoto a glutamina. Alm disso, na reaco catalisada pela sinttase da asparagina, forma-se AMP e PPi e no ADP e Pi como no caso da sinttase da glutamina (ver equao 2). aspartato + glutamina + ATP asparagina + glutamato + AMP + PPi (13)

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A fenilalanina [9C,1N] contm um anel benznico; a tirosina [9C,1N,1OH] deriva da fenilalanina por hidroxilao desse anel benznico. frequente classificar-se a tirosina como semi-indispensvel porque sintetizada a partir da fenilalanina, um aminocido nutricionalmente indispensvel. Uma deficincia nutricional de tirosina pode ser colmatada desde que ocorra a ingesto de fenilalanina em quantidade adequada para satisfazer as necessidades dos dois aminocidos. A reaco de formao da tirosina catalisada pela hidroxlase da fenilalanina, uma oxignase de funo mista (ver equao 14). Para que o processo possa continuar a dihidrobiopterina formada reduzida pelo NADPH numa reaco catalisada por uma redtase (ver equao 15). fenilalanina + tetrahidrobiopterina + O2 tirosina + dihidrobiopterina + H2O dihidrobiopterina + NADPH tetrahidrobiopterina + NADP+ (14) (15)

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O tomo de enxofre da cistena [3C,1N,1S] tem origem na metionina [5C,1N,1S], um aminocido indispensvel. Tal como no caso da tirosina, tambm a cistena pode ser classificada como semiindispensvel: as necessidades nutricionais de cistena podem ser colmatadas desde que ocorra a ingesto de metionina em quantidade adequada para satisfazer as necessidades dos dois aminocidos. Os carbonos da cistena tm origem na serina. O processo de sntese da cistena complexo porque se relaciona com a complexa via metablica da degradao da metionina (ver equaes 16-21). Durante o catabolismo da metionina forma-se um intermedirio (homocistena) que contm ainda 4 carbonos da metionina mas que, em vez do grupo metilo ligado ao carbono 4 por uma ligao sulfureto, contm um grupo tiol. Este intermedirio reage com a serina formando-se um composto (cistationina) que contm o tomo de enxofre entre os carbonos que derivaram da homocistena e da serina (ver equao 19). A clivagem da cistationina (ver equao 20) origina cistena (3 carbonos e azoto derivados da serina e o enxofre da homocistena) assim como NH3 e -cetobutirato (derivados da homocistena). ATP + metionina S-adenosil-metionina + Pi + PPi S-adenosil-metionina + aceitador S-adenosil-homocistena + aceitador metilado S-adenosil-homocistena + H2O homocistena + adenosina homocistena + serina cistationina cistationina cistena + NH3 + -cetobutirato (16) (17) (18) (19) (20)

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-cetobutirato + NAD+ + CoA propionil-CoA + NADH + CO2

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Embora a metionina seja um aminocido nutricionalmente indispensvel existe um mecanismo que permite "salvar" metionina em processo catablico: a homocistena aceitadora do grupo metilo do N5metil-H4-folato regenerando-se metionina (sntase da metionina; ver equao 22). O N5-metil-H4-folato forma-se por reduo (dependente do NADPH; aco da redtase do N5,N10-metileno-H4-folato; ver equao 23). N5-metil-H4-folato + homocistena H4-folato + metionina N5,N10-metileno-H4-folato + NADPH N5-metil-H4-folato + NADP+ 18(22) (23)

Oito (valina, leucina, isoleucina, treonina, metionina, lisina, fenilalanina, triptofano) dos 20 aminocidos5 que so incorporados nas protenas aquando da sua sntese so, classicamente, classificados como nutricionalmente indispensveis. Com trs excepes (treonina, lisina e triptofano) existem, contudo, transamnases que (com maior ou menor eficcia) so capazes de catalisar a troca entre o grupo cetnico dos -cetocidos correspondentes e o grupo amina do glutamato [3]. Embora absurdo do ponto de vista econmico, seria possvel usar os -cetocidos correspondentes para substituir na dieta uma grande parte dos aminocidos nutricionalmente indispensveis. As equaes 24-26 mostram as reaces de transaminao que envolvem os aminocidos ramificados. Na prtica, porque os cetocidos referidos no fazem parte de uma dieta normal as reaces 24-26 so fisiologicamente irreversveis no sentido em que os aminocidos essenciais (presentes na dieta ou que resultam da hidrlise das protenas endgenas) so consumidos. No caso da histidina tambm no existem, nos mamferos, vias metablicas de sntese, mas a deficincia deste aminocido s se torna aparente aps relativamente longos perodos de dietas sem histidina [4]. possvel que na origem desta resistncia esteja a capacidade de formar histidina a partir de carnosina, um dipeptdeo (-alanil-histidina) abundante no tecido muscular. Embora alguns livros de texto classifiquem a histidina num grupo parte, de acordo com Kopple e Swendseid [4], a histidina um aminocido nutricionalmente indispensvel. -ceto-isocaproato + glutamato leucina + -cetoglutarato -ceto--metil-valerato + glutamato isoleucina + -cetoglutarato -ceto-isovalerato + glutamato valina + -cetoglutarato (24) (25) (26)

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Tal como os aminocidos dispensveis tambm os aminocidos indispensveis sofrem catabolismo a uma velocidade que depende da actividade intrnseca das enzimas envolvidas e da concentrao do aminocido em causa. Para assegurar a manuteno da massa de protenas do organismo h, no s que ingerir uma quantidade total de aminocidos adequada (em mdia 50 g/dia no adulto saudvel com 70 kg), mas tambm que repor todos e cada um dos aminocidos indispensveis que se perderam. Tendo em conta as necessidades mnimas de cada um dos aminocidos indispensveis foram inventadas protenas padro: uma protena padro uma protena que, ingerida na quantidade mnima indispensvel para repor as perdas obrigatrias de aminocidos totais, contm a quantidade mnima de cada aminocido indispensvel para repor a perda individual de cada um destes aminocidos [5]. Se uma dieta contiver como nico constituinte proteico uma protena que no contm um aminocido indispensvel (caso da gelatina que no contm triptofano) a capacidade dessa dieta para colmatar as necessidades aminoacdicas nula. Todas as protenas endgenas contm pelo menos um resduo de triptofano e, por isso, nenhuma protena pode ser sintetizada na ausncia de triptofano e o mesmo poderia ser dito relativamente a cada um dos outros aminocidos indispensveis. Quando se ingere como nica protena gelatina nenhum dos aminocidos que resultam da sua hidrlise intestinal pode ser usado na sntese proteica porque falta o triptofano. Nestas circunstncias, com a excepo do triptofano, todos os aminocidos aumentam de concentrao aumentando a velocidade da sua oxidao. Quando se ingere como nica protena gelatina a quantidade de azoto perdido igual perda obrigatria somada a toda a gelatina ingerida cujos aminocidos so tambm perdidos. No caso da gelatina o aminocido limitante da sua qualidade diettica o triptofano mas no caso de outras protenas como, por exemplo, nas protenas do trigo e outros cereais o aminocido limitante a lisina. No caso das protenas do trigo a lisina no est ausente mas existe numa quantidade menor que a prevista nas protenas padro. A percentagem de lisina

Ou 21, se considerarmos tambm o caso da selenocistena.

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nas protenas de trigo cerca de metade da percentagem de lisina numa protena padro: assim, para colmatar as necessidades de lisina usando exclusivamente protenas de trigo haveria que ingerir no 50 g de protena de trigo mas o dobro deste valor [2, 6]. 20Em algumas protenas (como a peroxdase do glutatio) existem resduos de selenocistena, um aminocido semelhante cistena e serina. Na selenocistena em vez do tomo de enxofre do grupo tiol (caso da cistena) ou do tomo de oxignio do grupo hidroxilo (caso da serina) existe um tomo de selnio. A sntese da selenocistena ocorre a partir da serina quando esta est ligada a um tRNA especfico que tem como anticodo a sequncia ACU e se denomina tRNASec (Sec a abreviatura de selenocistena). A reaco catalisada por uma transfrase (ver equao 27) em que o dador de selnio o seleno-fosfato (selnio activado). O codo correspondente ao tRNASec (UGA) normalmente um codo de terminao mas em determinados RNA mensageiros contendo sequncias especficas (como o caso do RNAm codificador da peroxdase do glutatio) este codo liga-se ao anticodo do selenocisteinil-tRNASec ocorrendo a incorporao do aminocido selenocistena na estrutura da protena em processo de sntese. seleno-fosfato + seril-tRNASec selenocisteinil-tRNASec + Pi 21(27)

Os aminocidos hidroxiprolina e hidroxilisina constituem casos especiais pois existem na estrutura do colagnio (a protena mais abundante dos mamferos) mas no existem no RNA codificador do colagnio codes para estes aminocidos. A sntese da hidroxiprolina e da hidroxilisina ocorre por aco de oxignases do retculo endoplasmtico (hidroxlases da prolina e da lisina) que catalisam a hidroxilao de resduos de prolina e lisina do colagnio durante o processo de acabamento ps-traduo (ver equao 28). A vitamina C um cofactor das hidroxlases da prolina e da lisina e a deficincia de vitamina C leva formao de colagnio anormal. resduo prolil ou lisil + O2 + -cetoglutarato resduo hidroxiprolil ou hidroxilisil + succinato + CO2

(28)

22-

O caso do aminocido carboxiglutamato (constituinte de vrias protenas como a protrombina e outras protenas envolvidas no processo de coagulao sangunea) tem algumas semelhanas com os casos da hidroxiprolina e hidroxilisina j que a sua formao resulta da transformao de resduos de glutamato aps a sntese da protena. A transformao envolve a actividade de uma oxignase (ver equao 29) e uma reaco no enzmica (ver equao 30). A regenerao da forma hidroquinona da vitamina K a partir da forma epxido envolve a aco de oxiredtases. resduo de glutamato + O2 + vitamina K (forma hidroquinona) resduo de glutamato na forma de carbanio + vitamina K (forma epxido) resduo de glutamato na forma de carbanio + CO2 resduo de carboxiglutamato

(29) (30)

1. Rand, W. M., Uauy, R. & S., S. N. (1984) Protein-Energy-Requirement Studies in Developing Countries: Results of International Research in FOOD AND NUTRITION BULLETIN SUPPLEMENT (UNIVERSITY, T. U. N., ed), http://www.unu.edu/Unupress/unupbooks/80481e/80481E00.htm, Tokyo 150, Japan. 2. Fuller, M. F. (2000) Protein and amino acid requirements in Biochemical and physiological aspects of human nutrition (Stipanuk, M. H., ed) pp. 287-04, W.B. Saunders Company, Philadelphia. 3. Stipanuk, M. H. (2006) Biochemical, Physiological, Molecular Aspects of Human Nutrition, 2nd edn, Sunders, Elsevier., St. Louis. 4. Kopple, J. D. & Swendseid, M. E. (1975) Evidence that histidine is an essential amino acid in normal and chronically uremic man, J Clin Invest. 55, 881-91. 5. Young, V. R. & el-Khoury, A. E. (1995) Can amino acid requirements for nutritional maintenance in adult humans be approximated from the amino acid composition of body mixed proteins?, Proc Natl Acad Sci U S A. 92, 300-4. 6. Schaafsma, G. (2000) The protein digestibility-corrected amino acid score, J Nutr. 130, 1865S-7S.

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Processos gerais e sntese de aminocidos; Rui Fontes

glicose

cistena betana cistationina dimetil-glicina homocistena metionina sarcosina serina glicina

colina

3-fosfoglicerato

3-fosfohidroxipiruvato

3-fosfoserina

glioxilato glicolato treonina

piruvato

alanina

oxalacetato

aspartato

asparagina arginina

prolina

ureia

Ciclo de Krebs

ornitina semiladedo do glutamato

NH3 + NAD(P)H NAD(P)+

Ciclo da ureia

argininosuccinato

Carbamilfosfato

citrulina

-ceto-glutarato

glutamato

glutamina

fenilalanina prolina

tirosina

hidroxiprolina

lisina

hidroxilisina

glutamato

carboxiglutamato

Seril-t-RNASec

Selenocisteinil-t-RNASec

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