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AVALIAO DE RISCOS AMBIENTAIS DE PLANTAS TRANSGNICAS Rubens Onofre Nodari(1) e Miguel Pedro Guerra(1)

RESUMO A preciso e o poder de manipulao gentica in vivo aumentaram consideravelmente nestas ltimas dcadas com o avano do conhecimento cientfico na rea molecular. Uma das questes que ainda permanecem pendentes quanto aos Organismos Geneticamente Modificados refere-se aos impactos e riscos da liberao em larga escala de plantas transgnicas no meio ambiente. A ameaa diversidade biolgica em conseqncia da liberao de OGMs decorre das propriedades do transgene no ecossistema ou de sua transferncia e expresso em outras espcies. A adio de um novo gentipo numa comunidade de plantas pode proporcionar vrios efeitos indesejveis, como o deslocamento ou a eliminao de espcies no domesticadas, a exposio de espcies a novos patgenos ou agentes txicos, a gerao de plantas daninhas ou pragas resistentes, a poluio gentica, a eroso da diversidade gentica e a interrupo da reciclagem de nutrientes e energia. Assim, antes da liberao em larga escala de uma cultivar transgnica, deve ser feito um estudo de impacto ambiental que inclua a avaliao de riscos, passo a passo e caso a caso. A abrangncia desta avaliao de risco dever ser baseada numa matriz, a qual, de um lado, inclua a escala espacial (planta, parcela, lavouras agrcolas e regio) e, de outro lado, os efeitos diretos e indiretos na agricultura, ecologia e socioeconomia. Palavras-chave: OGM, biossegurana, biodiversidade, impacto ambiental. ASSESSMENT OF ENVIRONMENTAL RISKS OF GENETICALLY MODIFIED PLANTS ABSTRACT The precision and the power of genetic manipulation in vivo increased in the last decades as a function of the advancement of the molecular studies. One of the questions not resolved as yet is related with the environmental impacts and risks posed by large-scale cultivation of GMO. The hazards to the biodiversity after legal approval and release are provided by the transgene properties in the ecosystem or its transference and expression in other species. The addition of a new genotype in a plant community can cause several undesirable effects, such as the displacement or elimination of a non domesticated species, species exposure to a new pathogens or toxic agents, generation of super weeds or pests, genetic pollution, genetic erosion, and interruption of the
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Prof. Titular Dep. de Fitotecnia, Universidade Federal de Santa Catarina C.P. 476, Florianpolis, SC, 88040-900 Tel: (48) 331 5332 E-mail: nodari@mbox1.ufsc.br, mpguerra@cca.ufsc.br

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nutrient and energy recycling. Thus, before the release for the large scale cropping of a plant transgenic variety it should be done an environmental impact study, which must includes the risk assessment, step by step and case by case. The scope of the risk assessment should be based on a matrix, being one axis the spatial scale (plant, plot, farm, region) and the other axis the direct and indirect effects on agriculture, ecology, and socio-economy. Key words: GMO, biosafety, risk assessment, biodiversity, and environment impacts.

INTRODUO A liberao de plantas transgnicas para o cultivo e para o consumo humano e animal, ou de seus derivados, atrai cada vez mais a ateno das pessoas, sendo um dos temas que predominam nas discusses cientficas, ticas, econmicas e polticas na atualidade. A complexidade das discusses decorrente de dois fatores principais. Por um lado, nossa base de conhecimentos cientficos sobre as implicaes e impactos da liberao em larga escala de plantas transgnicas para o cultivo comercial ainda insuficiente. Por outro lado, a questo das plantas transgnicas enseja uma abordagem inter e multidisciplinar, uma vez que os impactos so diferenciados, os conflitos de interesses so mltiplos e o dilogo apenas recentemente vem-se tornando pblico. H uma srie de desafios a ser superada para que se possa usufruir os benefcios decorrentes do uso das biotecnologias modernas. Um deles relacionase com o exerccio da discusso da implantao e da aceitao destas tecnologias por parte da sociedade, como est ocorrendo em todo o mundo. A pertinncia do uso destas tecnologias dependente de inmeros fatores, como recursos humanos qualificados, investimentos substanciais no sistema de C&T, domnio do conhecimento cientfico e da disponibilidade de germoplasma. Requer, sobretudo, enfoques inter e multidisciplinares. Devido s suas mltiplas abordagens, a anlise das implicaes no pode ficar restrita apenas aos bilogos moleculares, como ser explicitado mais adiante. H a necessidade de contar com pessoas com conhecimento, sabedoria e experincia em diversas reas, tais como: ecologia, gentica, bioqumica, medicina, nutrio, epidemiologia, entomologia, fitopatologia, botnica, zoologia, biotica, sociologia e economia, entre outras (Nodari & Guerra, 2000a). Assim, natural o envolvimento nas discusses de cientistas de diferentes reas do conhecimento, bem como de consumidores, membros de organizaes
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no-governamentais, empresrios e funcionrios pblicos de agncias regulatrias. a primeira vez que a sociedade brasileira est tentando fazer um dilogo social a respeito da introduo de produtos oriundos de uma tecnologia. Contudo, o mais importante no classificar uma tecnologia como boa ou ruim mas, sim, conhecer e controlar suas implicaes (Nodari & Guerra, 2000b). Portanto, sobre estas implicaes ambientais, e na agricultura em si, decorrentes da liberao para cultivo em larga escala de plantas transgnicas que trata este artigo. A avaliao de riscos est associada com a possibilidade de ocorrncia de eventos no esperados. Estudos recentes confirmaram a existncia de riscos reais, alguns dos quais foram antecipados por vrios cientistas de diferentes pases. Por isto, a atuao e as decises da Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana CTNBio passam a assumir importncia fundamental no que tange definio dos critrios para a anlise e liberao de plantas transgnicas. CONCEITO DE OGM OU TRANSGNICO A transformao gentica de plantas consiste na insero no seu genoma de uma ou mais seqncias, geralmente isoladas de mais de uma espcie, especialmente arranjadas, de forma a garantir a expresso gnica de um ou mais genes de interesse. Neste contexto, o prefixo trans era plenamente justificado, pois exprimia a idia de alm de, neste caso, significando o rompimento da barreira da espcie. Com o estabelecimento de normas gerais de biossegurana que se comeou a utilizar a expresso Organismo Geneticamente Modificado OGM. Do ponto de vista legal, no Brasil, OGM o organismo cujo material gentico (ADN/ARN) tenha sido modificado por qualquer tcnica de engenharia gentica. A Lei 8.974, de 5/01/95, definiu ainda engenharia gentica como a atividade de manipulao de molculas ADN/ARN recombinantes. Pela legislao brasileira, ento, qualquer planta que tenha seqncia(s) de DNA ou RNA engenheiradas (neste texto ADN e DNA sero utilizados como sinnimos, assim como ARN e RNA), deve ser considerada OGM, e est, portanto, submetida aos efeitos da referida lei, mesmo porque ela regulamenta os produtos obtidos pelo processo do DNA recombinante. No presente trabalho, OGM ser utilizado como sinnimo de transgnico, embora no haja concordncia absoluta a respeito desta sinonmia.
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Desta forma, pode-se definir plantas transgnicas (ou OEMS) como plantas que tm inserido em seu genoma, uma ou mais seqncias de DNA manipulado em laboratrio por tcnicas de DNA recombinante ou engenharia gentica. Alternativamente, plantas transgnicas poderiam ser definidas como organismos que tiveram seu material gentico alterado por mtodos que no aqueles naturais, considerando-se como mtodos naturais em plantas o acasalamento sexual e a recombinao gentica. A induo mutagnese era at ento outra maneira utilizada pelo homem para alterar geneticamente uma planta. Neste caso, o gentipo do indivduo alterado tambm diretamente in vivo. Um exemplo disto a exposio de sementes a agentes qumicos, como o metil sulfonato, ou fsicos, como raios de cobalto ou X, na esperana que alguma modificao ocorra no gentipo previamente escolhido. No sentido conceitual de modificao in vivo, a transgenia equivaleria mutagnese, pois tambm provoca uma alterao gentica num gentipo previamente escolhido. Tambm h similaridade entre ambas quanto aleatoriedade no loco onde ocorrer a modificao, o que impossibilita, com o que se conhece hoje, antecipar o que vai acontecer. Contudo, existem vrias diferenas entre ambas. O processo, e em muitos casos, a natureza da alterao deste dois mtodos so diferentes. Enquanto na mutagnese as modificaes podem ser de substituio de uma base por outra, deleo ou duplicao de uma ou mais bases e rearranjos diversos, na transgenia as seqncias introduzidas so, em tese, previamente conhecidas e sero adicionadas, no todo ou em parte, ao genoma previamente escolhido. Esta diferena crucial, pois na tecnologia est embutida a possibilidade da aplicao de leis de propriedade industrial que permite o patenteamento das seqncias engenheiradas, bem como do processo de transgenia. Esta possibilidade baseia-se naquilo que adicionado, uma vez que conhecido, engenheirado e patenteado. O mesmo no ocorreu com a tcnica da mutagnese de plantas, embora uma cultivar desenvolvida com esta estratgia possa ser protegida por leis de proteo intelectual. Mutaes proporcionaram, alm de um prmio Nobel, concedido a Henry Muller, um defensor do determinismo gentico, avanos no conhecimento gentico das espcies e algumas variedades para cultivo. A mutagnese stio-dirigida, embora permitindo alterar uma seqncia, feita in vitro e no in vivo, como a transgenia. Alm disso, a mutagnese
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stio-dirigida limitada em termos de nmero de bases alteradas, comparativamente transgenia. Recentemente, uma outra tcnica desenvolvida para terapia gentica na espcie humana, a quimeroplastia, foi adaptada para plantas (Beetham et al., 1999; Zhu et al., 1999). Ela possibilita a substituio ou a adio de uma base, em uma seqncia conhecida. Neste caso a diferena em relao transgenia clssica a utilizao de oligonucleotdeos quimricos. Seu alcance, contudo, menor, restringindo-se a alterar ou adicionar uma ou poucas bases. Com o objetivo de confundir a opinio pblica, freqentemente dito por cientistas que o homem vem produzindo transgnicos h milnios com a seleo artificial de plantas. Como possvel perceber pela definio de OGM, ou transgnico, os agricultores que domesticaram as plantas cultivadas ou os melhoristas no conseguiram alterar um gentipo in vivo. Selecionavam sim, as novas combinaes (prognies), oriundas da recombinao gentica da gerao anterior. preciso no esquecer que o processo evolutivo composto de foras que criam ou amplificam a variabilidade gentica e outras que afetam o destino desta variao, como bem destacou Charles Darwin, em sua obra A origem das espcies (1859). O efeito conjunto das mutaes, aqui includas todas as modificaes de DNA em condies naturais, e das recombinaes entre mutantes, promove o surgimento de uma ampla gama de associaes allicas (Allard, 1960, Fehr, 1987), cujo destino ento dependente das diversas foras evolutivas como seleo, migrao e deriva. Os primeiros agricultores selecionaram estas novas associaes allicas que melhor se adaptavam a sua maneira de cultivar em cada situao. Assim, no cabe aqui falar de transgenia, mas sim de processo evolutivo. Melhoramento gentico (tradicional) e transgenia Os agricultores, assim como os melhoristas, utilizam os princpios da diversidade gentica quando fazem cruzamentos, e da segregao quando selecionam plantas ou animais considerados superiores. O melhoramento gentico, agora denominado de tradicional ou clssico aps o surgimento dos transgnicos, pode ser considerado uma forma de biotecnologia, empregada h milnios para diversos propsitos, incluindo a introduo de novas variedades
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de plantas no ambiente. De fato, o melhoramento envolve a manipulao gentica, mas no envolve as tcnicas da engenharia gentica conforme ficaram conhecidas desde 1973. Por meio dos mtodos de melhoramento, agora chamados de convencionais, novas combinaes genticas so geradas por meio de cruzamentos sexuais entre plantas que apresentam as caractersticas consideradas como desejadas. Cruzamentos so feitos entre plantas da mesma espcie e, ocasionalmente, quando a variao gentica desejada no existe dentro da espcie, genes so transferidos de outras espcies do mesmo gnero e, muito raramente, de gneros afins, via introgresso. Das metodologias utilizadas pelo melhoramento de plantas, a introgresso de genes, feita por retrocruzamentos sucessivos do F1 para o gentipo recorrente, a que mais se assemelha transgenia, em termos de obteno de uma nova associao allica. Contudo, existem muitas diferenas entre ambas, que esto explicitadas na Tabela 1. Na transgenia, seqncias de DNA (genes) podem ser removidas de um organismo, modificadas ou no, ligadas a outras seqncias, incluindo as regulatrias, e inseridas em outros organismos. A fonte destes genes pode ser qualquer organismo vivo (microorganismo, planta, animal) ou vrus. Assim, a Soja RR transgnica resistente ao Round-up, herbicida base de glifosato, contm material gentico de pelo menos quatro diferentes organismos: vrusdo-mosaico-da-couve-flor, petnia e duas derivadas de Agrobacterium. Uma das principais implicaes da transgenia o rompimento da barreira sexual. Desta forma, a transformao gentica possibilita uma alternativa de introduo de genes em plantas. A rigor, isto implica que, teoricamente, qualquer gene, natural ou sinttico, pode ser introduzido numa espcie vegetal. Neste cenrio, e considerando-se o ponto de vista cientfico, duas limitaes restringem o uso de genes via transgenia: a criatividade e o julgamento inadequado do valor de um gene, desde que h disponibilidade de tecnologias de isolamento e transformao de uma dada espcie. Esta ltima limitao refere-se a situaes em que o pesquisador no consegue perceber ou no tem informaes sobre a utilidade de um gene num programa de melhoramento de uma espcie. Alm dessas limitaes, j esto sendo adicionadas outras, como: a necessidade de um determinado OGM (comparao com outras alternativas) e a magnitude das implicaes que ele possa apresentar se cultivado e ou consumido em larga escala.
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O relatrio do Governo da Noruega, divulgado em 1999, denominado Too early maybe too late: ecological risks associated with the use of naked DNA as a biological tool for research, production and therapy, concluiu que qualquer OGM deve sofrer avaliao de impacto ambiental antes de ser liberado. Este relatrio refuta a idia de que a transgenia em plantas similar ao melhoramento gentico convencional (Traavik, 1999). A transgenia introduz novos genes exticos e cria recombinaes no naturais cujas localizaes no genoma do organismo so imprevisveis, ou seja, a tecnologia ainda no permite o controle do local da insero. Isto pode resultar em efeitos imprevisveis no metabolismo, fisiologia e bioqumica do organismo receptor. Tabela 1. Comparao entre o mtodo do retrocruzamento e a transgenia.
Retrocruzamento Objetivo Natureza Tempo Tecnologia Pool gnico Custo Resultados Efeitos adversos Alterar ou introduzir uma caracterstica Substituio de alelos 3 a 6 anos Simples Limitado Baixo Previsveis Limitados Raros Ex.: alelos indesejveis Transgenia Alterar ou introduzir uma caracterstica Introduo de seqncias novas (quimera) varivel Sofisticada Ilimitado Elevado Imprevisveis Ilimitados Freqentes Ex.: genes marcadores, promotores e outras seqncias filogeneticamente bem distintas; efeitos pleiotrpicos Grandes empresas, grandes agricultores, melhoristas.

Distribuio dos benefcios

Instituies pblicas e privadas, pequenos agricultores, consumidores.

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BIOSSEGURANA Biossegurana, na viso da FAO, significa o uso sadio e sustentvel em termos de meio ambiente de produtos biotecnolgicos e aplicaes para a sade humana, biodiversidade e sustentabilidade ambiental, como suporte ao aumento da segurana alimentar global. Desta forma, normas adequadas de biossegurana, anlise de riscos de produtos biotecnolgicos, mecanismos e instrumentos de monitoramento e rastreabilidade so necessrios para assegurar que no haver danos sade humana e efeitos danosos ao meio ambiente. Estes aspectos constituem um grande desafio, pois at o advento dos OGMs nenhuma nova cultivar passava por testes de biossegurana. Embora a engenharia gentica transfira somente seqncias curtas de DNA, comparativamente ao genoma de uma variedade, o fentipo resultante, que inclui a caracterstica transgnica, possivelmente acompanhado de mudanas nas caractersticas e pode produzir um organismo novo em termos de relaes ecolgicas (Wolfenbarger & Phifer, 2000). Segundo estes autores, os ecossistemas so complexos e nem todo o risco associado com a liberao de um OGM pode ser identificado e considerado. Os testes a serem realizados, os protocolos mais apropriados, os termos de referncia, os instrumentos mais adequados ainda so pouco conhecidos e esto sendo discutidos e desenvolvidos. AVALIAO DE RISCOS Risco pode ser definido como uma medida dos efeitos de uma ocorrncia em termos de sua probabilidade e da magnitude de suas conseqncias. Em seu texto-depoimento (1999) ao Parlamento Ingls, o Prof. Dr. Chris Glidon, da University of Wales, definiu avaliao de risco (risk assessment) como sendo o processo com base cientfica que consiste na identificao e caracterizao dos perigos, da avaliao da exposio e da caracterizao dos efeitos dos riscos. Por perigo entende-se a propriedade de uma substncia ou processo que cause dano. Ou seja, dano a materializao do perigo. Ento, se o potencial de dano elevado, mesmo uma baixa probabilidade pode significar um risco inaceitvel. A avaliao de segurana deve ser baseada nos riscos potenciais impostos pelo produto obtido (Fontes et al., 1996). Assim, a avaliao deve levar em considerao as caractersticas do doador, do recipiente, ou, quando apropriado, do organismo parental. Devem ainda ser avaliadas as caractersticas e a
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utilizao pretendida do OGM, incluindo a escala e a freqncia das introdues e consideraes ambientais e de sade. O manejo dos riscos deve levar em conta as alternativas decorrentes da avaliao de riscos e, se necessrio, a seleo e implementao de opes de controle apropriadas, incluindo normas regulatrias. Os danos podem ser diretos ou indiretos, intencionais ou involuntrios, imediatos ou no. Segundo o Dr. Chris Glidon, espera-se, ao final do processo, eliminar ou reduzir o risco que possa causar um dano de fato. A diretriz maior a de que o produto deve ser seguro e sadio para a espcie humana e para o meio ambiente. Portanto, o impacto de um transgene no ambiente e na sade humana deve ser criteriosamente avaliado (Glidon, 1999). A avaliao de risco ambiental a avaliao sistemtica dos riscos associados sade e segurana humana e ambiental. Os procedimentos devem incluir a identificao dos perigos e a estimativa de suas magnitudes e freqncias de ocorrncia, bem como das alternativas ao OGM. Como os riscos associados a uma variedade transgnica dependem das interaes complexas decorrentes da modificao gentica, da histria natural dos organismos envolvidos e das propriedades do ecossistema no qual o OGM liberado (Peterson et al., 2000; Wolfenbarger & Phifer, 2000), estes procedimentos devem ser aplicados em escala ampla, em termos espaciais e sociais (ver Figura 1).
Escala Espacial Impactos dos OGM Diretos Planta Agricultura Ecologia Indiretos Social Simples Predio, testes e monitoramento Difcil Riscos e Benefcios Potenciais Pequeno Parcela Propriedade Grande Regio

Figura 1. Efeitos diretos e indiretos de variedades transgnicas (OGM) e as interaes complexas que fazem parte da avaliao de risco ambiental (Adaptado de Peterson et al., 2000).
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O conhecimento dos riscos tambm indispensvel porque possibilita a elaborao de planos de seu gerenciamento. O manejo dos riscos um processo que envolve a anlise das alternativas decorrentes dos resultados alcanados com a avaliao destes. Quando requerido, o manejo seleciona e implementa opes apropriadas de controle, incluindo normas reguladoras (Glidon, 1999). Assim, o manejo de riscos deve tambm fazer parte do estudo de impacto ambiental para fins de licenciamento de atividades com plantas transgnicas. Na ausncia de efeitos pleiotrpicos, os efeitos diretos do transgene numa planta seriam razoavelmente previsveis. Quando os bilogos moleculares dizem que foram feitos estudos e no foram detectados efeitos adversos, eles normalmente esto se referindo primeira das vrias clulas possveis de serem analisadas (Figura 1). Existem tambm estudos de parcela (segunda clula da Figura 1), associados predominantemente performance agronmica do OGM, e que, a rigor, no podem ser tomados como estudos de impactos e riscos ambientais. No h estudos cientficos relacionados a todas as clulas relevantes desta matriz. Existem sim, relatos cientficos de estudos isolados com algumas espcies e que sero apresentados mais adiante. A complexidade da avaliao decorrente do fato de que os riscos e os benefcios associados a uma cultura especfica mudam e tornam-se mais difceis de serem avaliados na medida que a rea de cultivo aumenta e outros aspectos so considerados. Impactos indiretos nos ecossistemas so muito mais difceis de investigar, monitorar e, portanto, predizer (Peterson et al., 2000). Segundo estes autores, esta uma das origens da controvrsia estabelecida entre os ambientalistas e os bilogos moleculares. Enquanto os primeiros referem-se aos impactos sociais e nos ecossistemas, os ltimos fazem meno aos testes feitos com uma ou poucas plantas em laboratrio ou em casa de vegetao. A complexidade tambm decorrente do fato de que inmeros trabalhos cientficos demonstraram que o padro de variao fenotpica, sua base gentica e a seleo natural sobre eles variam em diferentes condies ambientais (Susuki et al., 1986; Ackerly et al., 2000). O problema da biologia que, em contraste com outros ramos do mundo fsico, nos quais poucas grandes foras dominam os fenmenos, o organismo vivo resultante de um grande nmero de caminhos fracos causais determinantes, fazendo com que seja extremamente difcil proporcionar explanaes completas (Lewontin, 2000). Em seu recente texto, o autor afirma ainda que um organismo vivo num momento qualquer de sua
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vida a conseqncia nica da histria do desenvolvimento que resulta de interaes e determinaes de foras internas e externas. Devido aos contextos histricos, polticos e econmicos da biotecnologia seria apropriado questionar o que vem sendo praticado em termos de avaliao de risco. As agncias regulatrias no tm utilizado critrios ecologicamente compreensveis para avaliar os riscos de organismos transgnicos (Peterson et al., 2000). Uma reviso dos pedidos de liberao para a comercializao de OGM na Comunidade Europia revelou claramente que a avaliao de risco ambiental no foi feita ou interpretada adequadamente pelos Estados Membros (Glidon, 1999). A recomendao de bastidores destes experimentos de campo sugere que est sendo aplicado o ditado popular no olhe, no encontre. Tampouco esta avaliao de riscos e dos impactos ambientais foi adequadamente feita no Brasil com os OGMs cuja liberao para cultivo foi solicitada por empresas a CTNBio. Equivalncia substancial Ns comemos quilos de DNA todo dia, na carne. E voc no v ningum mugindo por a. Esta frase de um cientista brasileiro (Folha de So Paulo, 4 ago. 2000) retrata, na verdade, a tentativa de desconsiderar a necessidade de estudos, pois os humanos j utilizam alimentos de organismos domesticados. Tambm uma tentativa de desqualificar a necessidade de avaliao de risco. Este comportamento bastante coerente com a viso da indstria e de parte significativa das autoridades governamentais, que vem nesta equivalncia substancial uma estratgia de anlise segura, mas que se configura como rpida e sem sustentao cientfica. As plantas transgnicas, aprovadas para o cultivo comercial nos Estados Unidos, tiveram sua liberao baseada no princpio da equivalncia substancial. Assim, a soja RR foi considerada equivalente a sua antecedente natural, a soja convencional, porque no difere dela nos aspectos cor, textura, teor de leo, composio e teor de aminocidos essenciais e de nenhuma outra qualidade bioqumica. Desta forma, no foram submetidas rotulagem pela agncia americana encarregada de sua liberao, a Food and Drug Administration FDA.
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Este conceito de equivalncia substancial tem sido alvo de crticas, entre outras, porque a falta de critrios mais rigorosos pode ser til indstria, mas inaceitvel do ponto de vista do consumidor e da sade pblica (Millstone et al., 1999). H dificuldades prticas no conceito de equivalncia entre plantas engenheiradas e naturais, ou obtidas por tcnicas convencionais de melhoramento gentico. Equivalncia significa dispor de igual valor ou outro atributo, normalmente expresso em unidades ou parmetros: um grama do produto Y equivale a X calorias. Equivalncia se refere sempre a quantidade ou algo mensurvel a que corresponde um sentido tecnicamente comparvel (Momma, 1999). A rigor, em termos de genoma, elas no so equivalentes nem iguais. S seriam iguais se uma fosse originria da outra por multiplicao vegetativa ou micropropagao. A construo gentica inserida na planta contm elementos bastante distintos daqueles naturais encontrados nas plantas, que proporcionam novos produtos gnicos e que podem desencadear efeitos pleiotrpicos substanciais, para que sejam considerados desprezveis. Esta estratgia baseada na equivalncia substancial foi introduzida na dcada passada para evitar que as indstrias tivessem custos maiores com testes de longa durao, como na rea farmacolgica. Quando se utiliza a equivalncia substancial, nenhum teste requerido para excluir a presena de toxinas prejudiciais, carcinognicas e mutagnicas. Este princpio da equivalncia substancial equivocado, carece de base cientfica e deveria ser abandonado em favor de testes biolgicos, toxicolgicos e imunolgicos mais aprofundados e eficazes (Guerra & Nodari, 1999). Com base nesta equivalncia, o FDA exige apenas testes de curta durao com animais e testes bioqumicos para avaliar, entre outros, a alergenicidade. Esta insuficincia de dados, que no consegue subsidiar cientificamente a anlise da segurana alimentar, est sendo questionada no s pela populao em geral, mas tambm por grande parte da comunidade cientfica e agora (outubro de 2000) pelos governos, como o caso da Itlia. Como o transgene , na verdade, uma nova caracterstica em geral desconhecida introduzida num genoma cultivado que vem sendo lapidado pelas selees natural e artificial, ainda no h experincia acumulada, nem conhecimento suficiente para tratar adequadamente este assunto. Contudo, a comunidade cientfica e os agricultores j tm experincia acumulada com os agroqumicos ou agrotxicos que foram liberados, aps a Segunda Guerra
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Mundial para uso, sem a realizao de testes adequados de biossegurana. S posteriormente, parte dos efeitos nefastos causados por eles se tornaria conhecida. Foi preciso a morte e a dor de inmeras pessoas contaminadas para que as restries de uso aumentassem. At hoje no houve reparao alguma por partes das empresas fabricantes destes produtos s vitimas intoxicadas ou mortas. RISCOS AO MEIO AMBIENTE Entre os riscos ambientais, a poluio gentica, por meio da transferncia vertical e da transferncia horizontal, a ameaa considerada mais importante. Em decorrncia disto, espcies que adquirirem certos transgenes podero alterar seu valor adaptativo e, conseqentemente, a dinmica de suas populaes e de outras espcies as quais interagem estar desafiada. Contudo, outros riscos so possveis como efeitos danosos em espcies no-alvo (aves, minhocas, peixes, entre outros), contaminao de solo e gua, cujas dimenses tambm so impossveis de prever antes dos estudos a serem realizados (Nodari & Guerra, 2000a). Do ponto de vista agrcola, a transferncia de genes pode provocar o surgimento de plantas daninhas e pragas resistentes, bem como variantes genticas, cujas caractersticas no se pode antecipar. Alm disso, a agrodiversidade, que a diversidade gentica em cultivo mantida pelos agricultores, poder ser afetada. Transferncia vertical refere-se ao acasalamento sexual entre indivduos sexualmente compatveis, geralmente da mesma espcie e, raramente, de espcies afins. O acasalamento uma via para o fluxo gnico, entre plantas da mesma espcie, como entre plantas de diferentes espcies. Assim, de longa data tm sido observados cruzamentos entre indivduos de populaes em estado incipiente de especiao ou de espcies aparentadas. Exemplos disso so os cruzamentos entre o arroz cultivado e o arroz perene, milho e teosinto, um de seus possveis ancestrais (Doebley, 1990), beterraba cultivada e beterraba no domesticada e entre espcies cultivadas e inos do gnero das abboras (Wilson, 1990). Os impactos ecolgicos da transferncia de plen, um mecanismo reprodutivo pelo qual a introgresso pode ocorrer, dependem da capacidade dos hbridos em sobreviver e reproduzir. Taxas de sobrevivncia ou de reproduo
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indicam a oportunidade da introgresso de transgenes em populaes naturais, dependendo do fluxo gnico subseqente e da presso de seleo (Wolfenbarger & Phifer, 2000). Estes autores relataram 11 casos de formao de hbridos entre variedades transgnicas e plantas aparentadas e/ou daninhas. Para se tornar uma ameaa, como uma planta invasiva, os hbridos precisam ser viveis e competitivos, alm de frteis quando dependem da reproduo sexual para propagao. Com base no que se conhece hoje, nem todos os hbridos vo atingir a ltima fase. Os poucos estudos associados introgresso de transgenes e suas conseqncias ecolgicas em populaes naturais ainda no permitem fazer previses confiveis. Contudo, a experincia anterior com plantas de lavoura sugere que os efeitos negativos so possveis. Para doze das treze espcies de maior importncia econmica mundial, a hibridizao com parentes selvagens contribuiu para a evoluo de algumas espcies de ervas daninhas. Em alguns casos, os elevados nveis de introgresso a partir de parentes cultivados ou introduzidos eliminaram a diversidade gentica e contriburam para sua extino (Ellstrand et al., 1999). Quando so viveis e havendo fertilidade, mesmo baixa, a sobrevivncia dos hbridos interespecficos se torna possvel, e estes podem cruzar com plantas de qualquer uma das duas espcies parentais. Caracteriza-se, ento, o processo de introgresso de genes de uma espcie para outra. No caso do cruzamento entre canola transgnica e a mostarda silvestre, o nmero de sementes da segunda gerao do hbrido foi dez vezes maior do que o F1. Algumas plantas descendentes do cruzamento produziram 10 mil sementes e o gene de resistncia ao herbicida ainda permanecia numa grande quantidade de plantas. Isto demonstra que a transferncia de genes que condicionam resistncia a herbicidas pode ocorrer com maior intensidade e facilidade do que se imaginava antes desta descoberta (Chvre et al., 1998). Uma vez dentro de populaes silvestres, os transgenes podero tornar estas plantas mais invasivas e, portanto, potencialmente perigosas para a agricultura ou a biodiversidade (Fontes et al., 1996). Mas tambm pode ocorrer, segundo as autoras, que a presena do transgene diminua a adaptao natural, o que tornaria a populao vulnervel extino. No caso de transferncia de outras caractersticas para outras espcies afins, praticamente nada pode ser antecipado, devido ausncia de dados. Contudo, se o valor adaptativo de um
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hbrido interespecfico for aumentado com a presena deste gene transferido, factvel que tal gene se mantenha via introgresso. A transgenia ainda pode afetar o processo reprodutivo em plantas. Um aumento da taxa de fecundao cruzada foi verificado em Arabidopsis thaliana. Bergelson et al. (1998) constataram um aumento de 20 vezes na freqncia de fecundao cruzada em plantas transgnicas comparativamente s plantas no-transgnicas. Tabela 2. Exemplos selecionados de transferncia de genes de resistncia a herbicida de plantas transgnicas para suas plantas daninhas.
Cultura Canola Trigo Sorgo Beterraba Agrostis stolonifera Planta daninha Mostarda silvestre Aegilops cylindrica Johnson grass Beterraba no domesticada A. canina, A. capillaris, A. castellana, A. Gigantea e A. Pallens. Herbicida Basta Round-up Round-up Round-up Round-up Autor Chvre et al., 1998 Steven et al.,1998 Arriola & Ellstrand, 1998 New Scientist, 21/10/2000 Wipff & Fricker, 2000

As plantas daninhas resistentes a herbicidas tambm podem se originar pela presso de seleo sobre os recombinantes cada vez mais tolerantes, gerados naturalmente, ao herbicida aplicado. Dentre as mais de 100 plantas resistentes a herbicidas, trs delas so plantas daninhas resistentes a formulaes comerciais base de glifosato: poaia-branca (Richardia brasiliensis), trapoeraba (Commelina virginica) e erva-quente (Spermacoce latifolia) (CTNBio, 1998). Transferncia horizontal ou lateral (TH) Quando existe transferncia de genes entre espcies filogeneticamente diferentes, na ausncia do acasalamento sexual, configura-se a transferncia lateral ou transferncia horizontal. Neste caso, o material gentico transmitido de uma espcie para outra, provavelmente com auxlio de vetores (plasmdios, transposons e vrus). Elementos similares a transposons so veculos para cortar e ligar DNA genmico de um organismo noutro. Vrus tambm poderiam ser responsveis pela transmisso de genes entre eucariotos. Na verdade, os mecanismos de transferncia lateral so pouco estudados e, portanto, praticamente desconhecidos.
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Diversos casos de absoro de DNA por parte de clulas eucariotas foram tambm registrados (Tappeser et al., 1999). Num deles, foi demonstrado que o DNA fornecido na alimentao de ratos no s no era totalmente destrudo no trato gastrointestinal, mas tambm poderia alcanar a corrente sangnea e temporariamente ser detectado nos leuccitos ou clulas do fgado. Outros exemplos de deteco de DNA de eucariotos em bactrias e animais, como DNA de milho transgnico em bactrias de intestino de abelhas ou DNA de milho transgnico em vrios rgos de galinhas, esto sendo noticiados pela imprensa, mas necessitam aparecer em publicaes cientficas ou serem validados cientificamente. A transferncia horizontal bem mais conhecida em bactrias, sendo os eventos menos comuns em animais e no homem comparativamente a plantas e microrganismos. A filogenia de plantas indica que a TH de genes est envolvida no processo evolutivo. A fuso endosimbitica a mitocndria e o cloroplasto fundidos com a clula nucleada em plantas seria um caso especfico de TH. Os genes citocromo c e gapdhA (gliceraldeido-3-fosfato-desidrogenase) devem ter sido transferidos de microrganismos para plantas (Syvanen, 1994). A transferncia de material gentico de Agrobacterium tumefasciens para plantas tambm um exemplo bem ilustrativo. A edio de 21/05/99 da revista Science (1999) inclui inmeros exemplos de transferncia horizontal de genes. Assim, genes humanos j foram detectados em Mycobacterium tuberculosis, a bactria que causa a tuberculose. Experimentalmente, Nielsen et al. (2000) verificaram que o DNA de beterraba transgnica pode ser transferido para Acinetobacter sp. Strain BD413, uma bactria de solo. Neste caso, a TH ocorreu de um extrato celular para plasmdeos de bactrias. Casos de transferncia via recombinao homloga so mais freqentes do que se imaginava (Nielsen et al., 1998). Um outro estudo recente demonstrou tambm que a promiscuidade na transferncia de DNA entre plantas maior que se suspeitava. O intron do grupo I do genoma mitocondrial de plantas vasculares, que est localizado no gene coxl da espcie Peperomia polybotrya, teria sido adquirido por transferncia horizontal (ou lateral) de um fungo. Analisando o DNA de 335 plantas de diferentes gneros, Cho et al. (1998) verificaram que este intron est amplamente disperso nos genes cox1 das angiospermas. O referido intron est presente em 48 gneros diferentes, a partir de 32 eventos independentes
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de transferncia horizontal. Esta constatao revela a grande freqncia das trocas de material gentico na natureza e traz preocupaes, em especial quanto possvel interao entre plantas transgnicas e outros vegetais. Uma pergunta comumente feita relaciona-se com as conseqncias da introduo em plantas de genes (intactos ou modificados) originados de vrus patognicos. Trocas de material gentico tambm podem ocorrer entre plantas e vrus. A primeira evidncia experimental sobre a recombinao entre uma planta transgnica contendo genes virais e um vrus foi obtida por Greene & Allison, em 1994, embora este tipo de recombinao j fosse conhecido desde os anos 80. A introduo de genes que codificam a capa protica originada de vrus patognicos, ou outras seqncias virais, utilizada para conferir s plantas resistncia aos prprios vrus doadores. difcil estabelecer as conseqncias, caso este gene seja transferido para outras plantas. Contudo, um vrus poder infectar um planta transgnica que tem a protena do encapsulamento de outro vrus. Neste caso ocorrer uma transencapsidao, cujas conseqncias so totalmente desconhecidas. Mais recentemente, um estudo com arroz transgnico, conduzido no John Innes Institute, da Inglaterra, corroborou a evidncia de que o promotor do vrus do mosaico-da-couve-flor (CaMV), que tambm est presente na maioria das plantas transgnicas e nas suas prognies, um stio de alta freqncia de recombinao gnica. Recombinao gnica a troca de material gentico entre duas molculas de DNA, altamente similares geneticamente, que pode resultar numa terceira molcula diferente das duas parentais, e, portanto, um variante. O mais intrigante, entretanto, que os autores verificaram que a maioria dos eventos era do tipo de recombinao ilegtima ou no-homloga e no requeriam uma similaridade substancial na seqncia de bases. Tais eventos podiam ocorrer mesmo na ausncia de genes virais (Kohli et al., 1999). Alm disso, a seqncia de bases do promotor do CaMV, usado em vrias plantas transgnicas, como a soja e o milho, similar a regies de vrus patognicos espcie humana. Desta forma, no se pode descartar a possibilidade de recombinaes entre o transgene e outros vrus, resultando em novas combinaes genticas, cujas propriedades no so conhecidas, mas que necessitam ser estudadas antes do cultivo em larga escala de plantas que contm estas seqncias. A priori, no se pode descartar, ento, que a insero de seqncias virais em plantas poder tornar os vrus mais promscuos e com isto provocar mais doenas em plantas.
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Embora no se conhea a magnitude da contribuio da engenharia gentica para a transferncia horizontal, possvel levantar a hiptese de que o cultivo em larga escala de plantas transgnicas deve favorecer a TH. Geralmente, as plantas transgnicas contm elementos mediadores da transformao in vitro, ou parte deles, e tambm da TH, como plasmdeos, transposons e vrus. Os vetores utilizados para a obteno de plantas transgnicas freqentemente apresentam na construo quimrica origem de replicao, seqncias de transferncia, promotores fortes e genes de resistncia a antibiticos. Todos estes elementos facilitam a recombinao e a transferncia de genes. Plasmdeos e vrus quimricos esto sujeitos a instabilidades estruturais, o que facilita tambm a recombinao (Ho et al., 1998). Na natureza, a poluio com metais pesados pode se constituir em fator benfico para a transferncia de genes. Como parte das seqncias introduzidas so homlogas a muitos procariotos, a transferncia de material gentico para eles via recombinao factvel. Dependendo das seqncias introduzidas na planta transgnica, haver uma maior ou menor probabilidade de favorecimento para a TH. Outro aspecto importante est relacionado com a freqncia de ocorrncia da TH. Embora, algumas estimativas sejam baixas, como 2x10-17, o nmero de cpias em cultivo poder ser muito alto. O fato de que uma planta pode conter mais de dois trilhes de clulas, e um hectare de soja mais de 300 mil plantas, permite supor a probabilidade da existncia de mais de 1,2 x 10-18 de cpias por hectare, de um transgene. Considerando o cultivo em pelo menos cinco milhes de hectares, no difcil concluir que uma ou mais recombinaes podem de fato ocorrer, mesmo porque, a probabilidade de sua ocorrncia, embora baixa, finita, ou seja, tem um valor que influenciado por vrios fatores. De crucial importncia tambm o efeito individual de cada transgene. Na tecnologia denominada de terminator, os embries contidos nas sementes a serem colhidas pelos agricultores so defeituosos. Um dos componentes do sistema a enzima recombinase, a qual tem o potencial de misturar genomas. Esta foi a concluso a que chegaram Schmidt et al. (2000). A recombinase Cre parte do stio especfico de recombinao Cre/lox, originalmente isolado do bacterifago P1. Cre catalisa a recombinao entre dois stios lox, retirando qualquer pedao de DNA entre ambos. Estes stios ilegtimos freqentemente carregam pouca similaridade em relao ao elemento lox. No h dados sobre o reconhecimento ilegtimo em animais e plantas. Segundo os autores, altos
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nveis de expresso de Cre nas espermtides de ratos transgnicos heterozigotos levam a 100% de esterilidade em machos, mesmo na ausncia dos stios lox. A esterilidade seria causada pela quebra e reunio de DNA em stios inapropriados. Embries fertilizados por estes espermas no passam do estgio de quatro clulas. Estes resultados indicam que Cre tem conseqncias patolgicas em animais, concluram os autores. So duas, ento, as principais implicaes da TH. A primeira refere-se maior probabilidade de transferncia horizontal de genes a partir de plantas transgnicas comparativamente s variedades tradicionais. A segunda referese ao fato de que os genes com potencial de disseminao podem dar vantagem seletiva aos organismos receptores, o que poder alterar dramaticamente a dinmica das populaes e a paisagem. Como ainda no possvel determinar a probabilidade de um evento de TH ocorrer, bem como suas conseqncias, torna-se praticamente impossvel fazer qualquer previso realstica na ausncia de novos estudos. Transferncia horizontal em bactrias Estudos comprovaram que a recombinao e a transferncia horizontal entre bactrias aceleram a disseminao de regies genmicas destes organismos causadores de doenas, bem como a disseminao de genes de resistncia a antibiticos (Ho et al., 1998). bem conhecido o exemplo da estreptomicina em sunos. Aps um ano de aplicao deste antibitico em animais (1983), genes de resistncia estreptomicina estavam presentes em bactrias que viviam na garganta e estmago dos sunos. Um ano mais tarde, bactrias humanas dos familiares que lidavam com estes animais tambm apresentaram resistncia estreptomicina. Esta uma prova inequvoca de transferncia lateral de genes entre bactrias. Em 1990, este antibitico foi praticamente retirado de circulao porque j no era mais efetivo. A maioria das plantas transgnicas desta primeira gerao de OGMs contm genes de resistncia a antibiticos, cuja funo possibilitar a seleo das clulas transformadas. Embora a freqncia de transformao e, conseqentemente, a transferncia horizontal em bactrias seja extremamente baixa, os genes de resistncia a antibiticos inseridos em plantas transgnicas podero ser transferidos para bactrias humanas, o que se constitui num risco a ser considerado.
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A relao entre os genes de resistncia a antibiticos e sade humana est no fato de que nos ltimos 20 anos, mais de 30 novas doenas ocorreram na espcie humana (AIDS, ebola e hepatites, entre outras). Alm disso, houve o ressurgimento de doenas como a tuberculose, a malria, a clera e a difteria com muito mais agressividade por parte dos microrganismos patognicos. Paralelamente, houve um decrscimo na eficincia dos antibiticos. Nos anos 40, um antibitico tinha uma vida til de 15 anos. Nos anos 80, a vida til passou para cinco anos, ou seja, trs vezes menos (Ho et al., 1998). A transferncia horizontal de material gentico entre diferentes bactrias relativamente comum. Sendo assim, o desenvolvimento de OGMs sem genes de resistncia a antibiticos pode evitar os riscos acima mencionados. Ameaas diretas aos componentes da biodiversidade As ameaas aos componentes da biodiversidade so mltiplas, pois, em um ecossistema devem ser considerados no somente os organismos vivos, mas tambm os processos ecolgicos. Um trabalho que causou grande impacto na comunidade cientfica avaliou o efeito do plen de milho transgnico em lagartas da borboleta-monarca (Danaus plexippus). A taxa de mortalidade destas lagartas atingiu 44% quando se adicionaram ao seu alimento natural folhas de Asclepias curassavica, plen de uma variedade de milho transgnico, que contm um gene de Bacillus thuringiensis (Bt) que codifica para uma toxina txica a vrios insetos. Entretanto, todas as lagartas que receberam plen de milho no-transgnico, ou nenhum plen, sobreviveram (Losey et al., 1999). O trabalho recebeu crticas metodolgicas, porm, um ano depois, resultados semelhantes foram obtidos em experimentos no campo. Neste caso, o plen das variedades de milho transgnicas KnockOut (evento 176) e YieldGard (Bt 11), ambos da Novartis Seeds, tambm provocou mortalidade (Hansen Jesse & Olbrycki, 2001). Tambm se conhece pouco sobre as possveis alteraes na associao entre plantas e fungos micorrzicos. O primeiro estudo sobre os exudatos na rizosfera de plantas transgnicas foi publicado recentemente (Saxena et al., 1999). Nesse trabalho observou-se que as toxinas inseticidas Bt podem permanecer ativas no solo, onde se ligam a argila e a cidos hmicos. Mesmo ligadas a estes componentes do solo, as toxinas mantm suas propriedades inseticidas e so protegidas contra a degradao por microrganismos porque
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esto ligadas s partculas do solo, onde podem persistir por pelo menos 234 dias. Quais so as implicaes destes fatos? Uma reviso recente feita por Wolfenbarger & Phifer (2000) assinala nove estudos focalizados no perigo de variedades transgnicas sobre organismos no alvo, incluindo os j mencionados. Em um tero deles, nenhum efeito negativo foi observado nas caractersticas avaliadas. Os resultados revelaram que as variedades transgnicas causaram maior mortalidade e diminuram a viabilidade de ovos e a longevidade dos adultos de insetos no alvos, alm de diminuir a diversidade bacteriana na rizosfera. Como conseqncia, a taxa de decomposio dos restos culturais e dos nveis de carbono e nitrognio poder diminuir e afetar a fertilidade do solo. Assim, a produtividade dos cultivos poder decrescer em face da diminuio da diversidade dos microrganismos de solo. Um dos aspectos relevantes na atualidade a preservao da identidade do produto como requisito de qualidade. No se trata apenas de segregao, mas de manter a identidade de um produto desde sua origem at o consumo. Contudo, na agricultura, esta preservao de identidade est longe de ser atingida. Nem a segregao simples pode ser garantida, mesmo por pases como Estados Unidos. ilustrativo o caso do milho transgnico StarLink (da Aventis CropScience), um tipo de Bt que contm o gene Cry9C, aprovado pela Environmental Protection Agency EPA para alimentao animal mas no para consumo humano. Este milho contm uma protena (Cry9C) que pode causar reaes alrgicas em humanos, uma vez que ela no foi quebrada imediatamente nos testes de digesto. Tanto gros quanto subprodutos foram misturados com gros no-transgnicos, conforme anlise de produtos alimentcios de consumo humano. Alm disso, houve tambm a contaminao de colheitas que deveriam ser no-transgnicas devido disseminao do plen. No s o cultivo de variedades melhoradas no-transgnicas, mas a agrodiversidade, que pode ser definida como a diversidade de espcies agrcolas, composta de variedades crioulas mantidas pelos agricultores, tambm pode ser ameaada pelo cultivo dos transgnicos. Na anlise dos riscos est sendo ignorada uma realidade fundamental: o plen de milho pode ser carregado pelo vento at 9,6 km. Segundo o professor Walter Fehr, melhorista da Iowa State University, no somente o que voc faz. tambm o que seu vizinho faz, ressaltando que agricultura vizinhana, quando se trata de identificao,
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segregao e rotulagem de cultivos transgnicos. Com esta mobilidade do plen, uma simples lavoura de transgnicos pode contaminar vrias outras notransgnicas, numa rea relativamente grande. Como decorrncia, separar os agricultores em duas classes, uma que produz transgnicos e outra que no os cultiva, no ajuda muito (Washington Bureau, 1 Oct. 2000). Este alerta corroborado por vrios episdios de contaminao de lavouras de milho com plen de milho transgnico. Alguns destes casos esto sendo analisados pela justia americana. Em diversos municpios do Sul do Brasil, esto sendo organizadas anualmente Feiras de Sementes. Na segunda edio de uma delas, realizada em 15 de julho de 2000 em Porto Unio (PR), 49 representantes de comunidades situadas em 13 municpios expuseram amostras de 41 variedades crioulas de milho e 46 de feijo, para citar apenas duas das 51 espcies identificadas na referida feira. Surpreendentemente, formas de teosinto tambm so mantidas pelos agricultores daquela regio. Assim como esta, uma ampla diversidade de espcies e formas dentro de espcies exposta ano a ano nestas feiras de sementes. Ensaios com variedades crioulas feitas por tcnicos da Emater/RS, em David Canabarro, revelaram que seu potencial chegou a mais de seis toneladas por hectare (Dados no publicados). Alm do rendimento, estas variedades crioulas contm uma ampla gama de caractersticas, com alta variabilidade gentica, estando continuamente submetidas ao processo evolutivo e gerando, anualmente, novas recombinaes. Esta agrodiversidade deve ser considerada nas avaliaes de riscos ambientais. O mnimo que se pode fazer informar aos agricultores o que poder acontecer com seus materiais, caso transgnicos sejam cultivados nas proximidades e levar em considerao a opinio deles. Nas regies de ocorrncia natural de alta diversidade gentica de uma espcie ou espcies afins, como o caso de algodo ou amendoim no Brasil, o cultivo de plantas transgnicas destas espcies merece anlise mais rigorosa. No Mxico, por exemplo, ainda no foi liberado o cultivo comercial de milho transgnico, devido existncia de extensas reas com populaes ancestrais e parentes silvestres da espcie. O Brasil ainda bero de vrias espcies cultivadas ou apresenta regies com alta variabilidade gentica nas populaes crioulas ainda em cultivo, situao esta que requer muita cautela. Como avaliar adequadamente este tipo de risco sem dvida um grande desafio.
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A determinao de riscos de plantas transgnicas que contm inseticidas complexa. No se conhece ainda profundamente o efeito destas sobre insetos ou outros organismos benficos. Tampouco, os poucos estudos sobre pssaros ou outros animais que se alimentam de insetos que se alimentam de plantas transgnicas no proporcionam um conhecimento amplo do assunto. Riscos socioeconmicos, com nfase na agricultura Dentre eles, os mais relevantes seriam o aumento da populao de pragas e microrganismos resistentes e/ou patognicos, o aumento ou promoo de plantas daninhas resistentes a herbicidas, a contaminao de variedades crioulas mantidas pelos agricultores, a contaminao de produtos naturais como o mel, a diminuio da diversidade em cultivo com o aumento da vulnerabilidade gentica, a dependncia dos agricultores a poucas empresas produtoras de sementes, produtividade e os preos ainda indefinidos. Um fato inquestionvel: os insetos que hoje so susceptveis ao Bt, no futuro, sero resistentes ao Bt. Resta saber em quanto tempo. Se houver uma grande rea plantada com variedades transgnicas resistentes a um inseto, somente os resistentes sobrevivero, gerando prognies recombinantes, que eventualmente apresentaro maior nvel de resistncia toxina. Aps vrios ciclos de recombinao, devero aparecer insetos resistentes ao gene Bt. No caso de esta resistncia ser condicionada por genes dominantes, a velocidade do aumento da freqncia dos alelos de resistncia extraordinariamente maior, comparativamente quela observada para alelos recessivos (Figura 2; Crow, 1986). Com isto, cria-se uma superpraga, como j ocorreu com o uso de agrotxicos. O fato de que a resistncia da lagarta European corn borer (Ostrinia nubitalis) s formulaes comerciais de Bt (ex: Dipel) seja controlada por um gene parcialmente dominante (Huang et al., 1999) indica que o sistema de refgio s ser efetivo por poucos anos, porque a maioria da prognie dos insetos ser resistente toxina e, portanto, atacar as variedades Bt. O que de fato acontecer com a freqncia dos insetos resistentes alvos e no-alvos, nas condies brasileiras, difcil de prever. O sistema de refgio apregoado como uma prtica de manejo, que retardaria o aumento na freqncia de insetos resistentes, consiste no cultivo de uma pequena faixa com variedades susceptveis, o que permitiria o acasalamento entre insetos susceptveis e resistentes. Uma das premissas para que o sistema seja duradouro, que a resistncia dos insetos toxina Bt deve ser recessiva.
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Em caso contrrio, rapidamente os alelos de resistncia sero prevalentes. Com o aumento rpido da freqncia de insetos resistentes ao Bt, o uso atual de formulaes comerciais base de Bt em lavouras orgnicas fica comprometido, como tambm a produo de produtos com este tipo de inseticida, considerado muito menos txico que os demais.

Figura 2. Evoluo da freqncia de um alelo de resistncia (p) quando recessivo (h=1), dominante (h=0) ou quando existe co-dominncia. (h=1/2) (2 ). A transgenia tambm pode levar ao aumento de pragas de solo. Na cultivar transgnica de algodoeiro, Paymaster 1560 BG, resistente ao glifosato, observouse um aumento na susceptibilidade ao nematide-das-galhas (Meloidogyne incognita Kofoid & White), quando comparado com o parental no-transgnico Paymaster 1560 (Colyer et al., 2000). Embora um nmero limitado de cultivares tenha sido avaliado, os dados demonstram diferenas na susceptibilidade ao nematide-das-galhas entre algumas cultivares transgnicas e seus parentais no-transgnicos. O resultado deste trabalho tambm indica a necessidade de estudos sobre a reao de plantas transgnicas s pragas e doenas antes da liberao para cultivo.
(2)

Para esta simulao, o indivduo deve estar sob presso de seleo e o coeficiente de seleo deve ser igual a 1, ou seja, no caso de insetos susceptveis, eles morrem aps se alimentarem de tecidos de uma planta que contm a toxina de Bt por exemplo. Para aquelas pragas cujos genes de resistncia s toxinas so recessivos, o aumento da freqncia ocorrer lentamente. O contrrio ocorrer com aquelas pragas que carregam genes dominantes para a resistncia. (Adaptado de Crow, 1986).

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A dinmica das populaes de microrganismos de solo tambm poder ser afetada pelo cultivo de plantas transgnicas. O uso de glifosato combinado ou no com outros herbicidas nas doses recomendadas sobre o cultivo de Soja RR apresentou maior incidncia de fusarium nas razes uma semana aps a aplicao, comparativamente soja no-transgnica que no recebeu (Kremer et al., 2000). Os testes que foram realizados no campo no perodo 1997-2000 revelaram que a freqncia de fusarium nas razes aumentou de 0,5 a 5 vezes entre a segunda e a quarta semana aps a aplicao dos herbicidas. O fusarium causa a sndrome da morte repentina (SDS) em soja. O artigo More Funny Honey, publicado no FOEE Biotech Mailout, aborda a questo da perda de status do mel como alimento sadio e natural, como resultado da poluio causada pelos OGM. Anlises efetuadas no mel indicaram a presena de plen de canola transgnica tolerante a um herbicida. Este mel, coletado na Inglaterra em 1999 e analisado no Austrian Federal Laboratory em Vienna revelou a presena de DNA do gene de resistncia ao mesmo herbicida. Ainda so desconhecidos outros efeitos dos transgnicos sobre as abelhas, pois isto depender das protenas codificadas pelos genes engenheirados. Contudo, dentre os trabalhos efetuados em abelhas com inibidores de proteases, cabe destacar um que demonstrou seus efeitos adversos quando abelhas foram alimentadas com acar contendo os referidos inibidores (Pham-Delgue, 1997). Este inibidores podero se converter em estratgias de resistncia a insetos, como j foi demonstrado em canola. Neste caso o efeito sobre abelhas poder ser grande. Entretanto, ainda no est clara a associao entre a concentrao dos inibidores e a magnitude dos efeitos. O autor verificou ainda que plen de canola e soja transgnicas encurtou o ciclo de vida e alterou comportamentos associados ao olfato e habilidade de apreender de abelhas melferas. Os resultados dos primeiros experimentos sobre os efeitos da incluso de derivados de OGM na rao animal feitos por pesquisadores independentes comeam a ser analisados. Segundo o jornal britnico The Guardian, de 04/11/2000, os pesquisadores Steve Kestin e Toby Knowles, da University of Bristol, verificaram que a mortalidade de frangos alimentados com milho transgnico foi praticamente o dobro (7,14%) comparativamente mortalidade de frangos
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tratados com milho convencional (3,57%). Os cientistas questionaram ainda os mtodos e concluses dos estudos da Aventis submetidos para anlise das autoridades britnicas visando liberao do milho transgnico. Contudo, estes resultados ainda devem ser validados cientificamente, pois este tipo de experimento deve ser efetuado para diferentes combinaes de nutrientes, raas e condies climticas. As alternativas s plantas transgnicas As principais demandas dos mais de seis milhes de pequenos agricultores familiares no Brasil, os quais, historicamente, ainda produzem a maior parte dos alimentos que chega mesa dos consumidores, no esto associadas necessidade das plantas transgnicas, mas, sim, necessidade de uma poltica agrcola e agrria que vise sustentabilidade e rentabilidade de suas atividades. Assim, a necessidade e a urgncia das plantas transgnicas para a agricultura brasileira uma falsa questo. importante mencionar que as plantas transgnicas desenvolvidas at o presente momento no atendem s necessidades da pequena propriedade familiar, ainda preponderante no pas. As evidncias cientficas da utilizao de plantas transgnicas com caractersticas de resistncias a herbicidas (por exemplo, RR) ou portadoras de biocidas (por exemplo, Bt) na produo de commodities agrcolas nas grandes propriedades revelam o aumento na freqncia de plantas invasoras e insetos resistentes aos transgenes, implicando a vida curta dessas tecnologias. Isto gerar demandas de novas tecnologias (variedades transgnicas e/ou agrotxicos), o que aumentar o grau de dependncia dos agricultores. A avaliao de risco deve necessariamente conter informaes sobre outras alternativas que poderiam ser utilizadas, bem como um comparativo entre os riscos das diversas solues. Assim, preciso avaliar simultaneamente alternativas sustentveis do ponto de vista agrcola e ambiental. Uma delas seria a agrodiversidade, termo empregado para definir a diversidade gentica (intra-especfica) e a diversidade de espcies (interespecfica) em cultivo nas propriedades agrcolas. Recentemente, pesquisadores chineses demonstraram que a heterogeneidade das culturas uma alternativa possvel vulnerabilidade das monoculturas s doenas. Observou-se que variedades de arroz susceptveis doena bruzone, cultivadas em mistura com variedades resistentes a esta doena, apresentaram 89% de acrscimo na produtividade e uma reduo de 94% de severidade dessa molstia comparativamente monocultura (Zhu et al., 2000). O sucesso
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dessa tcnica, que a simples mistura de diferentes variedades, foi to significativo que, no segundo ano, no foi necessria a aplicao de fungicidas. Os resultados mostraram que a diversificao intra-especfica das culturas proporciona um ambiente adequado para o controle de doenas que pode ser efetivo em grandes reas, podendo contribuir para a sustentabilidade da produo agrcola. O pas que detm a maior diversidade de espcies vegetais certamente deve ter um nmero de espcies comestveis e agricultveis capaz de proporcionar diferentes dietas balanceadas para as diferentes populaes, respeitando-se sua cultura e suas necessidades. Vitamina A ou caroteno, por exemplo, so encontrados em dezenas de espcies comestveis. O fato que as plantas transgnicas esto sendo consideradas como a nica maneira de aumentar a competitividade. Mas anlises comparativas com outras matrizes de produo agrcola ainda no foram feitas. A Pertinncia dos Estudos de Impacto Ambiental Embora a matria seja complexa, h o entendimento de que estes estudos so necessrios conforme determinam o artigo 225 da Constituio Federal, a Lei Ambiental e a Resoluo 237/97 do Conama, o que no teria sido observado pela Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana CTNBio no caso do pedido de liberao da Soja RR em 1998. Utilizando as competncias inclusas no art. 2 do Decreto 1.752, que diz no item XIV exigir como documento adicional, se entender necessrio, Estudo de Impacto Ambiental (EIA) e respectivo Relatrio de Impacto no Meio Ambiente (RIMA) de projetos e aplicao que envolvam a liberao de OGM no meio ambiente, alm das exigncias especficas para o nvel de risco aplicvel, a CTNBio decidiu pela sua no exigncia. Com base no artigo 225 da Constituio Federal, a sentena judicial exarada pelo Juiz Antonio Prudente exige o Estudo de Impacto Ambiental EIA acompanhado do Relatrio de Impacto no Meio Ambiente Rima como condio indispensvel para o plantio em escala comercial da Soja RR. No bastasse isto, a Conveno sobre a Diversidade Biolgica CDB estabeleceu no Art. 14 que trata da Avaliao de Impacto e Minimizao de Impactos Negativos, que cada Parte Contratante, na medida do possvel e
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conforme o caso, deve estabelecer procedimentos relacionados com a avaliao de impacto ambiental de projetos que possam ter sensveis efeitos negativos na diversidade biolgica, a fim de evitar ou minimizar tais efeitos e, conforme o caso, permitir a participao pblica nesses procedimentos. Uma srie de perguntas relacionadas com as conseqncias da introduo em plantas de genes originados de outros organismos, incluindo os patognicos (como genes de vrus ou parte deles) ainda permanece sem resposta. Um dos desafios, ento, o estabelecimento de um conjunto mnimo de protocolos e termos de referncia que devero nortear os testes para a obteno de informaes adequadas durante a realizao da avaliao de riscos. Assim, a avaliao de riscos deve fazer parte do estudo de impacto ambiental de uma planta transgnica, como parte imprescindvel do pedido de licenciamento ambiental para atividades com OGMs. A SITUAO NA EUROPA Alm da no aprovao de muitos dos OGMs em cultivo nos Estados Unidos, vrios pases da Europa esto invocando o artigo 16 da Diretiva 90/220, que lhes d o direito de banir temporariamente um OGM se existem razes justas, como evidncias cientficas de que o produto constitui-se num risco sade humana e ao ambiente. Assim, j so seis pases que baniram determinados OGMs, listados na Tabela 3. Mais recentemente, outros banimentos esto sendo feitos com base no artigo 12 do Regulamento Europeu 258/97, relativo a alimentos e seus ingredientes. Assim, cada estado membro pode banir um produto se existem novas razes que levam a acreditar que o alimento uma ameaa sade humana e ao ambiente. A Itlia foi mais adiante e est desafiando a definio de equivalncia substancial. Assim, quatro variedades de milho transgnicos foram banidas porque no foram consideradas equivalentes s no-transgnicas em termos de composio final, valor nutricional e efeitos metablicos. Considerando a falta de dados cientficos que assegurem que os produtos so sadios e seguros espcie humana e ao ambiente, outros pases esto tambm proibindo o cultivo de OGM e o consumo de seus derivados.
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Tabela 3. OGMs banidos da Comunidade Europia.


Produto Empresa Estado membro ustria(1) Comisso informou em 17.02.97 Comits cientficos deram sua opinio em 21.03.97 (alimento) 10.04.97 (nutrio animal) 12.05.97 (plantas) 21.03.97 (alimento) 10.04.97 (nutrio animal) 12.05.97 (plantas) 18.05.99 18.05.99 18.05.99 24.09.99 Pendente Pendente Pendente

Milho Bt

Novartis

Luxemburgo(1)

17.03.97

Canola

AgrEvo

Milho Bt Milho Milho Bt Milho Bt

Monsanto AgrEvo Novartis Novartis Monsanto AgrEvo

Grcia(1) Frana(1) Frana(1) ustria(1) ustria(1) Alemanha(1)

05.11.98 20.11.98 20.11.98 02.06.99 05.05.00 08.05.00 19.09.00

Itlia(2)

(1)

Invocando art. 16 da diretiva 90/220. Invocando o art. 12 do Regulamento Europeu 258/97, desafiando o conceito de equivalncia substancial. Adaptado de Nature Biotecnology, 2000.
(2)

CONSIDERAES FINAIS importante ter em mente que a engenharia gentica opera com base na manipulao do DNA de organismos vivos. Esta interveno ocorre em mbito muito mais complexo do que qualquer outra tecnologia j anteriormente aplicada. Esta tecnologia aplicada em um nvel de funcionamento da natureza a respeito do qual nossa base de conhecimento cientfico ainda insuficiente (Griffiths, 1999). Embora tenham havido avanos no conhecimento cientfico sobre os riscos associados ao cultivo de plantas transgnicas, o desenvolvimento da tecnologia
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de OGM ainda se baseia em processos do tipo tentativa e erro, portanto, imprecisos e pouco cientficos. Assim, os cientistas tm poucas condies de prever o comportamento do novo gene no organismo hospedeiro, sendo inadequado caracterizar-se a transgenia como science-based technology. Em suma, a engenharia gentica encontra-se em seu estgio bsico de pesquisa e cincia, sendo ainda prematura a liberao comercial de plantas transgnicas (Guerra & Nodari, 1999). Desta forma, assume importncia a adoo do Princpio da Precauo, estabelecido em acordos internacionais, como um princpio tico que afirma que a responsabilidade pelas futuras geraes e pelo meio ambiente deve ser combinada com as necessidades antropocntricas do presente. Adotado no prembulo da Conveno sobre a Diversidade Biolgica CDB , o Princpio da Precauo destaca que quando exista ameaa de sensvel reduo ou perda de diversidade biolgica, a falta de plena certeza cientfica no deve ser usada como razo para postergar medidas para evitar ou minimizar essa ameaa. Assim, a adoo do Princpio da Precauo se constitui em alternativa concreta a ser adotada diante de tantas incertezas cientficas. Desta associao respeitosa e funcional do homem com a natureza, surgem as aes antecipatrias para proteger a sade das pessoas e dos ecossistemas. Este princpio deve guiar as atividades humanas, mas incorpora outros atributos, como justia, eqidade, respeito, senso comum e preveno (Raffensperger & Tikner, 1999). Tambm, este princpio admite que a adoo de cautela poderia evitar conseqncias danosas que, eventualmente, um OGM possa apresentar como resultado de sua liberao apressada ao meio ambiente. As avaliaes, ainda iniciais, dos impactos ambientais potenciais, podem permitir uma deciso balanceada entre os possveis benefcios e a extenso e irreversibilidade dos danos e riscos. importante que a toxicidade ambiental relativa seja incorporada na anlise das mudanas de padres de uso e quantidade de pesticidas, e que os impactos das culturas tolerantes a herbicidas na conservao do solo sejam quantificados. Por outro lado, devem ser tomadas medidas que possam prevenir a transferncia de genes para populaes selvagens, bem como reduzir a evoluo da resistncia aos transgenes. Como concluem Wolfenbarger & Phifer (2000), tanto os riscos quanto os benefcios dos OGMs podem variar temporal e espacialmente e devem ser analisados caso a caso. A elucidao destes riscos e benefcios dos OGMs envolve
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a necessidade de estudos comparativos com outros sistemas e prticas agrcolas, tais como a agricultura orgnica. Nossa capacidade de predizer os impactos ecolgicos de espcies introduzidas, incluindo OGM, imprecisa e os dados empregados para avaliar impactos ecolgicos potenciais apresentam limitaes. Esta inabilidade de predizer acuradamente as conseqncias ecolgicas, especialmente no longo prazo, aumentam a incerteza associada avaliao de riscos, exigindo modificaes nas estratgias de manejo destes riscos. O intrigante neste momento de crise no uso das biotecnologias ditas modernas que muitos dos riscos potenciais previamente anunciados esto de fato ocorrendo. Em 1989, Tiedje et al., e Pimentel et al. mencionaram que os principais riscos potenciais dos OGMs ao meio ambiente seriam: criao de novas pragas e plantas daninhas e um aumento das pragas j existentes por meio da recombinao gnica entre a planta transgnica e outras espcies filogeneticamente relacionadas; a produo de substncias que so ou poderiam ser txicas a organismos no-alvos; o efeito disruptivo em comunidades biticas e o desperdcio de valiosos recursos genticos, seguido de contaminao de espcies nativas com caractersticas originadas de parentes distantes ou de espcies no relacionadas e efeitos adversos em processos dos ecossistemas e origem de substncias secundrias txicas aps a degradao incompleta de qumicos perigosos. Trabalhos publicados confirmaram os dois primeiros. Quanto aos dois ltimos, h a necessidade de estudos. A ampla gama de implicaes que este tema dos OGMs engendra, ultrapassa hoje os limites da cincia. As questes ticas, sociais, econmicas e polticas no podem estar dissociadas do tema e do eixo das discusses. Parte da sociedade comunga a percepo de que este assunto est sendo conduzido de forma inadequada, como demonstram protestos de grupos de presso e ONGs. Esta percepo encontra respaldo nos episdios recentes da doena da vaca louca, entre outros. Portanto, o dilogo deve ser social e extrapolar as paredes dos laboratrios cientficos e gabinetes governamentais. Por fim, tambm preciso avaliar os impactos sobre o domnio no acesso e uso dos recursos genticos. Afirma-se, com freqncia, que o insumo mais importante para o novo milnio o conhecimento. As tecnologias decorrentes deste conhecimento podero acentuar assimetrias nas relaes econmicas e sociais entre as naes mais desenvolvidas e menos desenvolvidas, caso no forem estabelecidos mecanismos compensatrios e regulatrios. No se pode
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admitir que interesses econmicos de uma minoria se sobreponham aos interesses maiores da sociedade. Contudo, os recursos genticos no tero papel menos importante que o conhecimento. Biotecnologias sem diversidade so mero exerccio acadmico, como afirma um documento da FAO (1999). Desta forma, imperiosa a manuteno da diversidade bem como fundamental tomar as medidas para evitar as ameaas eroso gentica. REFERNCIAS ACKERLY, D.D.; DUDLEY, S.A.; SULTAN, S.E.; SCHMITT, J.; COLLEMAN, J.S.; LINDER, C. R.; SANDQUIST, D.R.; GEBER, M.A.; EVANS, A.S.; DAWSON, T.E.; LECHOWICZ, M.J. The evolution of plant ecophysiological traits: recent advances and future directions. BioScience, v.50, n.11, p.979-995, 2000. ALLARD, R.W. Princpios do melhoramento gentico das plantas. So Paulo: Blucher-USAID, 1960. 381p. ARRIOLA, P.E.; ELLSTRAND, N.C. Crop-to-weed flow in the genus Sorghum (Poaceae): spontaneous interspecific hybridization between johnsongrass, Sorghum halapense, and crop sorghum (S. bicolor). American Journal of Botany, v.83, p.1153-1160, 1998. BEETHAM, P.R.; KIPP, P.B.; SAWYCKY, X.L.; ARTZEN, C.J.; MAY, G.D. A tool for functional plant genomics: Chimeric RNA/DNA oligonucleotides cause in vivo gene-specific mutations. Proceedings of National Academy of Sciences, v.96, p.8.874-8.878, 1999. BERGELSON, J., PURRINGTON, C.B.; WICHMANN, G. Promiscuity in transgenic plants. Nature, v.395, p.25, 1998. CHVRE, A-M.; BARANGER, F.E.A.; RENARD, M. Gene flow from transgenic crops. Nature, v.389, p.924, 1998. CHO, Y.; QIU, Y-L.; KUHLMAN, P.; PALMER, J.D. Explosive invasion of plan mitochondria by a group I intron. Proceedings of National Academy of Sciences, v.95, p.14.244-14.249, 1998.
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