TEMA 3.

RECOGIDA Y MANIPULACIÓ
MANIPULACIÓN DE
MUESTRAS. COLORANTES EN HEMATOLOGÍ
HEMATOLOGÍA

NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

#Punción venosa
•Región antecubital, yugular o femoral en RN, dorso de
la mano y pie en ancianos y obesos
•Punción limpia. Evitar coágulos
•En pacientes con terapia de anticoagulante se debe
presionar la herida durante 10 min.
•Procedimiento
™Brazo caliente y cinta elástica en el brazo
™Cerrar el puño para ver las venas
™Limpiar con solución desinfectante
™Realizar punción limpia
™Liberar el compresor
™Abrir puño y extraer aguja. Presionar

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 NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

#Punción venosa
•Tubos estériles al vacío con anticoagulante

•En el caso de jeringa y aguja se llenan de sangre los tubos

(que llevan anticoagulante), quitando previamente la aguja y
resbalando la sangre por la pared de los tubos, y se mezcla por
inmersión

•Tubos bien identificados. Botón rojo muestras infecto-

contagiosas

NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

#Punción capilar
•Muestras de sangre pequeñas o dificultades para
realizar la venopunción
•Pulpejo del dedo, lóbulo oreja o talón del pie (RN)
•Lancetas estériles con un tope
•Técnica:
™Vasodilatación
™Desinfectar y secar
™Pinchar con la lanceta, desechar las primeras gotas y
llenar el capilar o pipetas
•Extensiones de sangre periférica, Hematocrito, Hb

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 ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

#Utilidades anticoagulantes
•Obtener plasma o muestras de sangre total
•Estudiar características morfológicas
•Realizar recuentos celulares

#Propiedades anticoagulantes
•No alterar la morfología de los leucocitos
•No alterar el tamaño eritrocitario
•No producir hemólisis
•Impedir agregación plaquetaria
•Máximo tiempo de conservación de la muestra

ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

#EDTA
•Efecto quelante sobre el Ca
•EDTA-Na2
•EDTA-K3. Para recuento celular en autoanalizador

#Heparina
•Impide el paso protrombina → trombina

•No modifica las características celulares de leucocitos y

eritrocitos, pero proporciona color azul en los frotis de
tinciones panópticas

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 ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

#Citrato sódico
•Impide ionización del Ca
•Se utiliza en:
™Pruebas de hemostasia (1:9)
™VSG (1:4)

#Oxalato sódico
•Pruebas de hemostasia (1:4)

#ACD (Ácido cítrico 0,9 g; Citrato sódico 2 g; Dextrosa 2 g;

H2O 120 mL)
•Bancos de sangre (1:4)

EXTENSIONES DE SANGRE

Materiales:
Portaobjetos esmerilados, limpios y libres de grasa
Cubreobjetos
Método de los dos portaobjetos:
Depositar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos
Colocar otro portaobjetos sobre el anterior con la gota de
sangre, con una inclinación de 45º
Desplazarlo hacia atrás hasta entrar en contacto con la gota y
permitir que, por capilarización, la gota se extienda a lo largo
del canto del portaobjetos
Deslizar el segundo portaobjetos inclinado sobre el primero de
manera suave y rápida, para permitir que la gota de sangre
queda extendida
A mayor inclinación, extensión más gruesa. Menor inclinación
= extensión más fina
Secado a temperatura ambiente

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 EXTENSIONES DE SANGRE

Realización de un frotis

EXTENSIONES DE SANGRE

Partes de un frotis
Método de los dos cubreobjetos

Métodos de los dos cubreobjetos:

Dos cubres sin grasa limpios y secos
Colocar en uno una pequeña gota de sangre
Sujetarlo por los vértices e invertirlo colocándolo sobre el otro
rotándolo 45 º
Por capilaridad se extiende la gota
Secar

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 PROCESAMIENTO DE MUESTRAS

#Para el laboratorio de hemostasia (citrato Na)

•PPP (1500 g 15 min.): TP, TTPA, fibrinógeno
•PRP (<500 g 15 min.): Determinación de plaquetas

#Para el laboratorio de hematimetría (EDTA-K3)

•Recuentos celulares
•Recuento de reticulocitos
•Índices eritrocitarios
•Índices plaquetarios
•Hb
•Hematocrito

COLORANTES EN HEMATOLOGÍA

#Fijación
•calor seco
•alcoholes
•formaldehído
•acetona
•metanol (el mejor para morfología)

#Objetivo de las tinciones

•Identificar células
•Identificar estructuras subcelulares
#Formas de transmitir el color un colorante
•Su propio color
•Un color distinto → Metacromasia
•Más de un color → Alocromasia

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 COLORANTES EN HEMATOLOGÍA

#Tipos de colorantes
•Básicos (catiónicos): basofilia
•Ácidos (aniónicos): acidofilia
•Neutros (aniónicos y catiónicos): acidofilia o basofilia

#Tipos de tinciones
•Tinción pancromática: azul de metileno, eosina, Wright
•Tinción panóptica: May-Grünwald-Giemsa

COLORANTES EN HEMATOLOGÍA

#Terminología
•Acidofilia: Avidez por colorantes ácidos (e.g. eosinófilos)
•Basofilia: Avidez por colorantes básicos (e.g. basófilos)
•Azurofilia: Coloración violácea-rojiza (y no azul)
•Hipocromía: Falta de intensidad en la coloración
(e.g. Anemia ferropénica)
•Hipercromía: Refuerzo de la tinción
•Anisocromía: Distintas intensidades de la coloración
en el mismo tipo de células
•Policromasia: Distinto color en el mismo tipo celular