TITOLO: Estrazione DNA dalla banana

SCOPO:

L’esperimento può essere suddiviso in tre fasi:

1) preparazione della soluzione per estrarre il DNA;
2) preparazione del campione da cui estrarre il DNA;
3) estrazione del DNA dal campione mediante la soluzione preparata

FASE 1

MATERIALI:
 50cc di acqua distillata (in alternativa acqua del rubinetto)
 bilancia
 1,5g di sale da cucina (cloruro di sodio, NaCl)
 cilindro graduato da 10cc
 cilindro graduato da 50cc
 5cc di detersivo per i piatti
 becker da 100cc
 bacchetta di vetro

PROCEDIMENTO:
1. con la bilancia pesa 1,5g di NaCl.
2. versa il sale in un Becker da 100cc a aggiungici 50cc di acqua distillata.
3. mescola con la bacchetta di vetro fino alla completa dissoluzione del sale
4. con il cilindro graduato preleva 10cc di detersivo liquido e aggiungilo alla soluzione
5. mescola con la bacchetta di vetro per omogeneizzare i componenti evitando di
produrre bolle

FASE 2

MATERIALI:
 50g di banana (frutto di Musa acuminata o Musa balbisiana )
 bilancia
 coltello
 mortaio con pestello
 cucchiaino
 becker da 250cc

PROCEDIMENTO:
1. metti circa 50g di polpa di banana su un mortaio e schiacciala con il pestello fino a
trasformarla in poltiglia.
2. raccogli la poltiglia in un becker da 250cc
Il sapone serve____________________________________________________________

Il sale viene aggiunto per denaturare __________________________________________

Quindi la soluzione di estrazione __________________le cellule e difende il Dna dall’azione delle _________

FASE 3
MATERIALI:
 termometro
 cristallizzatore con acqua a 60°C (becker di maggiori dimensioni)
 vaschetta con acqua e cubetti di ghiaccio
 bacchetta di vetro
 imbuto
 carta da filtro (per una filtrazione più veloce puoi usare la carta da cucina)
 provette
 cilindro graduato
 porta provette
 pipette graduate
 succo d'ananas
 etanolo freddo (tenuto per almeno un'ora nel freezer)

Attenzione: a questa concentrazione l’etanolo è molto

pericoloso.
Lavora con estrema cautela, lontano da fiamme e
scintille: bada a non inalarlo e tanto meno ingerirlo!

PROCEDIMENTO:
1. aggiungi la soluzione di estrazione alla poltiglia di banana
2. metti il becker a bagnomaria in un cristallizzatore contenente acqua a 60°C per 15
minuti preoccupandoti di mescolare la poltiglia in modo da distribuire la soluzione di
estrazione e da uniformare la temperatura
3. utilizzando il termometro controlla che la temperatura dell’acqua riscaldata rimanga
il più possibile costante a 60 °C
4. passati i 15 minuti, togli il becker dall’acqua calda (attenzione a non scottarti) e
immergilo subito nella vaschetta con il ghiaccio
5. lascia il vasetto nel ghiaccio per 5 minuti e intanto prepara l’occorrente per la
filtrazione
6. metti l'imbuto sopra un cilindro graduato
7. prendi la carta bagnala con dell'acqua e sistemala nell'imbuto
8. versa lentamente la poltiglia facendo attenzione che il materiale non esca
dall'imbuto
9. mescola lentamente per facilitare e velocizzare la filtrazione
10.versa 5ml di filtrato in una provetta
11.aggiungici 10 ml di succo d'ananas
12.lascia riposare il filtrato per 5 minuti
13. aggiungi lentamente 5ml di etanolo freddo, cercando di evitare che si mescoli al
filtrato
14. lascia riposare la provetta per altri 5 minuti

per il punto 11:agisce la bromelina del mais, enzima che digerisce _________________________________________
Ora all'interfaccia fra alcool e filtrato dovrebbe comparire una massa bianchiccia
gelatinosa che, grazie alla sua struttura filamentosa, potrai facilmente avvolgere attorno al
filo di ferro piegato a uncino.
RACCOGLI LE IDEE E ANNOTA LE TUE IPOTESI
1. Per quale motivo, secondo te, è necessario svolgere azioni apparentemente incoerenti
fra loro come scaldare e subito dopo raffreddare il campione da cui intendiamo estrarre il
DNA?
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2. Perché ridurre in poltiglia la banana?

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3. A che cosa può servire, secondo te, sciogliere nell’acqua il detersivo per piatti e il sale
da cucina?
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4. Perché occorre mantenere per qualche tempo la miscela di estrazione a 60°C?

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5. Perché, dopo il riscaldamento, occorre trasferire rapidamente l’estratto dall’acqua calda

in cui si trova a un ambiente raffreddato addirittura col ghiaccio?
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6. Perché poi filtrare l’estratto?

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7. Quale ruolo pensi svolgano, rispettivamente, il succo di ananas e l’etanolo freddo?

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8. Dove si è accumulato il DNA precipitato? Prova a ipotizzare il perché.
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9. Pensi davvero di aver estratto dal nucleo solo la molecola del DNA?
Quale altra sostanza potrebbe essere presente in ciò che hai separato? (Pensa a quale
sostanza ha alcune caratteristiche analoghe al DNA e serve a trasferire l’informazione
genetica dal nucleo al citoplasma della cellula).
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