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Facultad de Química
Farmacéutica Biológica
ÍNDICE
PRACTICA 1:
SELECCIÓN DEL FÁRMACO PARA TRABAJAR EN EL LABORATORIO DE
BIOFARMACIA.............................................................................................3
PRÁCTICA 2:
CONTROL DE CALIDAD DE TABLETAS DE ALBENDAZOL..................................5
PRÁCTICA 3:
CURVA DE CALIBRACIÓN DE ACIDO ACETILSALICÍLICO.................................14
PRÁCTICA 4:
MÉTODO ACUOSO PARA DETERMINAR ALBENDAZOL....................................17
PRÁCTICA 5:
11 Mayo
MÉTODO DE ANÁLISIS DE ALBENDAZOL EN ORINA.......................................20
2011
PRÁCTICA 6:
PERFIL DE DISOLUCIÓN DE ALBENDAZOL....................................................22
Perfil de disolución de Albendazol
Universidad Veracruzana
Facultad de Química Farmacéutica Biológica
Practica 1
Selección del fármaco para trabajar en el laboratorio de Biofarmacia.
Objetivo
Que el alumno seleccione y realice una investigación sobre el fármaco que
utilizará para trabajar en el laboratorio de Biofarmacia.
Fundamento
La selección del fármaco que se analizará durante el curso del laboratorio de
Biofarmacia, se basa en considerar los factores que permitirán llevar a cabo de
los temas indicados en el programa. De esta manera es importante considerar
los siguientes puntos:
– Que en el laboratorio de Tecnología Farmacéutica de la Facultad de QFB, se
encuentren los reactivos, estándar de referencia y los equipos mencionados
en cada prueba de análisis.
– Que el fármaco sea económico
– Que sea accesible en el mercado para su obtención.
– Que se encuentre registrado en la farmacopea, para poder realizar su
análisis farmacéutico correspondiente.
– Que el método de cuantificación sea sencillo.
– Que el fármaco tenga un porcentaje alto de eliminación inalterada por vía
renal.
Generalidades
Es importante conocer los conceptos de farmacocinética y biodisponibilidad en
la investigación biomédica de nuevos fármacos. La farmacocinética estudia
como el principio activo objeto de análisis se absorbe, distribuye, metaboliza y
excreta en un organismo vivo. Por otra parte, la biodisponibilidad es un
parámetro farmacocinético que nos indica la cantidad de medicamento que ha
alcanzado la circulación general.
PROPIEDADES FARMACOLÓGICAS
En el diccionario de especialidades farmacéuticas (PLM) de la Facultad de
medicina de la UNAM que se encuentra disponible en internet se encuentra que
el Albendazol posee una escasa absorción en el tracto gastrointestinal debido
a una baja solubilidad acuosa. En el plasma no es posible detectar
concentraciones de albendazol, puesto que rápidamente se convierte en el
metabolito Albendazol sulfóxido antes de alcanzar la circulación sistémica. La
biodisponibilidad oral se incrementa con la ingesta concomitante de comida
rica en grasa (contenido estimado de grasa 40 g).
Las concentraciones plasmáticas máximas de sulfóxido de albendazol se
encuentran a las 2-5 horas luego de la administración oral (400 mg) junto a
alimentos grasos y son en promedio 1,31 µg/mL (rango de 0,46 - 1,58 µg/ml).
El promedio aparente de la vida media de eliminación del sulfóxido de
albendazol es de 8-12 horas, tanto en sujetos sanos como en pacientes con
enfermedad hidatídica y neurocisticercosis.
El sulfóxido de albendazol se liga en un 70% a las proteínas plasmáticas y
posee una amplia distribución corporal, siendo detectado en orina, bilis,
hígado, en las paredes y líquido del quiste, LCR.
La excreción urinaria del sulfóxido de albendazol es una vía de eliminación
menor con menos del 1% de la dosis recuperada por orina. La excreción biliar
posee concentraciones de sulfóxido de albendazol similares a las obtenidas del
plasma.
Lo importante en la investigación de la farmacodinamia, fue que en el ser
humano no posee efecto farmacológico a dosis terapéuticas de 5 mg/kg. Por
ello se comercializan a dosis en tabletas a partir de 200mg.
Metodología
1. Se revisó en el laboratorio de Tecnología Farmacéutica, los reactivos
disponibles
2. Se compararon los precios de los fármacos más accesibles.
3. Se visitaron algunos establecimientos de distribución de medicamentos
para comparar los precios de las diferentes marcas de albendazol
4. En la farmacopea, se estudiaron los métodos de análisis del fármaco
que se va a trabajar.
5. Se eligió por costo económico el Albendazol de origen genérico
intercambiable.
6. Se inició la investigación mediante la revisión bibliográfica en el
diccionario de especialidades farmacocinéticas y otras fuentes
bibliográficas.
Resultados
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Conclusión
Elegimos Albendazol como fármaco de investigación.
Bibliografía
Objetivo
Realizar las pruebas de control de calidad de las tabletas con 200mg de
principio activo de albendazol para comprobar que cumple con las
especificaciones de la FEUM.
Fundamento
El control de calidad de productos formulados farmacéuticos es una parte
especializada que apunta no sólo a controlar cualitativamente y
cuantitativamente los ingredientes de la formulación, sino también a verificar
las características farmacotécnicas y posológicas de los productos, en relación
a requisitos preestablecidos. Tiene como objetivo el evaluar la calidad del
producto fabricado, empleado como marco de referencia las especificaciones
previamente establecidas en la fase de desarrollo del mismo, esto con la
finalidad de garantizar la uniformidad en la fabricación de lote a lote.
Generalidades
Los parámetros de comprobación de la calidad son múltiples dentro de los
cuales encontramos:
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Caracteres Organolépticos:
* Aspecto, Apariencia: Observar si el color es uniforme (no deben haber
motas, grietas, microcrateres, partículas reflectoras y polvo suelto sobre la
superficie de la tableta)
* Olor: Para reconocer contaminación microbiana especialmente cuando se
utilizan excipientes como el almidón, celulosa, lactosa gelatina etc. Para
esta prueba se acostumbra destapar cada tambor y percibir de inmediato el
olor, o si se puede calentando una muestra de comprimidos hasta que
desprendan el olor.
* El sabor y textura, se analizan especialmente en los estudios de pre
formulación, donde se necesita brindar soluciones a los fármacos con
problemas de sabor.
Caracteres Geométricos:
* Tamaño (Diámetro y altura). Las dimensiones físicas del material junto con
la densidad de los materiales en la formulación de las tabletas
determinarán su peso. Las dimensiones (diámetro y altura) se acostumbran
a medir con un vernier o un tornillo micrométrico que da lecturas en
décimas de milímetro. Las medidas deben tener máximo una variación del
5% del valor estandarizado. Variaciones pequeñas de la altura o el diámetro
no deben notarse a simple vista.
* Variaciones altas pueden producir dificultades al empacar las unidades
tanto en el blisteado como en el llenado de recipientes de dosis múltiples.
Caracteres de Biodisponibilidad:
* Desintegración. La desintegración sirve al fabricante como guía en la
preparación de una fórmula óptima y en las pruebas de control de proceso
para asegurar la uniformidad de lote a lote. Si se desintegra una tableta no
quiere decir que el fármaco se vaya a disolver.
* Disolución. Los objetivos de disolución son que el fármaco se libere lo más
cercano al 100% y que la velocidad de liberación del lote sea uniforme para
que éstos sean clínicamente efectivos. Como la prueba de desintegración
no garantiza que la formulación libere el fármaco, se realiza la prueba de
disolución ya que las tabletas deben primero disolverse en el tracto
gastrointestinal para absorberse. Frecuentemente la velocidad de absorción
de un fármaco es determinada por la velocidad de disolución de las
tabletas. Los fármacos que tiene buena absorción en el tracto
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Metodología
Materia Prima
Tabletas de Albendazol GI 200 mg, lote 10081368 y con fecha de caducidad de
agosto de 2012, preparados en el laboratorio Química Son´s.
Disolución:
→ Preparación de Solución de referencia:
Pesar una cantidad de la SRef de albendazol equivalente a 11 mg de
albendazol, pasar a un matraz volumétrico de 100 mL, disolver con solución
de acido clorhídrico al 2.0 por ciento (v/v) en metanol, llevar al aforo con
solución de hidróxido de sodio 0.1 N y mezclar.
Pasar una alícuota de 4mL de esta solución aun matraz volumétrico de 50
mL, llevar al aforo con solución de hidróxido de sodio 0.1 N y mezclar. (8.8
µg/mL de albendazol).
→ Ensayo de disolución.
Colocar cada tableta en los vasos del disolutor con 900 mL de acido
clorhídrico 0.1 N accionarlo a 50rpm durante 30 minutos; filtrar
inmediatamente una porción de esta solución. Pasar una alícuota del
filtrado equivalente a 444 µg de albendazol aun matraz volumétrico de 50
mL y llevar al aforo con ácido clorhídrico 0.1N y mezclar. Obtener la
absorbancia de la preparación de la muestra y de la solución de referencia,
a las longitudes de onda de máxima absorbancia de 308nm y de 350nm,
utilizar celdas de un centímetro y solución de Hidróxido de Sodio 0.1 N
como blanco. Calcular el porcentaje de C12H15N3O2S disuelto, por medio de
la siguiente fórmula:
100D [Sref][Am/Aref]/M
Donde:
D= Factor de dilución
Am = Absorbancia de la muestra
Aref = Absorbancia de la solución de referencia
[Sref] = Concentración de la solución de referencia
M = Dosis
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Resultados
Información de empaque:
Marca: Genérico Registro sanitario No.:
intercambiable 246M93 SSA IV
Principio activo: Albendazol Lote: 10081368
sulfoxido Caducidad: agosto 2012
Forma farmacéutica: Fórmula
tabletas Cada tableta contiene:
Dosis: 200 mg Albendazol sulfóxido:
Vía de administración: Oral 200 mg
Fabricante: Laboratorio Excipiente cbp: 1
Química Son`s S.A. de tableta
C.V.
Resultados en el aspecto:
Apariencia: Uniformidad del color, tableta blanca
Textura: Ausencia de grietas y sensación suave.
ENSAYOS GEOMETRICOS
ENSAYOS MECÁNICOS
Friabilidad
Peso inicial Peso final
6.6551 g 6.3542 g
% friabilidad=6.6551-6.35426.6551100=4.52 %
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Prueba de disolución
Cálculos para realizar la lectura en el Nº de vaso Absorbanci
espectrofotómetro UV-Bis: a
200 mg →900 mL 0.222 mg →1 mL 1 0.0136
x→1 mL 0.444 mg →X 2 0.0123
x=0.222mg/mL 3 0.0142
4 0.0132
444 μg=0.444 mg X=2 mL
5 0.0137
Referencia 0.0068
Cálculo de albendazol sulfóxido
disuelto en 30 minutos (Q) Q= 10045000.0088
mg/mL0.01360.0068200 mg= 39.06
Q=(100)DSrefabs MAbs SrefM
Q= 10045000.0088
[D]= Factor de dilución mg/mL0.01230.0068200 mg=35.81
Abs M = absorbancia de la muestra
Abs Sref = absorbancia de la solución Q= 10045000.0088
de referencia mg/mL0.01420.0068200 mg=41.34
[Sref] = concentración de la solución
de referencia
[M] = Dosis Q= 10045000.0088
mg/mL0.01370.0068200 mg=42.80
Donde:
Q= 10045000.0088
[D]= 900 X 5= 4500
Abs Sref = 0.0068 mg/mL0.01320.0068200 mg=38.43
[Sref] = 8.8µg/mL = 0.0088 mg/mL
[M] = 200 mg
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100 % → 200mg
Promedio de albendazol sulfóxido disuelto
39.48 % → x
X = 78.97 mg en 30 minutos= 39.48%
* En la FEUM SE establece un valor de Q de 75% disuelto a los 30 minutos.
Discusión:
Con los análisis realizados se determinó la calidad de las tabletas de
albendazol que se adquirieron del Fármaco elaborado en el Laboratorio
Química Son´s , según lo investigado el albendazol alcanza su tiempo de vida
media de las 5-8 horas después de su administración. Las tabletas presentaron
una calidad aceptable en cuanto a sus propiedades físicas, mecánicas y de su
aspecto.
Conclusión
Se realizaron las pruebas de control de calidad según la FEUM al fármaco para
conocer el control de calidad de fabricación del fármaco.
Referencias
1. Romero MA. Desarrollo de nuevas metodologías analíticas en el control de
calidad de la industria farmacéutica. Universidad Autónoma de Barcelona.
2. Rojas Camargo Jhon Jairo. 2004. Parámetros de calidad de los comprimidos,
Farmacotecnia I. Universidad de Antioquia. Antioquía, Turquía. Disponible
en:
http://docencia.udea.edu.co/qf/farmacotecnia/10/parametros.html
3. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 8ª Edición. Tomo I y II
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CERTIFICADO DE ANÁLISIS
Forma y marcas Presentar forma característica Forma circular, sin marcas: Cumple
y sin marcas
Dimensiones Medidas de Diámetro, corona Valores de diámetro, corona
y borde constantes y borde sin variaciones: Cumple
Dureza 5-10 fuerza/área. 7.31 fuerza/área: Cumple
Práctica 3
Curva de Calibración de Acido Acetilsalicílico
Objetivo
Hacer una curva de calibración de ácido Acetilsalicílico.
Fundamento
Curvas de calibración
La ley de Lambert-Beer permite la determinación de concentraciones de
disoluciones. Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se
preparan soluciones de diferentes concentraciones del mismo, determinándose
para cada una de ellas el valor de absorbancia a λmáx. Estos valores de
absorbancia se representan en el eje de ordenadas (eje de y) y los de
concentración en el eje de las abcisas (eje de x). Se observará que (en
concentraciones bajas) el aumento de concentración corresponde con un
incremento lineal en la absorbancia (zona de cumplimiento de la ley de
Lambert-Beer). A concentraciones altas la linealidad se pierde y se observa que
la línea se aplana, por lo que las medidas son poco fiables.
ÁCIDO ACETILSALICÍLICO
Metodología:
Resultados:
Concentración AAS Absorbancia
µg/mL
4 0.0122
8 0.0268
12 0.0495
16 0.0618
20 0.1006
40 0.1609
60 0.2054
80 0.2516
100 0.3123
Mediciones de absorbancia a 265nm para ácido Acetilsalicílico.
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Discusión
La curva al inicio se observa variable, esto puedo ser debido al manejo inicial
de las concentraciones, pero a medida que se trabajó con las muestras se logró
hacer un mejor perfil. Esto lo podemos observar en la regresión que está muy
cercana a 1.
Conclusión
Se realizó la curva del ácido Acetilsalicílico verificando una buena linealidad.
Referencias:
1. Goodman &Gilman. Las Bases Farmacológicas de la Terapéutica.
Volumen I y II. Décima edición. Edit. Mc Graw Hill. 2004.
2. Abril Díaz N, et al. Espectrofometría: Espectros de absorción y
cuantificación colorimétrica de biomoléculas. Departamento de
Bioquímica y Biología Molecular. Facultad de Medicina. Córdoba.
3. http://www.vademecum.medicom.es
4. http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/a015.htm
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Práctica 4
Método acuoso para determinar tabletas de Albendazol
Objetivo
Que el alumno desarrolle una curva de calibración de tabletas de albendazol
de 200mg en medio acuoso.
Fundamento
Metodología
4. Una vez hechas las diluciones leer su absorbancia en espectro UV a 278 nm,
colocando como blanco acido clorhídrico 0.01 N.
5. Graficar los resultados de las absorbancias obtenidas (eje de las Y) contra las
concentraciones conocidas (eje de las X).
Resultados
Resultados de las absorbancias obtenidas a una concentración conocida.
Concentració Absorbancia
n µ g/ml
5 0.1593
8 0.3028
11 0.4258
14 0.5703
17 0.6362
20 0.7917
30 1.1671
40 1.4979
50 1.8428
60 2.5311
70* saturada
* Lectura de absorbancia saturada.
Discusión
Se realizaron los cálculos para obtener las alícuotas requeridas para elaborar
una curva de calibración en medio acuoso, a una concentración conocida,
como se observa en la tabla anterior, y en la gráfica; sin embargo a una
concentración de 70 µ g/ml, nos da como resultado una absorbancia saturada,
por lo cuál, fue eliminada en la gráfica anterior. Cabe señalar que nuestro valor
de R2 obtenido fue de 0.9039 lo cual nos indica que la relación entre la
linealidad de nuestros datos están dentro de los rangos requeridos, para poder
definir que tenemos valores confiables y un método realizado de manera
correcta.
Conclusión
Se logró obtener una curva de calibración con una linealidad de 0.9039
en medio acuoso con solución de Ácido clorhídrico 0.01N por lo que tenemos
un método confiable para cuantificar albendazol.
Referencias
1. Introducción a la espectroscopía de Absorción Molecular Ultravioleta, Visible
e Infrarrojo cercano. Brunatti C, Martín AM. Link
2. http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf visto 28 de
mayo de 2010.
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Práctica 5
Método de análisis de Albendazol en orina
Objetivo
Elaborar una curva patrón de Albendazol analizado en orina.
Fundamento
El albendazol (5-propiltio-1H-bencimidazol-2-il carbamato de metilo) (ABZ) es
un fármaco antihelmíntico de amplio espectro con demostrada actividad
sistémica que presenta efecto de primer paso y se transforma en un
compuesto conocido como sulfóxido de albendazol (ABSO).
Debido al extenso metabolismo del ABZ después de su administración oral, las
concentraciones plasmáticas del fármaco inalterado son muy bajas y su efecto
sistémico se ha asociado principalmente al ABSO. Este metabolito es
detectable tanto en plasma como en líquido cefalorraquídeo y en el interior de
los parásitos después de un período de incubación.
Sánchez y col. mencionan en su articulo de la revista Clinical
Neuropharmacology que la mayoría de los métodos publicados para cuantificar
metabolitos de albendazol utilizan plasma humano y plasma de diferentes
especies animales; sin embargo, sólo algunos consideran la determinación de
los compuestos en orina.
Metodología:
1.Se tomó una muestra de orina (Recolectada en 6 a 18 horas)
5.De esta solución madre se tomaron los siguientes volúmenes (5 µg, 8 µg, 11
µg, 14 µg, 17 µg, y 20 µg) para obtener las siguientes concentraciones (4.5,
7.3, 10, 12.7, 15.5 y 18.1).
Resultados
Concentración de Albendazol SR Absorbancia
5 µg/ml 0.1138
8 µg/ml 0.1668
11 µg/ml 0.2928
14 µg/ml 0.3704
17 µg/ml 0.5853
20 µg/ml 0.7907
Discusión
La curva de calibración en fluido biológico, en este caso orina, muestra un
comportamiento lineal de 0.9253, según lo que sabemos respecto a la
tendencia que debe ser lo mas próxima a 1, la curva no difiere mucho; lo cual
nos indica que el método utilizado puede ser útil para una calibración del
albendazol.
Conclusión
En esta práctica se realizó una curva de calibración en fluido biológico (orina)
la cual nos proporciona información para conocer la biodisponibilidad del
albendazol tabletas de 200 mg.
Referencias
1.Hurtado M., Medina M.T., Sotelo J., Jung H. 1989. Sensitive high-performance liquid
chromatographic assay for albendazole and its main metabolite albendazole
sulphoxide in plasma and cerebrospinal fluid. Journal
2.Sánchez M., Suártegui R., González-Esquivel D., Sotelo J., Jung H. 1993.
Pharmacokinetic comparison of two albendazole dosage regimens in patients with
neurocysticersosis. Clinical Neuropharmacology, 16:77−82.
3.http://ajol.info/index.php/ajb/article/viewFile/43078/26628.
Práctica 6
Perfil de disolución de Albendazol
Objetivo
Llevar a cabo el perfil de disolución de Albendazol para determinar si este fármaco
tiene una buena velocidad de absorción y biodisponibilidad y por ende tiene un
correcto funcionamiento.
Fundamento
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Generalidades
En México, la prueba de disolución para albendazol tabletas, se publicó en 1992, en el
segundo suplemento de la 5ª edición de la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos (FEUM). Las especificaciones indicaban el uso del aparato 2 (paletas), a una
velocidad de agitación de 50 rpm y 900mL de ácido clorhídrico al 0.3% (w/v), como
medio de disolución, siendo el requerimiento de no menos del 85% disuelto a los 30
minutos (Q ). En el año de 1994, la sexta edición de la FEUM modifica las
especificaciones y establece 900mL de HCl 0.1N como medio de disolución y el
requerimiento de no menos del 75% disuelto a los 30 min.
Estas condiciones de la prueba se han mantenido hasta la USP 30, sin embargo la
FEUM, en su 9ª edición modifica el requerimiento de disolución y al igual que la USP,
establece un valor de Q de 80% disuelto a los 30 minutos.
Considerando que en nuestro país existe poca información acerca del comportamiento
de disolución de productos conteniendo este fármaco, el objetivo del presente estudio
fue comparar los perfiles de disolución de productos conteniendo albendazol (tabletas)
disponibles comercialmente en México, utilizando el método Farmacopéico y
determinar el poder de discriminación del mismo mediante el alcance modelo
independiente de comparación de perfiles, factor de similitud, f2.
Metodología
1. El análisis se lleva a cabo a 50 rpm utilizando como medio de disolución 900 mL
de HCl 0.1N mantenido a 37°C ±0.5°C.
2. Se toman muestras de 1mL a los siguientes tiempos: 10, 20, 30, 45, 60 y 90
min, se filtra
3. Se diluye cada muestra con 10ml de HCl 0.1N y se mide la absorbancia a 308
nm
Resultados
Tiempo Absorbanc
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(minutos) ia M
10 0.0145
20 0.0176
30 0.0209
45 0.0238
60 0.0275
90 0.0314
Q= 10045000.0088 Q= 10045000.0088
mg/mL0.01450.0068200 mg= mg/mL0.02380.0068200 mg=69.3
42.22
Q= 10045000.0088
Q= 10045000.0088 mg/mL0.02750.0068200
mg/mL0.01760.0068200 mg=80.07
mg=51.24
Q= 10045000.0088
Q= 10045000.0088 mg/mL0.03140.0068200
mg/mL0.02090.0068200 mg=91.42
mg=60.08
Conclusión
Referencias
1. Jung-Cooka J, Mayet L, Mendoza O, Rodrígues JM. Estudio comparativo de perfiles de
disolución de tabletas de albendazol del mercado nacional. Revista Mexicana de
Ciencias Farmacéuticas. México 39;(4), 2008.
2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 8ª Edición. Tomo I y II