Catalogo Histologia Merck

Rápido y seguro.
Todo lo que necesita

para histología.
Contenido
04 • 05
01
Introducción
06 • 09 10 • 11 12 • 15 16 • 25 26 • 35
02 03 04 05 06
Fijadores Descalcificación Histoprocesamiento Solventes Tinciones
• Formaldehído • OSTEOMOLL® • Histosec® • Etanol • Tinción nuclear

• Etanol • OSTEOSOFT® • Cortes de parafina • 2-propanol con hematoxilina
• Acetona • Tinción de H&E
• Xileno • Tinción de PAS
• Neo-Clear® • Azul alcián-PAS
• Neo-Clear® y • Tinción rojo nuclear
Neo-Mount™ • Azul alcian-rojo
nuclear
• Tinción de Van Gieson
• Tinción de Giemsa
36 • 65 66 • 67 68 • 69 70 • 71 72 • 73
07 08 09 10 11
Kits de Tinciones ISOSLIDES® Montaje Colorantes en QM
forma sólida Gestión de Calidad
• Tinción de PAS • ISOSLIDES® • Bálsamo de Canadá

• Certistain®
• Hematoxilina férrica Reticulina porta- • Entellan™ 74 • 75
• Otros colorantes
de Weigert's objetos de control • Entellan™ nuevo en forma sólida
• Fibras elásticas • Entellan™ nuevo 12
Van Gieson para cubreobjeto Referencias
• Masson-Goldner • DPX
• Plateado de • DPX nuevo
metenamina • Neo-Mount™
• Plateado según
Warthin-Starry
• Plateado de reticulina
• Plateado según
von Kossa
• Rojo Congo
• Tb-color modificado
• Tb-fluor
• Tb-fluor, libre de fenol
• Tinción de ADN
• HEMATOGNOST Fe™
• LEUCOGNOST® NASDCL
Introducción
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Introducción
Certificación CE de IVDs
La Directiva Europea de Dispositivos Médicos In Vitro La Directiva agrupa IVDs de la siguiente manera:
(98/79/CE) del 20 de octubre de 1998, constituye el Clase 2 - IVD en la lista del anexo II A (que incluye kits
instrumento legal en el cual se basa la legislación IVD de pruebas para VIH y algunos productos de grupo
dentro de los Estados Miembros de la Unión Europea. sanguíneo) y la Lista B (que incluye kits de prueba para
Es una directiva obligatoria vigente desde diciembre varios anticuerpos y virus y kits de pruebas de glucosa
del año 2003, para todos los Dispositivos Médicos In en sangre).
Vitro (IVDs) que se comercializan en el mercado de la Clase 1a - IVD para autodiagnóstico, que no sean las
Unión Europea. Por esta razón, a partir del año 2005, de la Clase 2,
todos los fabricantes deben obtener la Certificación Clase 1 - todos IVDs distintos de los contemplados en
CE e incorporarla en el etiquetado de sus productos y el Anexo II y el IVD para el autodiagnóstico. Nuestros
en sus instrucciones de uso previo a la venta. "Productos para Microscopía" pertenecen a la Clase 1.
El término Dispositivo de Diagnóstico In Vitro se asigna La certificación CE es un proceso de auto-certificación

a cualquier dispositivo médico, un reactivo, calibrador, en la que se declaran los detalles de un determinado
material de control, equipo, instrumento, dispositivo, producto y se validan de acuerdo con los requeri-
equipo o sistema, utilizado sólo o en combinación, mientos de la EDMA (Asociación de Fabricantes de
destinado por el fabricante a ser usado "in vitro" para Diagnostica Europea) teniendo como base la
el estudio de muestras, incluyendo sangre y tejidos clasificación del código VDGH (Verband der
procedentes del cuerpo humano, exclusiva o principal- Diagnostika-Industrie eV). Merck ha completado con
mente, con el fin de proporcionar información: éxito el proceso de certificación CE en diciembre de
• r elativa a un estado fisiológico o patológico, 2003, para todos los productos de Microscopía
• r elativa a una anomalía congénita, clasificados como IVDs y que pertenecen al grupo de
•p ara determinar la seguridad y compatibilidad bajo riesgo. Los nuevos productos son desarrollados,
con receptores potenciales, fabricados, certificados y documentados de acuerdo
• para supervisar las medidas terapéuticas con la normativa, y se han registrado con la Autoridad
Competente antes de ser puestos en el mercado.
El proceso de certificación CE, también cubre la
realización de auditorías internas y externas de los
sistemas de gestión de calidad de acuerdo con la
norma ISO EN 13485.
Fijadores
La fijación de una muestra significa interrumpir los complejos procesos metabólicos intravitales y
supravitales que se producen en los tejidos, preservando las estructuras y la prevención del decaimiento
postmorten. La fijación cambia fundamentalmente el estado nativo del tejido y los análisis se basan en
una imagen que es característica del fijador utilizado. En histología el material de muestra se satura en
el líquido fijador, para luego ser seccionado finamente e inmerso en un volúmen de fijador, como mínimo
20 veces mayor que el volumen del tejido a ser fijado.
La fijación evita:
• A utólisis, producida por las enzimas

propias de las células
• Putrefacción, causada por microorganismos
• Descomposición, bajo oxígeno atmosférico
• Descomposición, el mismo proceso
pero sin oxígeno
Objetivo de la fijación
Las proteínas, sustancias orgánicas solubles, son desnaturalizadas con formaldehído para hacerlas insolubles y
biológicamente inactivas y para inducir el entrecruzamiento. La reacción de las cadenas laterales de las proteínas
con formaldehído conduce al entrecruzamiento, lo que lleva a los antígenos a ser enmascarados e incapaces de
reaccionar con los anticuerpos a menos que estén especialmente pre-tratados.
RH + CH2O R-CH2(OH)
R-CH2(OH) + HR´ R-CH2-R´ + H2O
Los lípidos se fijan y estabilizan a través de la fijación de la fracción proteica. Los lípidos son extraídos en alcohol
y son visibles como vacuolas o estructuras que semejan una malla vacia. Los hidratos de carbono se estabilizan a
través del tejido circundante fijo. Los ácidos nucleicos pierden su estructura cuando se fijan y forman agregados.
La estabilización es debida al tejido circundante fijo. Espacios intercelulares se hacen más grandes. Los límites
entre las diversas estructuras pueden presentar daño estructural masivo. Las estructuras que contienen agua
pueden presentar contracción o hinchazón inducida por la ósmosis.
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Fijadores
Formaldehído
El formaldehído (HCOH) es uno de los fijadores más familiares
y efectivos. Se ha utilizado por más de 100 años. Su solución
acuosa se conoce como formalina o formol.
Ventajas de la fijación con formaldehído Información Técnica

Las estructuras se mantienen. La solución madre es acuosa El formaldehído es un fijador rápido que perfunde aproximada-
aprox. 40% de formaldehído. Las soluciones de trabajo son al mente 1 mm de tejido por hora. Los tiempos de fijación no deben ser
4% o al 10%. Las muestras fijadas se mantienen estables inferiores a 8 horas para permitir la fijación completa de la muestra.
durante mucho tiempo, el material se endurece, por lo que es Mantener las muestras en el frío puede dar lugar a la formación de
fácil trabajar con él. Las enzimas tales como fosfatasa alcalina, para-formaldehído como resultado de la polimerización; este sedi-
esterasas inespecíficas, esterasa y lipasa específica permanecen menta en forma de precipitado blanco, reduciendo la concentración
activas después de la fijación con formalina. de la solución. Es importante, por lo tanto, no mantener soluciones
Cuando las muestras son mantenidas en soluciones diluídas de en el refrigerador. El ácido fórmico formado, por ejemplo, de la
formalina, éstas se pueden almacenar prácticamente en forma exposición a la luz en soluciones no estabilizadas y no tamponadas,
indefinida. La formalina, incluso en concentraciones muy puede perjudicar la tinción nuclear. Fijación con formaldehído es
bajas, tiene un efecto desinfectante sobre los virus, bacterias, especialmente adecuada para los siguientes tipos de muestra:
esporas, bacterias de la tuberculosis, la hepatitis y el virus del muestras generales, depósitos calcificados, hueso, cartílago, sistema
SIDA. nervioso. Soluciones ácidas de formaldehído tienen un impacto
negativo en tinciones de plata, por lo que el pH debe permanecer
Desventajas de fijar con formaldehído en el intervalo neutro.
Investigaciones histoquímicas pueden llegar a ser difíciles Además de formaldehído, otros fijadores pueden ser utilizados.
cuando las enzimas y epítopes son enmascarados. Sin embargo Cuando se trabaja con soluciones de formaldehído es vital asegurar
el enmascaramiento puede ser parcialmente eliminado por el que el lugar de trabajo esté bien ventilado. La solución de trabajo al
lavado. El formaldehído puede causar problemas de salud, es 4% se ajusta con tampón de fosfato para proteger las estructuras del
alergizante y un irritante químico. tejido. La solución es adecuada para todos los tipos de tejidos y
asegura eficiencia y, al mismo tiempo una fijación suave.
Con la adición de carbonato de calcio, la solución madre al 37% está
protegida contra los cambios de pH hacia el rango ácido. El metanol
al 10% proporciona una protección eficaz para detener la
polimerización de formaldehído a para-formaldehído.
Información para pedidos

Nombre Presentación Número de artículo
Formaldehído en solución 4%, tamponado 5 l, 10 l Titripak® 100496
Formaldehído en solución mín. 37% libre de ácido, 1 l, 2.5 l 103999
estabilizada con aproximadamente 10% de metanol y carbonato de calcio
Otros fijadores
La literatura cita un número de otras mezclas fijadoras con productos químicos, que ya no están
disponibles para éste propósito, tales como el sublimado, ácido pícrico, cloroformo, ácido crómico
y acetato de uranilo. Los beneficios de estas mezclas fijadoras ya no son considerados en la
visualización de estructuras peculiares, debido a su naturaleza tóxica y peligrosa durante su
exposición, tanto para el usuario como para el medio ambiente.
Etanol
El etanol (alcohol etílico) con un contenido de 96% o 100% (absoluto) es otro fijador
utilizado con frecuencia. Actua extrayendo el agua de las muestras sin alterar sus
estructuras o componentes químicos. El reactivo utilizado para desnaturalizar el alcohol
es un metíl etíl cetona, que se comporta de forma neutral en las aplicaciones para las que
se utiliza. Las muestras a fijar no deben ser superiores a 5 mm de espesor. El etanol al
96% o al 100% lleva a una fijación rápida, y toma entre 30 y 60 minutos para muestras
de 1-2 mm de espesor o entre 2 y 4 horas para aquellos con un espesor de 3-4 mm. La
rápida deshidratación causada por la fijación con etanol, a menudo deja una muestra
dura y quebradiza y no siempre fácil de cortar. Puede ocurrir que la muestra se encuentre
fijada y dura en el exterior, mientras que el interior todavía no esté fijada correctamente.
Esto se puede evitar utilizando soluciones de etanol de baja concentración como 50% a
70%. El encogimiento puede ser evitado mediante la fijación en soluciones frías.

Etanol absoluto, para análisis EMSURE® ACS, ISO, Reac. Ph Eur 1 l, 2.5 l 100983
Etanol desnaturalizado con aprox 1% de metil etil cetona para análisis EMSURE® 1 l, 5 l 100974
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Fijadores
Tambor de acero retornable con sistema
de vaciado para gas inerte presurizado
Descalcificación
OSTEOMOLL® y OSTEOSOFT®
Métodos de descalcificación para exámenes microscópicos
ópticos de hueso y otros tejidos duros en
procedimientos histológicos de rutina
Para tejidos delicados, como muestras obtenidas por punción Por esa razón, es importante que los procedimientos para el
de la cresta ilíaca, deben ser descalcificados suavemente para procesamiento de material duro, deben ser evaluados, ya que
preservar las células y estructuras de los antígenos, y permitir la capacidad de tinción del material, puede verse reducida si
que métodos inmunohistoquímicos puedan ser aplicados se tratan demasiado tiempo con OSTEOMOLL®.
después de la descalcificación. OSTEOSOFT®, es recomendado Si se encuentra que el material descalcificado está demasiado
hoy en día, como un descalcificador suave y su número de duro para hacer el corte, todo el bloque puede ser colocado
artículo es el 101728. durante unos minutos, hacia abajo, en un plato de fondo plano
Para el material óseo más duro, se debe utilizar una solución que contenga OSTEOMOLL® para permitir más descalcificación.
descalcificadora que permita una descalcificación rápida y Si el material persiste en permanecer demasiado duro, el pro-
confiable: por ejemplo OSTEOMOLL®, número de artículo cedimiento se puede repetir. Secar el bloque de parafina con
101736. OSTEOMOLL® es una solución descalcificadora que cuidado y hacer los cortes en la forma usual.
contiene formaldehído ácido, por lo que la descalcificación
y la fijación se producen en un solo paso. OSTEOMOLL®
decalcifica huesos en un tiempo que oscila, entre 30 minutos
a un máximo de 8 horas dependiendo del tamaño, peso y
densidad de la muestra, por ejemplo, los fragmentos de hueso
de la cadera.
Biopsia de médula ósea, corte

de parafina, OSTEOSOFT®,
inmunohistoquímica, Plasmocitoma
Biopsia de médula ósea, corte

de parafina, OSTEOSOFT®,
inmunohistoquímica, cambios reactivos
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Descalcificación
Si un material duro como los huesos o los dientes,
debe ser procesado histológicamente, éste deberá
ser descalcificado para su procesamiento estándar
de inclusión y corte en parafina o debe ser embebido
en plástico para hacer los cortes con micrótomo.

OSTEOSOFT® solución descalcificadora de huesos para 1l 101728
tejido delicado que contenga calcio
OSTEOMOLL® solución descalcificadora de huesos y tejidos duros 1 l, 2.5 l 101736
Histoprocesamiento
Parafina para histoprocesamiento
y formación del bloque
Las parafinas son mezclas de hidrocarburos saturados que tienen un punto de fusión que
aumenta con la longitud de la cadena. Las parafinas utilizadas en histología tienen longitudes
de cadena entre 20 y 35 átomos de carbono (y correspondientes puntos de fusión entre 38°C
y 70°C). La consistencia de la parafina solidificada a su vez aumenta con el punto de fusión.
Para el trabajo histológico de rutina, se utiliza parafina con un rango de fusión entre 56-58°C.
La parafina se cristaliza así como solidifica. Con enfriamiento rápido, la parafina solidificada
asume una estructura cristalina fina homogénea, fácil de cortar. Cuando se enfría sólo gradual-
mente, la parafina cristaliza para formar placas irregulares y agujas, y sufre contracción. La
superficie del bloque de parafina sólida puede ser muy irregular y se pueden formar espacios
llenos de aire entre los cristales de parafina. Estos últimos son vistos con apariencia de parafina
moteada y no con la apariencia transparente y vidriosa que normalmente posee la parafina. El
moteado es perjudicial durante el proceso de corte, los bloques pierden su integridad en estos
puntos y se rompen. Diversas sustancias se añaden a la parafina para evitar este efecto, el
aditivo clásico es 5% cera de abejas. Parafinas modernas contienen polímeros de plástico para
evitar el moteado, mejorando el proceso de corte y aumentando la tasa de infiltración. La
parafina no debe ser calentada más de 2-3°C por encima de su punto de fusión. La parafina
que se ha sobrecalentado se oxida a un color amarillo y saponifica cuando se enfría. La adición
de DMSO (sulfóxido de dimetilo) permite una penetración más rápida y completa, mientras
que la adición de polímeros presta mayor plasticidad a los tejidos embebidos. El alto grado de
pureza hace que sea innecesario filtrar la cera fundida. Excelentes propiedades de corte están
aseguradas para cortes individuales y múltiples, y la forma y el color de la tinción histológica
se conservan.
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Histoprocesamiento
Histosec®
Parafina de primera calidad para uso rutinario,
tinción inmunohistoquímica y aplicaciones de microondas
Histosec®
Histosec® es una parafina de alta pureza disponible con y La solución intermedia más utilizada hoy en día es el xileno
sin DMSO. Su punto de fusión es entre 56°C y 58°C y dentro y sustitutos del xileno. Después que toda el agua ha sido
de este rango, cualquier espécimen puede ser procesado sin removida, las muestras se colocan en baños de parafina y
temor a daños independiente del método utilizado. son perfundidas con parafina. Al final del proceso, la parafina
Histosec® se produce en un proceso complejo desde ceras ha penetrado en puntos donde el agua o sustancias solubles
cuidadosamente seleccionadas y otros materiales de partida. *en alcohol tales como la grasa se encontraban en el material
Es sometido a rigurosos controles de calidad. original. Las características notables de Histosec® son su
En histoprocesamiento, para lograr la deshidratación total excelente durabilidad en el histoprocesador y su estabilidad
de las muestras, se fijan y se enjuagan y luego pasarán por durante todo el proceso.
concentraciones ascendentes de alcohol, a través de baños
que contienen soluciones intermedias, esto es, soluciones
que son miscibles con alcohol, y con la parafina.
Protocolo de histoprocesamiento
Producto Concentración Tiempo
Etanol 50 % 1h
Etanol 70 % 1h
Etanol 70 % 1h
Etanol 80 % 1h
Etanol 90 % 1h
Etanol 100% desnaturalizado 1h
Xileno o Neo-Clear® 1h
Xileno o Neo-Clear® 1h
Histosec® 60 °C 2h
Histosec® 60 °C 3h
Histosec® son parafinas seleccionadas con adición de polímeros
Para asegurar una preparación fácil de cortes multiples,

las muestras deshidratadas y perfundidas con parafina
son incluídas en bloques de parafina, y mantenidas en
un lugar fresco.
Información Técnica
Si se utiliza parafina grado técnico o si la parafina se ha
mantenido durante mucho tiempo en el histoprocesador,
puede absorber demasiados componentes no deseados.
La apariencia de la parafina cambia, se convierte en
grasa, con olor al solvente y es incapaz de penetrar en
las muestras en forma eficaz.
Como consecuencia, puede que las muestras no sean
completamente penetradas y pueden ser más difíciles
de cortar. Muestras recién puestas en bloque, pueden
causar problemas y la calidad del corte ser más pobre.

Histosec® con DMSO 4 x 2.5 kg, 25 kg 111609
Histosec® sin DMSO 4 x 2.5 kg, 25 kg 115161
Parafina pura
Parafina 4 x 2.5 kg 107164
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Histoprocesamiento
Cortes de parafina
Para algunos procedimientos de tinción, tales como tinción con rojo Congo
para detectar amiloide, los cortes deben ser de 7 µm de espesor; para la
detección de micobacterias por el método de Ziehl-Neelsen el espesor debe
ser de al menos 5 µm para permitir a las estructuras objetivo ser teñidas
apropiadamente. Las dificultades en la preparación de los cortes son
experimentadas cuando los bloques de parafina son demasiado blandos,
demasiado duros o quebradizos, o cuando la parafina todavía contiene
residuos de solventes del histoprocesamiento. Resultados estables y
reproducibles sólo se pueden lograr mediante el uso de solventes de grado
superior, una parafina especialmente diseñada para uso histológico y un
protocolo apropiado. Por ello, cuando se utiliza el protocolo, los solventes
y las parafinas aquí descritos, los resultados son excelentes, reproducibles
y elimina los costos e interrupciones innecesarias durante la preparación
de la muestra.
Corte Unión y estiramiento

Las cortes de parafina se preparan usando un micrótomo Los cortes se estiran mediante la colocación de éstos en un
de deslizamiento o rotatorio. En ambos casos, la cuchilla baño de agua caliente y luego en un portaobjetos limpio. Para
se mueve horizontalmente sobre el bloque de parafina. aplicaciones especiales los portaobjetos se pueden recubrir
En el micrótomo rotatorio se realiza un movimiento lineal o bien utilizar portaobjetos pre-tratados comercialmente,
con un volante de accionamiento manual el que se transforma con el fin de impedir que los cortes se desprendan durante el
en un movimiento de rotación. Detalles del microtomo en procesamiento posterior. Después que los cortes se han unido
particular se pueden encontrar en las instrucciones de uso. al portaobjetos, éstos se colocan en una cámara de calor para
Cuchillas clásicas de microtomos diseñados para el uso secar.
repetido pueden ser utilizados en ambos tipos de dispositivos.
Cuchillas desechables son adecuadas para su uso en micró- Preparación para la desparafinación
tomos rotativos. Los cortes de parafina se funden durante unos 20 minutos a
Los bloques de parafina siempre deben mantenerse en frío aprox. 70°C en una cámara de calor y procesados posterior-
antes del corte. El microtomo se ajusta en el grosor de corte mente como se indica en el protocolo.
deseado, para que los cortes sean de aproximadamente 3 a
5 micras. Los cortes se retiran de la cuchilla con una pinza
fina y quedan listos para su posterior procesamiento.
Solventes
Etanol
El etanol, C2H5OH, está entre los solventes utilizados con
mayor frecuencia en histología. Se utiliza en el procesamiento
histológico para la serie ascendente y descendente de alcohol
empleado en la tinción, para enjuagar durante el proceso, así
como en numerosas soluciones de tinción. Las instrucciones
de aplicación explican cómo se utiliza el etanol para el histo-
procesamiento y la tinción. El etanol actúa con rapidez y
eficacia. Para evitar pérdida en la calidad de los cortes, los
baños deben ser cambiados con frecuencia y así evitar cortes
decoloridos o láminas turbias con aspecto lechoso.
H3C OH
El etanol lleva el símbolo de peligro F, por su característica de

inflamable. Instrucciones de seguridad e información sobre
cómo manipular el etanol sin riesgo, figuran en la ficha de
datos de seguridad que está disponible en la Web o por
solicitud.
El etanol es un solvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

Datos químicos y físicos
Temperatura de ignición 363 °C (DIN 51794) Solubilidad en agua (20 °C) soluble
Punto de fusión -114.5 °C Masa molecular 46.07 g/mol
Densidad 0.790-0.793 g/cm³ (20 °C) pH 7.0 (10 g/l, H2O, 20 °C)
Punto de ebullición 78.3 °C Presión de vapor 59 hPa (20 °C)
Limites de explosividad 3.5-15 % (V) Punto de inflamación 13 °C c.c.
Indice de refracción 1.36
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05
Solventes
El etanol se utiliza en un grado sin desnaturalizar con una
pureza de >/= 99,9% o bien como una solución al 96%.
Los grados de etanol sin desnaturalizar [en Alemania] tienen
ciertos impuestos, haciéndolos más caros.
Además del grado del etanol sin desnaturalizar, también existe
el etanol desnaturalizado, que contiene aproximadamente 1%
de MEC (metil etil cetona). Este etanol desnaturalizado se ha
utilizado durante muchos años y ha demostrado ser popular,
ya que no tiene relación con los resultados histológicos. Al
ser desnaturalizado, este etanol no tiene impuestos especiales,
por lo tanto a esta calidad se debería dar preferencia en las
aplicaciones rutinarias.
Además de los procedimientos con soluciones de etanol
concentrado a menudo son requeridos los diluídos. Estos
se pueden preparar manualmente según sea necesario.
Para re y deshidrataciones, se usan soluciones al 50%, 70%
y 80%. El etanol viene en numerosos grados que van desde
GR para análisis al grado técnico, y también como soluciones
re-procesadas. Por otra parte, la regla es que el uso de buenos
solventes tiende a evitar problemas en el flujo de trabajo y
en los resultados. Un análisis costo-beneficio realista debería
realizarse de vez en cuando para permitir cambios cuando sea
necesario.

Etanol absoluto, para análisis EMSURE® ACS, ISO, Reac. Ph Eur 1 l, 2.5 l 100983
Etanol desnaturalizado con aprox 1% de metil etil cetona 1 l, 5 l 100974

para análisis EMSURE®
2-Propanol
El alcohol 2-Propanol, C3H8O, es usado como disolvente de

laboratorio y también para la preparación de alcoholes en
serie descendente y ascendente, para hidratar y deshidratar
muestras respectivamentente. El 2-propanol actúa más
lentamente que el etanol.
OH
H3C CH3
El 2-propanol lleva los símbolos de peligro F y Xi, debido

a que es inflamable e irritante.
2-propanol es un disolvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

Densidad 0.786 g/cm³ (20 °C) pH (H2O, 20 °C) neutral
Punto de ebullición 82.4 °C (1013 hPa) Presión de vapor 43 hPa (20 °C)
Limites de explosividad 2-13.4 % (V) Punto de inflamación 17 °C, crisol abierto
Indice de refracción 1.378 Absorción de agua 1000 g/kg
Indice de evaporación 11

2-Propanol para análisis EMSURE® ACS, ISO, Reac. Ph Eur 1 l, 2.5 l 109634
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05
Solventes
Acetona
Acetona (sinónimos: dimetil cetona, propanona), C3H6O, es

un disolvente de uso general que encuentra aplicaciones
especiales en el laboratorio histológico: por ejemplo, como
fijador y para adicionar a soluciones.
H3C CH3
O
La acetona lleva los símbolos de peligro F y Xi debido a
que es inflamable e irritante
Acetona es un solvente que tiene las siguientes propiedades físico-químicas

Densidad 0.79 g/cm³ (20 °C) pH 5-6 (395 g/l, H2O, 20 °C)
Punto de ebullición 56.2 °C (1013 hPa) Presión de vapor 233 hPa (20 °C)
Limites de explosividad 2.6-12.8 % (V) Indice de refracción 1.35868 (20 °C)
Absorción de agua 1000 g/kg

Acetona para análisis EMSURE® ACS, ISO, Reac. Ph Eur 1 l, 2.5 l 100014
Xileno
El xileno es un solvente aromático, C6H4 (CH3)2, que ha sido utilizado

durante décadas en aplicaciones de histoprocesamiento, desparafinación
y clarificación. Se utiliza una mezcla de isómeros orto- meta- y para-.
CH3 CH3 CH3
CH3
CH3
CH3
El xileno es un disolvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

Temperatura de ignición 490 °C (DIN 51794) Solubilidad en agua 0.2 g/l (20 °C)
Punto de fusión > -34 °C Masa molecular 106.17 g/mol
Densidad 0.86 g/cm³ (20 °C) pH (H2O) no aplicable
Punto de ebullición 137-143 °C (1013 hPa) Presión de vapor 10 hPa (20 °C)
Limites de explosividad 1.7-7.0 % (V) Punto de inflamación 25 °C
Concentración de 35 g/m3 (20 °C) aire Viscosidad cinemática 0.85 mm2/s (201 °C)
saturación
Indice de evaporación 13.5
20 • 21
05
Solventes
Xileno El Problema
La ventaja del xileno es que desparafina cortes muy El problema con el xileno, es ser un reactivo peligroso y con
rápidamente y de manera eficiente y también termina la etapa clasificación Xn, esto es, inflamable, nocivo e irritante, y tiene
de deshidratación. El xileno tiene una excelente capacidad y una alta tasa de evaporación con un olor característico. El olor
velocidad para disolver la parafina de los cortes. En histología, revela rápidamente dónde se está utilizando. Los laboratorios
estas propiedades han hecho del xileno, el solvente estándar. deben tener una buena ventilación y cualquier trabajo que
Protocolos usados y probados usando xileno en histología, se implique el uso de xileno debe ser realizado bajo una campana
pueden encontrar en las secciones de Histoprocesamiento y de extracción.
Tinción. Indicaciones de seguridad e información del manejo del xileno
sin riesgo, se encuentran en la hoja de datos de seguridad que
Varios grados de xileno están disponibles, los que van desde está disponible en la Web o por solicitud.
el grado reactivo para análisis hasta los grados técnicos, pero
se pueden encontrar dificultades cuando se utilizan los grados Como resultado de una exposición intensa a disolventes
de menor calidad. La tinción y durabilidad pueden verse aromáticos tales como el xileno, son conocidos los daños al
afectadas negativamente cuando el xileno usado es de un hígado, órganos hematopoyéticos y al sistema linfático. La
grado de calidad muy baja. dosis oral LD50 para la rata es 2840 mg/kg; LD50 dérmica
El xileno es un disolvente que puede ser re-utilizado. Hay para el conejo es > 4350 mg/kg.
sistemas en el mercado que permiten procesar el xileno usado,
por ejemplo, destilado, por lo que puede ser reciclado y
re-utilizado. Sin embargo, se debe tener en cuenta que este
tipo de proceso siempre está asociado con una cierta pérdida
de calidad y que cualquier xileno que ha sido reciclado debe
ser reemplazado antes que produzca pérdida de calidad en la
muestra.

Xileno para análisis EMSURE® ACS, ISO, Reac. Ph Eur 1 l, 2.5 l 108661
Neo-Clear®
Neo-Clear® sustituto de xileno

Para cumplir con las regulaciones cada vez más estrictas
impuestas por las autoridades de salud y del medio ambiente,
hay una necesidad de reemplazar los disolventes aromáticos
tales como el xileno, con disolventes no aromáticos, amigables
con el usuario y el medio ambiente.
Las características necesarias

de un sustituto del xileno
Resultados óptimos con Neo-Clear® - información técnica
• Riesgo reducido para la salud Se puede utilizar el protocolo normal del xileno para histo-
procesamiento. La aplicación de pruebas ha demostrado que
• Resultados idénticos el xileno y Neo-Clear® poseen un mismo tiempo de vida útil
• Poco o ningún cambio en en el histoprocesador.
No hay diferencias en la forma en que se utilizan en la des-
las instrucciones de trabajo
parafinación. Neo-Clear® debe ser reemplazado al mismo
• Misma vida útil ritmo que el xileno.
• Bajo, preferentemente sin No se observa opacidad de los baños de alcohol en la serie

de tinciones. Clarificación de los cortes histológicos con
impacto ambiental
Neo-Clear®, proporciona la misma calidad de color que
cuando se utiliza xileno.
Para lograr resultados óptimos de tinción, las muestras deben
En la práctica, un sustituto del xileno se origina a partir de ser montadas usando un medio de montaje adecuado. Para
diferentes grupos químicos: como los terpenos, con su olor a tinciones con cubreobjetos ofrecemos el Neo-Mount™, número
limón, y los del grupo de mezclas de hidrocarburos alifáticos de artículo 109016, - un medio de montaje especial que está
que tienen una longitud de cadena de alrededor de C7-C15, diseñado para su uso con Neo-Clear®.
que les sitúa entre las isoparafinas.
Neo-Clear® es una mezcla de hidrocarburos alifáticos Neo-Clear® es un hidrocarburo alifático (C9-C11), que pertenece
saturados C9-C11 CAS No. 64742-48-9 que es prácticamente al grupo de sustancias conocidas como isoparafinas.
inodoro, incoloro, miscible con la mayoría de disolventes Estos disolventes son capaces de disolver la parafina, una
orgánicos e inmiscible con agua. característica crucial en un sustituto del xileno, y tienen una
consistencia ligeramente aceitosa que significa que reaccionan
muy sensiblemente cuando entran en contacto directo con el
agua. Más abajo se mencionan uno o dos puntos que ayudarán
a los usuarios a obtener el máximo provecho de Neo-Clear® y
maximizar la calidad de sus preparaciones.
22 • 23
05
Solventes
Neo-Clear® es una mezcla de hidrocarburos alifáticos saturados C9-C11
Temperatura de ignición ~ 230 °C (DIN 51794) Solubilidad en agua 0.1 g/l (20 °C)
Densidad 0.77 g/cm³ (20 °C) Presión de vapor 7.1 hPa (20 °C)
Punto de ebullición 150-215 °C (1013 hPA) Punto de inflamación > 40 °C
Limites de explosividad 0.7-7.0 % (V)
Según la normativa CE, Neo-Clear® se clasifica

como una sustancia Xn (nociva).
Indicaciones de seguridad y otra información
acerca del manejo de Neo-Clear® sin riesgo,
figuran en la ficha de datos de seguridad que
está disponible en la Web o por solicitud.
Neo-Clear® sustituto del xileno para desparafinación,

deshidratación e histoprocesamiento
Neo-Clear® y Neo-Mount™
La combinación perfecta de productos para
histoprocesamiento y montaje
Neo-Clear® y la calidad del alcohol Cuando se utiliza Neo-Clear® para la clarificación y Neo-Mount™
Cuando en la serie de baños de alcohol, se utiliza etanol para el montaje, el exceso de Neo-Clear® debe ser retirado de las
"extra puro" o grado superior en concentraciones de 96% muestras colocandolas en una hoja de papel de filtro por aprox.
o más, no ocurre turbidez. Grados técnicos de alcohol pueden 1 minuto. El riesgo que se sequen las muestras no existe, debido
tener un contenido menor de etanol que la indicada y no a la menor tasa de evaporación del Neo-Clear® y su consistencia
ser lo suficientemente concentrado para lograr la plena ligeramente aceitosa. Los portaobjetos se cubren posteriormente
deshidratación, con la consecuencia que el agua se lleva a de la forma habitual.
los baños de Neo-Clear®, haciendo que el medio de trabajo Si el exceso de Neo-Clear® permanece en las muestras y éstas
se torne turbio dando resultados con el mismo aspecto. se montan con Neo-Mount™ usando un cubreobjeto, se pueden
formar burbujas de aire debajo del cubreobjetos.
Neo-Clear® y manual de montaje con Neo-Mount™
Neo-Clear® tiene una menor tasa de evaporación que el xileno,
necesitando cambios menores en el protocolo normal.
Una vez que las muestras han sido retiradas del baño final de
la serie de deshidratación/clarificación, se procesan en forma
normal pero rápidamente para evitar que se sequen.
Las muestras tratadas con Neo-Clear® deben montarse con
el medio de montaje coincidente, Neo-Mount™, con el fin de
garantizar que se logre la brillantez óptica habitual. Cuando
se usa Neo-Clear® y los medios de montaje están basados en
xileno, en las preparaciones se producen manchas y una
apariencia turbia.
Neo-Mount™
medio de montaje amigable con el usuario y el medio ambiente,
que contiene un disolvente no aromático para muestras de
tinción rápida
24 • 25
05
Solventes
Neo-Clear® y montaje con Neo-Mount™ utilizando un equipo Uso de Neo-Clear® y Neo-Mount™ produce láminas de
de montaje automático tinción rápidas. El tiempo de secado para las muestras con
Cuando las muestras que han sido aclaradas con Neo-Clear® cubreobjetos usando Neo-Mount™ es de aproximadamente
son procesadas con un equipo de cubreobjetos automático, 30 minutos.
en el recipiente de retención, antes de sobreponer el cubre-
objetos, no deben ser cubiertas con Neo-Clear® (lo cual por Si es necesario, los cubreobjetos pueden ser removidos por
el contrario, es esencial cuando se utiliza xileno), pero en su inmersión en Neo-Clear®.
lugar se deben colocar en el recipiente vacío. Las muestras no
se secan, incluso cuando la rejilla está completamente llena de
portaobjetos. Si las muestras son cubiertas directamente en un
recipiente con Neo-Clear®, puede suceder que dentro de unas
horas, todas las muestras montadas estén llenas de burbujas
bajo el cubreobjeto.
Histoprocesamiento Cortes de Desparafinación Tinción Deshidratación con Montaje con

con Neo-Clear® parafina con Neo-Clear® Neo-Clear® Neo-Mount™

Neo-Clear® 5l 1098435000
Neo-Clear® 4x5l 1098435004
Medio de montaje adecuado

Neo-Mount™ 500 ml 1090160500
Tinciones
Soluciones de tinción listas para el uso en histología
Beneficios
• Listas para el uso

• Protocolos de tinción probados
• Resultados de tinción efectivos
• Resultados reproducibles
• Altos rendimientos
• Consistencia lote a lote
• Estables al menos 2 años,
en su mayoría 3
• Seguras de usar
• Control de calidad y pruebas
de aplicaciones
• No hay contacto directo con
colorantes o polvos
Información general y tinción estándar con hematoxilina y eosina

La tinción Hematoxilina-Eosina (H&E) es un procedimiento En la solución, el colorante forma un complejo con las sales
histológico estándar, que otorga una buena visión general de las de los metales, tiñiendo las estructuras objetivo. Para permitir
estructuras del tejido, y al mismo tiempo, permite que estructuras que el complejo de hematoxilina tome el típico color azul, el
de interés puedan ser clasificadas como normales, inflamadas, con portaobjetos se enjuaga bajo el agua corriente del grifo, que
cambios degenerativos o patológicas. fija la tinta en las estructuras objetivo. Los núcleos se tiñen
de azul oscuro, violeta oscuro a negro.
En la tinción con H&E, primero se tiñen los núcleos con una Al igual que los núcleos, el tejido calcificado, el moco ácido
solución de hematoxilina ácida, en la cual la hematoxilina está y las bacterias Gram-positivas se tornan de color azul.
en forma oxidada como hemateína. Además del colorante, la
solución contiene una sal de metal trivalente, esto es un compuesto
de aluminio, y un agente oxidante, ahora un yodato en lugar de
las sales de mercurio utilizadas anteriormente. 26 • 27
06
Tinciones
Tinción nuclear
con hematoxilina
En la tinción de hematoxilina-eosina, la técnica de tinción

histológica más utilizada, la tinción del núcleo se realiza
utilizando soluciones listas para el uso:
Kit de tinción Masson-Goldner para la
Solución hemalumbre de Mayer o solución de hematoxilina visualización de tejido conectivo con
coloración tricrómica Masson-Goldner
modificada de acuerdo a Gill III. La contratinción se lleva
a cabo con eosina A (amarillenta) al 0,5% en solución
alcohólica o acuosa, esto es, para la tinción de proteínas,
colágeno, queratina y sustancias intercelulares.
Ambas soluciones de hematoxilina utilizan sales de aluminio

para la formación del complejo. Éstos pertenecen al grupo de
los así llamados "hemalums" y se comportan de una manera
similar en términos de tiempo, diferenciación y terminación
de la tinción.
Los beneficios proporcionados por las soluciones de

hematoxilina listas para el uso en comparación con
soluciones preparadas en el laboratorio, además de las
características ya mencionadas, son las siguientes...
Tinción nuclear con hematoxilina
• Oxidación controlada del colorante en la solución
• Resultados estables con tinción nuclear selectiva
• Elección de la solución clásica o modificada
Tinción H&E (Hematoxilina-Eosina)
Tinción de contraste con eosina H&E Protocolo de tinción - Eosina A acuosa

Tras la tinción del núcleo, se debe realizar una tinción de Etapa Tiempo
contraste para visualizar las proteínas, tejidos conectivos, Desparafinar los cortes de la forma habitual y rehidratar
fibras y queratina. Teñir en solución hemalum de Mayer, 3 min
El colorante más usado para este propósito es la Eosina A, o solución de Hematoxilina según Gill lII
donde A representa amarillento (en inglés Y yellowish). Enjuagar en una solucion de HCl al 0,1% 2 seg
Dependiendo de las necesidades y preferencias personales, Diferenciar en agua corriente del grifo 3-5 min
la mayoría de los laboratorios utilizan concentraciones de Eosina A al 0,5% en solución acuosa* 3 min
eosina entre 0,1% y 1% en soluciones de tinción acuosas o Enjuagar con agua corriente del grifo 30 seg
Etanol 70% 20 seg
alcohólicas.
Etanol 70% 20 seg
Eosina A al 0,5% en solución alcohólica y acuosa, para la
Etanol 96% 20 seg
tinción H&E de contraste, están disponibles comercialmente
Etanol 96 % 20 seg
en su formato listas para el uso. Eosina A al 0,5% en solución Etanol 100%, desnaturalizado 20 seg
alcohólica produce una tinción más intensa que la solución Etanol 100%, desnaturalizado 20 seg
acuosa, y debe ser usada cuando se requiera una tinción de Aclarar en Neo-Clear® o xileno 5 min
mayor contraste. Adición de ácido acético a cualquier de las Aclarar en Neo-Clear® o xileno 5 min
dos soluciones produce una tinción más brillante (Adicionar Montaje
aprox. 0,2 ml de ácido acético (glacial) 100% anhidro a 100 ml *Adicionar 0,2 ml de ácido acético glacial a 100 ml de Eosina A al 0,5% en solución acuosa
para obtener un resultado de una tinción más intensa
de solución de eosina A).
Protocolo de tinción H&E – Eosina A alcohólica

Eosina A al 0,5% en solución alcohólica y eosina A al 0,5% en
solución acuosa pueden ser usadas con la solución hemalum Etapa Tiempo
Desparafinar los cortes de forma habitual y rehidratar
de Mayer o con la solución de hematoxilina modificada según
Teñir en solución hemalum de Mayer, 3 min
Gill III. o solución de Hematoxilina según Gill lII
Enjuagar en una solución de HCl al 0.1 % 2 seg
Diferenciar en agua corriente del grifo 3-5 min
Eosina A al 0,5% en solución alcohólica* 3 min
Etanol 96% 10 seg
Etanol 96 % 10 seg
Material Etanol 100%, desnaturalizado 10 seg
Tanto para cortes de parafina o tejido congelado, la tinción Etanol 100%, desnaturalizado 10 seg
H&E puede ser usada para material citológico, tales como Aclarar en Neo-Clear® o xileno 5 min
Aclarar en Neo-Clear® o xileno 5 min
esputo, lavados, sedimentos de orina, efusiones y muestras
Montaje
FAAB (biopsias por aspiración con aguja fina).
*Adicionar 0,2 ml de ácido acético glacial a 100 ml de Eosina A al 0,5% en solución alcohólica,
para obtener un resultado de una tinción más intensa
Resultado
Núcleos azul oscuro a violeta oscuro
Citoplasma, sustancias intercelulares rojo-naranja
Eritrocitos amarillo-naranja
28 • 29
06
Tinciones
Intestino, corte de parafina,
H&E tinción de eosina A al
Cuando las muestras o cortes de tejido congeladas son teñidos utilizando una tinción 0,5% en solución alcohólica.
Hematoxilina según Gill III
H&E, es importante que el material no fijado revele todos sus detalles estructurales con
una claridad que permita una fácil evaluación. Como el colorante se une más rápido
a las estructuras objetivo de material no fijado, los tiempos de tinción deben ser
reducidos significativamente (véase el protocolo para muestras de tejido congelado).
Neo-Clear® y Neo-Mount™ aportan numerosas ventajas en comparación con el xileno
y el medio de montaje, ya que la combinación de ambos productos es prácticamente
inodora y casi libre de evaporación. No se requiere campana de extracción y la tinción Hígado, corte de parafina,
se puede llevar a cabo directamente junto a microtomo. 0,5% en solución alcohólica.
Protocolo para cortes criogénicos

Etapa Concentración Tiempo
Tinción nuclear con solución 10-20 seg
de hematoxilina según Gill III
Enjuagar en agua Mover las muestras hasta que no haya más
corriente del grifo colorante rojo tipo nube saliendo de las partes
gruesas de las preparaciones
Diferenciar en ácido acético 1% 10 seg
Diferenciar en agua del grifo Mover los cortes, hasta que el color cambia
Riñon, corte de parafina, de violeta a azul
Enjuagar con agua destilada Enjuagar poco tiempo
0,5% en solución acuosa.
Hematoxilina según Gill III Teñir con solución de eosina A 0.5 % alcohólica 10-15 seg
Deshidratar en alcohol 70 % Mover las muestras hasta que no exista mas
turbiedad, esto es, colorante saliendo de las
preparaciones
preparaciones
preparaciones
Estómago, corte de parafina, Aclarar en Neo-Clear® 15 seg
H&E tinción de eosina A al Montaje con Neo-Mount™
0,5% en solución acuosa.
Resultado
Núcleos azul oscuro a violeta oscuro, negro
Si se necesitan diferentes Proteina, tejido conectivo, colágeno, queratina rojo-naranja, amarillo-naranja
concentraciones de
colorante en las soluciones Información para pedidos
de hematoxilina y eosina, Nombre Presentación Número de artículo
éstas se pueden preparar Solución Hemalum de Mayers 500 ml, 1 l, 2,5 l 109249
usando colorantes sólidos Hematoxilina en solución modificada según Gill III 500 ml, 1 l, 2,5 l 105174
Eosina A al 0,5% en solución alcohólica 500 ml, 2,5 l 102439
grado Certistain®.
Eosina A al 0,5% en solución acuosa 1 l, 2,5 l 109844
Tinción de PAS
La tinción de PAS (ácido periódico de Schiff) es uno de los Protocolo para tinción PAS
métodos químicos más utilizados en histología. Etapa Tiempo
En la tinción de PAS el material se trata con ácido periódico, Desparafinar los cortes de forma habitual y rehidratar
y es durante este proceso, que los 1,2-glicoles son oxidados a Enjuagar con agua corriente del grifo 5 min
grupos aldehído. Los aldehídos del reactivo de Schiff producen Solución de Periodato 5 min
un color rojo brillante. La tinción de PAS produce una reacción Enjuagar con agua destilada
de color específico con polisacáridos no sustituidos, mucopoli- Reactivo de Schiff 15 min
sacáridos neutros, muco-y glicoproteínas, glico-y fosfolípidos. Enjuague en agua sulfito 3 x 2 min
Combinando la tinción de PAS con azul alcián, a un pH de 2,5 Enjuaguar bajo agua corriente del grifo 10 min
Solución de hematoxilina según Gill III 2 min
para la solución de azul álcian, permite la identificación
Agua corriente del grifo 3 min
adicional de mucosustancias ácidas (glicosaminoglicanos).
Series de alcohol ascendentes, 2x Neo-Clear® o xileno
A un pH 1,0 se tiñen las mucosustancias sulfatadas.
Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con NEO-CLEAR®,
La tinción de PAS se utiliza para cortes de parafina y frotis. o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno,
y cubrir con cubreobjetos de vidrio
El reactivo de Schiff para la reacción del ácido

periódico de Schiff o PAS, –para la detección de
mucopolisacáridos, glucógeno, mucopolisacáridos Resultado
Núcleos azul
neutros, muco-y glicoproteínas, glicolípidos, Los polisacáridos, glucógeno, mucopolisacáridos neutros, púrpura
fosfolípidos, membrana basal, colágeno. muco-y glicoproteínas, glicolípidos, fosfolípidos,
membrana basal, colágeno
Duodeno, corte de parafina, Duodeno, corte de parafina,

tinción PAS tinción PAS

Reactivo de Schiff 500 ml, 2.5 l 109033
Adicional requerido
Hematoxilina en solución modificada según Gill III 500 ml, 1 l, 2.5 l 105174
30 • 31
06
Tinciones
Azul alcián-PAS
Mucosustancias ácidas, polisacáridos y mucopolisacáridos

neutros son visualizados usando una combinación de azul
Alcian (pH 2,5) y la tinción de PAS.
Protocolo para tinción azul Alcian-PAS

Etapa Tiempo
Duodeno, corte de parafina,
azul Alcian-PAS
Azul álcian en solución 5 min
Enjuagar con agua destilada
Ácido periodico 10 min
Reactivo de Schiff 15 min
Duodeno, corte de parafina, Solución de hematoxilina según Gill III 20 seg
azul Alcian-PAS
o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno, y cubrir con cubreobjetos de vidrio
Resultado
Núcleos azul
Mucosustancias ácidas brillante, azul claro
Polisacáridos, mucopolisacáridos neutros púrpura

Reactivo de Schiff 500 ml, 2.5 l 109033
Azul álcian en solución 500 ml 101647
Adicional requerido
Tinción rojo nuclear
Las tinciones, rojo nuclear en solución de sulfato

de aluminio al 0,1% y la tinción general de rojo Visión general de la tinción con rojo nuclear
nuclear, son métodos simples y confiables de Visualización de los núcleos y de todas las estructuras
celulares con rojo nuclear/solución sulfato de aluminio
tinción nuclear y son usadas principalmente para
al 0,1%.
tinción de contraste de alta diferenciación. Una
laca de aluminio de rojo nuclear (rojo nuclear
Protocolo para la tinción nuclear/Visión general de la tinción
en solución de sulfato de aluminio) es la que
realmente produce la tinción del núcleo. El Desparafinar los cortes de
fondo y la tinción del citoplasma se logran a forma habitual y rehidratar
Enjuagar con agua destilada 1 min
través de un colorante libre que no está unido
Rojo nuclear en solución de 10 min
en la solución como laca colorante de aluminio. sulfato de aluminio al 0,1%
Solución de rojo nuclear para la tinción nuclear, Enjuagar con agua destilada 1 min
Etanol 70 % 1 min
se utiliza por ejemplo en la tinción de azul alcián,
Etanol 96 % 1 min
para la visualización de hierro libre con la Etanol 100 % 1 min
reacción de azul de Prusia (ver kits de tinción: Etanol 100 % 1 min
Xileno o Neo-Clear® 5 min
HEMATOGNOST Fe™) y en la tinción de plata para
la visualización de las fibras reticulares (ver Kit de Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con Neo-Clear®,
plateado de reticulina según Gordon & Sweets). o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno
Si sólo el citoplasma debe ser teñido, se utiliza

una solución acidificada de rojo nuclear al 0,1%
en agua que no contenga sulfato de aluminio.
Resultado
Núcleos rojo oscuro
Citoplasma rojo claro

Rojo nuclear en solución sulfato de aluminio al 0,1% 500 ml 100121
32 • 33
06
Tinciones
Azul alcián-rojo nuclear
Si solo las mucosustancias ácidas van a ser teñidas, entonces

se recomienda el uso de la tinción de azul alcián (pH 2,5);
con rojo nuclear como tinción de contraste para una mejor
visualización estructural del núcleo.
Intestino, corte de parafina, azul Protocolo para la tinción azul Alcian para mucosustancias ácidas
alcián-rojo nuclear en solución
sulfato de aluminio al 0,1% Etapa Concentración Tiempo
Azul álcian en solución 5 min
Rojo nuclear en solución sulfato de aluminio al 0,1% 10 min
Etanol 70 % 1 min
Estómago, corte de parafina, azul
alcián-rojo nuclear en solución de Etanol 96 % 1 min
sulfato de aluminio al 0,1% Etanol 100 % 1 min
Etanol 100 % 1 min
Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con Neo-Clear®,
o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno
Resultado
Núcleos rojo oscuro
Citoplasma rojo claro
Mucosustancias ácidas azul claro

Azul álcian en solución 500 ml 101647
Tinción de van Gieson
Solución de picrofucsina para tinción tricrómica de van Gieson

La tinción de van Gieson es frecuentemente usada para lograr
una visualización de alto contraste de tejido conjuntivo de
colágeno en cortes de parafina. La solución de picrofucsina
de van Gieson se utiliza con frecuencia junto con la solución
hematoxilina férrica de Weigert, número de artículo 115973,
en la tinción tricrómica. La solución de picrofucsina de van
Útero, corte de parafina, Lengua, corte de parafina,
Gieson contiene dos colorantes distintos dispersos: ácido solución de picrofucsina solución de picrofucsina
pícrico finamente dispersado y fucsina ácida groseramente
dispersada. El colorante tiñe de color rojo brillante las fibras
Protocolo para tinción tricrómica según van Gieson
colágenas y de color amarillo, al músculo, citoplasma y fibras
gliales. Amiloide, material hialino, coloides y mucosidad,
Desparafinar los cortes de
muestran un teñido gradual que va desde el color amarillo
forma habitual y rehidratar
hasta tonos rojos. Para una tinción nuclear estable y duradera
Solución hematoxilina férrica 5 min
se debe utilizar tinción de hematoxilina férrica según Weigert, de Weigert
con el fin de evitar la decoloración debido a la solución de Enjuagar en agua corriente del grifo 3 min
tinción ácida. Solución de picrofucsina 30 seg
La ventaja de usar pricrofucsina en solución según van Gieson Enjuagar con agua destilada 30 seg
lista para el uso, radica en el hecho que el ácido pícrico está en Etanol 96 % 30 seg
forma disuelta y así se puede evitar el contacto directo, como Etanol 96 % 30 seg
también con la fucsina ácida. La solución de picrofucsina van Etanol 100 % 1 min
Etanol 100 % 1 min
Gieson puede ser usada en combinación con la solución de
elastina de Weigert en la tinción Elastica de van Gieson, para
demostrar fibras elásticas en material histológico.
Material
Cortes de parafina de 3 µm, fijados en formalina o en Resultado
solución de Bouin Núcleos negro-marrón
Colágeno rojo
Preparación Tejido muscular, fibras gliales amarillo
Solución hematoxilina férrica de Weigert Coloide, moco, material hialino, amarillo a rojo
amiloide, epitelio queratinizado
Mezclar solución A de Weigert y solución B de Weigert
en una proporción de 1:1.

Solución de picrofucsina según van Gieson 500 ml 100199
Kit de hematoxilina férrica según Weigert 2 x 500 ml 1159730002
34 • 35
06
Tinciones
Tinción de Giemsa
Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa en solución según Giemsa

La tinción de Giemsa es uno de los procedimientos estándares en
histología, usados para teñir muestras especiales como médula ósea,
amigdalas y ganglios linfáticos debido a su alta proporción de células
linfáticas y hematológicas. La tinción demuestra las diversas células
con sus características morfológicas mejor de lo que puede ser con
una tinción H&E. La tinción de Giemsa también se puede utilizar
Biopsias de médula ósea, Biopsias de médula ósea,
cortes de parafina, cortes de parafina, para detectar Helicobacter pylori en biopsias de tejido gástrico.
Azur-eosina-azul de metileno Azur-eosina-azul de metileno El material de muestra se ve afectado por tratamientos previos, como
según Giemsa en solución según Giemsa en solución
la fijación y procesamiento histológico, los núcleos celulares se tiñen
de distintos tonos de azul, mientras que otras estructuras son
Para la tinción de Giemsa visualizadas en varios tonos rojos
aplicada a cortes incluídos
en parafina, es importante
Protocolo de la tinción de Giemsa
utilizar baños de clarificación
Etapa Tiempo
por separado, con xileno o
Neo-Clear®, debido a que Enjuagar con agua destilada 10 seg
trazas de etanol en las Teñir en Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa 15 min
soluciones pueden producir en solución no diluída, filtrada
decoloración. Acido acético al 0,1% 10 seg
El pre-tratamiento de la Enjuagar con agua destilada 10 seg
2-Propanol 10 seg
médula ósea y punciones
2-Propanol 10 seg
de cresta ilíaca con la solución 2-Propanol 10 seg
para descalcificación leve, Xileno o Neo-Clear® 5 min
OSTEOSOFT®, produce Xileno o Neo-Clear® 5 min
resultados óptimos. Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con Neo-Clear®,
Las muestras de punciones
fijadas se colocan durante
6 horas en OSTEOSOFT® para
una descalcificación suave, Resultado
y posteriormente se someten Núcleo celular, células azul, azul oscuro
a procesamiento histológico Colágeno, osteoide azul pálido
convencional. Los bloques se Granos eosinofílicos rojo
Mucopolisacáridos acidofílicos, mastocitos, violeta rojizo
cortan cuidadosamente y, matriz de cartílago
si es necesario, tratados Materiales acidofílicos rojo naranja
nuevamente por 20 min con
OSTEOSOFT®.
Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa 100 ml, 500 ml, 1 l, 2.5 l 109204
Kits de Tinciones
Dependiendo del objetivo y el tipo de muestra, una serie de técnicas de tinción especiales
se utilizan de forma rutinaria en histopatología, además de la tinción H&E. Los métodos
son bien conocidos y han perdurado en el tiempo, con resultados que en su mayoría son
comparables, incluso con modificaciones del método. Las soluciones son a menudo
tradicionalmente preparadas por el usuario. La gama de soluciones de tinción “lista para
usar” y kits de tinción está en aumento. Un alto grado de fiabilidad se logra a través de
procesos de fabricación estandarizados, materias primas similares lote a lote y controles
de calidad. El uso de soluciones listas para el uso/kits se deben considerar como una posible
alternativa a los métodos tradicionales.
Para tinciones de uso frecuente suministramos kits que garantizan una alta consistencia
lote a lote, resultados reproducibles, larga vida media en estantería y también durante el
uso, manejo sencillo y seguro. Instrucciones probadas y comprobadas vienen dentro con
cada producto.
Duodeno, corte de parafina, kit de tinción PAS Duodeno, corte de parafina, kit de tinción PAS
Tinción de PAS
Kit de detección de polisacáridos, glicógeno,
mucopolisacáridos neutros, glicolípidos y mucolípidos, colágeno,
membranas basales
Para tinción de PAS el Protocolo tinción de PAS

material es tratado con ácido Etapa Tiempo
periódico, durante éste Desparafinar los cortes de forma habitual y rehidratar
proceso los grupos glicoles Enjuagar con agua destilada
Ácido periodico 5 min
1,2 son oxidados a aldehídos.
Con el reactivo de Schiff los
aldehídos dan una coloración Reactivo de Schiff 15 min
rojo brillante. Con poli- Agua corriente del grifo 3 min
sacáridos no sustituidos, Enjuagar con agua destilada
mucopoli-sacáridos neutros, Solución de hematoxilina según Gill III 2 min
mucoproteínas y glico-
proteínas, glicolípidos y Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con Neo-Clear®,
fosfolípidos, la tinción de o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno, y cubrir con cubreobjetos de vidrio
PAS produce una coloración
específica.
Resultado
Núcleos azul
Polisacáridos, glicógeno, mucopolisacáridos neutros, púrpura
muco y glicoproteínas, glicolípidos, fosfolípidos,
membrana basal, colágeno

Kit de tinción de PAS 2 x 500 ml 1016460001
Componentes del kit
Solución 1: Ácido periodico al 0.5 %, acuoso 500 ml
Solución 2: Reactivo de Schiff 500 ml
36 • 37
07
Kits de Tinciones
Hematoxilina férrica de Weigert
Kit para tinción nuclear para tinciones tricrómicas y
tinciones ácidas de contraste
Las soluciones de hematoxilina férricas, se utilizan

en particular, para tinción nuclear de cortes de
tejido donde se realiza la tinción de contraste
utilizando soluciones de colorantes ácidos.
Ejemplos de este tipo de aplicación son la
demostración de las fibras elásticas de acuerdo a
Pulmones, corte de parafina, Pulmones, corte de parafina,
van Gieson y las tinciones tricrómicas de varios Kit de hematoxilina férrica Kit de hematoxilina férrica
según Weigert según Weigert
tejidos conectivos, debido a la alta resistencia de
la tinción de hematoxilina férrica a soluciones de Protocolo del procedimiento de
tinción ácidas. Soluciones hemalum comúnmente tinción hematoxilina férrica de Weigert
utilizadas tales como hemalum de Mayer, Gill y Etapa Tiempo
Harris dan sólo tinciones nucleares débiles con
Tinción en solución hematoxilina férrica de Weigert 5 min
contraste ácido Diferenciar bajo agua corriente del grifo 3 min
Tinción de contraste de acuerdo al método
Preparación que se esta usando
Solución hematoxilina férrica de Weigert Dehidratar,clarificar y montaje de secciones
Mezclar solución A de Weigert y solución B Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con NEO-CLEAR®,
de Weigert en una proporción de 1:1. o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno,
Resultado
Núcleos azúl-negro

Componentes del kit
Solución A de Weigert-solución alcohólica de hematoxilina 500 ml
Solución B de Weigert - solución clorhídrica de nitrato de hierro(III) 500 ml
Elastica de van Gieson
Kit para detección de fibras elásticas
Vasos sanguíneo, corte de Vasos sanguíneo, corte de

parafina, kit de tinción de fibras parafina, kit de tinción de fibras
elásticas según van Gieson elásticas según van Gieson
Varios métodos comunes

de tinción son usados para
demostrar fibras elásticas en
cortes de tejido. Muy buenos Protocolo para tinción de fibras elásticas según van Gieson
resultados se logran para la Etapa Tiempo
visualización de las fibras
Elastina según Weigert 10 min
usando una solución de Enjuaguar bajo agua corriente del grifo 1 min
resorcina-fucsina según Solución hematoxilina férrica de Weigert 5 min
Enjuaguar bajo agua corriente del grifo 3 min
Weigert en conjunto con
Solución de picrofucsina 2 min
solución de picrofucsina de Etanol 70% 1 min
van Gieson y tinción nuclear Alcohol en concentraciones crecientes,
2x xileno o Neo-Clear®
con solución hematoxilina
férrica de Weigert o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno, y cubrir con cubreobjetos de vidrio
Resultado
Núcleos negro-marrón
Fibras elásticas negro
Colágeno rojo
Músculo amarillo

Kit de tinción de fibras eláticas según van Gieson 4 x 500 ml 1159740002
Componentes del kit
Solución 1: solución A de Weigert - solución alcohólica de hematoxilina 500 ml
Solución 2: solución B de Weigert - solución clorhídrica de nitrato de hierro (III) 500 ml
Solución 3: Elastina según Weigert - solución de resorcina-fucsina 500 ml
Solución 4: S olución de picrofucsina según van Gieson 500 ml
(solución de ácido pícrico-fucsina ácida)
38 • 39
07
Kits de Tinciones
Masson-Goldner
Kit para visualizar tejido conectivo
con tinción tricrómica de Masson-Goldner
El uso combinado de tres soluciones de tinción Protocolo para la tinción tricrómica de Masson-Goldner
diferentes, permite a las fibras musculares, Etapa Concentración Tiempo
fibras de colágeno, fibrina y eritrocitos, a ser Xileno o Neo-Clear® 5 min
visualizados en forma selectiva. Los métodos Etanol 100 % 30 seg
originales fueron usados primariamente para Etanol 100 % 30 seg
diferenciar colágeno y las fibras musculares. Etanol 96 % 30 seg
Etanol 96 % 30 seg
Los colorantes utilizados tienen diferentes Etanol 70 % 30 seg
tamaños moleculares y permiten que los Etanol 30 seg
tejidos individuales se pueden teñir en forma Solución hematoxilina férrica 5 min
de Weigert
diferenciada. Agua corriente del grifo 5 min
La tinción de Masson-Goldner tiene la siguiente Enjuagar en ácido acético al 1% 30 seg
ventaja: la técnica se puede aplicar con material Solución de azofloxina 10 min
Enjuagar en ácido acético al 1% 30 seg
fijado en formalina. Después de una tinción Solución de ácido fosfowolfrámico- 1 min
nuclear con hematoxilina férrica de Weigert, anaranjado G
componentes tales como músculo, citoplasma Enjuagar en ácido acético al 1% 30 seg

Verde luz SF en solución 2 min
y eritrocitos son teñidos con azofloxina y la Enjuagar en ácido acético al 1% 30 seg
solución anaranjado G. El tejido conectivo se Etanol 70 % 30 seg
contrasta luego con solución verde luz SF. Etanol 96 % 30 seg
Etanol 100 % 30 seg
Etanol 100 % 30 seg
Preparación Etanol 100 % 2 min
1. Ácido acético al 1 % Xileno o Neo-Clear® 5 min
Diluir el ácido acético 10% 10:1 con agua destilada Xileno o Neo-Clear® 5 min
2. Solución hematoxilina férrica de Weigert o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno,
Mezclar solución A de Weigert y solución B
Ácido acético al 1%: Preparar la solución fresca en forma regular.
de Weigert en un radio de 1:1.
Los tiempos dados de deben cumplir para obtener resultados óptimos
Resultado
Núcleos marrón oscuro a negro
Citoplasma, músculo rojo ladrillo
Tejido conectivo, sustancias muco ácidas verde
Eritrocitos naranjo brillante
Lengua, corte de parafina, Placenta, corte de parafina,

Kit de Masson-Goldner Kit de Masson-Goldner

Kit de tinción de Masson-Goldner 4 x 500 ml 1004850001
Componentes del kit
Solución 1: solución de azofloxina 500 ml
Solución 2: Solución de ácido fosfowolfrámico-anaranjado G 500 ml
Solución 3: Verde luz SF en solución 500 ml
Solución 4: Ácido acético al 10% 500 ml
Adicional requerido
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07
Kits de Tinciones
Metenamina plateado según Gomori (tinción GMS)
Kit para visualizar membranas basales,

células enterocromafinas, bacterias y hongos
Tinción con plata Nota importante

La tinción con plata es una de las técnicas especiales más Use sólo vidrio limpio y vasos de plástico para la preparación
comunes usadas en histología. Varios reactivos pueden ser de la solución de plata. Evitar el contacto de metal (por ejemplo,
aplicados para diferenciar diferentes estructuras de tejidos. La soporte de pinzas deslizantes) con la solución de plata.
tinción de Metenamina plateado según Gomori, es usada para
teñir membranas basales, bacterias y hongos. Las estructuras
objetivo se tornan negras, mientras que el resto, se tiñe con
solución SF Verde Luz (Light Green).
A través de la tinción de GMS, los aldehídos resultantes de la Protocolo para Metenamina kit de plateado según Gomori
oxidación de los 1,2-glicoles con ácido periódico se visualizan Etapa Tiempo
con una solución de nitrato de plata metenamina borato. Los Desparafinar los cortes de
grupos aldehído reducen los iones de plata en el intervalo de forma habitual y rehidratar
pH alcalino a plata metálica, que aparecen en negro. El color Agua destilada 2 min
Solución de ácido peryódico 10 seg
de los depósitos de plata puede ser intensificado aún más,
Agua destilada 3 x ca. 30 seg
mediante tratamiento con una solución de cloruro de oro,
Teñir en el baño de agua a 52-57 °C 34-35 seg
a través de la formación de un complejo de plata y oro. El con solución de nitrato de plata/
uso de la solución de cloruro de oro evita también la tinción metenamina borato
no específica del fondo. El exceso de nitrato de plata se lava Agua destilada 3 x ca. 30 seg
con una solución de tiosulfato de sodio. Solución de cloruro de oro 1 min
Agua destilada ca. 30 seg
Se ha diseñado un protocolo usando horno de microondas. Solución de tiosulfato de sodio 2 min
El horno microondas reduce el tiempo para la etapa de la Agua corriente del grifo 3 min
solución de nitrato de plata/metenamina borato a sólo Agua destilada ca. 30 seg
Verde luz SF en solución 2-3 min
2 minutos después de calentar a 600 W durante 55 segundos.
Agua destilada ca. 30 seg
El prototocolo esta disponible bajo solicitud.
Deshidratar en un baño de alcohol de concentración creciente,
clarificar 2 x en Neo-Clear® o xileno
Preparación de la solución de plata metenamina Montar con Neo-Mount™ las muestras tratadas con NEO-CLEAR®,
1 comprimido de metenamina/borato es suficiente para o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno,
la preparación de 30 ml de solución de plata. Disuelva y cubrir con cubreobjetos de vidrio
el comprimido completamente en la solución de plata.
La solución está lista para su uso. Colocar la solución de
nitrato de plata/borato metenamina junto con la muestra
para ser teñido en el baño de agua previamente calentado Resultado
a 55 °C, mantener esta temperatura durante todo el proceso Hongos marrón oscuro a negro
de tinción y teñir durante 35 a 45 minutos hasta alcanzar Membranas basales marrón oscuro a negro
la intensidad deseada. Usar la solución inmediatamente y Fondo verde
desechar después de su uso.

Riñon, corte de parafina, Pulmones con hongos, Pulmones, con hongo corte de parafina,
Metenamina kit de plateado corte de parafina, Metenamina Metenamina kit de plateado según
según Gomori kit de plateado según Gomori - Gomori - sin cloruro de oro
con cloruro de oro
Ventajas de usar una solución de cloruro de oro en reacciones argénticas

Los métodos de plata son reacciones sensibles que pueden El tratamiento de las células con una solución de cloruro
responder a las perturbaciones en el procedimiento mediante de oro produce una visualización más clara, las reacciones
la producción de una reacción inadecuada o no específica. no específicas se reducen, y la coloración marrón disminuye.
Las instrucciones de uso deben ser seguidas muy de cerca El uso de la solución de cloruro de oro aumenta la estabilidad
con el fin de lograr resultados concretos e inconfundibles. y la durabilidad de la tinción; el cloruro de plata puede ser
El uso de cloruro de oro es un paso hacia la mejora de resultados removido por tratamiento con tiosulfato de sodio.
de la reacción y el aumento de contraste. El proceso se supone La intensificación de la reacción es probablemente debido a
que es aproximadamente como sigue: una reducción de subproductos no deseados, argirofilia no
específica del fondo.
3 Ag + AuCl3 Au + 3 AgCl
A través del uso de cloruro de oro, la plata se convierte a cloruro de
plata y depósitos de oro metálico en lugar de la plata. El depósito de
oro es más estable y más duradero.

Metenamina kit de plateado según Gomori 7 x 100 ml, 10 tabletas 1008200001
Componentes del kit
Reactivo 1: solución de ácido periódico 100 ml
Reactivo 2: solución de nitrato de plata 3 x 100 ml
Reactivo 3: comprimidos de borato de metenamina 10 tabletas
Reactivo 4: solución de cloruro de oro 100 ml
Reactivo 5: solución de tiosulfato de sodio 100 ml
Reactivo 6: Verde luz SF en solución 100 ml
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07
Kits de Tinciones
Plateado de Warthin-Starry
Kit para detección de Helicobacter pylori en cortes de parafina
En el método de tinción de plata de Warthin-Starry, el nitrato de plata es reducido con hidroquinona

a plata metálica, la hidroquinona se oxida a quinona. La solución de reacción se selecciona de tal
manera que la plata metálica se deposita en una reacción específica en las estructuras objetivo, en
este caso Helicobacter pylori.
La reacción es detenida por una etapa de enjuague que termina el desarrollo del plateado. La plata
es depositada en la superficie de las bacterias, que aparecen marrón oscuras a negro bajo el
microscopio, las células se vuelven amarillas a amarillo dorado, mientras que los núcleos son de
color marrón. Las bacterias se encuentran en la mucosa del epitelio de la superficie, en las glándulas
apicales del estómago y en las foveolas de la mucosa gástrica. En una etapa adicional con una
solución de tiosulfato de sodio, la plata depositada se fija y estabiliza. El uso de tiosulfato de sodio
significa que posteriormente la muestra se puede montar con cualquier medio de montaje que
contenga xileno. Si se prefiere no utilizar este baño de tinción adicional, las muestras se deben
montar con DPX para detener la decoloración.
Material
Cortes de parafina de 3-5 µm espesor, fijados en formalina.
Preparación
Aplicación toma lugar en la cubeta. El kit es diseñado para
un volumen de 60 ml, el cual corresponde a la cubeta de
Hellendahl
Pre-calentar el baño de agua a 60°C
1. Producción de solución diluída de ácido acético

Acidificar 1 l de agua destilada con 10 ml de 1,2% ácido
acético (solución stock, puede ser almacenada por un
máximo de 3 semanas)
2. Solución de impregnación
Adicionar 50 ml de la solución diluída de ácido acético + 10 ml
de una solución de nitrato de plata al 6 %, mezclar y colocar en
el baño de agua cubierto y calentar a 60°C. Medir la temperatura
(solución lista para ser usada).
Importante
No usar materiales de metal
Biopsia de estómago, corte de Biopsia de estómago, corte de
parafina, kit de plateado según parafina, kit de plateado según
Warthin-Starry modificado Warthin-Starry modificado
3. Solución desarrolladora
A) Preparación
Adicionar 60 ml de la solución diluída de ácido acético +
2 cucharas dosificadoras rojas de gelatina y poner en un
baño de agua cubierto al mismo tiempo que la solución de
impregnación y agitando ocasionalmente. La gelatina debe
estar completamente disuelta. Otras adiciones siguen sólo
justo antes de la colocación de los cortes en esta solución.
(ver Finalización)
B) Finalización
Adicionar 2 cucharadas dosificadoras anaranjadas (ubicadas
en la tapa, llena hasta el borde) de mezcla de hidroquinona,
revolver bien. Adicionar 3 ml de solución de impregnación
caliente con la pipeta proporcionada, mezclar bien.
Protocolo kit de plateado Warthin-Starry, modificado
Nota Etapa Temperatura Tiempo
¡Los cortes deben ser puestos inmediatamente en la solución Desparafinar los cortes de
reveladora lista para usar!
Agua destilada 10 seg
Solución de impregnación 60 °C 30 min
4. Agua destilada
Enjuagar bien en agua 3 min
2 x enjuagar corriente del grifo
Solución reveladora 60 °C 2-3 min
Cubrir con cubreobjetos con DPX Agua destilada 60 °C 10 seg
Cubrir las preparaciones tratadas con xileno sólo con DPX Agua destilada 60 °C 2 min
y poner el cubreobjetos con el fin de mantener estable el Deshidratar y clarificar las
resultado de la tinción. secciones de la forma habitual
Cubrir con cubreobjetos con DPX
Resultado
Helicobacter pylori marrón oscuro a negro
Fondo amarillo a amarillo oro
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07
Kits de Tinciones
Cubrir con agente de montaje conteniendo xileno
Si otro agente de montaje que contenga xileno es usado,
entonces una etapa adicional con tiodulfato de sodio es
requerida para prevenir depósitos de plata no específicos
y mantener los resultados de la tinción estable.
Protocolo kit de plateado Warthin-Starry, modificado

Etapa Temperatura Tiempo
Biopsia de estómago, corte de
parafina, kit de plateado según
Warthin-Starry modificado Agua destilada 10 seg
Solución de impregnación 60 °C 30 min
Enjuagar bien en agua 3 min
corriente del grifo
Solución reveladora 60 °C 2-3 min
Agua destilada 60 °C 10 seg
Agua destilada 60 °C 2 min
Solución de tiosulfato de sodio 3 min
Deshidratar y clarificar las
secciones de la forma habitual
Cubrir con agente de montaje
Biopsia de estómago, corte de conteniendo xileno
parafina, kit de plateado según
Warthin-Starry modificado
Resultado
Helicobacter pylori marrón oscuro a negro
Fondo pardusco

Kit de plateado Warthin-Starry, modificado para 500 ensayos 1024140001
Componentes del kit
Reactico 1: Solución de nitrato de plata, 6 % 500 ml
Reactivo 2: Mezcla de hidroquinona 2 x 14 ml
Reactivo 3: Gelatina en polvo 130 g
Reactivo 4: Solución de ácido acético al 1.2 % 60 ml
Adicional requerido
DPX, agente de montaje no acuoso 500 ml 101979
Solución de tiosulfato de sodio, 0,1 mol/l (0,1 N) Titrisol® 1l 109950
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07
Kits de Tinciones
Plateado de reticulina
según Gordon & Sweets
Las fibras reticulares que no pueden ser visualiza- Procedimiento
das correctamente con una tinción H&E pueden La tinción con los reactivos 1-8 se lleva a cabo en un banco
'de tinción fabricado de plexiglás o revestido con plástico. Los
hacerlo a través de una reacción PAS o, mejor,
reactivos se adicionan por goteo uno tras otro de manera que
una tinción de plateado. La visualización de la cubra la muestra completamente. Enjuagar con agua destilada
reticulina con tinción de plata da un mayor usando una botella de lavado. No utilizar pinzas de metal y
contraste y nitidez en el contexto de PAS. Las tampoco permitir el contacto de otros objetos metálicos con
los preparados.
fibras reticulares consisten, entre otras cosas,
de haces delgados de fibrillas finas de colágeno Protocolo para plateado de Reticulina
según Gordon & Sweets
tipo III. Estas fibrillas de colágeno reaccionan
Etapa Cantidad Tiempo
fácilmente con sales de plata y se describen
como argirofilas y son teñidas de negro después forma habitual y rehidratar
del plateado. Las fibras reticulares se pueden Agua destilada 10 seg
Dejar caer gotas del reactivo 1 y 2, 4 gotas de cada uno 5 min
visualizar en las membranas basales, membranas
uno después del otro
de soporte alrededor de estructuras epiteliales, Agua destilada 10 seg
capilares y fibras nerviosas periféricas, así como Reactivo 3 8 gotas 2 min
en órganos como el hígado y los riñones y en
Reactivo 4 8 gotas 2 min
particular en los órganos hematopoyéticos. Agua destilada 10 seg
En esa ubicación, ellas forman mallas de fibra Reactivo 5 8 gotas 2 min
y esqueletos que proporcionan soporte flexible
y elástico para órganos y tejidos. La tinción de Agua destilada 10 seg
plata Gordon & Sweets para reticulina puede Reactivo 7 8 gotas 2 min
ser seguida por la tinción de rojo nuclear en
solución de sulfato de aluminio al 0,1% cuando Agua destilada 10 seg
los núcleos, el colágeno y el fondo deben ser Deshidratar y clarificar las secciones de la forma habitual
teñidos además de las fibras reticulares.
o con Entellan™ nuevo aquellas tratadas con xileno,
y cubrir con cubreobjetos de vidrio.
Resultado
Fibras reticulares negro
Nodulo linfático, corte de Pancreas, corte de parafina, kit de Pancreas, corte de parafina, kit de
parafina, kit de plateado de plateado de reticulina según plateado de reticulina según
reticulina según Gordon & Sweets Gordon & Sweets Gordon & Sweets
Pulmones, corte de parafina, kit de

plateado de reticulina según Gordon &
Sweets con tinción rojo nuclear rápido
Protocolo con Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1%
Etapa Tiempo
Rojo nuclear en solución 3 min
sulfato de aluminio al 0,1%
Enjuagar con agua destilada 10 seg
Deshidratar, clarificar y montar las secciones de la forma habitual
Pancreas, corte de parafina, kit de

plateado de reticulina según Gordon
& Sweets con tinción rojo nuclear Resultado
Núcleo celular rojo
Fondo rojo
Colágeno rojo

Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets 2 x 16 ml, 6 x 30 ml 1002510001
Componentes del kit
Reactivo 1: Solución de permanganato de potasio 16 ml
Reactivo 2: Ácido sulfúrico 16 ml
Reactivo 2: Ácido oxálico 30 ml
Reactivo 4: Solución de sulfato de hierro (III) y amonio 30 ml
Reactivo 5: Solución amoniacal de nitrato de plata 30 ml
Reactivo 6: Solución de formaldehido 30 ml
Reactivo 7: Solución de cloruro de oro 30 ml
Reactivo 8: Solución de tiosulfato sódico 30 ml
Adicional requerido
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07
Kits de Tinciones
Kit de plateado según von Kossa
Kit para la detección de depósitos de calcio en cortes de parafina
Los métodos de plateado son altamente específicos, y son usados para

visualizar estructuras finas que tienen afinidad con los iones de plata.
Las estructuras llamadas argentafin se muestran negras por la reacción
con plata. El kit de plateado según von Kossa es usado para visualizar
depósitos de calcio en muestras de tejido histológico. Los iones de plata
de la solución de nitrato de plata reaccionan con el carbonato y los iones
fosfato de calcio y desplazan los iones de calcio. Estos iones de plata son
reducidos a plata metálica por exposición a la luz fuerte, la que es evaluada
en el microscopio. Los métodos de tinción de plata pueden ser complicados
durante la aplicación y requieren de una particular precisión.
Procedimiento
La tinción es ejecutada en cubetas de Hellendahl
La distancia entre la fuente de luz y la cubeta de Hellendahl
debería ser de aprox. 5 cm para asegurar exposición óptima.
Adicionalmente requiere auxiliares para exposición

Fuente de luz (ej. lámpara de escritorio) equipada con una
lámpara de ahorro de energía de al menos 20 vatios.
Nota:
Muestras de tejido fijadas con formalina neutral tamponada.
Espesor del corte de tejido recomendados 5-6 μm. No usar
pinzas metálicas y no permitir que objetos de metal tengan
contacto con las muestras.
Protocolo de plateado según von Kossa
Etapa Tiempo
Solución de nitrato de plata bajo exposición 20 min
Solución de tiosulfato de sodio 5 min
Solución rojo nuclear 3 min
Etanol 70 % 1 min
Etanol 96 % 1 min
Etanol 100 % 1 min
Etanol 100 % 1 min
Corte de parafina, mama, Corte de parafina, mama, Xileno o Neo-Clear® 5 min
plateado según von Kossa H&E (muestra idéntica)
Resultado
Calcio marrón a negro
Núcleo celular rojo
Fondo rojo
Corte de parafina, mama, Corte de parafina, mama,
plateado según von Kossa H&E (muestra idéntica)
Colágeno rojo

Kit de plateado según von Kossa 2 x 100 ml 1003620001
Componentes del kit
Reactivo 1: Solución de nitrato de plata 100 ml
Reactivo 2: Solución de tiosulfato de sodio 100 ml
Adicional requerido
Rojo nuclear en solución de sulfato de aluminio al 0,1% 500 ml 100121
50 • 51
07
Rojo Congo según Highman
Kit para detección de amiloide
Además del método Highman, otra forma de La tinción con rojo Congo sigue siendo una de las técnicas
visualizar el amiloide es con los métodos según rutinarias en patología. Para hacer el procedimiento de
Bennhold y Puchtler. La detección del amiloide tinción más fácil, y los resultados reproducibles, un kit de
es relevante para todo un grupo de enfermedades, tinción fiable ha sido desarrollado en base a la tinción de
algunas hereditarias, como la enfermedad de Highman. El kit de tinción contiene solución de rojo congo
Alzheimer, la enfermedad de Creutzfeld-Jakob, y solución de diferenciación KOH, ambos en formato listos
encefalopatía espongiforme bovina, miopatías para usar.
hereditarias, y angiopatías, entre otros. La Material
tinción con rojo Congo se basa en la formación Para una mejor demostración del amiloide, es importante que los
de enlaces de puente de hidrógeno con el cortes de parafina no sean demasiado delgadas, éstas deberían ser
5-6 µm o preferentemente de 7 μm de grosor
componente carbohidrato del sustrato.
El amiloide que se ha teñido con rojo congo
Protocolo para Kit de tinción rojo Congo según Highman
muestra un notable dicroísmo en luz polarizada,
con depósitos mostrando un color verde brillante Desparafinar los cortes de
contra un fondo oscuro, mientras que otros forma habitual y rehidratar
materiales como el colágeno no muestra este
Tinción en Hematoxilina
efecto. La birrefringencia del amiloide teñido con en solución según Gill III
rojo congo, el cual aparece verde bajo luz polari- Enjuaguar bajo agua corriente del grifo 5 min
Tinción en rojo Congo en solución 10 min
zada, mejora enormemente la sensibilidad del
Enjuagar en agua corriente del grifo 5 min
método. La afinidad de las diferentes proteínas Diferenciar en solución KOH 30-40 seg
amiloides al rojo congo puede ser influenciada, Enjuagar en agua corriente del grifo 5 min
Enjuagar en Etanol 96 % 30 seg
y por lo tanto facilitar el diagnóstico, a través
Deshidratar en Etanol 100 % 1 min
de medidas de pre-tratamiento. Deshidratar en Etanol 100 % 1 min
Clarificar con xileno o Neo-Clear® 5 min
Clarificar con xileno o Neo-Clear® 5 min
Resultado
Núcleos azul oscuro
Amiloide en luz transmitida rosado a rojo
Amiloide en luz polarizada metacromasia verde
Tejido conectivo rojo claro
Hígado, corte en parafina, Hígado, corte en parafina,

kit de tinción rojo Congo según kit de tinción rojo Congo según
Control positivo
Highman, luz normal Highman, luz polarizada
En orden a identificar amiloide con certeza, los descubrimientos
bajo luz transmitida deberían ser siempre seguida por una
inspección de la muestra bajo luz polarizada.
El microscopio usado debería tener los requerimientos de un
laboratorio de diagnóstico médico y ser equipado con la opción
de polarización.

Kit Rojo Congo según Highman 3 x 100 ml 1016410001
Componentes del kit
Solución rojo congo 100 ml
solución KOH 2 x 100 ml
Adicional requerido
52 • 53
07
Kits de Tinciones
Tb-color modificado
Kit para tinción en caliente de bacterias alcohol-ácido resistentes
Devido a la elevada proporción de ceras y lípidos Uso
en la pared celular, las micobacterias absorben Para el análisis microscópico de micobacterias

El kit de Tb-color modificado es para el uso del procedimiento
los colorantes muy lentamente. Para acelerar
clásico de Ziehl-Neelsen en caliente.
la absorción del colorante fucsina y lograr la Las soluciones están también disponibles en forma separada
formación del complejo micolatofucsina en la en varios tamaños.
pared celular, normalmente se calienta la
Material
solución de carbolfucsina aplicada sobre el
Cortes de parafina - aprox. 5 µm y secados al aire, frotis de
preparado hasta la formación de vapores. Una vez
muestras bacteriológicas fijadas por calor como esputo, frotis
que las micobacterias han absorbido el colorante, de biopsias por aspiración con aguja fina (BAAF), lavados,
difícilmente lo ceden nuevamente a pesar de huellas, efusiones, pus, exudados, asi como cultivos líquidos
ser tratadas intensamente con una solución y sólidos.
decolorante como ácido clorhídrico en etanol.

Cortes histológicos
Así, las micobacterias se denominan bacteria Desparafinar los cortes en forma habitual y rehidratar en la
ácido-alcohol resistentes en los procedimientos serie decreciente de alcoholes.
de tinción y se visualizan de color rojo en el Protocolo para tinción Tb-color
preparado microscópico, mientras que todos los modificado sobre una rejilla de tinción
microorganismos ácido-alcohol no resistentes Etapa Tiempo
Cubrir las muestras completamente con solución 5 min
adoptan el color de la tinción de contraste carbol-fucsina Tb-color modificada. Calentar 3 veces con
correspondiente. cuidado desde el fondo con un mechero Bunsen hasta que
se produzca vapor y mantener caliente (no debe hervir)
No permitir hervir al colorante

Enjuagar con agua del grifo hasta que no se 15-30 seg
desprendan más nubes de color
Cubrir completamente con Tb-color modificado
alcohol-ácido clorhídrico y en función del espesor
de la muestra
Enjuagar inmediatamente con agua del grifo
Tinción de contraste en Tb-color modificado azul 30 seg
de metileno en solución
Enjuagar cuidadosamente con agua del grifo
Deshidratar las muestras histológicas (serie creciente de alcohol),
aclarar en xileno o Neo-Clear®) y montar con Entellan™ nuevo o
Neo-Mount™ respectivamente
Resultado
Bacteria alcohol-ácido rojo
resistente
Fondo azul claro
Valoración
Pulmones, corte de parafina,
Un resultado positivo se reporta como "bacterias alcohol-ácido
Tb-color modificado
resistente detectadas" y un resultado negativo se reporta como
"bacterias alcohol-ácido resistente no detectadas".
No es posible determinar si hay bacterias de tuberculosis u
otras bacterias "atípicas".
Tampoco es posible determinar si las micobacterias son
todavía capaces de reproducirse o ya están muertas.
Cuando se observan bacterias alcohol-ácido resistentes en
la muestra, se deben realizar más análisis en un laboratorio
especializado. Tb-color modificado

Tb-color modificado, kit de tinción 4 x 500 ml 1004970001
Componentes del kit
Solución 1: Tb-color modificado fucsina fenicada en solución 500 ml
Solución 2: Tb-color modificado ácido clorhídrico-alcohol 2 x 500 ml
Solución 3: Tb-color modificado azul de metileno en solución 500 ml
Reactivos individuales
Fucsina fenicada en solución según Ziehl-Neelsen 100 ml, 500 ml, 2.5 l 109215
Azul de metileno en solución según Löffler 500 ml, 2.5 l 101287
Ácido clorhídrico en etanol 1 l, 5 l 100327
54 • 55
07
Kits de Tinciones
Tb-fluor
Kit para tinción fluorescente de bacterias alcohol-ácido resistentes
La tinción para microscopía de fluorescencia con Pretratamiento
auramina O y rodamina B se ha convertido en un Esputo

El esputo debería ser tratado previamente con Sputofluol® con
procedimiento de rutina junto con la tinción ZN,
el fin de liberar las micobacterias de la mucosidad envolvente.
como la tinción de fluorescencia que permite El principio activo en Sputofluol® es hipoclorito, el cual por
identificar fácilmente bacilos ácido-alcohol oxidación disuelve el material orgánico mientras que conserva
resistentes, aún si su número es bajo. en gran medida las micobacterias.
Dependiendo de la combinación de filtros en

En un tubo de centrífuga mezclar 1 parte de la muestra (al
el microscopio hay una elección entre los dos
menos 2 ml) con 3 partes de una solución de Sputofluol®
colorantes fluorescentes Rodamina B - rojo y al 15 % preparada con agua destilada, dejar actuar por
auramina O - de color verde amarillento. La 10 minutos bajo fuerte agitación cada cierto tiempo.
solución de permanganato de potasio convierte Centrifugar durante 20 minutos a 3.000 – 4.800 rpm,
decantar el líquido sobrenadante, extender el sedimento
el fondo de color negro uniforme con el fin de
y dejar secar.
suprimir la problemática intrinsica de la Muestras de punción y lavados, sedimentos
fluorescencia de la muestra. Si es necesario, Después de pasos adecuados de enriquecimiento, extender
es posible realizar una doble tinción con las muestras sobre el portaobjetos y dejar secar al aire.
Tb-color modificado (ZN) Cortes histológicos

Desparafinar los cortes en forma habitual y rehidratar en
la serie decreciente de alcoholes.
Material de muestra Protocolo para Tb-fluor en jarras coplin

Cortes de parafina y frotis de esputo fijado por calor, Etapa Tiempo
BAAF, lavados, huellas, fluidos corporales, exudados, Tinción con solución auramina-rodamina 15 min
pus, cultivos líquidos y sólidos. Enjuagar con agua corriente del grifo 10 min
Solución decolorante 1 min
Fijación Enjuagar con agua corriente del grifo 5 min
La fijación se realiza sobre la llama de un mechero Solución de contraste con KMnO4 5 min
Bunsen (2-3 veces, evitando un exceso de calor). Enjuagar con agua destilada 5 min
También es posible fijar los frotis en una estufa a Deshidratar y clarificar de la manera habitual
Montar con Neo-Mount™ o Entellan™ nuevo
100-110°C durante 20 min. Temperaturas superiores
o calentamientos más largos, pueden perjudicar la
tinción.
Protocolo para TB-fluor en instrumentos de tinción
Etapa Tiempo
Tinción con solución auramina-rodamina 15 min
Enjuagar con agua corriente del grifo 10 min
Solución decolorante 1 min
Solución de contraste con KMnO4 5 min
Deshidratar y clarificar de la manera habitual Pulmones, corte de parafina, Pulmones, corte de parafina,
Montar con Neo-Mount™ o Entellan™ nuevo Tb-fluor, tinción con Rodamina Tb-fluor, tinción con Auramina
Resultado
Los bacilos alcohol-ácido resistentes se presentan de color rojo
o amarillo-verdoso bajo el microscopio de fluorescencia, según
la combinación de filtros usados, contra un fondo oscuro. Pulmones, corte de parafina, Pulmones, corte de parafina,
Tb-fluor, tinción con Rodamina Tb-fluor, tinción con Auramina
Interpretación Requerimientos técnicos

Una reacción positiva significa "presencia de bacilos Combinación de filtros recomendados
alcohol-ácido resistentes", y un resultado negativo para microscopía de fluorescencia:
significa "ausencia de bacilos alcohol-ácido resistentes". Filtro de excitación 490-570 nm
No se puede diferenciar si la bacteria detectada corresponde Espejo dicroico 525 and 635 nm
a Mycobacterium tuberculosis u otras micobacterias, como Filtro supresor 505-600 nm
tampoco es posible determinar si las bacterias están vivas
o muertas.
De encontrarse micobacterias, deberían realizarse análisis
posteriores en un laboratorio especial.

Kit de tinción Tb-fluor 6 x 500 ml 1090930001
Componentes del kit
Solución 1: Solución de auramina-rodamina 500 ml
Solución 2: Solución decolorante 3 x 500 ml
Solución 3: Solución de contraste (KMnO4) 2 x 500 ml
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07
Kits de Tinciones
Tb-Fluor libre de fenol
Kit de tinción fluorescente para
bacterias alcohol-ácido resistentes
Además del kit de Tb-fluor, la clásica tinción Pretratamiento
auramina-rodamina, hay un kit con el que la Esputo

El esputo debe ser tratado previamente con Sputofluol® con el fin de
solución de tinción de auramina-rodamina se
liberar las micobacterias de la mucosidad envolvente. El ingrediente
prepara sin fenol. Es necesario la penetración activo en Sputofluol® es hipoclorito, el cual por oxidación disuelve
eficaz de los colorantes en las estructuras el material orgánico mientras que preserva las micobacterias en su
objetivo, lo que se logra mediante un sustituto gran mayoría.
de fenol que es más fácil de utilizar y ecológico

En un tubo de centrífuga mezclar 1 parte de la muestra (al menos
que el fenol. El kit Tb-fluor, libre de fenol, está
2 ml) con 3 partes de una solución de Sputofluol® al 15 % preparada
diseñado para ser utilizado en frotis, aunque con agua destilada, dejar actuar por 10 minutos bajo fuerte
también se puede utilizar para cortes de parafina agitación cada cierto tiempo. Centrifugar durante 20 minutos a
cuando se necesite asegurar la no sequedad en 3.000 – 4.800 rpm, decantar el líquido sobrenadante, extender el
sedimento y dejar secar.
el mesón.
Muestras de punción y lavados, sedimentos
Después de llevar a cabo el enriquecimiento apropiado, extender
las muestras en los portaobjetos y dejar secar al aire. Secciones
Material de muestra histológicas
Frotis de esputo fijados por calor, BAAF, lavados, Desparafinar los cortes en forma habitual y rehidratar en la serie
improntas, fluidos corporales, exudados, pus, cultivos decreciente de alcoholes.
líquidos y sólidos, secciones histológicas
Fijación
La fijación se realiza sobre la llama de un mechero Protocolo para TB-Fluor libre de fenol
en una bandeja para teñir
Bunsen (2-3 veces, evitando un exceso de calor).
También es posible fijar los frotis en una estufa a Etapa Tiempo
Cubra la muestra fijada al aire y con calor completamente 15 min
100-110°C durante 20 min. Temperaturas superiores o
con la solución de tinción de auramina-rodamina y teñir
calentamientos más largos, pueden perjudicar la tinción.
Enjuagar cuidadosamente con agua corriente del grifo 30 seg
Cubrir las muestras completamente 1 min
con solución de decoloración y dejar reposar
Enjuagar cuidadosamente con agua corriente del grifo 30 seg
Cubrir las muestras completamente 5 min
con solución de contraste KMnO4 y teñir
Enjuagar cuidadosamente con agua corriente bajo el grifo 30 seg
Deshidratar y clarificar de la manera habitual
Montar con Neo-Mount™ o Entellan™ nuevo
Resultado
Bacterias alcohol-ácido resistentes aparecen de color rojo o
verde-amarillo bajo el microscopio de fluorescencia, dependiendo
de la combinación de filtros usados, contra un fondo oscuro.
Un resultado positivo significa "presencia de bacterias alcohol-

ácido resistentes " y un resultado negativo significa "ausencia de
bacterias alcohol-ácido resistentes“. No se puede diferenciar si se
trata de micobacterias de la tuberculosis o de otras micobacterias,
tampoco resulta posible verificar si se trata de bacterias activas
o muertas. De encontrarse micobacterias, deberían realizarse
análisis posteriores en laboratorios especiales.
Tb-fluor libre de fenol, tinción con rodamina
Tinción doble Requerimientos técnicos

Cualquier resultado dudoso o sospechoso puede confirmarse Combinación recomendada de filtros
realizando la tinción doble "TB-fluor-Tb-color" o "Tb-fluor- para microscopía de fluorescencia:
Tb-color modificado". En el caso de preparaciones no Filtro de excitación 490-570 nm
montadas teñidas con Tb-fluor, se utiliza primeramente Espejo dicroico 525 and 635 nm
solo aceite de inmersión para diagnóstico. Posteriormente, Filtro supresor 505-600 nm
el aceite de inmersión se retira cuidadosamente y las muestras
secas se tiñen con Tb-color o Tb-color modificado.
Las micobacterias se destacan por su color rojo sobre fondo
verde claro (Tb-color) o azul claro (Tb-color modificado).
Cortes histológicos pueden ser tratados de la misma forma que
con Tb-color modificado, el cubreobjetos debe ser removido
antes de la segunda tinción. Teñir según protocolo.

Tb-Fluor libre de fenol 4 x 200 ml 1015970001
Componentes del kit
Solución 1: Solución de auramina-rodamina, libre de fenol 200 ml
Solución 2: Solución decolorante 2 x 200 ml
Solución 3: Solución de contraste (KMnO4) 200 ml
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Kits de Tinciones
Tinción de ADN según Feulgen
Kit para la determinación cuantitativa de ADN
La reacción estandarizada de Feulgen es el método Pretratamiento
de elección para la determinación de ADN en Solución de lavado de sodio disulfito

Para preparar aprox. 100 ml de solución, mezclar 95 ml de
muestras histológicas y citológicas. Desde que
agua destilada, 5 ml de sodio disulfito concentrado (Reactivo 3)
se reconoció la importancia del contenido de ADN y 1 ml de HCl (Reactivo 1).
en el diagnóstico y el pronóstico, particulamente en
tumores no diferenciados, el análisis de imágenes Preparación de la muestras
Varios métodos pueden ser usados para fijar la muestra
de ADN realmente ha pasado a primer plano. Un
factor crucial en la fiabilidad de las mediciones
de ADN es la reproducibilidad de la reacción de
Feulgen. Siempre que se sigan las instrucciones
del protocolo, los reactivos contenidos en el kit Frotis ginecológicos
de Feulgen proporcionan esta reproducibilidad. Etapa Tiempo
Fijación por pulverización con Merckofix®
Fijación en formaldehído en solución 1 hora
4% tamponado (pH 7,0)
Otras muestras citológicas

Etapa Tiempo
Secar por una hora al aire
Fijación en formaldehído en solución 1 hora
Prostata, corte de parafina,
kit de tinción de ADN según Feulgen
4% tamponado (pH 7,0)
Material
Las muestras incluyen monocapas de cultivos celulares,
Cortes de tejido fijados en forma rutinaria con formalina,
frotis por contacto, frotis de biopsias por aspiración con incluídos en parafina
aguja fina (BAAF) y preparados exfoliativos, citocentri-
Etapa Tiempo
fugados de líquido ascítico, orina y líquidos obtenidos Desparafinar los cortes de forma
por punción de la pleura y líquido cerebroespinal, así habitual y rehidratar
como cortes de tejidos fijados con formalina incluídos Enjuaguar bajo agua corriente del grifo 10 min
en parafina.
Protocolo para tinción de ADN según Feulgen
HCl a 22 °C (± 0.5 °C) 50 min
Agua destilada 2 min
Reactivo de Schiff a temperatura ambiente 60 min
Solución de lavado de disulfito de sodio 3 min
Solución de lavado de disulfito de sodio 3 min
Etanol 50 % 1 min
Etanol 70 % 1 min
Histograma de la muestra, carcinoma de prostata G3
Etanol 80 % 1 min
Etanol 99 % 1 min
Xileno 1 min
Procedimiento para analizar muestras preparadas Montar con Entellan™ nuevo y cubrir con cubreobjeto
Antes de ser analizadas, las muestras montadas deben ser
mantenidas durante 24 horas en la oscuridad, ya que el
índice de refracción del medio de montaje todavía cambia Resultado
durante un tiempo, lo que comprometería la reproducibilidad Núcleo celular teñidos rojo violeta
de la medición. Citoplasma y fondo debe ser incoloro

Kit de tinción para ADN según Feulgen 5 x 250 ml 1079070001
Componentes del kit
Reactivo 1: Ácido clorhídrico 5 M 2 x 250 ml
Reactivo 2: Reactivo de Schiff 2 x 250 ml
Reactivo 3: Metabisulfito de sodio concentrado 250 ml
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07
Kits de Tinciones
HEMATOGNOST Fe™
Kit para la detección de hierro iónico libre
por la reacción de azul de Prusia en histología y hematología
Reacción de azul de Prusia

En la reacción de azul de Prusia cualquier ion de hierro
libre (Fe3+) en el tejido, reaccionan con hexacianoferrato
(II) en solución acuosa de ácido clorhídrico. El producto
de reacción es un precipitado típico azul brillante que se
deposita en la estructura blanco.
La ecuación de la reacción es la siguiente:
4 Fe3+ + 3 K4Fe(CN)6 Fe4(Fe(CN)6)3 + 12 K+
La reacción del azul de Prusia en histología

En histología, se utilizan reacciones de azul de Prusia, Preparación de la solución de tinción para cortes y frotis
por ejemplo, para el diagnóstico de la hemocromatosis Reactivo 1 y Reactivo 2 se mezclan en volúmenes iguales.
en el hígado y para el diagnóstico de enfermedades de Cuando se usa una cubeta de Hellendahl (con extensiones)
los pulmones (asbestosis) y articulaciones. de 60 ml, se recomienda un volumen de 30-40 ml de cada uno,
Reactivo 1 y Reactivo 2. La solución de tinción debe desecharse
La reacción del azul de Prusia en hematología después de cada procedimiento de tinción.
En hematología, reacciones de hierro se utilizan en Reactivo 3: Con el fin de lograr la máxima diferenciación
enfermedades de la médula ósea y especialmente en óptica de los precipitados de hierro del fondo celular, se utiliza
el síndrome mielodisplásico (MDS). la solución de rojo nuclear para dar una tinción de contraste
ligeramente rosada.
Material Si necesita información más detallada sobre morfología celular
Cortes de parafina de 5-6 μm. y elementos estructurales, también es posible usar tinción de
contraste con procedimientos establecido "clásicos" (Giemsa,
May Grünwald, hemalum, etc).
La tinción HEMATOGNOST Fe™ también puede llevarse a cabo
(sin los pasos 4 y 5) sobre muestras que ya han sido teñidas
utilizando uno de los métodos mencionados anteriormente.
Protocolo para HEMATOGNOST Fe™
Secciones de tejido* Tiempo
Poner los cortes en solución de 20 min
teñir recién preparada e incubar
Colocar las secciones en solución de reactivo 3 e incubar 5 min
Hígado, cortes de parafina, Hígado, corte de parafina, Enjuagar brevemente con agua destilada
HEMATOGNOST Fe™, HEMATOGNOST Fe™,
hemocromatosis - nivel suave hemocromatosis - nivel fuerte Deshidratar los cortes con etanol en concentraciones
ascendentes y clarificar con xileno
Cubrir con Entellan™ nuevo
Información sobre cambios patológicos en el contenido de

hierro celular
Valores aumentados de ferritina en suero indican hemo- Resultado
cromatosis. Tal sospecha ha de ser demostrada por medio Precipitados con Fe 3+ liberados de azul
de una biopsia de hígado con determinación del contenido ferritina y haemosiderina
de hierro en el hígado. A menudo, una determinación Núcleos rosado o rojo
semicuantitativa mediante la reacción de azul de Prusia
es suficiente. Las células principalmente afectadas son las
células del parénquima y epiteliales del conducto biliar.
En cortes de tejido se pueden detectar cantidades de hasta
0.002 μg de hierro iónico.

HEMATOGNOST Fe™ 4 x 250 ml 1120840001
Componentes del kit
Reactivo 1: solución de hexacianoferrato (II) de potasio 250 ml
Reactivo 2: solución de HCl 250 ml
Reactivo 3: Solución de rojo nuclear 2 x 250 ml
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07
Kits de Tinciones
LEUCOGNOST® NASDCL
Kit para la detección de esterasas específicas
en células granulocíticas inmaduras y maduras
LEUCOGNOST® NASDCL permite a las esterasas específicas en células

inmaduras particularmente de la serie granulocítica, a ser detectadas
en cortes de parafina, frotis de sangre y médula ósea a través de una
coloración roja intensa producida en una reacción enzimática citoquímica.
Material
Sección de parafina de 2-3 μm espesor
Preparación de la solución de tinción*

Solución A
Diluir 10 ml de reactivo 1 con 60 ml de agua destilada,
adicionar 1 botella de reactivo 2, y enjuagar 2-3 veces
con unos pocos ml de tampón.
Solución B
Adicionar 15 gotas de reactivo 3 a una botella de Protocolo para LEUCOGNOST® NASDCL
reactivo 4, mezclar y dejar incubar durante 2 minutos. Secciones de tejido Tiempo
Solución C Incubar los cortes en la solución de tinción recién 30 min
preparada a temperatura ambiente
Adicionar la solución B a la solución A, y enjuagar
Poner en agua destilada 5 min
2-3 veces con unos pocos ml de mezcla de sustrato
Tinción de contraste en hemalum de Mayer 5 min
tamponado.
* Preparar la solución inmediatamente antes de usar
Deshidratar y clarificar de la manera habitual 5 min
Montar con Entellan® nuevo
Preparación de la muestra
• Colocar los cortes de parafina de 2-3 μm de espesor
sobre portaobjetos recubiertos
• Secar los cortes de parafina por 20 min a 60°C y Resultado
desparafinar NASDCL células positivas rojo brillante
• Permitir que los cortes se sequen durante 30 minutos Fondo azul
a temperatura ambiente Células madres de tejido reaccionan positivamente
• Calentar LEUCOGNOST® NASDCL a temperatura
ambiente
LEUCOGNOST® NASDCL para teñir 12 lotes 1161980001
(con un máximo de
16 diapositivas cada uno)
Componentes del kit
Reactivo 1: Tampón tris concentrado
Reactivo 2: Naftol-AS-D cloroacetato
Reactivo 3: Solución de nitrito de sodio
Reactivo 4: Solución de sal LB violeta rojo sólido
Beneficios de las soluciones

listas para el uso
Los usuarios obtienen numerosos beneficios al usar estos
Punción de cresta iliaca, tinción productos para el trabajo diario y aplicaciones especiales
LEUCOGNOST® NASDCL
Un resumen se presenta aqui:
• Resultados reproducibles
• Consistencia lote a lote como resultado
del control de calidad del fabricante
• Simple, procedimiento seguro
• Tiempo ahorrado durante la preparación
• Protocolos de tinción probados basados
Punción de cresta iliaca, tinción en estándares internacionales
LEUCOGNOST® NASDCL
• Certificados de análisis disponible para cada lote
• Menor contacto directo con reactivos y
colorantes sólidos peligrosos
• El kit contiene en la mayoría de los casos,
todos los reactivos necesarios para la tinción
• Fácil de usar y envases de tamaños económicos
• Desarrollado, probado y fabricado de acuerdo
con DIN ISO 9001
• Analizados de acuerdo con DIN ISO 13485
• Productos cumplen con requerimientos
de productos IVD y son certificados CE
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07
Kits de Tinciones
ISOSLIDE® Reticulina, muestras control
Muestras control para tincion histológica de rutina y especial
Para asegurar que las preparaciones contengan Principio del método
el material relevante para el diagnóstico y las En el kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets,
las sales de plata son depositadas sobre las fibras de reticulina,
estructuras blanco pueden ser visualizadas por
las cuales se hacen visibles como estructuras negras. En éste
tinción con una buena diferenciación, se método el material es oxidado con permanganato de potasio
recomienda usar un control de preparación. y reducido con formaldehído. El cloruro de oro sirve para
Preparaciones de control ISOSLIDE® son un grupo estabilizar mejor los componentes metálicos, los cuales hacen
posible que los resultados sean más intensos. Nota: ISOSLIDE®
de productos creados para ayudar a optimizar y
Reticulina es un ejemplo, consultar por otras ISOSLIDES®
estandarizar los resultados de tinción, permi-
tiendo una comparación directa del material de Material
control estándar con las muestras de laboratorio. Cortes de parafina de aprox. 3-4 µm de muestras de tejido
Las muestras de control ISOSLIDE® consisten en de origen animal. El tejido es fijado con formalina neutra
tamponada.
portaobjetos para el microscopio con un corte de
parafina conteniendo las estructuras típicas del
método a usar. Las muestras controles son
preparadas usando cortes de material animal
disponible. Cada paquete de muestras control
ISOSLIDE® contiene 25 muestras. Una muestra
viene pre-teñida con el método de referencia
como estándar para ser comparada con aquellas
teñidas en el laboratorio. Las 24 muestras sin
teñir son teñidas de acuerdo a la especificación
de Merck o de acuerdo a la especificación interna
del laboratorio. Para ver los resultados de las
tinciones, una muestra control es teñida en
conjunto con el material del laboratorio y ambas
comparadas con el control pre-teñido.
Resultado
Con solución rojo
nuclear sólido
Nucleos celulares rojo
Fondo rojo
Colágeno rojo
Procedimiento
ISOSLIDE® muestra de control
Análogo al kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets, reticulina, corte de vertebras,
N° Art. 1002510001. El kit de tinción incluye 8 reactivos plateado de reticulina
contenidos en botellas de 30 ml con gotario. Los reactivos son

depositados por goteo sobre los portaobjetos como descrito en el
protocolo. La tinción en si misma se ejecuta sobre una bandeja
de tinción hecha de plexiglás o recubierta con plástico. También
es posible teñir con solución rojo nuclear para demostrar núcleo
y otras estructuras, el procedimiento esta descrito en las
instrucciones de uso del kit de plateado de reticulina según
ISOSLIDE® muestra de control
Gordon & Sweets. reticulina, corte de hígado,
plateado de reticulina
Es importante enjuagar los portaobjetos copiosamente con agua

destilada. No use pinzas de metal y no permita otros metales a
tener contacto con las muestras.

ISOSLIDE® Reticulina Kit de portaobjetos control 25 portaobjetos controles 1003610001
Adicionalmente requerido
Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets 2 x 16 ml 1002510001
6 x 30 ml
Rojo nuclear en solución de sulfato de aluminio al 0,1% 500 ml 1001210500
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08
ISOSLIDES®
Montaje
Para obtener preparaciones de larga duración en histología, se utiliza un medio de montaje que
inicialmente se aplica en la muestra en forma líquida, como un líquido claro y viscoso. Como el
xileno, tolueno o sustituto del xileno se evaporan, el medio de montaje permanece como una
película clara y dura entre el portaobjetos con la muestra y el cubreobjetos.
Procedimiento
Las muestras histológicas y citológicas deben estar completa- Entellan™ nuevo es adecuado para equipos comerciales automáticos
mente deshidratadas antes de ser montadas. En el último paso que trabajan con cubreobjetos de vidrio. El medio de montaje
se aclaran con xileno o un sustituto de xileno para sacar las Entellan™ nuevo para cubreobjetos se usa como en las instrucciones
trazas de agua que causan turbidez. en el manual del cubreobjetos. La cantidad óptima de medio de
Aprox. 0,5 ml de medio de montaje se coloca sobre un porta- montaje se calcula en la corrida inicial con cubreobjetos en blanco y
objetos colocado horizontalmente con el fin de llenar el portaobjetos, basados en el tamaño del cubreobjetos y el tamaño/
espacio entre el portaobjetos y el cubreobjetos. Tan pronto grosor del corte, y chequeando cuando se cambia la botella.
como se asegura una distribución uniforme sobre toda la DPX nuevo es un medio de montaje libre de agua para microscopía que
muestra, se coloca cuidadosamente un cubreobjeto limpio puede sustituir completamente el previamente usado DPX, medio de
de manera tal de excluir burbujas de aire. Antes que pueda montaje libre de agua para microscopía (N° Cat. 101979), en todas las
colocarse bajo el microscopio, la muestra se deja en posición aplicaciones. Aunque DPX nuevo aún contiene xileno, el ingrediente
horizontal para secar durante aprox. 30 minutos. El secado teratogénico dibutil ftalato (DBP) no esta presente, así, la nueva
completo, es necesario antes que la muestra pueda ser composición no es solamente mas amigable para el medio ambiente,
archivada, tomando varias horas. Muestras preparadas de esta si no también mas conveniente para el usuario.
manera mantienen un color estable durante al menos 5 años. Un nuevo grupo de medios de montaje son los fabricados con di-
solventes a base de mezclas de hidrocarburos alifáticos. Neo-Mount™
El medio de montaje anhidro incluye productos clásicos como es un medio de montaje libre de agua que tiene que ser utilizados en
bálsamo de Canadá o productos modificados, generalmente combinación con Neo-Clear® para el montaje de los cubreobjetos, con
mezclas de resinas acrílicas, que se disuelven en disolventes el fin de conseguir las propiedades ópticas deseadas. Neo-Mount™ es
aromáticos tales como xileno o tolueno. sumamente estable en cuanto al color.
Neo-Mount™ contiene Neo-Clear®, el sustituto libre de aromáticos para
Laboratorios que procesan grandes cantidades de muestras xileno de Merck Millipore. Tiene un índice de refracción de aprox. 1,46
están reemplazando, cada vez más, el montaje manual del y produce una película transparente, dura bajo el cubreobjeto Se tarda
cubreobjeto con el montaje automático usando equipos aprox. 30 minutos en secar y esto es muy similar a los medios de
automáticos. Esto optimiza y estándariza el proceso de montaje a base de xileno.
montaje.
Todos los medios de montaje deben cumplir con ciertos criterios
Nosotros hemos desarrollado Entellan™ nuevo para equipos químicos y físicos
automáticos que colocan el cubreobjeto, un medio de montaje 1. índice de refracción de aprox. 1.5, igual al vidrio, de manera que
con un intervalo de viscosidad pequeño diseñado especial- el medio de montaje es prácticamente invisible entre el porta-
mente para éste propósito. Su viscosidad oscila entre 500 y objetos con la muestra y el cubreobjetos,
600 mPas. El rango de viscosidad menor mejora y acelera la 2. viscosidad suficientemente alta para que la solución pueda
aplicación, ya que ni la velocidad de goteo ni el volumen distribuirse homogéneamente y no correr inmediatamente
necesitan ser reseteados después de la primera corrida cuando fuera de los bordes,
una botella nueva de Entellan™ nuevo es usado en equipos 3. muy baja fluorescencia intrínseca, entonces la muestra puede, si
automáticos. es requerido, ser examinada bajo un microscopio de fluorescencia.
Medio clásico de montaje DPX nuevo, medio de montaje
Bálsamo de Canada para microscopía N° Art. 101691 libre de agua para microscopio N° Art. 100579
Indice refractivo (20 °C) 1.515-1.530 Indice refractivo (20 °C) 1,518-1,521
Densidad (20 °C/4 °C) 0.980 g/cm3 Viscosidad (20 °C) 600-700 mPas
Medio de montaje modificado con tolueno con Neo-Clear®

Medio de montaje rápido Medio de montaje anhidro Neo-Mount™
para microscopía N° Art. 107960 para microscopía N° Art. 109016
Indice refractivo (20 °C) 1.492-1.500 Indice refractivo (20 °C) 1.43-1.46
Densidad (20 °C/4 °C) 0.925-0.935 g/cm 3 Viscosidad (20 °C) 300-650 mPas
Viscosidad (20 °C) 60-100 mPas Fluorescencia </= 250 ppb
Fluorescencia </= 100 ppb
Nota técnica
con xileno Neo-Mount™ no se debe utilizar junto con xileno en el mismo
Medio de montaje rápido Entellan™ nuevo protocolo, ya que esto da lugar a incompatibilidades entre el
para microscopía N° Art. 107961 disolvente aromático y el disolvente alifático en Neo-Mount™,
Indice refractivo (20 °C) 1.490-1.500 causando que las muestras se vuelvan turbias y con rayas.
Densidad (20 °C/4 °C) 0.94-0.96 g/cm3 Cualquier exceso de Neo-Clear® se debe dejar escurrir antes
Viscosidad (20 °C) 250-600 mPas de cubrir con cubreobjetos, ya que de otro modo, se pueden
formar burbujas de aire debajo del mismo. Esto se logra
Entellan™ nuevo para montadores mediante la colocación de los cubreobjetos deshidratados
de cubreobjetos para microscopia N° Art. 100869 sobre papel filtro durante aprox. 1 minuto y después montar
Indice refractivo (20 °C) 1.490-1.500 en forma habitual. Con equipos cubreobjetos automáticos el
Viscosidad (20 °C) 500-600 mPas depósito debe ser utilizado sin Neo-Clear® como solvente para
Fluorescencia </= 250 ppb evitar las burbujas de aire.
Medio de montaje DPX libre de agua

para microscopía N° Art. 101979
Indice refractivo (20 °C) 1.518-1.521
Viscosidad (20 °C) 600-700 mPas

Balsamo de Cánada 25 ml, 100 ml 101691
Medio de montaje rápido Entellan™ para microscopía 500 ml 107960
Entellan™ nuevo medio de montaje rápido para microscópía 100 ml, 500 ml, 1 l 107961
Entellan™ nuevo para cubreobjetos para microscopía 500 ml 100869
Medio de montaje DPX libre de agua para microscopía 500 ml 101979
DPX nuevo, medio de montaje libre de agua para microscopía 500 ml 100579
Neo-Mount™ anhídro, medio de montaje para microscopía 500 ml 109016
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Montaje
Colorantes en forma sólida
Numerosos colorantes sólidos están disponibles para los usos de rutina y especiales en histología.
Para cada aplicación hay protocolos que permiten al usuario preparar, en su propio laboratorio,
los colorantes necesarios desde formas sólidas. Ciertos colorantes pueden ser utilizados en
combinación para lograr resultados óptimos.

Nombre C.I. Aplicación Presentación Número
de artículo
Fucsina ácida 42685 Tinción de plasma 25 g 105231
Anaranjado de acridina ZnCl2 46005 Tinción vital y fluorescente 25 g 115931
Azul alcian 8GX 74247 Visualización de mucosustancias ácidas 10 g 105234
Verde brillante (hidrógeno sulfato) 42040 Tinción de esporas 25 g 101374
Azul de cresilo brillante ZnCl2 - Tinción de reticulositos 25 g 101368
Carmín 75470 Cortes histológicos 5 g, 25 g 115933
Violeta de cresilo (acetato) - Tinción nuclear 25 g 105235
Violeta cristal 42555 Tinción de Gram 25 g, 100 g 115940
Eosina B 45400 Tinción de plasma 25 g, 100 g 115934
Eosina A (amarillenta) 45380 Tinción de plasma 25 g, 100 g 115935
Eritrocina B 45430 Tinción de plasma 10 g, 25 g 115936
Fast green FCF 42053 Tinción de muestra de testículo 25 g 104022
Fucsina (básica) 42510 Tinción nuclear y bacteria 100 g 115937
Hematoxilina monohidrato 75290 Tinción nuclear 25 g, 100 g 115938
Indigo carmin 73015 Tinción de tejido conectivo 25 g 104741
Verde luz SF 42095 Cromosomas 25 g, 100 g 115941
Verde de malaquita (oxalato) 42000 Tinción de contraste 25 g, 100 g 115942
Azul de metileno 52015 Bacteria y tinción de contraste 25 g, 100 g 115943
Verde de metilo ZnCl2 42590 Cromatina 25 g 115944
Violeta de metilo 42535 Amiloide 25 g 115945
Rojo neutro 50040 Cortes de cerebro 25 g 101376
Neofucsina 42520 Tinción de micobacteria 100 g 105226
Nigrosina (soluble en agua) 50420 Tinción de bacteria 25 g 115924
Azul de Nilo (hidrogenosulfato) 51180 Cortes de hígado 25 g 115946
Rojo nuclear sólido 60760 Tinción de contraste 25 g 115939
Rojo aceite O 26125 Tinción de grasa 25 g 105230
Anarnajado G 16230 Tinción de plasma 25 g 115925
Orceína (sintética) - Fibras elásticas 5 g, 25 g 107100
Pararosanilina (cloruro) 42500 Visualización de aldehídos 25 g, 100 g 107509
Floxina B 45410 Tinción de citoplasma 25 g 115926
Ponceau S 27195 Tinción de conectivo 25 g 115927
Pironina G 45005 Tinción de verde metilo-pironina 5g 107518
Safranina O 50240 Cromosoma y tinción de Gram 25 g 115948
Tionina (acetato) 52000 Cortes de cerebro 25 g 115929
Azul de toluidina O ZnCl2 52040 Tinción nuclear, metacromasia 25 g 115930
Certistain®
El grupo de los colorantes Certistain® comprende más de 30 colorantes para microscopía.
Los colorantes son probados para garantizar que cumplan criterios químicos y físicos
especificados, y una prueba de tinción típica se realiza para cada colorante. Certistain®
es sinónimo de excelente y resultados de la tinción reproducibles. Los resultados
coinciden con los del CTB (Comisión de Tinción Biológica) que se encuentra en los
EE.UU. y define el estándar. Por cada colorante Certistain® hay instrucciones para una
aplicación típica. Las instruciones se pueden descargar desde www.merckmillipore.com
y también están disponibles si asi lo requiere.
Otros colorantes en forma sólida

Además de Certistain® existen otros colorantes de microscopía
que se utilizan para la tinción clásica con soluciones preparadas
por el usuario. Para tinciones especiales que no se realizan con
frecuencia y para los que no están comercialmete disponibles,
estos colorantes ofrecen una alternativa viable junto con
colorantes Certistain®.

Nombre C.I. Aplicación Presentación Número
de artículo
Negro amido 10B 20470 Tejido conectivo colagénico 25 g, 100 g 101167
Auramina O 41000 Tinción flurescente para Micobacteria 50 g 101301
Ácido carmínico 75470 Carmalum, paracarmina 1 g, 5 g 100211
4’,6’-Diamidino-2-fenilindol- - Tinción fluorescente de ADN 100 g 124653
dihidrocloruro (DAPI) (crio secciones)
Fluoresceína 5-isotiocianato (FITC) - Marcaje de proteínas 250 g 124546
Azur-eosina-azul - Muestra linfática, detección de 25 g, 100 g 109203
de metileno según Giemsa Helicobacter pylori en biopsias de estómago
Hemateína 75290 Tinción nuclear 25 g 111487
Cristales de hematoxilina 75290 Tinción nuclear 25 g, 100 g 104302
Verde de malaquita (oxalato) 42000 Tinción de contraste 25 g, 100 g 101398
Azul de metileno (> 60 %) 42780 Tinción de tejido conectivo 50 g 116316
Rodamina B 45170 Tinción flurescente para Micobacteria 25 g, 100 g 107599
70 • 71
10
Colorantes
Gestión de Calidad
Los requisitos de gestión de calidad en el laboratorio de histología se cumplen a través del uso de
productos certificados y, en particular, mediante el uso de soluciones de tinción listas para su uso
y kits de tinción.
Productos que han sido designados como IVD y por Todas las preguntas técnicas y los problemas que se
lo tanto sometidos a pruebas de idoneidad para el reciben en relación con un IVD se procesan utili-
uso indicado en aplicaciones de diagnóstico y zando un software espécifico y gestionadas y
'llevan la marca CE, que ha sido obligatoria en almacenadas en una base de datos. Cada vez que
Europa desde fines del 2003, están debidamente se recibe un reclamo, un chequeo es llevado a cabo
documentados. Los documentos proporcionan a los para ver si un RCA es requerido (Análisis Causa Raíz)
usuarios importante información para su trabajo con CAPA (Acción correctiva Acción preventiva).
cotidiano y garantizan la seguridad. El marcaje CE El sistema de atención al cliente te ayuda en la
es un proceso de autocertificacion documentando identificación de cualquier problema con el producto
cada paso en el ciclo del producto junto con los o proceso y la búsqueda de una solución eficaz.
datos de gestión de calidad.
La aprobación exitosa de los productos a través de
Documentos que se relacionan con el producto, un proceso de avalación para obtener resultados
tales como el certificado de análisis de lote reproducibles y uso dedicado, proporcionando a los
específico, la hoja de datos de seguridad, usuarios información sobre los productos y una
instrucciones de uso y las hojas de información garantía de seguridad para su trabajo diario y la
técnica están disponibles en nuestro sitio web, asistencia en caso que ocurra un problema.
www.merckmillipore.com, o a petición.
Cada producto ha sido objeto de una evaluación de Durante la acreditación de un laboratorio, los
riesgos ISO 13485, para ver dónde están los riesgos documentos relacionados a los productos pueden
para los usuarios u otras partes y que se puede ayudar a simplificar la documentación de procedi-
hacer para detener tales situaciones cuando mientos del laboratorio. Todo es más sencillo cuando
ocurran. Las instrucciones del producto, que son se usan en el proceso productos comercialmente
un elemento importante de la documentación, manufacturados, ya que muchas etapas en el
contienen información general sobre el uso del IVD, laboratorio están cubiertas con documentación
así como información específica del producto y la detallada.
aplicación relacionada.
IVDs sufren auditorías internas y externas periódi-
cas para comprobar la exactitud e integridad de la
documentación en todas las áreas.
Gestión de Calidad por Merck Millipore
72 • 73
11
QM
Referencias
• J. Bancroft, A. Stevens
Theory and Practice of Histological Techniques,
Churchill Livingstone, Edinburgh (1990)
• A. Böcking, F. Giroud, A. Reith

Consensus report of the ESACP task force on
standardization of diagnostic DNA image cytometry,
Analytical Cellular Pathology 8, 65-74 (1995)
• G. Clark
Staining Procedures,
Williams & Wilkins, Baltimore (1981)
• H. J. Conn’s
Biological Stain’s,
Williams & Wilkins, Baltimore (1977)
• E uropean Committee for Clinical Laboratory Standards

(ECCLS) S on RM for TS [SRMTS] (1992)
Dye Standards, Part I, Terminology and general principles,
Histochemical Journal 24, 217-219
• R. W. Horobin, J. A. Kiernan

Conn’s biological Stains, A Handbook of Dyes,
Stains and Fluorochromes for Use in Biology and Medicine,
10th Edition, BIOS Scientific Publisher, Oxford UK (2002)
• J . A. Kiernan
Histological & Histochemical Methods:
Theory & Practice, 2nd Edition,
Pergamon Press, Oxford (1990)
• D
. P. Penney, J. M. Powers, M. Frank, C. Willis, C. Churukian
Analysis and testing of biological stains –
The Biological Stain Commission Procedures,
Biotechnic & Histochemistry, 77 (586),
237-275 (2002)
• M
. Mulisch; U. Welsch (Hrsg.)
Romeis Mikroskopische Technik,
18. Auflage, Spektrum Akademischer Verlag (2010)
• L. Vacca
Laboratory Manual of Histochemistry,
Raven Press, New York (1985)
• D. Wittekind
Standardization of Dyes and Stains for Automated
Cell Pattern Recognition, Analytical and Quantitative
Cytology and Histology, Vol. 7, No. 1, March 1985
74 • 75
12
Referencias
Nosotros suministramos información y asesoramiento a nuestros clientes, según nuestro mejor conocimiento y capacidad, pero sin obligación o responsabilidad.
Existen leyes y reglamentos en cada país que deben ser respetados por nuestros clientes en todos los casos . Esto también se aplica con respecto a los derechos
de terceros. Nuestra información y asesoramiento no exime a los clientes de su propia responsabilidad en la comprobación de la idoneidad de nuestros productos
para la finalidad prevista.
Para más información sobre Merck Millipore

y nuestros productos contactar con:
W287331 01/2015
Merck KGaA
64271 Darmstadt, Alemania
Correo electrónico: microscopy@merckgroup.com
www.merckmillipore.com

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Biopsia de médula ósea, corte

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El etanol lleva el símbolo de peligro F, por su característica de

El etanol es un solvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

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El 2-propanol lleva los símbolos de peligro F y Xi, debido

2-propanol es un disolvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

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Acetona (sinónimos: dimetil cetona, propanona), C3H6O, es

Acetona es un solvente que tiene las siguientes propiedades físico-químicas

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El xileno es un solvente aromático, C6H4 (CH3)2, que ha sido utilizado

CH3 CH3 CH3

El xileno es un disolvente que tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas

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Medio de montaje adecuado

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Información general y tinción estándar con hematoxilina y eosina

En la tinción de hematoxilina-eosina, la técnica de tinción

Ambas soluciones de hematoxilina utilizan sales de aluminio

Los beneficios proporcionados por las soluciones de

Tinción de contraste con eosina H&E Protocolo de tinción - Eosina A acuosa

Protocolo de tinción H&E – Eosina A alcohólica

Protocolo para cortes criogénicos

El reactivo de Schiff para la reacción del ácido

Duodeno, corte de parafina, Duodeno, corte de parafina,

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Mucosustancias ácidas, polisacáridos y mucopolisacáridos

Protocolo para tinción azul Alcian-PAS

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Las tinciones, rojo nuclear en solución de sulfato

Si sólo el citoplasma debe ser teñido, se utiliza

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Si solo las mucosustancias ácidas van a ser teñidas, entonces

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Solución de picrofucsina para tinción tricrómica de van Gieson

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Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa en solución según Giemsa

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