Universidade Federal de Alagoas

Unidade Acadêmica Centro de Tecnologia - CTEC

Curso de Engenharia Química

ALANA MELO DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA 2

PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011
 RESUMO

O DNA é um composto orgânico cujas moléculas contêm as instruções genéticas que

coordenam o desenvolvimento e o funcionamento de todos os seres vivos e alguns
vírus. O seu principal papel é armazenar as informações necessárias para a construção
das proteínas e RNAs. Seu processo de extração, em pequena escala, é bastante simples
e requer uma noção de alguns conceitos de Genética. Assim, por exemplo, é necessário
saber que, estando no núcleo da célula, para extrair-se o DNA, é preciso romper a
parede celular e as membranas celulares. Nesta prática, podemos verificar tais conceitos
e, através da obtenção do material genético da cebola. As paredes celulares foram
rompidas por corte e esmagamento do material, enquanto as membranas celulares, com
uso de detergente para romper as camadas lipídicas. Utiliza-se, também, álcool, para
isolar o DNA dos demais componentes, pelo fato dele não ser solúvel nele. Realizado o
experimento, pôde-se observar um emaranhado de fios, constituído pelas diversas
cadeias de DNA existentes e não a dupla hélice que forma este composto, por ser muito
pequena para ser observada a olho nu.
 ÍNDICE

1. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA.............................................................................3
2. OBJETIVOS..............................................................................................................4
3. MATERIAIS E MÉTODOS......................................................................................4
3.1. MATERIAIS..........................................................................................................4
3.2. MÉTODOS.............................................................................................................4
4. RESULTADOS E DISCUSSÕES.............................................................................5
5. CONCLUSÃO...........................................................................................................6
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS..............................................................................6
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1. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA

O DNA (ácido desoxirribonucléico) é a parte mais importante de cada célula.

Ele contém informações vitais que passam de uma geração à outra. O DNA coordena
sua fabricação, assim como a de outros componentes das células, como as proteínas.
Pequenas alterações do DNA podem ter conseqüências graves, e a sua destruição leva à
morte celular.
O DNA é encontrado no núcleo de toda célula humana e suas informações:
 orientam a célula (junto com o RNA) na fabricação de novas proteínas que
determinam todos os nossos traços biológicos;
 passam (são copiados) de uma geração para outra.
O DNA em uma célula é simplesmente um padrão feito de quatro partes
diferentes, chamadas nucleotídeos. Cada nucleotídeo consiste de um açúcar
(desoxirribose) ligado a um lado para um grupo de fosfato e ligado ao outro lado para
uma base de nitrogênio. É uma molécula longa e para encaixar-se na célula, é
totalmente enrolado e torcido em um cromossomo circular, como mostrado na Figura 1.

Figura 1. Célula da bactéria E. coli, motrando o DNA em detalhe.

O processo de extração de DNA é o começo do estudo molecular dos genes. A

partir do isolamento (extração) da substância química DNA, é possível, por meio de
diferentes métodos químicos, identificar genes, fazer o seqüenciamento de nucleotídeos
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que compõem esse DNA e localizar seqüências homólogas (iguais ou similares) a

seqüências encontradas em outros seres vivos.
Para realizar essa extração, é necessário que alguns procedimentos sejam feitos:
 Rompimento das membranas celulares para liberação do material
genético, o que é feito com o esmagamento ou corte do material;
 Desmembramento dos cromossomos e seus componentes básicos (DNA
e proteínas), através da adição de detergente, que desestruturam as
moléculas de lipídios das paredes celulares, com aquecimento, que
favorece a reação, e com a adição de sal, que ajuda a manter as proteínas
dissolvidas no líquido extraído;
 Separação do DNA dos demais componentes celulares, com a adição de
álcool, pois o DNA é insolúvel nele.

2. OBJETIVOS

O objetivo do trabalho é a compreensão dos princípios básicos de extração de

material genético.

3. MATERIAIS E MÉTODOS

3.1. MATERIAIS
 Béquer e copo de plástico;
 Pipeta
 Tubos de ensaio;
 Colher, faca e bastão de vidro;
 Saco plástico do tipo ziploc;
 Cebola;
 Funil e gaze;
 Sal, detergente neutro e álcool comum.
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3.2. MÉTODOS
a) Foram colocados 25 mL de água em um béquer, adicionando-se uma colher de
detergente e meia colher de sal, misturando a solução até torná-la homogênea;
b) Cortou-se, em pequenos pedaços, metade de uma cebola, colocando-a, em
seguida, dentro do saco plástico do tipo ziploc, iniciando o processo de
esmagamento do material;
c) Em seguida, adicionou-se a solução preparada na etapa (a) ao saco plástico e
continuou-se o processo de esmagamento do material, por aproximadamente
cinco minutos;
d) Então, o material esmagamento foi filtrado, sendo transferido para uma proveta,
com a utilização do funil e da gaze;
e) Com a pipeta, foram tranferidos 3 mL da solução filtrada para dois tubos de
ensaio, aos quais foram acrescentados 5 mL de álcool: no primeiro tubo,
utilizou-se álcool à temperatura ambiente e no segundo, álcool gelado.

4. RESULTADOS E DISCUSSÕES

Para a extração do DNA da cebola, iniciou-se o processo de corte e

esmagamento da mesma, para que a parede celular fosse rompida, com conseqüente
exposição do material genético. O detergente tinha a função de afetar as membranas
porque elas são constituídas por lipídios. Com a rotura das membranas, o conteúdo
celular, incluindo as proteínas e o DNA, solta-se e dispersa-se na solução. O sal
proporciona ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos que
neutralizam a carga negativa do DNA. Numerosas moléculas de DNA podem coexistir
nessa solução.
O álcool tem a função de separar o DNA dos demais componentes, pelo fato de
não dissolvê-lo. Assim, o DNA aparece à superfície da solução ou precipita. Por ser
menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, no caso do experimento
feito, ele aparece à superfície da solução aquosa.
O que observamos quando ocorre a separação do material genético, não é a
dupla hélice, tal qual conhecemos dos livros, mas, na verdade, um emaranhado de fios
parecido com algodão. Isso ocorre porque a dupla hélice é muito pequena para ser
observada a olho nu, apenas em microscópio eletrônico.
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Também observou-se que, utilizando o álcool gelado, o emaranhado de fios

formado foi maior que com o álcool à temperatura ambiente, além de ser um pouco
mais firme e fácil de ser capturado. Isso é devido ao choque térmico proporcionado pela
álcool a uma menor temperatura.

5. CONCLUSÃO

A execução da prática “Extração de DNA” permitiu a observação de material

genético da cebola, de uma forma simples e clara. Foi possível perceber os conceitos
básicos de genética, sobre as células, membranas celulares e parede celular, para
viabilizar o processo de extração com técnicas adequadas. Apesar de não ser possível
visualizar a dupla hélice do DNA, a verificação do emaranhado de fios constituído por
milhões de cadeias de DNA e RNA aglomerados, para além de imensas proteínas.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

FREUDENRICH, C. Como funciona o DNA. HowStuffWorks Brasil. Disponível em:

<http://saude.hsw.uol.com.br/dna.htm> Acesso em: 18 de março de 2011.

OLIVA, C.; SERRANO, M. I. Extração de DNA. Laboratório de Biologia Molecular,

Universidade de Évora. Disponível em:
<http://www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Extraccao/Extraccao_DNA.html> Acesso em:
18 de março de 2011.