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2010/2011
Alunas:
Andreia Sousa
n.º 40261
Alexandra Salvado
n.º 40267
29 de Março de 2011
1.º Ano - 2.º Semestre
Separação das Proteínas do Soro de Coelho por Electroforese
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em Acetato de Celulose
1. Apresentação, Tratamento e
Discussão de Resultados
1 – Albumina
2 – Globulinas 1
3 – Globulinas 2
4 – Globulinas
5 – Globulinas
6 – Ponto de aplicação
Imagem 1 Tira de acetato de celulose obtida na electroforese (após a transparentização).
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Albumina;
Globulinas 1;
Globulinas 2;
Globulinas ;
Globulinas .
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Quadro 1 Quadro com a massa relativa de cada proteína, o seu nível no plasma e o seu pI.
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Função do Ponceau S
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Tiras Resultado
1
(45 minutos)
(50 minutos)
(60 minutos)
(70 minutos)
(90 minutos)
(100 minutos)
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Dez minutos depois foi retirada a terceira tira. Esta tira ainda se
apresentava na condição atrás mencionada: pouco tempo de exposição á
corrente eléctrica. Por esse motivo, nesta tira também não foi possível
distinguir com facilidade as 5 bandas das diferentes proteínas do soro de
coelho e não se observou uma boa migração por parte das mesmas.
Aos 70 minutos foi retirada a quarta tira. Nesta tira podemos assumir que
a corrente eléctrica foi mais fraca, uma vez que havia menos tiras na tina de
electroforese. No entanto, devido ao maior tempo de exposição, podemos
afirmar e observar que se conseguiu distinguir mais facilmente as 5 bandas
distintas de proteínas e a migração das mesmas também foi mais eficaz.
Aos 100 minutos, foi retirada a sexta e a última tira. Esta tira, em
semelhança às últimas duas, também esteve exposta a uma menor intensidade
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2. Bibliografia
Quintas, A., Halpern, M.J., Freire, A.P. Eds., “Bioquímica –
Organização Molecular da Vida”, Lidel, Lisboa, 2008
http://www.angelfire.com/clone2/fouad/techniques/ponceau_S_sol
ution.pdf (2 de Abril de 2011, às 15:04 h)
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3. Questões a desenvolver
As instruções para a realização de uma electroforese em papel indicam
que a amostra deve ser aplicada numa tira de papel 10x10cm,
previamente impregnada de uma solução tampão de fosfato de sódio (pH
6,5) 1mM, e sujeita depois a 10mA durante 1h a 0ºC. Preveja as
consequências das seguintes acções, justificando:
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