BIOSEGURIDAD

La seguridad en el laboratorio es simple sentido común, involucrando prácticas de seguridad

en el área de trabajo, el uso de equipo protector, educación, y la aplicación de precauciones
universales. Algunas reglas generales de seguridad en el laboratorio son delineadas a
continuación.

Nunca pipetear con la boca. Usar artefactos mecánicos de pipeteo. No comer, beber, fumar, o
aplicarse cosméticos en el laboratorio. Lavarse las manos después de manipular materiales
químicos, infecciosos o potencialmente infecciosos, y animales. Lavarse las manos antes de
dejar el laboratorio. Siempre usar mandil mientras lleve a cabo actividades de laboratorio. No
usarlo fuera del laboratorio. Llevar guantes apropiados mientras manipule materiales
biológicos o tóxicos. No usar sandalias o zapatos abiertos en el laboratorio. Restringir el
acceso al laboratorio y no trabajar solo. Usar una cabina de seguridad biológica para la
protección del producto y del personal. Mantener el área de trabajo limpio, descontaminarla
regularmente. Desechar apropiadamente los residuos biológicos, químicos y radiológicos.
Leer las señales de rótulos, direcciones y precauciones. Asegurar todos los cilindros de gas.
Conocer la localización del más cercano lavadero de ojos, ducha de emergencia, y extinguidor
de fuego, y saber como usarlo. Tener a mano los números telefónicos de emergencia.

Protección del Empleado

Precauciones Para Laboratorios en el Manejo de Sangre y Líquidos Corporales

La sangre y líquidos corporales de todos los pacientes deben ser considerados infecciosos y
las siguientes precauciones deben ser tomadas cuando se las manipule. Las muestras de
laboratorio deben ser colocadas en un contenedor de transporte bien confeccionado; evitar la
contaminación del contenedor. Siempre usar guantes mientras manipula muestras de
pacientes, quitárselos y lavarse las manos cuando el procesamiento esté completado. Usar una
cabina de seguridad biológica cada vez que el procedimiento a seguir tenga una alto potencial
de generar aerosoles y gotas; por ejemplo, mezclado vigoroso, apertura de tubos vacutainer,
mezclado por vortex. Siempre use artefactos mecánicos de pipeteo, nunca pipetee con la boca.

El uso de agujas y jeringas deben limitarse a situaciones en la cual no hay otra alternativa. Las
agujas nunca deben ser reencapsuladas. Después de su uso, las jeringas descartables y las
agujas, las hojas de bisturí, y otros artículos cortantes deben ser cuidadosamente colocados en
contenedores resistentes a las punciones para su desecho, estos contenedores deben estar
colocados cerca al área de uso. Las superficies de trabajo del laboratorio deben ser
descontaminados cuando las actividades de trabajo se completen y al finalizar el día. Siempre
use guantes. Para limpiar los derrames , humedezca el área con hipoclorito de sodio (lejía) al
5.25% diluido 1:10 con agua si el derrame es pequeño. La lejía diluida no debe tener más de
24 horas. Para áreas pequeñas es suficiente con pasar con etanol 70% para matar virus de
hepatitis B y HIV. Los materiales contaminados usados en pruebas de laboratorio deben ser
descontaminados antes de ser reusados o se deben colocar en bolsas para descartarlos. El
material científico que ha sido contaminado debe ser descontaminado y limpiado antes de ser
reparado en el laboratorio o transportado al fabricante. Quitarse la ropa protectora antes de
dejar el laboratorio y lavarse las manos después de completar las actividades de laboratorio.
Lavado de Manos

El lavado de manos frecuente es una importante precaución de seguridad: las manos deben
lavarse después del contacto con muestras, después de completar los procedimientos de
laboratorio, después de quitarse los guantes, antes de dejar el laboratorio, y antes de coger
alimentos o bebidas.

Mandiles de Laboratorio

Este debe cubrir los brazos así como la mayor parte del cuerpo y estar abotonado siempre.
Los mandiles deben quitarse para salir del laboratorio.

Guantes

Usar guantes siempre que manipule muestras. Lavarse las manos con jabón y agua
inmediatamente después de quitarse los guantes. Los guantes deben descartarse
frecuentemente.

Protección de ojos

Se recomiendan vidrios de seguridad para proteger al ojo de salpicaduras químicas cuando se

manipulan químicos fuertes o concentrados tales como ácidos o bases. No se recomiendan
lentes de contacto para el trabajo de laboratorio. Un lavadero de ojos debe ser colocado en
cada laboratorio. Para salpicaduras de químicos se recomienda lavar los ojos con abundante
agua por 15 minutos como mínimo.

Tratamiento de Exposiciones

Contacto Directo de la Piel con un Carcinógeno

Inmediatamente dejar correr abundante agua sobre el área afectada. Usar un buen jabón para
ayudar en la eliminación física, excepto en el caso de aminas aromáticas, las cuales forman
compuestos insolubles con el jabón. Continúe lavando con agua fría por 15 minutos evitando
restregar vigorosamente.

Contacto Directo de la Piel con un Reactivo Químico

No usar ningún químico para neutralizar otro químico ya que esto puede causar irritación de
la piel o puede producir calor lo cual aceleraría la reacción con la piel y abriría los poros. En
lugar de ello, usar agua fría, la cual cierra los poros, bajando la proporción de reacción con la
piel, y provee una eliminación mecánica del químico; se puede usar jabón. No usar solventes
orgánicos.

Primeros Auxilios en Lesiones

Las lesiones percutáneas deben ser vigorosamente restregadas, lavadas por 10 minutos con
una solución de yodo-povidona al 10%. Las membranas mucosas deben ser irrigadas por 15
minutos con salina normal.
EQUIPOS DE BIOSEGURIDAD

Barreras Primarias

Cabinas de Seguridad Biológica

La cabina de seguridad biológica es el equipo primario más efectivo comúnmente usado para
trabajar con agentes infecciosos. Hay tres clases; para un laboratorio de citogenética se
recomienda las cabinas clase II, hay dos tipos, IIa y IIb, ambos son aceptables. En ambos el
aire es filtrado a través de un filtro HEPA ( filtrado de aire de alta eficiencia), el cual elimina
el 99.9% de las partículas. El uso de químicos debe ser limitado en ambos tipos. La
efectividad de la cabina está en función del flujo de aire direccional, así cuando trabaje en la
cabina, minimize los movimientos de brazos dentro y fuera de la cabina para prevenir
interrupciones en el flujo de aire laminar. No colocar objetos al frente de donde se aspira el
aire para no bloquearlo. Limpiara el área de trabajo y todo lo que se coloque dentro de la
cabina con etanol al 70% y permitir a la cabina activarse por al menos 5 minutos antes de
empezar a trabajar. Además, mantener la cantidad de equipamiento y accesorios en la cabina
al mínimo. Trabajar en una dirección (por ejemplo, de izquierda a derecha), manteniendo los
materiales limpios en un lado, el trabajo al medio, y el desecho en el otro lado, quitarse los
guantes cuando deje la cabina.
Todas las cabinas de seguridad biológica deben ser inspeccionados anualmente y certificados
por la eficiencia del filtro y velocidad de flujo del aire.

Barreras Secundarias

La apropiada construcción y diseño de barreras secundarias (el laboratorio) puede reducir en

mucho la probabilidad de diseminación de agentes infecciosos. Los materiales para el área de
trabajo deben ser fáciles de limpiar; los muebles deben ser colocados para minimizar la
acumulación de polvo, el cual trae hongos y bacterias; la ventilación debe ser adecuadamente
ajustada. Las cabinas de seguridad biológica deben ser colocadas en un lugar lejos de puertas
corredizas y de tráfico de personas, los cuales pueden interrumpir el patrón de flujo de aire.

Descontaminación y Eliminación de Desechos

La esterilización es la destrucción completa, por medios físicos o químicos, de todos los

organismos vivos y esporas. La desinfección es la destrucción selectiva de organismos
específicos, excluyendo las esporas, y es usualmente acompañado por el uso de químicos
antimicrobianos sobre objetos inanimados. La descontaminación se refiere a la inactivación
de microorganismos a tal grado que los artículos contaminados sean seguros de manipular. Es
un término relativo, y el grado de inactivación requerido depende de la situación.
El método mas efectivo y rápido de esterilización es el uso de vapor a presión a 121° en el
autoclave. Una exposición de 30 a 60 minutos es suficiente para la mayoría de desechos del
laboratorio de citogenética.
En la mayoría de laboratorios de citogenética, el líquido de desecho de los cultivos (medios de
cultivo, sueros y células) es mezclado con fijadores durante la cosecha por lo que la
descontaminación es innecesaria. Si el medio sobrenadante no es mezclado con fijadores,
debe ser descontaminado antes de su eliminación, ya sea mezclándolo con un desinfectante
como la lejía o autoclavándolo.
La industria médica de seguridad ahora produce contenedores especialmente diseñados para la
eliminación de desechos médicos. Los contenidos deben ser identificados sobre estos
contenedores. Los contenedores de agujas de punción y agujas y jeringas son construidos de
tal manera que éstos no puedan atravesar el contenedor.
Además del uso del autoclave y de la incineración de materiales biológicamente
contaminados, el uso de desinfectantes es la forma de descontaminación más aplicable a los
laboratorios de citogénetica. Los desinfectantes más comunes en el laboratorio de citogenética
son etanol 70%, lejía diluida recientemente (dilución 1:10 ó 1:100 con agua) y peróxido de
hidrógeno (3-6%).

SEGURIDAD QUIMICA

Los laboratorios de citogenética ofrecen muchas oportunidades de exposición ocupacional a

químicos. Hay peligros químicos en todos los laboratorios pero el riesgo de lesión se reduce
en gran medida si estos peligros son identificados y definidos y si se toman pasos para el
apropiado manejo y eliminación. Para evaluar los peligros en el laboratorio se necesita saber
la naturaleza del químico, incluyendo su toxicidad (habilidad para producir lesión) y su
potencia (la toxicidad inherente y cantidad necesaria para causar lesión), las condiciones
peligrosas que contribuyen a la posibilidad de lesión, y el riesgo de probabilidad de que una
lesión pueda ocurrir.
Los químicos en el laboratorio deben ser categorizados de acuerdo a su toxicidad: altamente
tóxico, moderadamente tóxico, ligeramente tóxico, y no tóxico.

Efectos Químicos

Los efectos de un químico dado dependen no sólo de la naturaleza del químico sino también
de la ruta de entrada, el grado de exposición y la susceptibilidad del individuo.

Ruta de Entrada

Los materiales tóxicos pueden entrar al cuerpo por inhalación, ingestión o contacto con la piel
(incluyendo absorción). La inhalación es una ruta de entrada común y los tóxicos inhalados,
ya sea en forma de gases, vapores, o finas partículas, pueden dañar el sistema respiratorio. El
rango de daño va desde irritación hasta neumonía química. La ingestión de tóxicos puede
ocurrir cuando la persona come, bebe y fuma en el laboratorio o toca manos u objetos sucios
(lapiceros, lápices, etc.) con la boca; la entrada a través de la piel puede ocurrir cuando la
barrera de la piel (compuesto de aceites, ceras y piel muerta) es dañada por cortes, abrasiones,
quemaduras y rascado, la exposición resultante puede ser sólo local o puede ser sistémico
cuando el químico penetra al sistema sanguíneo. Algunos químico como el metanol o aquellos
disueltos en solventes orgánicos pueden entrar a la sangre a través de la piel intacta.

Grado de Exposición

Los efectos de un químico tóxico están también relacionados al grado de exposición que un
individuo recibe. La exposición masiva única causa enfermedad aguda que conlleva a
recuperación eventual, discapacidad permanente o muerte. Exposiciones bajas producidas por
semanas o meses puede producir efectos subagudos o a corto plazo. Exposiciones repetidas en
bajas dosis por meses o años pueden producir daños a largo plazo que no son reconocidos
sino hasta que el daño es permanente. La exposición a químicos puede ser medido por los
Valores Límite de Umbral (TLVs) los cuales son dados por la Conferencia Americana de
Higienistas Industriales Gubernamentales.

Susceptibilidad Individual

La susceptibilidad individual a químicos puede ser altamente variable. Los individuos de alto
riesgo (aquellos con enfermedades crónicas al hígado o pulmones, niños, embarazadas y
mujeres lactantes, y ancianos) deben limitar especialmente su exposición a químicos tóxicos.
Químicos tales como mutágenos pueden afectar la fertilidad, el embrión, el feto y al recién
nacido, éste último vía leche materna. Algunos químicos producen alergias y dermatitis que
obligan a algunos trabajadores a renunciar.

Almacenamiento de Químicos, Manejo, Primeros Auxilios y Eliminación

Los químicos y reactivos deben ser manipulados con precaución, usando ropa protectora,
protección ocular y facial, y usando guantes apropiados. Hay instrucciones específicas para
cada químico pero algunas precauciones generales se aplican a todos los químicos: rotular
todos los químicos y reactivos claramente e incluir los símbolos relevantes de precaución.
Usar ambas manos para llevar las botellas grandes (una de las manos debe estar en la base de
la botella). Cuando prepare soluciones en frascos grandes, no coja el frasco por el cuello para
agitarlo ya que éste puede romperse fácilmente. Nunca coloque soluciones químicas de un
frasco por encima del nivel del ojo. Mantener seco el rótulo cuando manipule los químicos
para evitar su daño. Nunca pipetee con la boca. Consultar las leyes locales para la respectiva
descarga, tratamiento y eliminación de químicos.

Acidos

Los dos ácidos comúnmente usados en el laboratorio de citogenética son el ácido acético
glacial y el ácido clorhídrico (HCl). El ácido acético es inflamable, por eso debe mantenerse
lejos del calor, flamas y chispas; evitar aspirar el vapor y evitar el contacto con los ojos y la
piel. El HCl concentrado es corrosivo y tóxico y causa quemaduras, el vapor es irritante al
sistema respiratorio; abrir la botella con sumo cuidado. Al preparar diluciones recordar añadir
el ácido lentamente sobre el agua, no a la inversa, para evitar explosiones o la salpicadura
violenta del ácido en la cara. Si se ingiere ácidos, dé agua a beber, luego leche de magnesia.
Cuando derrame ácido acético aleje todas las posibles fuentes de ignición, use guantes y
mascarilla, trapee con abundante agua, ventile el área para evaporar el líquido remanente y
disipar el vapor. Para el HCl, limpie el área de otro personal; usando guantes y algún aparato
de respiración, eche soda sobre el derrame, y trapee cuidadosamente con agua, el cual es
entonces eliminado. Luego trapee con abundante agua y ventile el área. Una vez que han sido
fuertemente diluidos, ambos ácidos pueden eliminarse en el lavadero y dejar correr el agua
por varios minutos.

Solventes

Los solventes más comúnmente usados en el laboratorio de citogenética son, además del
alcohol, el xilol y el tolueno. Estos hidrocarbonos aromáticos son inflamables, volátiles y
tóxicos por todas las formas de entrada. Las soluciones stock deben almacenarse en
contenedores de metal y en un lugar fresco. Todos los mecheros de Bunsen de la habitación
deben estar apagados cuando se trabaje con estos químicos. Usar jabón para eliminar el xilol
de la piel. El contacto prolongado con la piel puede causar dermatitis.
En caso de derrame, alejar las fuentes de ignición, usando guantes y mascarilla aplicar un
agente dispersante no flamable y haga una emulsión con agua. Elimine al lavadero y deje
correr el agua. Ventile el sitio del derrame.

Alcoholes

Debido a que son usados para preparar fijadores, el etanol y el metanol son los alcoholes más
comúnmente usados en citogenética. Ambos son altamente inflamables y deben ser
almacenados en cabinas de metal. El metanol es tóxico por inhalación e ingestión, y la
inhalación de altas concentraciones puede causar mareos, estupor y calambres y desarreglos
digestivos. Bajas concentraciones de vapor pueden causar dolor de cabeza, nausea, vómitos, e
irritación de las membranas mucosas; el contacto continuo con la piel puede causar dermatitis.
La ingestión de metanol puede causar daño al SNC, órganos internos, inconciencia, y muerte.
En caso de derrame aleje las posibles fuentes de ignición. Usando guantes y mascarillas (y un
aparato de respiración para el metanol), mop up con abundante agua y llevarlo al lavadero,
ventile el área bien.

Carcinógenos, Mutágenos y Teratógenos

Los químicos más frecuentemente usados en el laboratorio de citogenética son: actinomycin

D, amethopterin (methotrexate), 5’-bromodeoxyuridine, formamida, Hoechst 33258,
mitomycin C, phorbol 12-myristate 13-acetato (TPA), y mostaza de quinacrina.
Los carcinógenos, mutágenos y teratógenos deben ser claramente rotulados como tal,
fechados en la recepción, y almacenados separadamente de otros químicos; el área de
almacenamiento debe ser claramente advertido como un área de almacenamiento carcinógeno,
y el acceso debe ser limitado. Limitar el almacenamiento de carcinógenos volátiles en el
refrigerador, debido a que el espacio confinado puede concentrar los vapores.
Cuando manipule carcinógenos en polvo que pueden generar aerosoles debe usarse en una
cabina de seguridad. Las cabinas de flujo laminar pueden ser usadas para procedimientos in
vitro que involucren bajas concentraciones de carcinógenos. Use guantes y mascarilla para
prevenir la inhalación o ingestión de polvo y sea cuidadoso en no contaminar las balanzas.
Cuando trabaje con carcinógenos líquidos use una bandeja de metal, vidrio o esmaltada para
recoger cualquier derrame accidental.
Trapee el derrame con papeles absorbentes desechables, limpie completamente el área
contaminada e incinere los papeles contaminados dentro de bolsas dobles. Todos los
materiales que han tenido contacto con el carcinógeno deben colocarse en un contenedor,
claramente rotulado y recolectado por el departamento de seguridad química para su
incineración.

SEGURIDAD MECANICA, ELECTRICA Y POR FUEGO

Centrífugas

Las centrífugas tienen un buen potencial de infección por el contacto directo con el material
contaminado y por la creación de aerosoles. Los tubos de centrífuga no deben ser sujetos a
fuerzas de centrifugación mayores a la que son diseñados, y todos los tubos que contengan
sangre o cultivos celulares deben centrifugarse debidamente tapados. Siempre cerrar la
centrífuga cuando esté en operación, no abrirlo hasta que se haya detenido completamente.
Recordar balancear la carga y operar la centrífuga dentro del límite de velocidad diseñado por
el fabricante.

Cilindros de Gas Comprimido

Los cilindros de gas deben ser asegurados con barras de seguridad o encadenados a la pared o
mediante otras estructuras sólidas. Si se maneja violentamente o se caen, los cilindros pueden
autopropulsarse como cohetes a través de la pared y volar y puede causar serios daños y
lesiones.

Autoclaves

El sellado debe ser chequeado regularmente. Se debe tener cuidado al finalizar el ciclo de
esterilización: portar un protector facial, liberar la puerta pero dejarlo por 5 minutos antes de
abrirlo totalmente para permitir que el vapor escape. Portar guantes gruesos antes de sacar las
cosas del autoclave.

Hornos Microondas

Los hornos microondas, que son usados en algunos laboratorios para envejecer láminas,
pueden causar accidentes cuando se usan para procedimientos para los que no han sido
diseñados. No deben colocarse en el microondas líquidos volátiles e inflamables como el
alcohol, acetona y xilol (y colorantes que contengan esos solventes), ya que pueden producir
niveles tóxicos de humo, explotar si hay alguna chispa (por el motor), o causar deterioro del
gasket con consiguiente liberación de radiación. Por ello, las láminas deben estar
completamente secas antes de colocarse en el microondas.

Seguridad Eléctrica

El equipo eléctrico puede ser fuente de cortocircuitos y fuego en el laboratorio. Siempre

investigue olores extraños en el equipo eléctrico ya que puede ser indicativo de
sobrecalentamiento, llevando a incendio del equipo eléctrico o de materiales combustibles
cercanos. Para reducir los riesgos inspeccione cada pieza de equipo eléctrico periódicamente y
elimine cualquier equipo defectuoso del servicio. Asegúrese que el voltaje requerido por un
instrumento sea compatible con el del tomacorriente. Desenchufe los instrumentos antes de
usarlos. No use cordones eléctricos que estén rotos o parchados. Evite el uso de cordones de
extensión. No manipule equipos eléctricos con las manos o pies húmedos. Apague los equipos
eléctricos que emitan olores inusuales.

Seguridad por Fuego

Cada institución debe tener reglas establecidas con procedimientos bien definidos acerca de
que hacer en caso de fuego o explosión. Todos los empleados deben ser instruidos en planes
de acción en procedimientos de emergencia, el uso y localización de alarmas de fuego,
llamado al departamento de bomberos y otro personal de emergencia, y las rutas más rápidas
y seguras de evacuación (nunca usar el ascensor durante un incendio).
Si no hay peligro, un pequeño fuego puede ser controlado por el personal para prevenir su
propagación mientras llegan los bomberos. Aunque la selección del tipo de extinguidor a usar
depende de la naturaleza del material combustible, un extinguidor de dióxido de carbono es el
más útil ya que puede ser usado en una variedad de fuegos pequeños y es el extinguidor de
elección para líquidos inflamables. El dióxido de carbono extingue las llamas excluyendo el
oxígeno y puede ser usado cuando hay peligro de shock eléctrico y donde hay equipo delicado
ya que no deja residuos.