PROCEDIMIENTO N°: 1

DETERMINACIÓN DE NITRATOS
MÉTODO ESPECTROFOTOMÉTRICO CON LUZ ULTRAVIOLETA
Ref.: Standard Methods 20 th Edition - 1998
Análisis: 4500-NO-3 B. Ultraviolet Spectrophotometric Screening Method

Método espectométrico ultravioleta selectivo.

Esta técnica solamente se utiliza para seleccionar muestras con

bajo contenido en materia orgánica (aguas naturales incontaminadas
y suministros de agua potable).

Las medidas de absorbancia -UV a 220 nm permiten la

determinación de nitratos que son absorbentes a esta longitud de
onda. Debido a que las materias orgánicas también pueden absorber
a esta longitud de onda debemos hacer una segunda lectura a 275
nm para obtener la medida relativa sólo a nitratos.

1. Equipos e Instrumental.-
1.1. Equipo para filtración Milipore con membranas tipo HA.
1.2. Erlenmeyer de 125 ó 250 ml. (una para cada estándar y
muestra).
1.3. Pipetas de 1 ml.
1.4. Pipetas de 5 ml.
1.5. Cilindros graduados de 50 ml.
1.6. Espectrofotómetro UV-VISIBLE, para el rango de 220 nm y 275
nm.
1.7. Celdas de Cuarzo de 1cm.
2. Reactivos.-
2.1. Agua destilada o desionizada de máxima pureza para
soluciones y disoluciones, de ser posible agua bidestilada.
2.2. Solución madre de nitrato, para la cual se deberá secar nitrato
de potasico KNO3 en un horno a 105 ºC/24 horas, disolver

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 0,7218 gramos en agua con balanza analítica y diluir a 1.000
ml (1ml = 100 mg NO3- -N).
2.3. Solución intermedia de nitratos. Diluir 100 ml de solución
madre de nitrato a 1.000 ml con agua (1,00 ml=10,0mg NO 3-
-N).
2.4. Solución de ácido clorhídrico HCl 1N.
3. Procedimiento:
3.1. PREPARACIÓN DE LA CRISTALERÍA.-

Toda la cristalería que se utilice en el procedimiento de

preparación de reactivos y estándares, así como las que se use para
el tratamiento de la muestra, debe ser lavado con una solución
Acidad de Dicromato de potasio o con un detergente que permita
eliminar cualquier contenido de impurezas o materia orgánica que
pueda interferir. Se debe luego del lavado, enjuagar varias veces con
agua descrita en el punto 2.1, que permita eliminar cualquier traza de
detergente o acido que pueda interferir. Se deben secar y limpiar
escrupulosamente, las cubetas o celdas de cuarzo por su parte
externa con papel para limpiar lentes.

3.2. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.-

3.2.1. Remover el contenido de turbiedad, color e impurezas de
la muestra mediante coagulación y filtración, mediante una
filtración milipore con membrana.
3.2.2. Los residuales de color que puedan que dar después de la
filtración se pueden decolorar con cloro o mediante dilución
de la muestra.
3.2.3. A 50 ml de muestra transparente, libre de interferencias
de turbiedad y color, añadir 1mL de solución de HCl y
homogeneizar, para eliminar la alcalinidad.
3.3. PREPARACIÓN DE LOS PATRONES O ESTÁNDARES DE NITRATO
(NO3-N).-
3.3.1. Se han de preparar estándares de calibrado de nitrato en
el rango de 0 a 7 ml NO-3-N /l por dilución a 50 ml de los

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 siguiente volumen de solución intermedia de nitrato. Se
han de tratar los patrones de NO-3-N del mismo modo que
las muestras.
3.3.2. Se deben preparar los patrones o estándares de NO-3-N,
para construir la curva como se describe en la tabla anexa
1-A, luego de haber preparado las soluciones madres como
se describe en los puntos 2.2 y 2.3 respectivamente.
3.4. CONSTRUCCIÓN DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN Y ANÁLISIS DE
LA(S) MUESTRAS.-

Luego preparar los patrones como se describe en la tabla anexa 1-A,

se debe construir la curva con dichos patrones de NO-3-N.

3.4.1. Leer la absorbancia o transmitancia, partiendo desde el

blanco que es el patrón de 0 mg NO-3-N/lt con la que
previamente se ha ajustado a absorbancia 0, hasta el
patrón de 3 mg NO-3-N/lt,. Para esta determinación se
utilizará la longitud de onda de 220 nm para obtener la
lectura de NO-3-N.
3.4.2. De igual forma y ajustando a cero con el patrón de 0 NO-3-
N se leen los patrones y las muestras a una longitud de
onda de 275nm para determinar la interferencia.
3.4.3. Para muestras y patrones debemos restar 2 veces la
absorbancia leída a 275nm de la lectura a 220nm para
obtener la absorbancia debida a los NO3- y construir la
curva de calibrado de la cual se obtiene la concentración de
la muestra. Detergentes, nitritos y Cr6+ pueden provocar
distorsiones en las medidas.
3.5. CORRECCIÓN POR NITRITOS (NO-2-N) Y CROMO HEXAVALENTE
(Cr+6).-

Si se presume o determina que la muestra presenta contiene

nitritos y/o cromo hexavalente, preparar curvas de corrección

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 con estándares de de nitrito y dicromato de potasio dentro del
rango de concentración respectivo y realice las correcciones.

4. INTERFERENCIAS.-

Los nitratos absorben energía luminosa de longitud de onda 220

nm, pero no a una longitud de onda de 275 nm. La acidificación de la
muestra busca eliminar las interferencias producidas por hasta 1000
mg/lt. De hidróxidos y/o carbonatos como CaCO3. Los nitritos, el
cromo hexavalente y la materia orgánica interfieren. Por esto debe
hacerse la correspondiente corrección indicada.
La turbiedad y/o color pueden interferir y de igual manera
deben ser eliminados. Durante el proceso de su remoción es posible
contaminar la muestra con los reactivos añadidos o con el filtro de
membrana. Es necesario entonces comprobar que no haya ocurrido
esta contaminación. Para evitar diluir la muestra notoriamente, trate
grandes volúmenes de esta (300 o 500 ml) con pequeñas cantidades
o volúmenes concentrados de reactivos (1 a 5 ml).

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 ANEXOS

TABLA 1-A
Concentración Volumen Estándar Volumen de agua
Estándar
1 ml = 0.01 mg NO-3- destila o desionizada de
mg NO-3-N/lt. N /ml. alta pureza
0.0 0 50
0.2 1 49
0.4 2 48
0.8 4 46
1.0 5 45
2.0 10 40
3.0 15 35
4.0 20 30
5.0 25 25
6.0 30 20
7.0 35 15

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