Quorum sensing: espressione genica dipendente La comunicazione intercellulare da quorum sensing

dalla concentrazione cellulare è favorita in biofilm piuttosto che in colture liquide

Molecola segnale
Molecola segnale
Cultura liquida: 108-109 cfu/ml

Attivatore
Attivatore trascrizionale
trascrizionale

Molecole segnale (in Gram negativi):

Gene target
acil-omoserin-lattoni (AHL o HSL)
Gene target

Bassa concentrazione Alta concentrazione

cellulare cellulare

Quorum Sensing in Pseudomonas aeruginosa: Geni regolati da Quorum Sensing in Pseudomonas aeruginosa
Il sistema lasR/lasI e rhlR/rhlI costituiscono una cascata regolativa

C12-HSL

C4-HSL Tre classi funzionali principali: fattori di virulenza, sintesi di EPS, uptake del ferro

Studi genomici stimano al 5-6% la percentuale di geni regolati da QS

1
 Il cluster rhlR/rhlI è così chiamato per il suo I promotori QS-dipendenti sono spesso co-regolati
ruolo nella biosintesi dei rhamnolipidi da meccanismi legati a stimoli ambientali/fisiologici

(sito di legame per LuxR)

Rhamnolipidi: un esempio di biosurfattanti e i responsabili della

“gliding motility”

Geni quorum sensing-dipendenti determinano la La biosintesi degli AHL ha come unico scopo
“struttura ordinata”all’interno di un biofilm batterico la creazione di una molecola segnale

2
Le proteine regolatrici della famiglia LuxR
sono tipici regolatori di risposta

3
 Non solo piante: il QS è direttamente
Patogeni delle piante: coinvolto in meccanismi di patogenesi nei
l’unione fa la forza mammiferi
• In Agrobacterium tumefaciens e in Erwinia
carotovora l’induzione dei sistemi di quorum
sensing presiede a sistemi di virulenza
specifici (trasferimento di un plasmide
coniugativo in A.t.; produzione di enzimi
pectinolitici in E.c.);
l’aggressione all’organismo ospite viene
preceduta da un “contare le proprie forze” per
evitare di cadere vittima della reazione
dell’ospite stesso

Passare la barriera della specie: gli AHL come segnali “universali” Effetti su cellule eucariote: inibizione della
replicazione in colture cellulari

C4-HSL

C12-HSL

Inibizione della mitosi in linee cellulari di milza umana in coltura da HSL

4
 Numerosi microrganismi (ma anche cellule umane,
particolarmente delle vie respiratorie e polmonari)
Effetti di HSL su organismi eucarioti producono lattonasi e acilasi (enzimi degradativi di
HSL)

E ancora:
inibizione della contrazione della muscolatura liscia
inibizione dell’attivazione del macrofago

Produzione di lattonasi e acilasi (enzimi degradativi di HSL)

Lattonasi Acilasi
da parte di cellule polmonari umane

Un esempio „scozzese“di interazione cross-specie nell‘ambiente:

alghe e batteri Gram negativi

Molto diffusa sulle coste

dell‘Atlantico del nord
(es. Scozia)

La colonizzazione degli
scafi da parte di Ulva è
Zoospore
difficilmente rimuovibile e
di Ulva
porta a biocorrosione

5
 Gli induttori (molecole segnale) appartengono a classi chimiche diverse
Il QS è un bersaglio di sostanze organiche naturali

L’alga Delisea pulchra

produce furanoni
alogenati (HF), inibitori
specifici del QS e
competitori degli AHL
per il regolatore di
risposta (es. LasR)

Un caso a sé: gli “A factor”:

Streptomyces
OH
Streptomiceti/Attinomiceti:
Batteri (Gram +) del suolo O
(30 °C temperatura ottimale di crescita)
Organismo multicellulare O
O
(Uniche forme monocellulari: spore e protoplasti)
Sporigeno (su substrati solidi, spore in circa 7 gg)
Crescita come micelio in terreno liquido
S. coelicolor
Principale produttore di antibiotici identificato in S. griseus
Mutanti incapaci di produrre A factor sono Spo-, StrS and Str-
Geni regolatori: A factor aggiunto esternamente ripristina il fenotipo originario
Numero di ORF predette
65 fattori sigma A factor lega il repressore ArpA, inibendone l’attività
S. coelicolor 7825 E’ in grado di agire a concentrazioni nM
E. coli 4289
B. subtilis 4099 TCRS:
S. cerevisiae 6203 85 sensor kinases Coinvolto nella produzione di numerosi composti antimicrobici
79 response regulators

6
 OH

O
A factor, S. griseus
O O

S. bikiniensis, S. cyanofuscatus,
OH

S. viridochromogenes
O OH
OH

O
S. virginiae γ-butirrolattoni in
O OH Streptomyces
OH

O
S. bikiniensis, S. cyanofuscatus
O OH

OH

O
S. virginiae
O OH

OH

O
S. virginiae
O OH

OH

O
S. virginiae
O OH

OH

O
S. virginiae
O OH

OH

O
Streptomyces sp. FRI-5
O OH