UNIDAD 2 ESTRUCTURA MICROBIANA

2.2 PARED CELULAR

¿LAS BACTERIAS TIENEN PARED CELULAR?
¿Cómo está compuesta?
¿Qué tan rígida es?
¿Para qué la necesitan?
¿Son iguales a las de los vegetales?
¿Es igual en todas las bacterias?

2.2 Pared celular: estructura, composición

química y función de las paredes celulares
de Eukarya, Archaea y Bacteria. Células
carentes de pared celular naturales e
inducidas.
Muchos grupos microbianos comparten estructuras
semejantes, lo que nos permite imaginar que son esenciales
para su viabilidad, tal es el caso de la Pared celular.
La PARED CELULAR permite a las bacterias, algas y hongos tener
formas rígidas características.

Las bacterias tienen

formas básicas esféricas,
cilíndricas y curvas
características debido a la
presencia de su Pared
Celular
 LA PARED CELULAR BACTERIANA

• Es una estructura compleja, semirígida, responsable de la forma de la

bacteria. La pared celular rodea la frágil membrana citoplasmática
protegiendo el interior celular de los cambios en el medio ambiente.
• La mayoría de los procariotes poseen pared celular
• La principal función de la pared celular es prevenir la ruptura de
las células cuando su presión interna es mayor que la de su exterior,
esto ocurre cuando la bacteria se encuentra en medios hipotónicos.
La pared celular mantiene la
forma de la célula bacteriana ,
sí fuese eliminada, el
microorganismo se convertiría
en una burbuja amorfa .
Sirve de anclaje a los flagelos ,
y distintos receptores están
localizados en ella.
La interacción de la pared
celular con el ambiente
externo de la célula bacteriana
determina su supervivencia.
Péptidoglucano o Mureína

Saco de mureína
asilado de E. coli y
visualizado con
microscopía
electrónica.
El disacárido del péptidoglicano (mureína) esta compuesto por:
N-acetilglucosamina (NAG) y
el Ácido N-acetilmurámico(NAM)

GLUCOSA + N-ACETILO GLUCOSA + N-ACETILO +

AC. OXIPROPANOICO
 Enlace glucosídico  (1>4)

Estos 2 carbohidratos se enlazan por uniones glucosídicas  (1>4)

formando una cadena de 10 a 65 azúcares, que constituyen la
porción glucosídica de la pared celular
Las cadenas de NAM-NAG son unidas por pequeños péptidos
que constituyen la porción peptídica de la pared celular.
La parte peptídica del péptidoglucano en general, esta constituida
por cuatro aminoácidos unidos al ácido acetilmurámico.
Los aminoácidos que con mayor frecuencia son encontrados en
éste péptido son : D-Alanina, L-Alanina , Ácido D- Glutámico y/o
D-Lisina ó bien Ac. Diaminopimélico. Este hecho es único pues los
aminoácidos que se encuentran generalmente en otras proteínas
son todos de la forma L.
Los aminoácidos se unen para formar una estructura repetida
llamada el “péptido del glicano”, constituído por 4 ó 5 a.a

El Ácido
Diaminopimélico
(DAP) no ha sido
encontrado en
Arqueas ni en
Eucariontes
 Enlaces en la pared

Gram negativas
Gram positivas
Se conocen más de
100 tipos distintos de
péptidoglicano, su
variación más
importante se refiere
al número de puentes
peptídicos y al tipo de
aminoácidos
presentes.
PÉPTIDOGLUCANO en Escherichia
coli.
PÉPTIDOGLUCANO en Staphylococcus
aureus.
SÍNTESIS DE PARED CELULAR
Ensamblaje
de la pared
celular
El ensamblaje de las
subunidades de la pared
celular ocurre en el lado
citosólico de la MI. Los
precursores de azúcares UDP-
activados son montados sobre
un portador poli-isoprenoide
(BACTOPRENOL), estos
forman el Lípido II (b), que
entonces es transportado a través
de la MI por un
mecanismo desconocido. Nature Reviews Drug Discovery 5, 321-323 (April 2006)
uridina

http://www.scielo.br/img/revistas/qn/v31n2/a33fig01.gif
Ensamblaje de la Pared Celular
Autolisinas: Cortan
previamente los enlaces
glicosídicos y peptídicos
PBP´s para que se intercalen
nuevas subunidades

PBP´s: Penicillin Binding Proteins

Transglicosilasas y transpeptidasas
Nature Reviews Microbiology 6, 28-40 (January 2008)
Growth of the bacterium requires
continuous remodelling of the
peptidoglycan envelope. Bacteria,
therefore, also possess a series of
autolytic enzymes, such as
glycosidases, peptidases and
amidases, that selectively
cleave the molecular meshwork and
thereby facilitate the insertion of
additional cell-wall material.
http://pharmaxchange.info/press/2011/03/animation-of-synthesis-of-peptidoglycan-layer/
Ensamblaje de la Pared Celular
Gram positivas Gram negativas
Antibióticos que afectan la síntesis de pared celular
 PARED CELULAR EN BACTERIAS GRAM POSITIVAS
Debido a que la pared celular de las bacterias Gram (+) estan constituídas por una
capa gruesa de péptidoglicano son más sensibles a la acción de la penicilina,
lisozima y sus derivados, ya que estos antibióticos inhiben la formación de los
enlaces peptídicos intracatenarios del péptidoglicano y glucosídicos entre NAM y
NAG.
Las bacterias G(+) y G( - )muestran diferencias estructurales
muy importantes.en su pared celular:

Membrana
externa

Peptidoglicano Espacio
periplásmico

Membrana
citoplasmática

Gram Positivas Gram Negativas

TINCIÓN DE GRAM

Hans Christian J.
Gram, 1853-1938
El cristal-violeta con el Yodo forma un complejo insoluble. El etanol en Gram +
deshidrata porque tienen una pared celular (PC) muy gruesa con varias capas de
péptidoglucano y se cierran los poros de la PC lo que impide la salida del
complejo cristal violeta-yodo.
En Gram - el alcohol penetra rápidamente la membrana externa que es rica en
lípidos y el complejo se extrae fácilmente.
Gram positivas
Staphylococcus aureus

Bacillus anthracis
Algunos de estos ácidos que contienen glicerol se asocian a los lípidos de la
membrana, tomando el nombre de ácidos lipoteicóicos.

Algunos microorganismos como Bacillus, tienen ácidos teicurónicos como parte

de la estructura de su pared celular cuando crecen en medios con bajas
concentraciones de fosfatos.

Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)

Muchos patógenos Gram + presentan tipos especiales de glicopolímeros
(CGW) en su pared celular además de los ácidos teicóicos
 Glicopolímeros de
Pared Celular
(CWGs)
 Mantenimiento de las
envolturas.
 Interacciones
Microorganismo-
Hospedero.
 Existe una gran variedad.
 Son altamente
antigénicos.
 Son usados como
marcadores.

Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)

Ácidos teicoicos y otros
componentes.
 Ácidos teicoicos Polímeros de ribitol fosfato o glicerol fosfato.

 Ácidos teicurónicos Polisacáridos ácidos conteniendo ácido urónico (N-

acetilgalactosamina y acido D-
glucorónico). Bacillus subtilis en medios
pobres de fosfato.

 Polisacáridos neutros Son particularmente importantes en la

clasificación de estreptococos y
estafilococos (ejemplo en grupos A, B y C de
estreptococos).

 Ácidos lipoteicoicos (LTA) Asociados a la proteína M de Streptococcus

pyogenes

Gram negativas
 Neisseria meningitidis

Enterobacter cloacae
PARED CELULAR EN BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

La membrana externa de
la pared de Gram
negativos no solamente
esta compuesta por
fosfolípidos, contiene
además el
LIPOPOLISACÁRIDO
(LPS), lipoproteínas,
porinas y otros
receptores.
Más 50% Entre 10 y 20%
DIFERENCIAS ENTRE BACTERIAS GRAM (+) y Gram (-)

Gram Gram
Característica Positivas Negativas
Grueso de la pared 20-80 nm 10 nm
Número de membranas 1 2
Contenido de lípidos y
0-3% 58%
lipoproteínas
Contenido de proteínas 0% 9%
Lipopolisacárido 0 13%
Sensibles a penicilina + - (Poco)
Sensibles a lisozima + - (Poco)
Espacio periplásmico (periplasma)
Es el espacio que se
encuentra entre las dos
membranas en las bacterias
Gram negativas, comprende
del 20-40% del total del
volumen celular, este
periplasma tiene embebido
la capa de mureína y una
solución densa de proteínas
que facilitan la nutrición e
inhibición de algunas
sustancia tóxicas.
 Proteínas del periplasma
 Proteínas de unión:
-Aminoácidos (arginina, leucina)
-Azúcares (galactosa, glucosa,
arabinosa)
-Vitaminas (tiamina, Vitamina B12)
-Iones (fosfato, sulfato)

 Enzimas degradativas:
-Varias fosfatasas
-Proteasas
-Endonucleasa I
-Macromoléculas

 Enzimas destoxificantes:
--lactamasas
-Enzimas fosforilantes de
aminoglucósidos
 PROTEÍNAS DEL ESPACIO PERIPLÁSMICO

Tipo de
enzima Ejemplos Función

Enzimas Degradantes, compuestos que contienen

hidrolíticas Fosfatasas
fosfato

Proteasas Degradantes proteínas y péptidos.

Endonucleasas Degradantes ácidos nucleicos.

Proteínas
de unión a: Azúcares, aminoácidos, Proteínas de acoplamiento para el
iones, vitaminas transporte a través de la membrana.

Quimiore- Percepción del medio ambiente y el cambio

ceptores Proteínas de quimiotaxis de comportamiento de la célula en respuesta
a un estímulo.

Enzimas Degradantes, la penicilina y compuestos

desintoxi- β -lactamasas relacionados antes de que tengan contacto
cantes con la célula.
Funciones del periplasma
 Osmorregulación:
 Transporte de moléculas:
El periplasma tiene una
osmolaridad igual que el
interior, lo cual es regulado
por que existe un gradiente
osmótico con el exterior, por
medio de la formación de altas
concentraciones de
oligosacáridos derivados de
membrana (8-10 unidades de
glucosa enlazados y sustituidos
con glicerol-fosfato).
Micobacterias

Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium tuberculosis
 Diversidad de las estructuras de
superficie en arqueobacterias

Nature Reviews
Microbiology 9,
414-426, 2011
Arqueobacterias

Nature Reviews Microbiology 9, 414-426, 2011

 PARED CELULAR EN ARQUEAS
Algunas especies de Arqueas carecen de pseudopéptidoglicano y están cubiertas por
polisacáridos, glicoproteínas ó proteínas.
La forma más común de pared de las Arqueas es la capa S paracristalina, que está
compuesta de proteínas o lipoproteínas dispuestas en simetría hexagonal. Esta estructura
se encuentra en Arqueas como los halófilos extremos, metanógenos y los hipertermófilos.
Sus funciones son idénticas a las de Eubacterias y son resistentes a penicilina y
lisozima.

Capa S de
Aquaspirillum serpens
de simetría hexagonal
 Capa cristalina S
Se encuentra principalmente en arqueobacterias y en
algunas bacterias.

 Hipertermófilas

 Mesófilas

Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)

Pseudomureína  N- acetilglucosamina y ácido N-
acetiltalosaminurónico.

 Enlaces β1-3.

 Resistente a la lisozima y a la
penicilina.

 Descrita en los
Methanobacteriales y en el
género Methanopyrus.
Células sin Pared Celular
 Micoplasmas  Protozoarios

Mycoplasma pneumoniae Amoeba

 Protoplastos las células bacterianas a las
que se ha desprovisto totalmente de pared
celular.

 Esferoplastos son aquellas células

bacterianas que poseen restos de pared.

 Gram-positivas, la desorganización total

de su pared, por lo que se obtienen
protoplastos.

 Gram-negativas, quedan restos de membrana En ambos casos, protoplastos y

externa y de peptidoglucano atrapados en ella, esferoplastos pueden revertir a
por lo que se obtienen esferoplastos. la forma normal eliminando el
tratamiento.
Obtención. Existen dos posibles métodos alternativos:
Por destrucción del entramado del PG mediante enzimas líticas (lisozima,
peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas, previamente hay que
desorganizar la membrana externa para hacerla permeable a estas enzimas.
Ello se logra usando el quelante EDTA y/o sometiendo las células a bajas
temperaturas.
 Por inhibición de la
formación de nuevo PG en
las células en crecimiento,
tratándolas
p. ej., con penicilina. Si se
parte de un mutante auxótrofo
para un componente del PG
basta hacer crecer a la bacteria
en un medio carente de dicho
componente.
FORMAS L

Formas L naturales:
Carentes totalmente (o casi) de PC que algunas bacterias
generan espontáneamente en medios a base de suero (que son
hipertónicos)
Ejemplo: Streptobacillus moniliformis
Colonias en forma de “huevo frito”

Formas L inducidas: Tratamiento con penicilina en

medio hipertónico
L inestables: tratamiento breve; revierten PC
L estables: tratamiento prolongado; no revierten PC
 Constituída por quitina( Polímero de N-
acetil-glucosamina), algunas especies
PARED CELULAR poseen microfibrillas de celulosa y otras
EN HONGOS presentan polímeros como mananos,
galactanos ó quitosano
Quitina

La Quitina también esta presente en el exoesqueleto de los arácnidos,

crustáceos e insectos

Quitosano

La Quitina se desacetila para transformarse en Quitosano y Quitano

 PARED CELULAR DE ALGAS

Celulosa

Formada por moléculas de glucosa unidas por enlaces β1-4

LOS PROTOZOARIOS NO TIENEN PARED CELULAR
 Pared Celular
 Bacterias Péptidoglucano
(N-acetilglucosamina y N-acetilmurámico) Ácidos
Teicoicos y Lipoteicoiocos en Gram positivas
 Micobacteria Péptidoglucano
(N-acetilglucosamina y N-acetilmurámico) Acidos
Micólicos
 Arqueas Pseudopeptidoglucano
(N- acetilglucosamina y ácido N-acetiltalosaminuronico)
Polisacáridos, glicoproteínas o proteínas (Glucosa, Ácido
glucorónico, galactosamina, acetato, SO -) 4
Capa cristalina S
Proteína o glicoproteína
 Hongos Principalmente Quitina

 Algas Principalmente Celulosa

 Protozoarios No tienen pared