“Año de la Universalización de la Salud”

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

TEMA: Espectrofotometría ultravioleta-visible: tipos de

transiciones electrónicas, aplicaciones

DOCENTE: Mg Elisa Sihuay Fernandez

FACULTAD: Farmacia y Bioquímica

ESCUELA: Farmacia y Bioquímica

ESTUDIANTE: Perez Palomino Paola

FECHA DE ENTREGA: 15-07-2020

2020
 INDICE

Introducción………………………………………………………………….3

Objetivos…………….…...…………………………………………………..3

Marco Teórico…………….…………………………………………………4

Descripción de caso de estudio…..……………………………………….7

Resultados…………………………...………………………………..……10

Tabla de datos……………………………………………………………...10

Conclusiones………………………….……………………………………13

Artículo científico………………………...…………………………………14

Referencias bibliográficas…………………………………………………16
 ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA-VISIBLE:
TIPOS DE TRANSICIONES ELECTRÓNICAS,
APLICACIONES

I. INTRODUCCIÓN:
Desde hace muchos años se ha usado el color como ayuda para
reconocer las sustancias químicas al reemplazar el ojo humano por otros
detectores de radiación se puede estudiar la absorción sustancias no
solamente en la zona del espectro visible, sino también en ultravioleta e
infrarrojo.

Se denomina espectrofotometría a la medición de cantidad de energía

radiante que absorbe un sistema químico en función de longitud de onda
de radiación y a las mediciones a una determinada longitud de onda.

La teoría ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es

un flujo de cuantos de energía llamado fotones, la luz de una cierta
longitud de onda este asociada con los fotones uno de los cuales posee
una gran cantidad definida energía.

II. OBJETIVOS:

Conocer la función del espectrofotómetro.

Como se maneja el espectrofotómetro.
Construir la gráfica de las curvas de calibración

Determinar la concentración de una solución desconocida.

III. MARCO TEÓRICO:
La espectrofotometría es un método analítico que utiliza los
efectos de la interacción de las radiaciones electromagnéticas con la
materia (átomos y moléculas) para medir la absorción o la transmisión
de luz por las sustancias. La espectrofotometría se refiere a los
métodos, cuantitativos, de análisis químico que utilizan la luz para medir
la concentración de las sustancias químicas. Se conocen como métodos
espectrofotométricos y, según sea la radiación utilizada, como
espectrofotometría de absorción visible (colorimetría), ultravioleta,
infrarroja. En espectroscopia el término luz no sólo se aplica a la forma
visible de radiación electromagnética, sino también a las formas UV e
IR, que son invisibles. En espectrofotometría de absorbancia se utilizan
las regiones del ultravioleta
(UV cercano, de 195-400 nm)
y el visible (400-780 nm).La
región UV se define como el
rango de longitudes de onda
de 195 a 400 nm. Es una
región de energía muy alta.
Provoca daño al ojo humano
así como quemadura común.

espectrofotometria.html

Los compuestos con dobles enlaces aislados, triples enlaces,

enlaces peptídicos, sistemas aromáticos, grupos carbonilos y otros
heteroátomos tienen su máxima absorbancia en la región UV, por lo que
ésta es muy importante para la determinación cualitativa y cuantitativa
de compuestos orgánicos. Diversos factores -como pH, concentración de
sal y el disolvente- que alteran la carga de las moléculas, provocan
desplazamientos de los espectros UV.

Las bandas de absorción en las regiones Ultravioleta y Visible

que presentan los compuestos orgánicos se asocian con transiciones
electrónicas en la capa de valencia. Los electrones involucrados en
dichas transiciones corresponden a aquellos más débilmente atraídos
por el conjunto de núcleos atómicos que componen la molécula y cuyos
estados pueden ser descritos a través de orbitales moleculares que se
expresan como combinaciones lineales de orbitales atómicos de la capa
de valencia. Las transiciones electrónicas a orbitales moleculares más
externos dan lugar a las denominadas transiciones Rydberg presentes
en el Ultravioleta de Vacío. Por otra parte las transiciones electrónicas
que involucran a los electrones de las capas internas son muy
energéticas y se presentan en la región de los rayos X del espectro
electromagnético. Nuestro análisis se reducirá a las transiciones
electrónicas en la capa de valencia. A estos efectos resulta conveniente
recordar la clasificación convencional de los orbitales moleculares en la

capa de valencia de los compuestos orgánicos.

 https://miseptiembrerojo.wordpress.com/

Orbitales o y o*: Son orbitales moleculares localizados a lo largo

del eje de unión de los átomos. Los orbitales o generan una densidad
electrónica elevada en la región intranuclear teniendo un carácter
fuertemente enlazante.

Los orbitales o*: Como todos los orbitales antienlazantes,

presentan un plano nodal perpendicular al eje del enlace en la región
internuclear y tienen un acentuado carácter antienlazante.

Orbitales r y r: Estos orbitales se emplean en la descripción de

los enlaces múltiples. Las regiones de mayor densidad electrónica
correspondiente a los mismos son aquellas colaterales al eje del enlace.
El carácter enlazante o antienlazante de estos orbitales es menos
acentuado que el de los orbitales o.

Orbitales n: Estos orbitales moleculares tienen un acentuado

carácter local y describen pares electrónicos libres asociados con
heteroátomos (O, S, N, Hal). Energéticamente tienen carácter no-
enlazante.
IV. DESCRIPCIÓN DEL CASO ESTUDIADO:

Reactivos Materiales
Etanol al 40 % Espectrofotómetro
Alcohol etílico 96 % Celda de plástico
Leche en polvo Tubos de ensayos
Agua destilada Gradilla
Matraz
Bureta
Fiola

Procedimiento
Solución de leche en polvo en agua

Preparamos un solución de leche

en polvo 0.9 gr en agua estilada
en una fiola de 100ml a las
cuales se les determino a
absorbancia.
 Luego que la solución esta lista
lo pasamos aun cubeta y lo
colocamos en una gradilla para
celda. Después comenzamos a
leer las 12 muestras

Se colocó una muestra con un

blanco para calibrar el
espectrofotómetro, una vez
realizada dicha acción se
comenzó con la lectura para
posteriormente realizar unas

Solución de leche en polvo en etanol al 40%

Preparamos una solución leche en polvo

0.9 gr en Etanol de 40% a partir del
alcohol etílico 96% de pureza en agua
destilada, cada equipo en una fiola de
100ml a las cuales se les determino su
absorbancia
 Luego que la solución esta lista lo
pasamos aun cubeta y lo colocamos
en una gradilla para celda. Después
comenzamos a leer las 12 muestras.

Se colocó una muestra

con un blanco para
calibrar el
espectrofotómetro, una
vez realizada dicha
acción se comenzó con
la lectura para
posteriormente realizar
unas curvas de
calibración de los
valores obtenidos.

V. ANÁLISIS DE RESULTADOS

Para encontrar la concentración real del analito a estudiar se construyó

la curva de calibración pertinente para ambas soluciones; además se
estudió si al usar la solución de etanol como solvente favorece o
desfavorece en la absorbancia (absortividad).

VI. TABLA DE DATOS:

 Absorbancias obtenidas para las dos soluciones con sus
respectivas concentraciones
Absorbancias
Concentración Sol de agua Sol etanol 40%
gr/l
9 1.098 1.423
8 0.9863 1.2745
7 0.8856 1.182
6 0.703 0.985
5 0.5943 0.7855
4 0.483 0.61
3 0.388 0.403
2 0.2476 0.219
1 0.1073 0.1735
0.5 0.0553 0.136
0.2 0.0156 0.0975
0.1 0.00166 0.0535

Muestra el promedio de las absorbancias de las tres

replicas obtenidas para las diluciones de cada uno de los
solventes utilizados.

Grafico Nº1- Curva de calibración.

Se decidió graficar solamente aquellas absorbancias que fueran menor a
uno ya que mayores a esta absorbancia se va llegando al límite de
detección y por consecuente se va perdiendo el rango lineal que interesa
de nuestro estudio .

Concentración muestra:

La absorbancia dada por la muestra que se analizo fue de 0.658 en la

longitud de onda de 600 nm y con ayuda de la ecuación de la regresión
dada por la figura 1 es:

Y = 0.1238x – 0.0078

Despejando la x la concentración que nos da es de 5.3gr de leche en

polvo por cada litro de agua destilada con un 99.74% de confianza

Grafico N2- Curva de calibración.

 Al igual que para la figura 1 se decidió lo mismo para la figura 2
solamente graficar las absorbancias menores a 1 por lo ya antes
comentado en ese apartado.

Concentración muestra:

La absorbancia obtenida para este análisis utilizando la solución de

etanol 40% a la misma longitud de onda fue de 0.8640 despejando de la
ecuación dada por la figura 2 que es y=0.1516x + 0.05 despejando x
como la concentración es de 5.37 gr/ L con un 99.7 de confianza.

VII. CONCLUSIONES:

Se encontró la concentración que se espera sea la real a partir de las

dos curvas siendo prácticamente iguales para cada una. El disolvente
etanol fue el que presento comparado con el del agua mayor
absorbancia a la misma concentración (debido a la interacción del
analito con el solvente), su aplicación es que utilizando este solvente
tienes más amplitud de conocer la concentración desconocida o conocer
alguna otra y de tener un mayor rango lineal. Cabe mencionar que el
solvente y algunas condiciones de la solución como el pH, la fuerza
iónica y la temperatura deben ser optimizados y controlados para
minimizar las interferencias y mantener la linealidad (para prevenir la
descomposición por oxidación, foto descomposición u otros
mecanismos). Por otro lado se debe de mantener el equilibrio y
maximizar el tiempo de estabilidad de la forma absorbente.
ARTICULO CIENTICO
https://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/107849/recm1de1.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Comentario:
Este articulo estudia  se estudia la potencialidad que ofrece el uso de la
espectroscopia en el infrarrojo próximo por reflectancia difusa (NIRRS),
combinada con métodos de calibración multivariable, para el análisis
de preparados farmacéuticos sólidos, El objeto de todos los trabajos
presentados es, por un lado, la punta a punto de métodos analíticos
para la industria farmacéutica que permitan la determinación del
principio activo en un período corto de tiempo y con una mínima
manipulación de la muestra. Y por otro, el estudio de los problemas
que presenta la aplicación de la técnica al análisis de productos que se
fabrican de un modo reproducible. Se estudian las estrategias que
permiten obtener un conjunto de muestras que cubra el intervalo de
concentraciones aceptado en la fabricación del producto y que sea
representativo de todas las fuentes de variación asociadas a la
fabricación que afectan al espectro.

Link del video

LINK: https://www.youtube.com/watch?v=tS91u7PrgUY&list=PLhQRRVeAXbE-
tWuixZ9BB1jI2rHAqLGAW&index=4
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Nieves Abril Díaz, J. Antonio Bárcena Ruiz, Emilio Fernández

Reyes, Aurora Galván Cejudo, Jesús Jorrín Novo, José Peinado
Peinado, Fermín Toribio Meléndez-Valdés, Isaac Túnez Fiñana.
Espectrofotometría: Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. Facultad de medicina de Córdova
en argentina, 2011
González R. Calibración de espectrofotómetro ultravioleta-visible.
CASMET Querétaro de México , 2004