Programa de Biología

Principios químicos de la vida

MÉTODOS BASICOS DE SEPARACIÓN
PRACTICA #2

Valentina Garzón Perico-164004511

OBJETIVOS
 Conocer algunas técnicas empleadas en la separación de mezclas conociendo y aplicando
algunas propiedades físicas de la materia.

INTRODUCCIÓN
Las mezclas se pueden separar mediante diversos procesos tanto químicos como físicos, ya sea
para su estudio o elaboración de otros productos, algunos de los métodos que se van a encontrar
mediante este informe serán: cromatografía, filtración, destilación y evaporación. Esto es
importante ya que todo lo que nos rodea en la vida diaria está compuesta por mezclas de
sustancias, pero también tenemos que notar que algunas muestras son una mezcla y en algunos
casos hay que hacer un proceso riguroso para determinar si es una sustancia pura, pura o una
mezcla de sustancias.
DIAGRAMAS DE FLUJO
DISCUSIONES
CROMATOGRAFÍA
Es una técnica de separación en la que los componentes de una muestra se separan en dos fases:
una fase estacionaria de gran área superficial, y una fase móvil. El objetivo de la fase
estacionaria es retrasar el paso de los componentes de la muestra. Cuando los componentes pasan
a través del sistema a diferentes velocidades, estos se separan en determinados tiempos. Cada
componente tiene un tiempo de paso característico a través del sistema, llamado tiempo de
retención. La separación cromatografía se logra cuando el tiempo de retención del analito difiere
del resto de componentes de la muestra.

La cromatografía es una de los principales métodos analíticos y permite la separación y

cuantificación de sustancias muy similar en estructura y propiedades químicas.

Términos empleados

 Analito es la sustancia que se va a separar durante la cromatografía.

 Fase móvil es la fase que se mueve en una dirección definida. Puede ser un líquido
(cromatografía de líquidos o CEC). un gas (cromatografía de gases) o un fluido
supercrítico (cromatografía de fluidos supercríticos). La muestra que se está
separando/analizando (formada de analito/s y el disolvente) se inyecta en la fase móvil
que se mueve a través de la columna. En el caso de la cromatografía líquida de alta
resolución, HPLC, la fase móvil es un disolvente no polar como el hexano (fase normal)
o bien algún disolvente polar (cromatografía de fase reversa).
 Fase estacionaria es la sustancia que está fija en una posición durante la cromatografía.
Un ejemplo es la capa de gel de sílice en la cromatografía en capa fina.
 Cromatografía analítica se emplea para determinar la existencia y posiblemente
también la concentración de un analito en una muestra.
 Fase enlazada es una fase estacionaria que se une de forma covalente a las partículas de
soporte o a las paredes internas de la columna.
 Cromatograma es el resultado gráfico de la cromatografía. En el caso de separación
óptima, los diferentes picos o manchas del cromatograma se corresponden a los
componentes de la mezcla separada.
o En el eje X se representa el tiempo de retención, y en el eje Y una señal (obtenida,
por ejemplo, a partir de un espectrofotómetro, un espectrómetro de masas o
cualquier otro de los diversos detectores) correspondiente a la respuesta creada
por los diferentes analitos existentes en la muestra. En el caso de un sistema
óptimo, la señal es proporcional a la concentración del analito específico
separado.

 Cromatógrafo es el equipo que permite una separación sofisticada. Por ejemplo, un

cromatógrafo de gases o un cromatógrafo de líquidos.
  Cromatografía es el método físico de separación en el cual los componentes que se van
a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales es estacionaria (fase
estacionaria) mientras la otra (la fase móvil) se mueve en una dirección definida.
 Eluyente es la fase móvil que atraviesa la columna.
 Serie eluotrópica es una lista de disolventes clasificados según su poder de dilución.
 Fase inmovilizada es una fase estacionaria que está inmovilizada sobre partículas de
soporte, o en la pared interior del tubo contenedor o columna.
 Cromatografía preparativa se usa para purificar suficiente cantidad de sustancia para
un uso posterior, más que para análisis.
 Tiempo de retención es el tiempo característico que tarda un analito particular en pasar a
través del sistema (desde la columna de entrada hasta el detector) bajo las condiciones
fijadas. Véase también: Índice de retención de Kovats
 Muestra es la materia que va a ser analizada en la cromatografía. Puede consistir en un
simple componente o una mezcla de varios. Cuando la mezcla es tratada en el curso del
análisis, la fase o fases que contienen los analitos de interés es llamada
igualmente muestra mientras el resto de sustancias cuya separación no resulta de interés
es llamada residuo.
 Soluto es cada uno de los componentes de la muestra que va a ser separado.
 Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra, y especialmente la fase móvil
líquida en cromatografía de líquidos.
 Capacidad de carga Es la cantidad máxima de muestra que puede ser separada en una
sola carga.
 Capacidad de fraccionamiento Es el número máximo de componentes que pueden ser
separados en una sola operación.
 Selectividad Es la capacidad de poder discriminar y distinguir entre dos componentes.

Tipos de cromatografía

Tipos Fase móvil Fase estacionaria

 Cromatografía en
Líquido Papel de celulosa.
papel

Cromatografía en
Líquido Gel de sílice o alúmina.
capa fina

Columnas capilares de sílice fundida, con

Cromatografía de recubrimientos internos de varios tipos de siloxanos
Gas
gases enlazados, columnas empaquetadas con tierras
diatomeas hechas de tubos de vidrio o metal.

Cromatografía
Líquido Relleno de siloxano de octilo o siloxano de
líquida
(polar) octadecilo.
en fase reversa

Cromatografía Líquido
Relleno de sílice, alúmina o un soporte al que se unen
líquida (menos
químicamente grupos polares (ciano, amino, etc).
en fase normal polar)

Cromatografía
Líquido
líquida Resinas de intercambio iónico.
(polar)
de intercambio iónico

Cromatografía
Relleno de pequeñas partículas de sílice o polímeros
líquida Líquido
con red de poros uniforme.
de exclusión

Cromatografía
líquida Líquido Partículas finamente divididas de sílice o de alúmina.
de adsorción

Columnas abiertas de sílice fundida con

Cromatografía de
Líquido recubrimientos internos de varios tipos de siloxanos
fluidos supercríticos
enlazados y de enlaces cruzados.

FILTRACIÓN
Se trata de una operación que permite separar mezclas heterogéneas de un sólido insoluble en un
líquido. Se hace pasar la mezcla a través de un papel filtro, el sólido se quedará en la superficie
del papel y el otro componente pasará. Es posible separar sólidos de partículas sumamente
pequeñas. Utilizando papeles con el tamaño de los poros adecuados. Es uno de los métodos más
simples de separación física, además de ser sencillo y barato. Seguramente lo has usado, al colar
en la cocina algún elemento.

Según la fuerza impulsora que ayuda a que el líquido pase a través del filtro, la filtración puede
clasificarse en:

1. Filtración por gravedad: la única fuerza impulsora para que el líquido atraviese el filtro
es la gravedad.  Es el método más sencillo y tradicional. Separar un sólido de un líquido
cuando lo que se quiere recuperar es el líquido. Ofrece la máxima superficie de filtración
de manera que ésta es más rápida.

2. Filtración al vacío:  la fuerza impulsora para que el líquido atraviese el filtro es la que
ejerce la presión atmosférica cuando aplicamos el vacío al sistema. Es el método más
rápido y a veces permite la filtración de aquellas suspensiones en las que la fuerza de
gravedad no es suficiente para el proceso.

Separar un sólido de un líquido, cuando lo que se quiere recuperar es el sólido. Ofrece una
menor superficie de filtración para recoger mejor el sólido. El hecho de aplicar la succión
con vacío permite acelerar la velocidad de filtración.

Un ejemplo de aplicación de este proceso es la separación del agente desecante de una

disolución orgánica. En este caso, es necesario tener cuidado de que el sistema de vacío no
succione parte del líquido filtrado o facilite la evaporación del disolvente durante el
proceso.
 DESTILACIÓN

Consiste en el uso consecutivo y controlado de otros dos procesos físicos: la

vaporización (o evaporación) y la condensación, usándolas de manera selectiva para separar los
ingredientes de una mezcla por lo general de tipo homogéneo, es decir, en la que no pueden
distinguirse a simple vista sus elementos.

Las mezclas susceptibles a destilación pueden contener dos líquidos, un sólido en un líquido

o incluso gases licuados, puesto que este método aprovecha el punto de ebullición de las
sustancias, una de las características inherentes a la materia.

El punto de ebullición es, entonces, la temperatura precisa a la cual un líquido pasa a

convertirse en gas (es decir, se evapora).De este modo, para que la destilación se lleve a
cabo correctamente, deberemos hervir la mezcla hasta alcanzar el punto de ebullición de una de
las sustancias integrantes, que entonces pasará a ser vapor y podrá ser conducido hasta un
recipiente enfriado, en el cual condensarse y recuperar su liquidez.

La otra sustancia integrante, en cambio, permanecerá en el recipiente sin alteraciones; pero en

ambos casos tendremos sustancias puras, libres de la mezcla inicial.

La destilación puede ocurrir de distintas formas:

 Destilación simple. La más elemental, consiste en hervir la mezcla hasta separar los

elementos. No garantiza, sin embargo, la pureza total de la sustancia destilada.
 Destilación fraccionada. Se realiza mediante una columna de
fraccionamiento: diferentes placas en las cuales se produce sucesivamente la evaporación
y la condensación, garantizando una mayor pureza en el resultado.
 Destilación al vacío. Usando la presión del vacío generado, se cataliza el
proceso para reducir el punto de ebullición de los ingredientes a la mitad.
 Destilación azeotrópica. La necesaria para romper un azeótropo, o sea, una
mezcla cuyas sustancias se comportan como una sola, incluso compartiendo el punto de
ebullición. Incluye la presencia de agentes separadores, todo de acuerdo a la Ley
de Raoult.
 Destilación por arrastre de vapor. Los componentes volátiles y no volátiles de una
mezcla se separan mediante la inyección directa de vapor de agua.
 Destilación seca. Consiste en calentar materiales sólidos sin presencia de solventes
líquidos, obtener gases y luego condensarlos en otro recipiente.
 Destilación mejorada. Llamada también destilación alterna o reactiva, se adaptan a los
casos específicos de mezclas difíciles de separar o de un mismo punto de ebullición.
La aplicación de la destilación se puede dividir aproximadamente en cuatro grupos:

 Escala de laboratorio,
 Destilación industrial,
 Destilación de hierbas para perfumería y medicamentos (destilado de hierbas)
 Procesamiento de alimentos.
Los dos últimos son distintivamente diferentes de los dos anteriores en que la destilación no se
usa como un verdadero método de purificación, sino más bien para transferir todos
los volátiles de los materiales de origen al destilado en el procesamiento de bebidas y hierbas.
EVAPORACIÓN
Es un método físico que permite separar un sólido de un líquido en una mezcla homogénea. Se
basa en que el punto de fusión del sólido es mayor al punto de ebullición del líquido. Se utiliza
cuando no hay interés en el líquido que se evapora, ya que este no se recupera, pasa a formar
parte del medio. Esta operación se emplea para separar la sal del agua de mar en las salinas. El
agua de mar almacenada en tanques abiertos se evapora poco a poco por los rayos de sol.
Tipos de evaporación

1. Evaporación por aumento de la temperatura

Para evaporar un líquido o concentrar una disolución se utilizan baños de agua u otras fuentes de
calor. Cuando se trabaja con disolventes inflamables no se deben someter a la llama directa. Si
los vapores del disolvente son perjudiciales para la salud, se debe trabajar en vitrina extractora y
tomar las precauciones adecuadas. Esta técnica también se puede utilizar para el secado de un
sólido húmedo. Secado de sólidos

2. Evaporación por disminución de la presión

Este procedimiento se utiliza para el secado de una substancia a temperatura ambiente cuando la
sustancia es inestable a temperaturas más elevadas. Se introduce la muestra en un desecador de
vacío, en presencia de una substancia o agente desecante.
3. Evaporación por combinación de ambos efectos

Una operación frecuente en un laboratorio de química es la eliminación del disolvente orgánico

volátil de una solución de un compuesto orgánico, como por ejemplo sucede al finalizar un
proceso de extracción. La eliminación rápida de grandes cantidades de un disolvente orgánico se
efectúa utilizando el rotoevaporador.

La evaporación tiene lugar a presión reducida, producida normalmente por una bomba de vacío y
a temperaturas moderadas.

La eliminación de vapores por calentamiento y aplicación simultánea de vacío se puede realizar

también en estufas de vacío, que disponen de un regulador de temperatura, así como de una
conexión para el vacío. Estas estufas se utilizan también para el secado de sólidos.

Factores que influyen en la tasa de evaporación

 Concentración de la sustancia que se evapora en el aire: La alta concentración que

pueda poseer el aire, permitirá la evaporación del mismo de una manera más despacio.

 Concentración de otras sustancias en el aire: Cuando el aire se encuentra saturado por

otras sustancias, puede tener una calidad inferior para la sustancia que se evapora.

 Tasa de flujo de aire: El movimiento del aire fresco sobre la sustancia de manera

constante, ocasiona menos probabilidades a tal sustancia de subir con el tiempo,
potenciando así una evaporación más rápida. Esto resulta en una capa divisoria en la
superficie de evaporación que disminuye con la velocidad de flujo, disminuyendo
la distancia de difusión en la capa estancada.

 Concentración de otras sustancias en el líquido: Si el líquido contiene otras sustancias,

tendrá una capacidad inferior para la evaporación.

 Temperatura de la sustancia: Cuando la sustancia está más caliente,

la evaporación será más rápida

 Fuerzas intermoleculares: Entre mayores son las fuerzas que mantienen

las moléculas juntas en el líquido, más energía será necesaria para evaporarlas.

 Área superficial: La sustancia que posee un área superficial más grande

se evaporará más rápido, debido a la existencia de más moléculas superficiales que poseen
la capacidad de escaparse.
 Calentamiento: Cuánto más grueso es el recipiente donde se está calentando, más se
reduce la evaporación del agua debido a que se dedica menos calor a la
propia evaporación.

Podemos argumentar entones mediante varias páginas leídas y videos vistos que, con respecto al
método físico de separación, en este caso la filtración, tiene como objetivo la separación de
partículas sólidas de un líquido utilizando un material poroso llamado papel de filtro. Esta
técnica consiste en verter la mezcla sólido-líquido que se quiere tratar sobre un filtro que permita
el paso del líquido pero que retenga las partículas sólidas.
En el video de cienciabit se evidenció que todas las sustancias fueron filtradas excepto el
hidróxido de cobre que permaneció en el papel filtro.
De ahí todas las filtraciones salieron correctamente ya el papel filtro presenta poros para separar
las partículas más grandes, pero al mezclar los solutos con el agua, estas partículas llegan a
desaparecer siendo más pequeñas que los poros del filtro y atravesándolo, volviendo así que la
sustancia se vuelva más pura.

Tal como también se pudo demostrar que en la cromatografía que es un método que sirve para
separar, identificar y determinar en qué cantidad se encuentran los componentes de una mezcla
homogénea, los solutos se encuentran en proporciones muy pequeñas.
Debido a que la mezcla de sube por el papel filtro llevando a cabo la cromatografía separando los
colores primos de la mezcla; en este caso la mezcla a base de agua y tintas colorantes, al llevar a
cabo la cromatografía con el papel filtro se pudieron observar una gama de colores distintos y en
posición diferente.
RESULTADOS
Video de cromatografía en capa fina:
1. En una cubeta que disponga de tapa hermética se introduce el insolvente, hasta una altura
de 0,5 un centímetro.
2. Se introduce a continuación una tira de papel de filtro de forma que toque la fase móvil y
se apoye en la pared posterior de la cubeta, se deja que el disolvente suba por el papel de
filtro por capilaridad.
3. Con un lápiz se hacen pequeñas marcas alineadas sobre la placa cromatografica para
cada una de las muestras al analizar.
4. Cada marca debe hacerse aproximadamente a 0,5 cm de la parte inferior de la placa de
forma que queden siempre por encima del nivel de la fase móvil.
5. Con una micropipeta o tubo capilar se deposita la disolución de cada muestra sobre las
marcas correspondientes.
6. La placa de cromatografía se sujeta por los márgenes con unas pinzas y se introduce en la
cubeta, procurando tener abierta la cubeta el menor tiempo posible.
7. Se tapa la cubeta y se deja en reposo.
8. A medida que el eluyente sube por la placa los diversos componentes se separan más o
menos dependiendo de su polaridad, del tipo de soporte sólido y del eluyente.
9. Se deja avanzar la elución hasta que el disolvente esté a punto de llegar a la parte superior
de la placa.
10. Una vez desarrollada, la placa se extrae con cuidado de la cubeta, se marca con una línea
hecha a lápiz la altura a la que ha llegado el frente del disolvente y se seca la placa.
11. Los componentes separados se pueden visualizar directamente si son coloreados; si las
manchas son visibles se dibujarán suavemente con un lápiz sobre la misma placa.

También se puede exponer la placa a la luz ultra violeta para observar mejor las manchas o
revelar las manchas que no son visibles.

Video de filtración: se muestra la purificación mediante disolución y filtrado por gravedad con
los siguientes pasos:
1. Se introduce la muestra de hidróxido de cobre en un vaso precipitado y se añade agua
destilada.

2. Disolviendo el precipitado en agua destilada, dado que el hidróxido de cobre es muy poco
soluble, precipita y el resto de sustancias quedan disueltas. Ahora sólo tenemos que filtrar
 la mezcla y obtendremos un hidróxido de cobre (CuOH)2 mucho más puro, esta queda
con un color azul.

3. En el soporte universal, le colocamos el aro y sobre este se colocará el embudo.

4. Encima del embudo le acomodaremos el papel de filtro.

5. Se coloca un vaso vacío debajo del embudo, luego vertimos el contenido donde se
encuentra la muestra en el embudo.

6. Al final se obtiene que el vaso vacío se llena y queda limpia.

7. En el papel de filtro encontraremos la muestra de hidróxido de cobre.

8. Sacamos este papel del embudo para terminarlo de secar y obtener una muestra más pura
de hidróxido de cobre.
Si se quisiera purificar más esta muestra tocaría repetir el mismo proceso las veces que
quisiéramos.

Video de destilación: se describe la técnica de destilación sencilla, aplicada en este caso a una
mezcla agua-acetona.
1. El agua de acetona se pone en el matraz de destilación que debe llenarse aproximadamente
hasta la mitad de su capacidad.

(Para evitar que el líquido hierva a saltos antes de iniciar la destilación se añade al matraz
1 o 2 trozos de porcelana porosa sus pequeños poros constituyen un lugar adecuado para
la formación de núcleos de burbujas, hirviendo así el líquido suavemente)

2. Se apoya el matraz en la manta eléctrica y se sujeta al soporte con una pinza, se adaptan al
matraz la cabeza de destilación y el termómetro.

(El extremo superior del bulbo termométrico debe quedarse justamente a la altura de la
horizontal que pasa por la parte inferior de la tabuladora lateral de la cabeza de
destilación de tal forma que el bulbo se ha bañado por el vapor que asciende justo antes
de que se condense en el refrigerante).
3. El refrigerante se sujeta a un soporte metálico con una pinza, se une el refrigerante a la
cabeza de destilación y se adaptan dos gomas de refrigerante que se conectan al sistema de
circulación de agua de forma que esta circule en contra corriente.

4. Finalmente, a la salida del refrigerante se conecta la alargadera y el matraz colector en el

que se recoge el destilado.

5. Todas las piezas del aparato de destilación se sujetan unas a otras mediante clips y se
comienza a calentar el matraz con la manta calefactora.

6. Se etiqueta y se enumera tres matraces Erlenmeyer para recoger las fracciones con los
siguientes puntos de ebullición.
1) 56-65°C
2) 65-78°C
3) 78-95°C
4) La fracción 4, es el residuo que queda en el matraz de destilación.

7. Cuando se alcanza la temperatura de ebullición del líquido comienza la producción

apreciable de vapor condensándose parte del mismo en el termómetro y en las partes del
matraz.

La mayor parte del vapor pasa a través de la tabuladora lateral de la cabeza de destilación
al refrigerante donde se condensa, debido a la corriente de agua fría que asciende por la
camisa de este.

El destilado vapor condensado cae al matraz colector a través del refrigerante durante el
proceso de destilación debe calentarse moderadamente de forma que el destilado se
recoja
de una manera continua.

8. Se cambian los matraces colectores en los intervalos de temperatura indicadas.

9. A los 95°C interrumpa la destilación, dejando que el vapor se condense en el matraz de

destilación.

10. Mida en una probeta los volúmenes de destilado obtenido en cada intervalo, así como el
residuo del matraz, la fracción 4.
 11. Se anotan los volúmenes obtenidos y se comparan con los obtenidos en las destilaciones
fraccionadas.
Video de evaporización:
1. Se mezcla la sal con el agua en un vaso precipitado para así obtener una mezcla
homogénea.

2. En el soporte universal acomodamos en el aro sobre este el mortero y debajo de este el

alcohol solido ya encendido.

3. Se vierte la mezcla en el mortero para después de unos minutos ver los resultados
obtenidos.

4. Se obtiene que el líquido pasó a ser vapor y el sólido o sea la sal queda en el mortero.

CONCLUSIONES
 La cromatografía es una de los principales métodos analíticos, permite la separación y
cuantificación de sustancias muy similar en estructura y propiedades químicas.
 La evaporación permite separar un sólido de un líquido en una mezcla homogénea.
  Los diversos métodos de separación de mezclas nos han hecho de mucha utilidad ya que
estos tipos de separación los practicamos día con día y al conocerlos nos hacen realizar
estas actividades diarias mucho más fáciles de lo normal.
 La filtración permite separar mezclas heterogéneas de un sólido insoluble en un líquido.

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