CBB 101 – Laboratorio de Biología General – Práctica #2: Uso del Microscopio

Nombre: Joseimy Eliezer Mateo Alcántara ID: 1097771

Introducción
El microscopio es un instrumento utilizado para visualizar objetos que son
demasiado pequeños para ser observados a simple vista. El holandés Antonie
van Leeuwenhoek (1632-1723) fue el primer a observar células vivas al
microscopio. Para esto, utilizó un microscopio de un solo lente (Figura 2.1), el
que es conocido hoy en día como microscopio simple.

Existen diferentes tipos de microscopios, especializados para los diferentes

tipos de muestras o especímenes (vivos, muertos, transparentes,
fluorescentes, 2D, 3D, organismos enteros, tejidos, células, etc.): Figura 2.1. Microscopio
simple utilizado por A. van
Leeuwenhoek en 1674.
a) Microscopio óptico: es un microscopio compuesto que utiliza la luz
para iluminar el objeto. La luz penetra en el microscopio por el lente objetivo,
que desempeña la función de una lupa (es decir, produce una imagen muy ampliada del objeto). Ésta
imagen se modifica mediante otro sistema de lentes, en el ocular, produciendo una imagen virtual,
invertida y ampliada del objeto. Existen distintos tipos de microscopios ópticos especializados, como
son los siguientes:

 Microscopio de campo claro: es el que se utiliza en los laboratorios educativos. Este microscopio
emplea la luz visible (400-700nm) para observar un espécimen. La muestra debe ser lo bastante fina
como para que los haces de luz puedan atravesarla. Con este microscopio se pueden observar
especímenes en 2D exclusivamente. Se pueden utilizar métodos de tinción con el fin de aumentar
los detalles en la imagen. En general con este microscopio se pueden alcanzar los 1,000 aumentos,
pudiéndose llegar con ciertas modificaciones a 2,000 y 3,000 aumentos.

 Microscopio de fluorescencia: emplea la luz ultravioleta para iluminar el objeto. La importancia del
mismo radica en la posibilidad de distinguir diferentes estructuras en un espécimen (cada estructura
apreciándose de un color distinto).

 Microscopio confocal: toma muchas imágenes en capas de un espécimen (el corte histológico debe
ser muy delgado), para así recrear una imagen tridimensional al final.
 Estereoscopio (“lupa”): cada lente ocular posee una posición angular distinta, produciendo imágenes
diferentes para cada ojo, dando una percepción
tridimensional del espécimen. Además, el rayo de luz, en
vez de ser proyectado a través del espécimen, incide sobre
la superficie del espécimen y es reflejado, facilitando el
estudio de especímenes gruesos.

b) Microscopio electrónico: utiliza electrones en vez de luz y

Figura 2.2 Imágenes de una bacteria
aumenta los objetos hasta 250,000 veces. Las imágenes que (izquierda) y un virus (derecha) con el
microscopio electrónico de transmisión.
se producen son en blanco y negro (las imágenes que se
observan en libros o el Internet con colores poseen colores falsos). Existen distintos tipos de
microscopios electrónicos especializados, como son los siguientes:

 Microscopio electrónico de transmisión (MET): trabaja “iluminando” un

ejemplar en la platina con un haz de electrones, los cuales atraviesan
la muestra (debidamente deshidratada), enfocando y aumentando la
“imagen” con lentes magnéticas. Esta imagen
electrónica, que es invisible, se transforma en una
imagen digital, visible en una pantalla de un
ordenador.

 Microscopio electrónico de barrido (MEB): dirige

un haz de electrones sobre una superficie de una
muestra recubierta con una capa delgada de oro,
produciendo una imagen de la superficie del objeto.
Figura 2.3 Imágenes tomadas con el
microscopio electrónico de barrido.

Capítulos del Libro de Biología

 Starr et al. (2009) Biología: La unidad y la diversidad de la vida. 12ª edición. Capítulo 4. Págs 58-
59: 4.3: ¿Cómo observamos las células?
 Mader, S. S.; Windelspecht. M. (2019). Biología. (13. Edición). México: McGraw Hill. Capítulo 4.
 Solomon, E. P; Berg, L. R.; Martin, D. W. (2013). Biología. (9. Edición). Cengage Learning. Capítulo
4. Págs. 77-81: 4.2 Métodos para estudiar las células.
Para la casa: investigue y estudie
1. ¿Qué es el poder de resolución? ¿Cuál es el poder de resolución del microscopio óptico de campo
claro y del microscopio electrónico?
2. ¿Qué es el poder de aumento o magnificación? ¿Cuál es el poder de aumento del microscopio
óptico de campo claro y del microscopio electrónico?
3. ¿Qué es la notación científica? ¿Qué son micrómetro, nanómetro y Angstrom? Coloque las
equivalencias.
4. ¿Cuáles son las características de la imagen al microscopio?
5. ¿Cuál es la utilidad del microscopio en el área de la Biología?
6. ¿Cuál de las siguientes estructuras son visibles al microscopio óptico de campo claro? Virus,
bacteria, eritrocito (glóbulo rojo) humano, proteína, cloroplasto.

Práctica

Parte 1: Las partes del microscopio óptico de campo claro

1. Ver el vídeo sobre las partes del microscopio óptico de campo claro:
https://www.youtube.com/watch?v=ITNRdwbLil0
2. Identificar las partes del microscopio en la figura abajo;
3. Indicar la función de cada una de las partes del microscopio.

Fuente de luz Tornillo micrométrico Pie o base

Lente ocular Sujetador o pinza Platina
Diafragma Tornillo macrométrico Revolver
Lente
Ajuste de altura de platina Brazo
objetivo
Tubo Condensador

Figura 2.4. Microscopio

óptico de campo claro

Número Parte del microscopio Función

1 Lente ocular Este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa

2 Brazo
3 Platina
4 Tornillo macrométrico
Tornillo micrométrico
5 Ajuste de altura de platina
6 Pie o base
7 Fuente de luz
8 Condensador
9 Sujetador o pinza
10
Lente objetivo
11 Revólver
12 Tubo
de ampliación de imagen.
Es la pieza intermedia del microscopio que conecta todas sus
partes.
Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere
observar.
Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la muestra
respecto el objetivo de forma rápida.
Se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la
muestra.
Nos permite regular la altura de la platina
Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del
microscopio y sobre la cual se montan el resto de elementos
Este es un elemento esencial que genera un haz de luz
dirigido hacia la muestra. 
El condensador es el elemento encargado de concentrar los
rayos de luz provenientes del foco a la muestra. 
Tiene la función de mantener fija la preparación una vez esta
se ha colocado sobre la platina.
Es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la
muestra y que producen la primera etapa de aumento. 
El revólver es una pieza giratoria donde se montan los
objetivos. 
El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio
que conecta el ocular con los objetivos.

4. ¿Cómo saber cuántas veces está aumentada la imagen observada al microscopio?

Debemos multiplicar el número aumento del lente ocular por el número del aumento del lente objetivo.

5. Investigue: ¿Por qué se agrega una gota de agua a la muestra antes de observarla al microscopio?
Es importante mantener la muestra hidratada para evitar que se seque, especialmente si la
observación durará mucho.
Además, evita la dispersión de la luz y que no sea captada por el lente objetivo.
Parte 2. Tipos de microscopios

Compare las ventajas y desventajas de diferentes tipos de microscopios.

Figura 2.5. Microscopio

estereoscopio
Microscopio Ventajas Desventajas
Microscopio Óptico de Campo - Permite observar organismos - La imagen solo se muestra en

vivos.
- Utiliza lentes para ampliar la
imagen del objeto observado.
- Nos brinda una mejor
Claro
percepción, ya que se percibe
con nitidez algunos detalles.
- El microscopio óptico puede ser
monocular o binocular.
- Nos presentan los objetos en 3
Estereoscopio dimensiones.
- Gran calidad en la imagen.
- Se observan muestras gruesas.
- Más aumento, y con alta
resolución.
MET: estructuras internas.
Microscopio Electrónico MEB: superficie externa (imagen
3D)
dos dimensiones.
- El aumento obtenido con estos
microscopios es reducido,
debido a la longitud de onda de
la luz visible que impone
limitaciones.
- No se pueden realizar
investigaciones muy profundas
debido a la baja resolución de
los lentes.
- Bajo poder de resolución.
- Bajo poder de aumento.
- Incapacidad para analizar
especímenes vivos, ya que la
muestra requiere una
preparación con anticipación.
- Imágenes en blanco y negro.
- Son muy costosos.
- Solo puede ser usado por
especialistas.

Parte 3. Epidermis interna de la cebolla

1. Ver el video de observación de epidermis de cebolla al microscopio óptico de campo claro:

https://www.youtube.com/watch?v=CIitP9SOreo
2. La figura abajo demuestra el observado al microscopio óptico de campo claro (lente objetiva: 40x)
tras teñir la muestra de la epidermis de cebolla con el colorante verde de metilo. Indique en la figura
lo que se observa.

Pared celular

Citoplasma
Núcleo