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1. Conceptos.
Las enzimas hacen referencia a catalizadores biológicos, con naturaleza proteica, altamente
específicos. Debido a su origen biológico son responsables de algunas de sus ventajas y
limitaciones con respecto a los catalizadores químicos. Algunas características que han
limitado su aplicación en diversos procesos han sido las condiciones de trabajo bajo las
cuales son estables y la solubilidad en agua, aunque, con los métodos de inmovilización
este tipo de problemas se han solucionado en gran medida1.
La inmovilización de enzimas se define como el confinamiento de la enzima en un soporte,
limitando su movilidad, pero conservando su poder catalítico. Por otra parte, la
inmovilización aumenta la estabilidad de la enzima, haciendo posible su reutilización en su
forma insoluble. Sin embargo, en el proceso de inmovilización se pueden presentar
inconvenientes en la alteración de la conformación de la enzima, pérdida de la actividad,
heterogeneidad en el sistema de soporte y en el incremento en el costo de la enzima
inmovilizada2.
Entre las ventajas del empleo de enzimas inmovilizadas se encuentra: el aumento de la
estabilidad de la enzima, la posibilidad de reutilización del derivado, ya que se disminuyen
costos en el proceso y finalmente, la posibilidad de diseño de un reactor enzimático de fácil
manejo, permitiendo el empleo de cargas elevadas de enzima, obteniendo productos de
mayor pureza. Por otro lado, también se encuentran inconvenientes en el proceso de
inmovilización, entre ellas la alteración de conformación de la enzima respecto a su estado
nativo, su heterogeneidad dando lugar a distintas fracciones de proteínas inmovilizadas con
un número diferente de uniones al soporte, se puede presentar una pérdida de actividad de
la enzima durante la movilización y los biocatalizadores suelen ser más caros que las
enzimas nativas.
3
Lupo, P., González, A., & Maestro, G. (2012). Microencapsulation in alginate for food. Technologies and
applications. Revista Venezolana de Ciencia y Tecnología de Alimentos, 3(1), 130-151.
polimerización, como también, la comprobación de la naturaleza química del proceso no
altere los reactivos de la proteína.
Otro método de inmovilización de enzimas es por unión química, este tipo de método es
uno de lo más utilizados y de los que se disponen mayor información. Este método procura
que la inmovilización incremente la afinidad por el sustrato, disminuya la inhibición,
amplié el intervalo de pH óptimo y reduzca la contaminación microbiana. En este orden de
ideas, se hace uso de varios materiales como soportes para la inmovilización de numerosas
enzimas. En la etapa de absorción, la enzima se adhiere a un soporte a través de
interacciones iónicas, fuerzas de Van der Waals y por puentes de hidrógeno. Se encuentran
factores que influyen en la adsorción de enzimas, el pH del medio, la fuerza iónica, el
diámetro del poro y la presencia de iones que actúan como cofactores de la enzima, ya que
pueden incrementar la carga enzimática del derivado.
La inmovilización de enzimas altera en primer lugar su estabilidad y seguidamente ya que
son un sistema heterogéneo, donde todos los componentes que intervienen en el proceso
catalítico (pH, sustratos, productos, inhibidores, cofactores, activadores, etc.); como
consecuencia, la actividad enzimática se ve afectada por efectos de tipo difusional, estérico
y del microentorno. A partir de una inmovilización, la actividad enzimática puede disminuir
e incluso perderse por diversas razones, ya sea por la unión al soporte impidiendo el paso
del sustrato al centro activo, por la reacción de aminoácidos que forman parte del centro
activo y por las condiciones experimentales del proceso causando la desnaturalización o
desactivación de la enzima. Aunque se han desarrollado y aplicado diferentes técnicas de
inmovilización a numerosas enzimas, no existe un método universal válido para todas las
enzimas, la elección de cada técnica debe tener en cuenta las condiciones de la reacción
biocatalizadora, el tipo de reactor que se vaya a utilizar, el tipo de sustrato que tenga que
ser procesado y otros factores4 .
4
Mellor, R. B., Ronnenberg, J., Campbell, W. H., & Diekmann, S. (1992). Reduction of nitrate and nitrite in
water by immobilized enzymes. Nature, 355(6362), 717-719.