METODOS DE EXTRACION DE ADN

UNIVERSIDAD NACIONAL
FEDERICO VILLARREAL

Facultad de Ciencias Naturales y Matemática

Escuela Profesional de Química
Bioquímica
“EXTRACCIÓN DE ADN”
Profesor:
-Carlos Santacruz
Alumna: Migna Baltazar Romero
METODOS DE EXTRACION DE ADN
El ADN lleva la información genética ,está formada por nucleótidos están presentan
propiedades son poco solubles en agua , bases débiles , absorben luz uva 250-280 nm, lo que
permite su identificación y cálculo de su concentración : en el ARN 258nm , 40 ug/ml y en el
ADN 260 nm y 50 ug/ml .

Las muestras de extracción de ADN pueden hacerse por sangre , sangre en papel , saliva ,
hisopos , cabello , hueso, dientes , tejido , semen , manchas , las muestras que se extraen el
ADN son muy estable y solo requiere que las muestras estén congeladas .

Estos son los siguientes métodos de extracción:

 Fenol –cloroformo- alcohol: este método se usa para la separación de ácidos nucleicos
y proteínas. este método permite obtener un alto rendimiento pero tienes
desventajas se contaminan las muestras , los reactivos son tóxicos consume mucho
más tiempo(1)
 Chelex-100 : es una técnica utiliza una resina quelante ha sido utilizada para la
extracción de ADN de diferentes tejidos como sangre , bacterias y cultivo d de células
ventaja que es rápida , económica per tiene la desventaja solo se usa para ADN de
cadena sencilla - desnaturalizado(2)
 Papel FTA: se utiliza para muestras de sangre o saliva esto se usa la medicina
forense , se añade directamente el papel lavado , preserva y protege ácidos
nucleicos(3)
 Gradiente de Sales: se utiliza 1ml del amortiguador TKM10 mM Tris-HCl pH 8.0, 10
mM KCl, 10 mM MgCl2, 2 Mm EDTA , 1ml de sangre y se centrifuga este método es
mas rápido , menos toxico , se obtine 8.5 ng/ul de ADN
 Gradientes de Sacarosa: es menos toxico se obtuvo 393.20 ng/ul estos métodos
últimos tienen mejores resultados de pureza y cantidad mostro una eficiencia del
100% (1)
 Método del CTAB; Este es un procedimiento básico para extraer ADN de vegetales,
donde un detergente aniónico puede romper la pared celular y así se produce la lisis
de las células. El uso de detergentes aniónicos no solo se restringe a la extracción de
ADN vegetal, puede ser usado para ADN genómico de bacterias y otros tipos de
organismos. Un ejemplo de este método, quizás el más conocido, es el uso de CTAB
(bromuro de cetil trimetil amonio) como detergente para lograr la lisis. El CTAB
además, en presencia de EDTA como agente quelatante y TRIS-HCl como tampón,
forma complejos insolubles con el ADN. Luego se extraen los residuos orgánicos con
cloroformo, para separar posteriormente el ADN por precipitación con etanol. Si se
quiere evitar el uso de disolventes orgánicos se puede llevar a cabo el método del
CTAB separando directamente los complejos insolubles formados con el ADN del
sobrenadante donde han quedado disueltos el resto de componentes celulares. Estos
complejos se resuspenden en disolución salina y se adiciona posteriormente alcohol y
RNAsa, logrando que precipite el ADN con un grado de pureza aceptable para muchas
aplicaciones.(4)

CONCLUCION
Los diversos métodos descritos el más eficiente y menos contamínate seria por
método por sales y sacarosa es económica rápida y eficiente a comparación de los
otros métodos
METODOS DE EXTRACION DE ADN

REFERENCIAS
1. Ríos-sánchez E, Calleros E, González-zamora A, Rubio J, Martínez OC, Martínez A, et al.
Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción de DNA y su eficiencia de
genotipificación en población mexicana. 2016;26(4):56-65.
2. Aci I. Extracción de adn con resina chelex en el análisis de la amplificación oncogénica
en carcinomas de cabeza y cuello. 2004;139-44.
3. Sandoval-arias SM. Extracción de ADN humano mediante dos métodos para la
tipificación forense a partir de muestras fecales en papel FTA Human DNA Extraction by
Two Extraction Methods for Forensic Typification from Human Feces on FTA Paper.
2014;27(506):14-21.
4. Guadalupe Sánchez-Coello N, Luna-Rodríguez M, Mario Vázquez-Torres ;, Lázaro ;,
Sánchez-Velásquez R, Santana-Buzzy N, et al. OPTIMIZATION OF DNA ISOLATION AND
ISSR-PCR SYSTEM OF Ceratozamia mexicana Brongn. (Zamiaceae). 2012;18(1):123-33.