UNIVERSIDAD

“PEDRO RUIZ GALLO”

NACIONAL

FACULTAD DE
CIENCIAS
BIOLÓGICAS
Informe de
práctica
CURSO : Biología Molecular

TEMA : “Extracción de ADN casero”

DOCENTE : Mblgo. MSc. Jhon García López

ALUMNA : Paz Campos, Odaly Jazmín

CÓDIGO : 171559 C

CICLO : 2020 - I

LAMBAYEQUE

2020
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 UNIVERSIDAD NACIONAL
PEDRO RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

EXTRACCIÓN DE ADN
CASERO

ESTUDIANTE:
ODALY JAZMÍN PAZ CAMPOS

LAMBAYEQUE

2020
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 INTRODUCCIÓN

Sabemos que todo ser vivo está formado por la ya conocida molécula de DNA. El

ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el material genético que se encuentra en las células

de todos los organismos. Compuesto por nucleótidos (Adenina, Timina, Guanina, Citosina).

unidos entre sí. Al ordenar y secuenciar los nucleótidos formaremos un polímero de DNA

de doble cadena, el cual posteriormente será traducido a ARN mensajero (ARNm), este

ARN contiene la información necesaria para la síntesis de una o varias proteínas usando

ARNs como intermediarios, y estos son: los ARN de transferencia (ARNt) y ARN

ribosomales (ARNr). La mayor parte del DNA, en células eucariotas, se encuentra

localizada en el núcleo y a su vez rodeada por una bicapa lipídica. Sin embargo, la menor

parte de DNA también la encontramos en otras estructuras celulares, como en la

mitocondria en animales o cloroplastos en plantas.

Para el estudio de esta molécula se precisamos generalmente aislarla de la célula, y

para ello se necesitan instrumentos y materiales de laboratorio complejos. El fin de esta

experiencia es el acercamiento simple y sencillo a la técnica de extracción del DNA, la cual

se puede realizar desde el hogar, con materiales fáciles de conseguir, usados en la vida

cotidiana.

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 OBJETIVOS

1. Utilizar un protocolo de extracción de ADN casero.

2. Obtener ADN mediante la extracción casera.

MARCO TEÓRICO

MATERIALES

 Muestra vegetal: Plátano

 Agua destilada

 Sal de mesa

 Detergente liquido

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 Etanol 95% helado

 Mortero estéril

 Vaso de precipitación 100 ml y 250 ml

 Embudo

 Vaso de precipitación

 Probeta

 Pipeta

 Bagueta

 Papel filtro

PROCEDIMIENTO

 En un recipiente triturar la muestra de plátano y mezclar con 50 ml de agua

destilada hasta obtener una solución homogénea.

 En un vaso de precipitación mezclar 2 ml de lavavajilla 20%, con 50 ml de NaCl

2M, mezclar sin producir espuma.

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 Mezclar 1 y 2 por 6 – 10 minutos sin producir espuma.

 Centrifugar a 2000 rpm por 5-10 minutos o filtrar la muestra.

 Pasar el sobrenadante o el filtrado a un vaso de precipitación de 200 ml (70 ml

como mínimo aproximadamente)

 Con una pipeta añadir 50 ml de alcohol helado por las paredes del vaso, se formarán

dos capas, en la interfase está el ADN.

RESULTADOS

 Fácilmente se puede observar el DNA precipitado en la capa de alcohol con

apariencia de sustancia mucosa y filamentosa blanquecina. Al enrollar el DNA en

la punta varilla de vidro, previamente calentada ,y estirarla, observamos el tamaño

de la molécula.

CONCLUSIÓN

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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 CUESTIONARIO

1. Determina y fundamenta la función de:

a. La acción mecánica ejercida sobre cada una de las muestras.

Al triturar la muestra de plátano y formar un aspecto relativamente

homogéneo, vamos a romper las paredes celulares y separar las células,

obteniendo así la separación física de la muestra, lo que nos ayudará en la

liberación del material genético y una mejor observación del DNA.

b. La solución de NaCl 2M

El cloruro de sodio va ayudar en la separación de las proteínas que se

encuentran unidad al DNA, también va a impedir que las proteínas se

precipiten con el alcohol ya que las mantendrá disueltas en la capa acuosa,

junto con el DNA, los cationes sodio van a contrarrestar las cargas negativas

de los fosfatos de DNA.

c. La solución de lavavajilla 2%.

Al ser vertido el lavavajillas líquido, este al tener contacto con la

muestra, romperá la membrana celular y la envoltura nuclear, ya que los

lípidos de la membrana se descomponen por acción del detergente que

deshace las uniones que mantienen la membrana junta y de esta manera

permitir que el ADN salga al exterior.

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 d. El filtrado en cada una de las muestras.

El filtrado nos permitirá separar los restos de los tejidos del plátano y

de células que hemos triturado anteriormente, y así obtener el líquido

esencial, el que contiene el ADN, con mayor pureza.

e. La adición de alcohol helado.

Se utiliza el alcohol para el precipitado del DNA, el cual es soluble

en agua, pero al tener contacto con el alcohol frío, se va a desenrollar y caerá

hasta quedarse entre el alcohol y el agua del extracto. Se sabe que el DNA es

el único componente de la solución que no es soluble en el alcohol, y se

puede observar porque las cadenas se aglutinan entre sí al precipitar debido a

la acción de fuerzas físicas. El alcohol tiene menos densidad en comparación

al agua del extracto y por eso queda flotando sobre la capa del extracto

preparado.

2. Analice y responda la siguiente preposición; ¿Se puede cuantificar la cantidad

de material genético obtenido en esta experiencia? Fundamente las técnicas

que usted usaría.

3. Según los métodos que usted consideró en su respuesta anterior, ¿Cuál sería la

pureza de nuestro resultado? ¿Existe alguna manera de optimizar este

proceso?

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4. Detalle mediante un gráfico los siguientes experimentos:

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 a. Experimento de Griffith

CEPA S CEPA R
Bacterias Bacterias no
virulentas virulentas, no
encapsuladas encapsuladas
vivas. vivas.
inyecta inyecta

El ratón El ratón
muere vive

CEPA S
CEPA R muerta

Bacterias Bacterias
CEPA S virulentas virulentas
muertas por muertas por
calor, calor con
calor bacterias no
inyecta
virulentas
vivas. inyecta

El ratón El ratón
vive muere
Se extrae una
muestra
Bacterias
11 virulentas
encapsuladas
vivas.
 b. Expermiento de Avery, Mcleod y McCarty

Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty trataron de identificar el factor de

transformación (FT), que debía encontrarse en los neumococos S muertos por el calor.

LISADO
Neumococos S
CELULAR el polisacárido de la
muertos por
contiene superficie celular, las
calentamiento Extracto libre de
con detergente células que proteínas, el ARN y el
contenía el FT. ADN de los neumococos S

TRATAMIENTOS
ENZIMÁTICOS
Neumococos R vivos
+ fracción del lisado
modificada
enzimáticamente

TRATAMIENTO Resultado
SOBRE EL LISADO

El FT está presente en
Ninguno
el lisado

Se añadió la enzima El FT no era el

SIII,que degrada la polisacárido que
cápsula de estaba presente en el
polisacárido. lisado.
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 Se añadieron al lisado
anterior (con el El FT no era una
polisacárido proteína. Debía ser
degradado) las un ácido nucleico
enzimas proteolíticas (ARN o ADN)
tripsina y
quimiotripsina.

Se extrajeron los
ácidos nucleicos del
lisado anterior y se El FT no era el ARN
añadió la enzima
ARNasa (que degrada
el ARN)

Al extracto de ácidos
nucleicos anterior se le
añadió la enzima FT = ADN
ADNasa (que degrada
el ADN)

Demostró que la naturaleza química del factor de transformación era un DNA y no

una proteína.

c. Experimento de Hershey y Chase

Los cultivos de mezclaron y

centrifugaron para separar
fagos de bacterias.

32
P se encontró en el
sedimento, dentro
de bacterias.
Un lote de fago se
marcó 35S que se Bacterias se Se mide radioactividad
incorpora a la infectaron en sedimento y líquido
envoltura de proteínas. con el fago
Otro lote se marcó con 35
32 S se encontró en el
P que se incorpora al sobrenadante, fuera
DNA. 13 de bacterias.
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