UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGÍA GENERAL
AISLAMIENTO

AISLAMIENTO DE LA BACTERIA
Clostridium butyricum

INTEGRANTES:
MARLON JULIO VERGARA MONTERROZA
MIGUEL ANGEL CASTRO NEGRETE
MARÍA PATRICIA MUÑOZ ARROYO
MARÍA CAMILA DURANTE CORDERO
KEVIN ANDRÉS HERAZO ANGULO
GRUPO: INGAL – LAB. 01

DOCENTE:
ING. YENIS IBETH PASTRANA PUCHE M. Sc

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PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
CAMPUS BERÁSTEGUI
2018
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METODOLOGÍA
Para realizar la esta investigación se seguirán sucesivamente los siguientes pasos:
2.1 Seleccionar el intestino de cerdo.
2.2 Preparación de la muestra: Se deben homogeneizar la muestra (intestino de cerdo).
2.3 Pre enriquecimiento de la muestra: Para pre enriquecer la muestra En el Caldo de
soja triptona, debe incubar a 37ºc el homogeneizado, por un período de 24 horas en jarra de
Gaspak.
2.4 Enriquecimiento de la muestra: Al finalizar el período de incubación se debe inocular
a una proporción 1:100 en el caldo enriquecido: caldo tioglicolato, el cual posteriormente
debe incubarse a 37°C durante 48 horas .En jarra de Gaspak.
2.5 Siembra en medios sólidos: Al finalizar el período de incubación se sembrará el
microorganismo en 2 medios de cultivo, agar sangre para anaerobios agar brucella además
los medios serán incubados a 37°C durante 48 horas. En jarra de Gaspak.
2.6 Identificación morfológica: Posteriormente se realizarán las tinciones para la
identificación morfológica del clostridium butyricum.
2.7 Pruebas bioquímicas: Para la identificación del clostridium butyricum, se realizarán
las siguientes pruebas bioquímicas: TSI o KIA, gelatinasa, motilidad y H2S, las cuales se
incubaran según la técnica de cada prueba. En jarra de gaspak
2.8 Análisis de Resultados: Se realizarán los análisis respectivos de las pruebas realizadas
y se determinará el éxito del aislamiento.
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MATERIALES FACILITADOS EN EL LABORATORIO

 Asas Bacteriológicas
 Porta Objetos Estéril
 Cubre Objetos
 Mechero de Bunsen
 Microscopio Electrónico
 Incubadora De 37°C
 2 Medio de Cultivo Agar Sangre para Anaerobios Agar Brucella
 Medio de Cultivo Caldo Tioglicolato
 Medio de Cultivo Caldo de Soja Triptona
 Agua Destilada
 Varilla De Vidrio
 Jarra De Gaspak
 Vela
 2 Tubos TSI y de KIA
 2 Tubos de Gelatinaza
 2 Tubos de Motilidad y Sulfuro

MATERIALES FACILITADOS O TARIDOS POR LOS ESTUDIANTES

 Cinta de Enmascarar
 Algodón
 Encendedor
 Alcohol

REACTIVOS FACILITADOS EN EL LABORATORIO

 Safranina de Gram
 Lugol
 Cristal Violeta
 Alcohol Acetona
 Reactivo de kovacs
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4. PROCEDIMIENTO
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Homogenizar Intestinos de cerdo

Esto es para el Caldo de soja triptona

preenriquecimiento

Incubar a 37ºC Por 24 horas

Resultados Observar Jarra de

gaspak

ENRIQUECIMIENTO DE LA MUESTRA

Inocular 10 g (En caldo tioglicolato)

INCUBAR
37°C por 48 horas

Jarra de Gaspak

Observar Resultados
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SIEMBRA DE LA MUESTRA QUE CONTIENE (clostridium butyricum)

Tomar Muestra del tracto digestivo del cerdo con un asa en punta.

Sembra En medio de cultivo agar sangre

Incuba De 24 a 48 horas a 37°C

r

Jarra de gaspak

Observar Resultados
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Frotis
REALIZAR

SECAR Al aire

FIJAR Con calor

El portaobjetos con CRISTAL

CUBRIR VIOLETA por 1 minuto

Con agua destilada

LAVAR
TINCIÓN DE GRAM

LUGOL por 1 minuto

ADICIONAR

Con agua destilada

LAVAR

Con ALCOHOL ACETONA por 14 segundos

DECOLORAR

LAVAR Con agua destilada

Con SAFRANINA DE GRAM por 30 segundos

CUBRIR

Con agua destilada

LAVAR

Al aire
SECAR

Al microscopio con objetivo de inmersión

OBSERVAR

La morfología y disposición de las bacterias.

REPORTAR
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PRUEBA DE MOTILIDAD Y SULFURO

Sembrar Con el asa en punta una o

dos colonias, en el medio

Incubar 37ºC por 24 horas

Jarra de
gaspak

Observar Resultados

PRUEBA DE GELATINAZA

Sembrar Medio gelatina

Incubar 37ºC por 24 horas por 5 días

Sacar Enfriar

Jarra de
gaspak

Observar Resultados
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Meses académicos

N° ACTIVIDADES
Abril
Mayo

1 23 24 25 26 27 28 29 30 01 02 03 04 31

Revisión bibliográfica y
realización de la X
propuesta.
Extracción del X
microorganismo
2
Siembra X
3
Incubación X
4
Verificación de X
crecimiento del
5
microorganismo
Prueba de tinción de X
Gram
6

Pruebas bioquímicas X
7
Socialización del informe X
final.
8
Sustentación X
9