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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGÍA GENERAL
AISLAMIENTO

AISLAMIENTO DE Gluconobacter sp A PARTIR DE UNA MUESTRA DE CAÑA


DE AZÚCAR

LINDA MARÍA DÍAZ SOTO; MIGUEL EDUARDO ARRIETA MILANES;


CARLOS DANIEL MONTENEGRO; NELSON JOSÉ AVILEZ CONDE

PRESENTADO A: ING. YENIS IBETH PASTRANA PUCHE M. Sc

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FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
CAMPUS BERÁSTEGUI
2018

INTRODUCCIÓN

Gluconobacter es un género de bacterias en la familia de las bacterias del


ácido acético, las cuales se caracterizan por ser un grupo de bacterias Gram-
negativas que oxidan azúcares o etanol y producen ácido acético durante la
fermentación. Las bacterias de ácido acético constan de 10 géneros en la
familia Acetobacteraceae. Varias especies de bacterias de ácido acético se
utilizan en la industria para la producción de ciertos alimentos y productos
químicos. Prefieren ambientes ricos en azúcar, por lo que a veces se
encuentran como un organismo de descomposición en la cerveza. Se
desconocen que sean patógenos, pero pueden causar pudrición en: manzanas,
peras, café, piña, arroz, zanahoria, papaya, caña de azúcar y remolacha.
Principalmente debemos contar con métodos de aislamiento potencialmente
utilices como lo es el método LGI.
El objetivo de este proyecto es purificar y caracterizar, mediante métodos
convencionales, aislados pertenecientes al género Gluconacetobacter sp, para
establecer una colección base que se pueda emplear en la elaboración de
inoculantes.

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MÉTODO

Lo primero que debemos realizar es la respectiva recolección de las muestras


de caña de azúcar que no hayan tenido ningún antecedente de aplicación
previa de químicos, las muestras se deben recolectar de hojas, tallo y raíz, las
cuales, se transportaran al laboratorio de microbiología general.

Para realizar el respectivo procedimiento, las muestras se lavaran con


abundante agua y se desinfectaran con Tween 80 al 1%, serán lavadas con
agua destilada.

Las muestras serán maceradas y serán vertidas en 50 mL de una solución de


sacarosa al 1% (dilución 10-1).

A partir de la dilución 10-1 se realizará una dilución 10-2 tomando 1mL de la


solución 10-1 y vertiéndolo en un tubo de ensayo con 9 mL de solución de
sacarosa al 1%.

A partir de la última se realiza una dilución 10 -3 tomando 1 mL de la solución y


vertiendo en un tubo de ensayo con 9 mL de solución sacarosa al 1%.

Luego de esto se sembrarán en medio semisólido LGI, estos cultivos los


incubaremos de 30°C a 40°C durante aproximadamente una semana o más y
la identificación de gluconobacter sp se realizará a partir del aislamiento en
agar papa dextrosa (PDA).

MATERIALES Y REACTIVOS

 Muestras de caña (hoja, tallo, raíz)


 Asas Bacteriológicas
 Porta Objetos Estéril
 Cubre Objetos
 3 cajas de petri
 Mechero de Bunsen
 Microscopio Electrónico
 Incubadora De 30°C a 40°C
 Medio de Cultivo Agar papa dextrosa

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 Medio de Cultivo Caldo Tioglicolato


 Medio de cultivo semi solido LGI
 Agua Destilada
 Tween 80 al 1%
 Solución de sacraso 1%
 2 Varilla De Vidrio
 Jarra De Gaspak
 Vela
 2 Tubos TSI y de KIA
 2 Tubos de Gelatinaza
 2 Tubos de Motilidad y Sulfuro
 Cinta de Enmascarar
 Algodón
 Encendedor
 Alcohol

FLUJOGRAMA

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Lavar Desinfectar

Macerar

Verter en 50 mL de una A partir de la dilución


solución de sacarosa al 10-1 se realizará una
1% (dilución 10-1) dilución 10-2 con 1mL de
solución 10-1

Verter en tubo
De la última se realiza Verter en tubo de
de ensayo con
una dilución 10-3 con ensayo con 9ml de
9ml de solución
1mL de la solución solución sacarosa 1%
sacarosa al 1%

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SIEMBRA DE LA MUESTRA

Muestra con un
Seleccionar
asa en la punta

En medio de
Sembrar
cultivo LGI

De 30°C a 40°C por


Incubar
aproximadamente una semana

Observar e A partir del aislamiento en


identificar agar papa dextrosa (PDA).

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