PROBLEMAS DE CINÉTICA ENZIMÁTICA

1. La siguiente información se obtuvo de un experimento de cinética

enzimática. Grafique los datos usando el modelo de Lineweaver-Burk
plot y determine por inspección de el gráfico, los valores de K m and
Vmax. (1.5)

[S] V (nmol/min)
(µM)
0,20 1,43
0,26 1,67
0,33 2,08
1,00 3,33

2. La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilinasa,

una enzima presente en algunas bacterias resistentes a la penicilina.
El peso de esta enzima en Staphylococcus aureus es de 29,6 KDa.
La cantidad de penicilina hidrolizada en un minuto en una disolución
de 10 mL que contiene 10 -9 g de penicilinasa purificada, se midió
como función de la concentración de penicilina. Suponiendo que la
concentración de penicilina no cambia apreciablemente durante el
ensayo, representar 1/v frente a 1/[S] a partir de los siguientes datos:
(1.5)

[Penicilina] Moles hidrolizados/min)

0,1 x 10-5 M 0,11 x 10-9
0,3 x 10-5 M 0,25 x 10-9
0,5 x 10-5 M 0,34 x 10-9
1 x 10-5 M 0,45 x 10-9
3 x 10-5 M 0,58 x 10-9
5 x 10-5 M 0,61 x 10-9

¿Sigue la penicilinasa una cinética de Michaelis Menten? Si es así ¿Cuál es el

valor de Km y Vmax?
3. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para
una reacción catalizada por una enzima hipotética son: (1)

[S] (moles/L) V (µmoles /min)

5 x 10-2 0,25
5 x 10-3 0,25
5 x 10-4 0,25
5 x 10-5 0,20
5 x 10-6 0,071
5 x 10-7 0,0096
 ¿Se puede calcular los valores de Km y Vmax con estos datos? De
darse el caso, obtener los valores

4. 25 µL de una preparación de Ribonucleasa A se lleva a ensayo a un

volumen de reacción estándar de 1 mL y a temperatura y pH
óptimos, pero con distintas concentraciones iniciales de sustrato
obteniéndose las velocidades iniciales que se indican: (1.5)
[S] V (nmoles /min)
(mMoles/L)
303 x 10-3 120
149 x 10-3 98
128 x 10-3 92,6
100 x 10-3 83,3
80 x 10-3 74,6

Determine la Km y Vmax

5. Los siguientes datos fueron obtenidos para la hidrólisis de

carbobenzoxyglicil- L- triptófanocatalizada por la enzima
carboxipeptidasa. (1.5)

La reacción en sí es:
Carbobenzoxyglicil-L-triptófano+H2O = Carbobenzoxyglicina + Triptofano
Grafique estos datos usando el método de linealización de Lineaweaver-Burk y
determine valores para Km y Vmax. La concentración de la enzima es la misma
en todos los experimentos.

mM mM/s
2,5 0,024
5 0,036
10 0,053
15 0,06
20 0,064

6. La actividad de la Acetil CoA carboxilasa, medida con tres diferentes

concentraciones de enzima y a diferentes concentraciones de
sustrato fue la siguiente: (3 pts)

Enzima (µg mde proteína)

[AcetilCoA
] 0,1 0,2 0,5
µM Vo (µM/min)
0,05 0,275 0,546 1,373
0,14 0,482 1,001 2,502
0,23 0,58 1,185 2,891
0,32 0,642 1,385 3,463
0,5 0,755 1,494 3,656
0,59 0,766 1,497 3,81
a. Calcular para cada experimento el valor de Km y el valor de
Vmax.
b. Son los valores de Km y Vmax iguales o diferentes?