LABORATORIO BIOQUÍMICA

Profesora: Luz Mery Buitrago A.

Laboratorio No. 1

FECHA: _______________ SECCIÓN:________________

INTEGRANTES

APELLIDO APELLIDO NOMBRES CODIGO

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DILUCIONES Y CONCENTRACIONES

1. INTRODUCCION

Las diluciones son usualmente expresadas como 1 unidad de la solución original referida a las unidades de la solución final.

Una dilución 1:10 significa que hay 1 unidad de la solución concentrada, diluida en un volumen final de 10 unidades. De esta forma
la concentración inicial queda diluida 10 veces (factor de dilución 10)

Para cualquier dilución aplique la siguiente fórmula:

Volumen final
Factor de dilución ( D) 
Volumen inicial

Ejemplo: Se miden 100 µL de suero (0.1mL) y le adicionamos 4.8mL de Solución salina. ¿Cuál es la dilución del suero?
Aplicando la fórmula tenemos que:

(4,8  0,1) 4,9

D 
0,1 0,1 La solución está diluida 1:49

Si solamente queremos preparar 0.05 mL de la dilución anterior (1:49), ¿qué volúmenes de suero y solución salina utilizaríamos?
Aplicando la fórmula:
Volumen final
D
Volumen inicial
Despejando:
Volumen final 50 microlitro s
Volumen inicial    1,02 microlitro s
D 49
Se requerirán 1,02 µL de suero + 48,98 µL de solución salina.

2. DILUCIONES SERIADAS

Se necesita preparar una curva de calibración o preparar diluciones de una muestra determinada, entonces deben tenerse en cuenta
los volúmenes finales que se requieren y las concentraciones finales de cada solución.

Ejemplo: Se tienen 800uL de un estándar de fructosa de 900mg/dL y se necesita prepara una curva de calibración que cubra un rango
entre 500mg/dL a 10mg/dL. El volumen final que necesita el método para realizar la determinación es de 100µL. Deben prepararse
como mínimo cinco estándares y cada uno analizarse por duplicado.

Solución: (Una de muchas posibles)

Se necesitan para cada determinación del estándar 100µL, pero como es por duplicado como volumen mínimo 200 µL. (Lo ideal es
preparar más del volumen necesitado para el proceso en la eventualidad que se malogre alguna de las determinaciones y se deba
repetir)

De acuerdo al planteamiento anterior, lo ideal sería preparar de cada estándar 400 µL (volumen final) y se necesitan como mínimo
cinco estándares.

Se observa que al diluir el estándar inicial (900mg/dL) 1:2 queda en 450mg/dL muy cerca del valor de cubrimiento exigido por el
método.

Entonces se realizan las diluciones seriadas a partir del primer estándar de la siguiente forma :

Se tiene entonces 400 µL de cada estándar, excepto el último, que queda con 800 µL y se cubre el área necesitada por el método con
seis estándares.

Observaciones:

 Si el investigador no quiere manejar tantos decimales en la concentración de los estándares, deberá pesar otro Estándar (Ejemplo: 800mg/dL
que al realizar la misma serie de diluciones ofrecería valores de 400, 200, 100, 50 25 y 12.5mg/dL para cada dilución 1:2 respectivamente)
 Tenga en cuenta el diagrama. Puede observar que los volúmenes de solvente y los factores de dilución de la curva de calibración, SIEMPRE son
los mismos.

3. EJERCICIOS SOLUCIONES

3.1 Preparar las siguientes diluciones, teniendo en cuenta que el volumen final, debe ser 120 mL, ¿Cuánto tomaría de muestra y
cuanto de solución diluyente?

a) 1: 40
b) 1:4
c) 1:20

Preparar las siguientes diluciones, teniendo en cuenta que el volumen final, debe ser 60 mL, ¿Cuánto tomaría de muestra y cuanto de
solución diluyente?

a) 1:100
b) 1:500
c) 1:70

Preparar las siguientes diluciones, teniendo en cuenta que el volumen final, debe ser 10 Litros, ¿Cuánto tomaría de muestra y cuanto
de solución diluyente?

a) 1:100
b) 1:240
c) 1:400
Preparar las siguientes diluciones, teniendo en cuenta que el volumen final, debe ser 20000 µL, ¿Cuánto tomaría de muestra y cuanto
de solución diluyente (en mililitros) ¿?

a) 1:16
b) 1:80
c) 1:100

3.2. FACTOR DE DILUCIÓN

Si a las siguientes cantidades de muestras se les agrega 500.000 µL de diluyente, ¿Cuál es el factor de dilución?

a) 120 mL
b) 40000 µL
c) 0.01 L

Si a cada una de las siguientes cantidades de muestras, se le adiciona un volumen de 400 mL de diluyente, ¿Cuál es el factor de
dilución?

a) 0.06 L
b) 9000 µL
c) 25 mL

Si cada uno de los siguientes volúmenes de muestra se llevan a un volumen final de 0,09 Litros con agua destilada ¿Cuál es el factor
de dilución? para dicho espécimen:

a) 3600 µL
b) 0,03 L
c) 0,5 mL

3.3 CONCENTRACION FINAL

Se tiene un patrón de glucosa de 4500 µg/mL, si se hacen las siguientes diluciones que concentraciones se obtienen en mg/dL?

a) 1:25
b) 1:18
c) 1:32

Se tiene un patrón de proteínas de 250 mg/dL, si se hacen las siguientes diluciones que concentraciones se obtienen en µg/mL?

a) 1:68
b) 1:214
c) 1:420