EXTRACCIÓN DE ALMIDÓN DE PATATA

Dr. Mahesha H B, Universidad de Yuvaraja, Mysore.

Objetivo: aislar el almidón de la muestra de papa dada.
Principio: el almidón es un polisacárido importante que se encuentra en las fuentes
vegetales. El microscópico
La apariencia del almidón es en forma de gránulos. Es típico de los gránulos de almidón
individuales. Difieren en tamaño dependiendo de la fuente de la que se aislaron. El
almidón es insoluble en agua y se deposita rápidamente en el fondo y puede recogerse
decantando el sobrenadante.
Materiales necesarios: patata, tela de muselina, reloj de vidrio, mortero, mortero, tubo
de ensayo, yodo solución, etc.
Procedimiento:
1. Pele una papa cruda y córtela en trozos pequeños, y registre el peso inicial.
2. Muele en un motor y maja con suficiente agua.
3. Recoja el homogeneizado de papa en un vaso de precipitados y agregue suficiente
agua.
4. Luego filtre el homogeneizado a través de un paño de muselina para eliminar las
partículas.
5. Permita que el filtrado se asiente. El almidón se deposita rápidamente en el fondo.
Decantar el almidón libre sobrenadante con cuidado.
6. Lavar 3-4 veces y decantar el sobrenadante. Recolecte la masa compacta de almidón
y permita secar
7. Registre el peso final del almidón aislado y calcule el rendimiento.

Resultado: La muestra dada contiene _____ gm de almidón / 100 gm de papa.

Prueba de yodo: tome una pequeña cantidad de solución de prueba con una gota de HCl
1 N y luego agregue dos gotas de solución de yodo. La formación de color azul indica
la presencia de almidón.

II Materiales y métodos
Recolección de muestras y preparación
Aproximadamente 30 piezas de cada una de las cuatro variedades de cultivares de
mango maduro localmente llamados Bintasuga, Dankamaru, Paparanda y Peter en
Hausa Inaguage fueron adquiridos de un mercado local (Kasuwar Daji) en Sokoto
Análisis de muestras
Determinación del contenido total de almidón
El contenido total de almidón de las semillas se determinó según lo descrito por Ezeagu
et al. [9] Brevemente, los azúcares solubles se extrajeron con etanol (95%) y el almidón
residual se hidrolizó luego con ácido perclórico en monosacáridos. El azúcar se
determinó colorimétricamente con ácido fenol-sulfúrico por medio de un
espectrofotómetro UV-VIS (UVIKON 932,).
Aislamiento de almidón
Los embriones recuperados de las muestras se cortaron en trozos pequeños y se
sumergieron en una solución acuosa de sulfito de sodio al 0,16% durante 24 horas a 50
° C para su conservación. La solución se decantó y las muestras se molieron en un
mezclador de laboratorio. La lechada molida se tamizó a través de un paño de muselina
donde se dejó y se lavó a fondo con agua destilada. Después de 1 hora, el sobrenadante
se decantó del filtrado y la capa de almidón sedimentado se volvió a suspender en agua
destilada y se centrifugó a 2800 rpm durante 5 minutos. La capa superior no blanca del
residuo se raspó y la capa blanca se volvió a suspender en agua destilada y centrifugada.
Esto se repitió 4 veces más y finalmente el almidón se recogió y se secó a 50 ° C
durante 6 horas en un horno [10].
Análisis inmediato del almidón.
(a) Determinación del contenido de humedad
Esto se determinó utilizando el método descrito en Ezeagu et al. [9] y Lee et al. [11]
(2007).
(b) Determinación total de cenizas
El contenido de cenizas se estimó mediante la medición del residuo que queda después
de la combustión de 2 g de almidón en una placa de sílice a 450 ° C y el porcentaje de
cenizas se calculó en relación con la cantidad de muestra quemada [12].
(c) Determinación de proteína de almidón
Esto se realizó determinando primero el contenido de nitrógeno mediante el método
estándar de micro-Kjeldahl utilizando un aparato de digestión (Kjeldatherm System KT
40) y un sistema de titulación como se describe en AOAC [13].
(d) Determinación de lípidos de almidón
Esto se analizó mediante extracción del lípido con éter de petróleo (punto de ebullición
40o - 60oC) usando un extractor Soxhlet como se describe en Ezeagu et al. [9]
Determinación del contenido de amilosa
Esto se determinó utilizando el método de Williams et al. [14] En resumen, se pesaron
0,10 g de la muestra en un matraz volumétrico de 100 cm3 y 1 cm3 de etanol al 99% y
9 cm3 de hidróxido de sodio 1 M
La solución se añadió cuidadosamente. Los contenidos se mezclaron completamente y
la solución de muestra se calentó durante 10 minutos en agua hirviendo para gelatinizar
el almidón. Después de enfriar, la solución se completó hasta la marca con agua
destilada y se agitó a fondo. Se trataron cinco (5) cm3 de la solución de almidón en
matraces volumétricos de 100 cm3 con 1,0 cm3 de ácido acético 1 M y 2,0 cm3 de
solución de yodo. La solución se diluyó hasta la marca con agua destilada y la
absorbancia se leyó usando un espectrofotómetro a 620 nm. La absorbancia de la
solución en blanco preparada en consecuencia se restó de la de la muestra y los
contenidos de amilosa y amilopectina se calcularon usando las ecuaciones (1) y (2)
respectivamente:
Contenido de amilosa (%) = 3.06 x absorbancia x 20 ………… (1)
Amilopectina (%) = 100 -% de contenido de amilosa ……………. (2)
Morfología Granular
La morfología granular se determinó utilizando un microscopio óptico (S-0009). La
muestra de almidón se suspendió en glicerol para asegurar la uniformidad de la muestra
de prueba. Se colocó una gota de la suspensión en un vidrio deslizante y luego se
observó al microscopio con un aumento de x1000 [15].
Determinación de la temperatura de gelatinización.
Una suspensión al 0,29% p / v de la muestra en agua en un vaso de precipitados de 25
cm3 se calentó en un baño de agua a 40 ° C. La temperatura se elevó gradualmente y
después de cada ~ 2oC se extrajeron muestras y se observaron bajo un microscopio
polarizado. La temperatura a la que los gránulos perdieron por completo sus cruces de
polarización se registró como temperatura de gelatinización [16].
Determinación del poder de hinchamiento y solubilidad
El método de Nadiha et al. [17]) se utilizó en la determinación del poder de
hinchamiento y la solubilidad. Brevemente, se trataron 0,400 g de muestra de almidón
en un tubo de centrífuga con 40 cm3 de agua destilada. La suspensión se calentó a 0,
50, 60, 70, 80, 85 y 90 ° C en un baño de agua durante 30 minutos. Después de enfriar a
temperatura ambiente, la solución se centrifugó a 3000 rpm durante 15 minutos. El
sobrenadante se recuperó cuidadosamente y se pesó el sedimento de almidón hinchado.
La parte alícuota del sobrenadante se evaporó durante la noche (110 ° C) y el poder de
hinchamiento y la solubilidad se calcularon a partir de las ecuaciones (3) y (4):
Determinación del contenido de amilosa
Esto se determinó utilizando el método de Williams et al. [14] En resumen, se pesaron
0,10 g de la muestra en un matraz volumétrico de 100 cm3 y 1 cm3 de etanol al 99% y
9 cm3 de hidróxido de sodio 1 M
La solución se añadió cuidadosamente. Los contenidos se mezclaron completamente y
la solución de muestra se calentó durante 10 minutos en agua hirviendo para gelatinizar
el almidón. Después de enfriar, la solución se completó hasta la marca con agua
destilada y se agitó a fondo. Se trataron cinco (5) cm3 de la solución de almidón en
matraces volumétricos de 100 cm3 con 1,0 cm3 de ácido acético 1 M y 2,0 cm3 de
solución de yodo. La solución se diluyó hasta la marca con agua destilada y la
absorbancia se leyó usando un espectrofotómetro a 620 nm. La absorbancia de la
solución en blanco preparada en consecuencia se restó de la de la muestra y los
contenidos de amilosa y amilopectina se calcularon usando las ecuaciones (1) y (2)
respectivamente:
Contenido de amilosa (%) = 3.06 x absorbancia x 20 ………… (1)
Amilopectina (%) = 100 -% de contenido de amilosa ……………. (2)
Morfología Granular
La morfología granular se determinó utilizando un microscopio óptico (S-0009). La
muestra de almidón se suspendió en glicerol para asegurar la uniformidad de la muestra
de prueba. Se colocó una gota de la suspensión en un vidrio deslizante y luego se
observó al microscopio con un aumento de x1000 [15].
Determinación de la temperatura de gelatinización.
Una suspensión al 0,29% p / v de la muestra en agua en un vaso de precipitados de 25
cm3 se calentó en un baño de agua a 40 ° C. La temperatura se elevó gradualmente y
después de cada ~ 2oC se extrajeron muestras y se observaron bajo un microscopio
polarizado. La temperatura a la que los gránulos perdieron por completo sus cruces de
polarización se registró como temperatura de gelatinización [16].

Determinación del poder de hinchamiento y solubilidad

El método de Nadiha et al. [17]) se utilizó en la determinación del poder de
hinchamiento y la solubilidad.
Brevemente, se trataron 0,400 g de muestra de almidón en un tubo de centrífuga con 40
cm3 de agua destilada. La suspensión se calentó a 0, 50, 60, 70, 80, 85 y 90 ° C en un
baño de agua durante 30 minutos. Después de enfriar a temperatura ambiente, la
solución se centrifugó a 3000 rpm durante 15 minutos. El sobrenadante se recuperó
cuidadosamente y se pesó el sedimento de almidón hinchado. La parte alícuota del
sobrenadante se evaporó durante la noche (110 ° C) y el poder de hinchamiento y la
solubilidad se calcularon a partir de las ecuaciones (3) y (4):
 







Peso del sedimento húmedo g
Poder de hinchamiento g / g = ………………… 3
Peso del almidón seco g
Peso del sobrenadante seco g
Solubilidad% = x100 ……… ..... 4
Peso del almidón seco g
Determinación de la capacidad de retención de agua
La capacidad de retención de agua (WBC) se determinó de acuerdo con el método
descrito por Medcalf y Gilles [18] con algunas modificaciones. Se suspendieron
aproximadamente 1.000 g de almidón en 20 cm3
de agua destilada y la suspensión se agitó durante 1 hora en un agitador después de lo
cual se centrifugó durante 10 minutos a 2200 rpm. los
el sobrenadante se decantó y el depósito de almidón se drenó durante 10 minutos y
luego se pesó. La capacidad de retención de agua se calculó utilizando la ecuación (5):
WBC (%) = (Peso del almidón escurrido - Peso del recipiente) x 100 ………… ..5
Turbidez de almidón
La turbidez del almidón se determinó según lo descrito por Pereira y Hoover [19]. Una
suspensión acuosa al 1% de la muestra de almidón se calentó en un baño de agua a 90
oC durante 1 hora con agitación constante. La suspensión se enfrió a 30 ° C durante 1
hora. La muestra se almacenó durante 4 días a 4 oC y se determinó la turbidez cada 24
horas midiendo la absorbancia a 640 nm contra un blanco de agua con un
espectrofotómetro.
Lixiviación de amilosa
Quince miligramos (15 mg) de muestra de almidón se calentaron (55 a 85 ° C) en un
tubo calibrado durante 30 minutos. Luego se enfrió el tubo a temperatura ambiente y se
centrifugó a 2000 rpm durante 10 minutos. El líquido sobrenadante (1 cm3) se retiró y
el contenido de amilosa se determinó por el método de Chrastil [20].
Análisis estadístico
Los datos numéricos obtenidos de varias determinaciones son promedios de observaciones
por triplicado. Los datos se sometieron a análisis estadísticos utilizando el software
estadístico Minitab (Minitab Inc., EE. UU.). Se utilizó el análisis de varianza unidireccional
(ANOVA) a α = 0.05 para comparar las diferentes variedades de mango para cualquier
diferencia significativ