Meio SIM (Sulfureto, Indol, Mobilidade)

Ana Ferreira _ P1
O meio SIM, teste bioquímico, consiste em 3 provas distintas 3-11-2010
para a identificação de bactérias:

Formação de Sulfureto de Hidrogénio (H2S)

Produção de Indol

Mobilidade

Composição do Meio SIM:

Peptona (30,0g) císteina é um dos componentes

Extrato de carne (3,0g)

Tiossulfato de sódio (0,2g) composto sulfurado inorgânico

Sulfato Ferroso Amoniacal (0,2g) funcionará como indicador da presença de H2S

Agar (3,0g) Meio Semi-Sólido (permitirá mobilidade)

Água destilada (1000ml)

Procedimento: Inoculação por picada e posterior incubação a 37ºC durante 24h.

 Meio SIM (Sulfureto, Indol, Mobilidade)
PROVA DO SULFURETO DE HIDROGÉNIO (H2S)

Microrganismos podem produzir H2S a partir de duas vias principais:

1
A cisteína (presente nas peptonas) é hidrolisada na presença da enzima Cisteína
Desulfurase, perdendo o seu átomo de enxofre que é reduzido pela adição de hidrogénio da água
Desulfurase
para formar H2S.

Cisteína Desulfurase
Cisteína (C3H7NO2S) Ácido pirúvico + Amónia + H2S

2
Compostos Sulfurados Inorgânicos (tiossulfatos, sulfatos e sulfitos) quando reduzidos, na
presença da enzima Redutase do Tiossulfato
Tiossulfato, também podem produzir H2S.

Redutase do Tiossulfato
Tiossulfato (S2O32−) Sulfito (SO32- ) + H2S
 Meio SIM (Sulfureto, Indol, Mobilidade)
PROVA DO SULFURETO DE HIDROGÉNIO (H2S)
Resultados

Na prova positiva o H2S produzido é incolor mas ao reagir com o
sulfato ferroso amoniacal forma-se um precipitado negro insolúvel
(sulfureto de ferro) ao longo da linha de inoculação.
Sulfato Ferroso Amoniacal + H2S ---> Sulfureto de Ferro (Precipitado Negro)
POSITIVO NEGATIVO
(Proteus vulgaris) (Escherichia

A prova negativa caracteriza-se pela ausência de precipitado negro. coli)

MOBILIDADE

O meio, semi-sólido, indica mobilidade quando o

crescimento da cultura não se restringe à zona de inoculação.
Presença de Mobilidade: detectada pela turvação do meio
Ausência de Mobilidade: ausência de turbidez NEGATIVO POSITIVO
(Klebsiella (Proteus vulgaris e
pneumoniae) Escherichia coli)