MICROBIOLOGIA SEGUNDO PARCIAL

 Acción de la penicilina: Sólo afecta a células metabólicamente activas, esto es, que están sintetizando su pared.
Inhibe la transpeptidación. Es menos activa contra las bacterias Gram negativas ya que: La pared celular está
menos puenteada. la membrana externa funciona como una barrera protectora física a la acción de los
antimicrobianos en general.
 Sitio de acción de la penicilina: Antibiótico que interfiere con la biosíntesis de la pared celular. La penicilina se
une covalentemente a las PBPs (Penicillin Binding Proteins), enzimas que participan en la formación del puente
interpeptídico, por lo que se inhibe la formación de este puente, generando paredes débiles, sin
entrecruzamientos y la célula se lisa. Inhibe la formación del puente por inactivación de la PBP específica
 Pared celular de una bacteria Gram positiva: Ácidos teicoicos y lipoteicoicos = pared: Se extienden hacia fuera
de peptidoglicana alcanzando el exterior de la célula. Son fibras polianiónicas que se pueden expander o
contraer dependiendo de la concentración iónica.
 Composición química de los ácidos teicoicos: Son polisacáridos ácidos: polímeros de ribitol fosfato (enlace 1-5),
polímeros de glicerol fosfato (enlace 1-3).
 Funciones de los ácidos teicoicos: proporcionan carga negativa a la célula, permiten el paso de iones a través de
la pared, son sitio de recepción para bacteriófagos, son antigénicos, intervienen en la regulación de la división
celular, No contribuyen a dar rigidez a la pared.
 Ácidos lipoteicoicos: polímeros de glicerol fosfato (enlace 1-3) y un lípido. Se unen por enlace fosfodiéster a los
glucolípidos de la membrana citoplásmica. Son el sitio de anclaje de la pared a la membrana citoplásmica y por
lo tanto a la célula.
 Otros componentes: Lípidos y ceras En bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) los lípidos alcanzan hasta un
60 %.
 Otros componentes: Lípidos y ceras :Reciben el nombre de ácidos micólicos y están unidos al -OH del C5 de las
unidades de arabinosa. Nocárdico en Nocardia, cardiomicólico en Mycobacterium tuberculosis , ácido
leprosínico en Mycobacterium leprae
 Propiedades de estas paredes Son base de la respuesta de ácido resistencia (BAAR), en la técnica de Ziehl
Neelsen.
 Propiedades de estas paredes : Dan aspecto céreo y consistencia dura a las colonias. Crecimiento en grumos en
medios líquidos.Dan impermeabilidad a la pared celular. Gran resistencia a la desecación. Gran resistencia a
sustancias antibacterianas (jabones, detergentes, agentes oxidantes, ácidos, bases, antibióticos etc).
 Estructura de la pared celular de las bacterias Gram negativas : Peptidoglicana, Membrana externa (mide 75
Å de espesor)
 Componentes de la membrana externa : *1968, es diferente de la membrana citoplasmática en composición y
función membrana externa* : lipoproteína Y lipopolisacárido
 Lipoproteína : Lípidos Son fosfolípidos y forman una bicapa semejante a la membrana citoplasmática
 PROTEINAS: porinas , lipoproteína de Braun, proteínas modificables por el calor proteínas menores
 Porinas (proteínas matrices): Composición química: proteína, Organizadas en subunidades triméricas , Forman
poros o canales hidrofílicos que permiten la difusión pasiva inespecífica de solutos hidrofílicos de bajo peso
molecular a través de la membrana externa.Son receptoras de fagos y colicinas.
 Lipoproteína de Braun: Composición química: proteína unida a un ácido graso*. Función: sitio de anclaje de la
membrana externa a la pared celular y por tanto a la célula. Mantiene la integridad estructural y funcional de la
membrana externa.
 Funciones integrales de la fracción lipoproteica: Es una barrera protectora de la peptidoglicana y de la célula
ya que limita el paso de substancias como: enzimas, antibióticos, colorantes, alcoholes, metales pesados etc. Su
presencia hace más resistentes a la bacterias Gram negativas. Es un mecanismo de defensa de la bacteria ya que
inhibe la fagocitosis. Es un mecanismo de patogenicidad de la bacteria.
 Lípido A: azúcar : disacárido de N-acetilglucosamina unido por enlace α 1-6 Fosfolipido: ácidos grasos* de
cadena larga, unidos a la N-acetil glucosamina
 Características del Lípido A : Tiene actividad de endotoxina. Es pirogénico. Es termoestable.
 Core ó núcleo: Núcleo del polisacárido. Contiene KDO (cetodesoxioctonato). Azúcares de 7 C (heptosas), además
de azúcares de 6 C como glucosa, galactosa etc.
 Polisacárido “O” : Constituye la región más externa del LPS, se proyecta a partir de la membrana externa. Es una
cadena específica de unidades repetitivas de azúcares (4 a 5) hasta de 25 unidades. Los azúcares generalmente
son hexosas lineales o ramificadas. Son antígeno específicas*. Protegen contra la fagocitosis, las cepas mutantes
sin antígeno “O”, son fácilmente fagocitadas. *También llamado antígeno “O”
 Polisacárido “O” : Llamado también Antígeno O . Generalmente constituido por galactosa, glucosa, ramnosa y
manosa así como azúcares poco comunes (dideoxiazúcares) como abecuosa, colitosa, paratosa y tivelosa. Estos
azúcares se unen en secuencias de 4 o 5 y a menudo se ramifican y cuando esto sucede se forma el largo
polisacárido O. Es específico de cepa
 Funciones del Lipopolisacárido (LPS) 1.- Menor fluidez de esta membrana (papel estructural) 2.-Le proporciona
a la bacteria una mayor resistencia contra agentes químicos: colorantes, detergentes y solventes 3.-Las cadenas
laterales son menos permeables a moléculas hidrofóbicas (Ej.: resisten mejor el efecto de algunos antibióticos)
4.-El antígeno somático “O” de las bacterias Gramnegativas condiciona la virulencia en bacterias patógenas.
Tiene propiedades inmunogénicas o antigénicas. 5.-Se une a cationes como Mg, Zn. Si se añaden agentes
quelantes como el EDTA se genera desorganización de la membrana externa. 6.-Constituye un sitio de
reconocimiento para los bacteriófagos. 7.-La región del lípido A constituye la endotoxina que es pirogénica. 8.-
Papel positivo: El macrófago reconoce el LPS, y libera citocinas que activan al sistema inmune 9.-Papel negativo:
En ocasiones, el sistema inmune se activa “en exceso” (por el LPS) provocando síntomas patológicos: a)
Inducción de fiebre (pirogenicidad) b) Hipotensión, a veces con fallo cardiaco c) Actividad necrótica en tejidos. El
LPS está presente en microorganismos patógenos y no patógenos.
 Uniones de Bayer: Son los sitios de unión entre la membrana externa y la membrana citoplásmica. Son sitios
fisiológicamente activos. Son sitios de adsorción de bacteriófagos. Son aparentemente sitios de translocación de
proteínas secretoras, proteínas de membrana externa, exopolisacáridos, polisacárido capsular, sitios de
emergencia de pili y flagelos.
 Periplasma o espacio periplásmico: En Escherichia coli este espacio mide aproximadamente 12-15 nm y tiene
consistencia de gel debido a la abundancia de proteínas periplásmicas que aquí se encuentran.Espacio entre la
membrana citoplasmática y la membrana externa. Más evidente en las bacterias Gram negativas que en las
Gram positivas. Está ocupado por la peptidoglicana y proteínas distintas a las del citoplasma. Tiene consistencia
de gel, es viscoso y conserva una estructura sumamente ordenada. La presión osmótica en bacterias Gram
positivas es de 520 atm. Y en Gram negativas es de 3-5 atm. En el periplasma de las bacterias G- se observan
diversos tipos de proteínas:
A) Enzimas hidrolíticas cuya función principal es la degradación inicial de macromoléculas.
B) Proteínas de unión que inician el transporte de diversos sustratos.
C) Quimiorreceptores que son proteínas involucradas en la respuesta quimiotáctica.
D) Proteínas (enzimas) biosintéticas
E) Proteínas (enzimas) modificadoras de compuestos tóxicos

 Proteínas del periplasma : Enzimas hidrolíticas: fosfatasas, proteasas, celulasas, amilasas etc.
Proteínas de unión (transportadoras): para amino ácidos (e.g. histidina, arginina) para azúcares (ej. glucosa,
maltosa) para vitaminas (ej. tiamina, vitamina B12) para iones (ej. fosfato, sulfato)
Enzimas de biosíntesis: Ensamble de la peptidoglicana, (PBP’s) membrana externa, formación de fimbrias, pili ,
flagelo etc.
Proteínas modificadoras: Enzimas detoxificantes como las βlactamasas .
 Funciones de las Proteínas periplásmicas : “Detectan” el entorno (ambiente):quimio receptores. Transportan
nutrientes al interior de la célula (proteínas transportadoras específicas). Protegen de sustancias dañinas a la
célula. Poseen gran actividad enzimática, degradan polímeros para ser utilizados (enzimas extracelulares),
participan en la biosíntesis de estructuras complejas celulares: Pared, membrana externa, glicocálix etc.
 Síntesis de la peptidoglicana: Bactoprenol (C55 alcohol isoprenoide) -- acarreador lipídico que transporta el
disacárido pentapéptido del citoplasma al periplasma y lo inserta en la pared celular en crecimiento. La
transpeptidación, es un proceso inhibido por la penicilina
 Síntesis de la pared celular: Cuando las células crecen y se reproducen, la pared celular debe ser hidrolizada en
ciertos sitios por diversas enzimas y posteriormente se insertan nuevas cadenas de peptidoglicana.
 BACTERIAS SIN PARED CELULAR : MICOPLASMAS, FORMAS L, PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS
 los micoplasmas : Son bacterias que no tienen información genética para sintetizar pared. Se tiñen como Gram
negativos. Filogenéticamente son Gram positivas, debido a su cercanía evolutiva con el género Clostridium.
Presentan colesterol en su membrana, que incorporan del medio ambiente.Organismos PPLO (organismos como
los de la pleuroneumonía). Morfológicamente son pleomórficos con gran plasticidad y pueden formar
filamentos.
 Formas L, Variantes L ó CWL (cell wall-deficient): Se parecen morfológicamente a los micoplasmas. Se
distinguen dos variantes: Formas L estables y Formas L inestables que son capaces de revertir a la morfología
original.Carecen total o parcialmente de pared celular, son pleomórficos. Perdieron la capacidad de sintetizarla
de forma espontánea ó inducida (con antibióticos) si éste se retira, generalmente sintetizan su pared. No
presentan esteroles en su membrana citoplásmica. Requieren de medios hipertónicos para poder crecer. Es
posible obtener Formas L de: Bacillus, Salmonella, Shigella, Haemophilus, Proteus, Staphylococcus,
Streptococcus. Se aislaron por primera vez del tracto genitourinario de las glándulas de Bartolinii de un
humano. Descubiertas en el Instituto Lister de Londres en 1935, por Emmy Klieneberger-Nobel, de ahí su
nombre de formas “L”.
 Protoplastos. Son células esféricas que carecen totalmente de pared celular. Se obtienen a partir de bacterias
Gram positivas a las que se les ha quitado la pared por métodos enzimáticos (lisozima) ó por antibióticos que
interfieran con la síntesis de la pared (penicilina).Son osmóticamente sensibles.Para conservarlas hay que
mantenerlas en solución de sacarosa al 20% . Su concentración intracelular es de 0.5M (2 at.).
 Esferoplastos Son células esféricas que presentan restos de pared en forma de parches.Se obtienen a partir de
bacterias Gram negativas a las que se les ha quitado parcialmente la pared por métodos enzimáticos (lisozima) ó
antibióticos que interfieren con la síntesis de pared (penicilina).Son osmóticamente sensibles.Para conservarlas
hay que mantenerlas en solución de sacarosa al 20% . Su concentración intracelular es de 0.5M (2 at.).
 ¿Cual es la utilidad de los protoplastos y esferoplastos? Es un método suave que permite obtener extractos
libres de células y fracciones subcelulares. Para hacer a las células mas fácilmente permeables a DNA exógeno
en experimentos de transformación ej: en ingeniería genética, biología molecular. Fusión de protoplastos para
obtener recombinantes somáticos.
 Características de la pared celular en las arqueas: Ninguna presenta peptidoglicana.Ninguna presenta N-acetil
murámico.Ninguna presenta DAP Diaminopimélico). Ninguna presenta aminoácidos de la serie D. Por tinción
de Gram pueden ser Gram positivas o Gram negativas.
 Tipos de paredes celular en Archaea : Pseudomureína, Heteropolisacárido, Glicoproteína
 Pared de Pseudomureína” : Se presenta en algunas arqueas metanógenas. Es un polímero de NAG ó NA-Gal
unido por enlace β 1-3 al N-acetil talosaminurónico. Presenta cadena laterales de aminoácidos. Presenta
puentes interpeptídicos entre el aminoácido de una cadena y el aminoácido de otra cadena lateral. Todos son
aminoácidos de la serie L. Es resistente a penicilina. Es resistente a la lisozima.
 Pared celular de heteropolisacárido: Se presenta en algunas arqueas halofílicas extremas. Está formada de
galactosamina, ácido glucurónico, glucosa y acetato. Se le ha relacionado químicamente con la condroitina del
tejido conectivo. No es sensibles a agentes que actúan sobre la pared celular de bacterias.
 Pared celular de glicoproteína: Se presenta en arqueas termoacidofílicas y en una arquea halofílica extrema
( Halobacterium salinarum ). Está constituida de un polisacárido y una proteína (rica en aminoácidos ácidos:
ácido aspártico, ácido glutámico). Tiene una carga negativa.CORRESPONDE A LA CAPA S. *glucosa,
galactosamina, galactosa, manosa, ribosa, arabinosa
 Pared de glicoproteína ó Capa S en termofílicas y termoacidófilicas: Habitan en ambientes extremos de
temperatura y pH. Su pared de glicoproteína, contiene una proteína extremadamente resistente en una solución
de detergente a ebullición.
 Arqueas sin pared celular : Thermoplasma y Ferroplasma carecen de una pared celular regular. Crece a
temperaturas de 45 – 60°C y a un pH de 1-2. Tienen una membrana citoplasmática fortalecida con enlaces
tetraéter de glicerol, lipoglucanos y glucoproteína.
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