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I. INTRODUCCION
Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a células, tejidos, fibras, etcétera. Por
su origen: Colorantes naturales, los cuales son extraídos de plantas o animales, y colorantes
artificiales, que son aquellos de minerales procesados y manipulados en el laboratorio.
Químicamente, el colorante está constituido de un componente cromóforo y un auxócromo. El
cromóforo es todo grupo aislado, covalente e insaturado, que tiene una absorción característica en la
región ultravioleta o visible; dicho de otra forma, es la capacidad que tiene la molécula para que sus
electrones absorban energía o luz visible, se exciten y emitan diversos colores de acuerdo con la
longitud de emitida como resultado del cambio en el nivel energético. Cabe mencionar que esta
longitud de onda corresponde al rango de espectro visible. Los auxócromos son grupos funcionales o
radicales que constituyen una molécula y poseen carga parcial positiva; tienen la función de intensificar
la formación de color mediante la acción de grupos de átomos no saturados; su función es desplazar
a los cromóforos hacia longitudes de ondas largas para aumentar la intensidad. Aunque los
microorganismos vivos se pueden observar directamente en fresco al microscopio óptico, la mayoría
de las veces es necesario teñirlos para que por medio del uso de colorantes, sea mucho más fácil su
identificación; además, la presencia de ciertas estructuras, así como su reacción a determinadas
técnicas, nos permite clasificar a las bacterias. Así pues, los colorantes tienen las siguientes funciones:
La membrana citoplasmática, situada debajo de la pared, tiene permeabilidad selectiva frente a las
sustancias que entran y salen de la bacteria. Es soporte de numerosas enzimas, en particular las
respiratorias. Por último, tiene un papel fundamental en la división del núcleo bacteriano. Los
mesosomas, repliegues de la membrana, tienen una gran importancia en esta etapa de la vida
bacteriana.
El núcleoide lleva el material genético de la bacteria; está formado por un único filamento de ácido
desoxirribonucleico (ADN) apelotonado y que mide cerca de 1 mm de longitud (1000 veces el tamaño
de la bacteria).
Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaños y formas. La mayoría presentan un tamaño
diez veces menor que el de las células eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 μm. Sin embargo, algunas
especies como Thiomargarita namibiensis y Epulopiscium fishelsoni llegan a alcanzar los 0,5 mm, En
el otro extremo se encuentran bacterias más pequeñas conocidas, entre las que cabe destacar las
pertenecientes al género Mycoplasma, las cuales llegan a medir solo 0,3 μm, es decir, tan pequeñas
como los virus más grandes.
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos
morfológicos, lo que se conoce como polimorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos
fundamentales de bacterias: cocos, bacilos y espiroquetas.
Esta amplia variedad de formas es determinada en última instancia por la composición de la pared
celular y el citoesqueleto, siendo de vital importancia, ya que puede influir en la capacidad de la
bacteria para adquirir nutrientes, unirse a superficies o moverse en presencia de estímulos.
II. PROCEDIMIENTOS
COLORACIÓN DE LA PARED CELULAR (Método de Robinow)
2.1.1 Material Biológico:
2.1.3 Procedimiento
1. Colocar en una lámina portaobjetos una pequeña suspensión de cultivo bacteriano.
2. Con otro portaobjetos, extender suavemente la suspensión tratando de que se obtenga un extendido
sumamente fino.
3. Sumergir la preparación en el líquido de Bouin por 1 minuto.
4. Lavar con alcohol y agua para eliminar la coloración amarilla del ácido pícrico.
5. Tratar por 20 minutos con la solución de ácido tánico al 10%. Lavar con agua.
6. Colorear con la solución de cristal violeta por 10 segundos.
7. Lavar y secar a medio ambiente.
8. Observar con objetivo de inmersión.
V. ANEXOS
COMPOSICIÓN DEL LÍQUIDO DE BOUIN
Solución acuosa saturada de ácido pícrico 75 mL
Formalina 25 mL
Ácido acético 5 mL
COMPOSICIÓN DEL LÍQUIDO FIJADOR DE SCHAUDINN
Cloruro mercúrico (solución acuosa saturada) 66 mL
Alcohol etílico absoluto 33 mL
Ácido acético glacial 1 mL
VI. CUESTIONARIO
1. Explique el fundamento de las técnicas usadas en la práctica.