TEMA 2: GLUCÓLISIS Y GLUCONEOGÉNESIS

La glucosa en el metabolismo

La glucosa posee una posición central en el metabolismo:

 Es usada por todos los seres vivos
 Es un buen combustible (-2840 kJ/mol)
 Fácil almacenaje en sacarósa y polímeros (glucógeno y almidón)
 Precursor versátil
 En animales y plantas tiene 3 destinos:
o Almacenamiento intracelular / Síntesis de
polisacáridos complejos.
o Oxidación a piruvato vía glucolisis.
o Oxidación a ribosa-5-P vía ruta de las pentosas
fosfato.

Metabolismo de la glucosa
varía en distintos tipos
celulares animales, el más
simple es el del heritrocito
(dibujo superior izquierso) y el
más complejo el de una
neurona (dibujo inferior)

c. Vía Pentosas Fosfato

d. Glucólisis
g. Ciclo de Krebs
h. Glucógenogénesis
i. Glucógenolisis
l. Gluconeogénesis
n. Síntesis de Glucurónido
La entrada de glucosa en la célula es llevada a cabo por transportadores llamados GLUT:
 GLUT1 se localiza en la membrana plasmática de eritrocitos. Independiente de ins.
 GLUT3 se encuentra en la membrana plasmática de las células nerviosas. No está
regulado por insulina. Es necesario un aporte constante.
 GLUT4 se encuentra en la membrana plasmática de
células musculares estriadas. Si no hay insulina, GLUT4 se
localiza en vesículas. Cuando la insulina se une a su
receptor se transmiten señales para fusionar las vesículas
a la membrana plasmática.
 GLUT2 está en la membrana plasmática del hepatocito.
Su transporte es independiente de insulina.

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Glucolisis

2
Balance de la reacción: 1Glc + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi → 2 Piruvato + 2 NADH + 2H+ + 2ATP

Enzimas de la glucolisis

1. Hexokinasa: El aceptor de P puede ser glucosa aunque también otras hexosas como
D-fructosa o D-manosa. El sustrato de las hexokinasas es Mg-ATP, el Mg 2+ hace que
el átomo de P terminal sea una diana más facil. La unión de glucosa produce un gran
cambio conformacional

Esta presente en todas las células (HK I,

II, III y IV). En hepatocitos, la hexokinasa
IV (Glucokinasa) tiene una cinética y una
regulación distinta (alostérica). La
glucokinasa únicamente se activa a
concentraciones altas de glucosa en
sangre, que será cuando el hepatocito
tendrá que catabolizarla o almazenarla.
La hexokinasa se inhibe por Glc-6-P, pero
no la glucokinasa

2. Fosfohexosa isomerasa

Los dobles enlace

C=C terminales son
muy inestables

3
3. Fosfofructosakinasa (PFK)
 La PFK-1 produce Fructosa-1,6-bisfosfato
 La PFK-2 produce Fructosa-2,6-bisfosfato
 Las bacterias y otras plantas tenen una PFK que usa PPi como donador de P.
PFK-1 es una enzima tetramérica central para la regulación de la glicólisis con una
compleja regulación alostérica inducida por altos niveles de ADP (o bajos de ATP),
acumulación de AMP, y por 2,6-bisfosfato. Se inhibe por ácidos grasos y altas
concentraciones de ATP

4. Fructosa 1,6-bifosfato aldolasa

 Clase I (animales y plantas) Usan un intermediario base de Schiff
 Clase II (hongos y bacterias) Usan Zn en lugar de base de Schiff
Tiene una ∆G’° de 23.8 kJ/mol, pero es un paso reversible a las concentraciones de
productos existentes (DHAP y G3P son usados rápidamente y sus concentraciones
se mantiene bajas, lo que permite que la reacción se de lleve a cabo).

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5. Triosa fosfato isomerasa: Usa un mecanismo muy similar a la fosfohexosa isomeras a

6. Gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa:

 La oxidación no es directamente a un carboxilo, sino a un carbonil-fosfato (acil-
fosfato). Éste es un enlace energético que conserva mucha de la energía de la
oxidación.
 La reacción ocurre cuando el gliceraldehído 3-P se une covalentemente a la
enzima, participando un SH de la enzima en la catálisis. El Hg + envenena la
reacción al unirse al SH
 Es importante que el [NAD +] se regenere para evitar que se paralice la glucólisis
 Reactivos sulfidrilo. Inhiben la GA3P-DH al reaccionar con la Cys catalítica,
evitando la formación del hemiacetal. (El mercurio y otros metales pesados ataca
los grupos sulfidrilo de las Cys de centros activos, inactivando las enzimas).
 Compuestos fluoruros reaccionan con PPi precipitando, impidiendo su uso.
 El arsénico previene la síntesis neta de ATP al ser un análogo estructural del Pi
(interviene a este nivel y también en la fosforilación oxidativa). El 1-arsenato, 3-
fosfoglicerato formado es inestable dando 3-fosfoglicerato. Esto permite que la
glucólisis siga sin síntesis neta de ATP

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7. Fosfoglicerato kinasa: Está acoplada a la anterior. Es una fosforilación a nivel de
sustrato.

8. Fosfoglicerato mutasa:
 El intermediario 2,3-bisfosfoglicerato
es necesario a niveles bajos para
mantener un pool activo de la enzima
fosforilada.
Esto se resuelve sintetizandolo a partir
de 1,3-bisfosfoglicerato con una 2,3-
difosfoglicerato mutasa, que también
es una El descenso del precio de un
bien, aumenta la demanda del otro.sa
a 3-fosfoglicerato.
 Los eritrocitos tienen concentraciones
altas de 2,3-bisfosfoglicerato (el 15-25
% de la Glc pasa por aquí) Esta Glc
derivada no generaría ATP de forma
neta (no hay paso por la PGK). La
derivación se amplía con la MIP fosfatasa que deriva el 2,3BPG a 2-
fosfoglicerato. Esta enzima se encuentra en eritrocitos y es muy sensible a pH,
es un regulador alostérico negativo de la unión de O 2 a la hemoglobina
(promueve la liberación de O 2)
o Bajadas del pH (acidosis metabólica) incrementan la actividad MIP fosfatasa,
disminuyendo los niveles de 2,3-BPG
o Subidas del pH (altitud, anemia, hipoxia,...) disminuyen la actividad MIP
fosfatasa y suben los niveles de 2,3-BPG, favoreciendo la liberación de
oxígeno a la célula

9. Enolasa: La deshidratación del 2-fosfoglicerato aumenta la energía del enlace

fosfoéster (la ∆G de hidrólisis pasa de -17.6 kJ/mol a -61.9 kJ/mol). Se inhibe con
fluoruro al formar éste complejos con Mg 2+ y Pi

10. Piruvato quinasa: Requiere K+ y Mn2+/Mg2+.

Produce fosforilación a nivel de sustrato. El piruvato
aparece en forma enólica pero tautomeriza no
enzimáticamente a su forma ceto. Esta tautomería
baja el valor del ∆G, aumenta la entropía.

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Entrada de monosacáridos y disacáridos en la glucólisis

 Disacáridos: Se hidrolizan a monosacáridos por enzimas disacarasas presentes en

la superficie externa de células del epitelio intestinal (enterocitos)
 Monosacáridos: Se transportan activamente a las células epiteliales y luego son
transferidas a la sangre, en cualquiera de ellos el primer paso que sufrirán es una
fosforilación para evitar su salida de la célula.

 Fructosa
o En músculos y riñones la fructosa es mayormente fosforilada por la hexokinasa
en Fru 6-fosfato.

o En el hígado, la fructokinasa fosforila en el carbono 1. Posteriormente la

fructosa 1-fosfato se convierte en DHAP y gliceraldehído por la fructosa 1-
fosfato aldolasa. El gliceraldehído se fosforila por la triosa kinasa en GA3P

Por esta vía se evitan dos

puntos claves de regulación:
la HK y la PFK-1

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 Galactosa
o La galactosa es fosforilada en el carbono 1 por
la enzima galactokinasa, la galactosa 1-fosfato
se convierte en su epímero en el carbono 4,
glucosa 1-fosfato a partir de un grupo de
reacciones en las que la uridina difosfato
(UDP) tiene un papel de coenzima. Las otras
dos enzimas implicadas son son la UPD- (fos fohexosa
muta sa)
glucosa galactosa 1-fosfato uridiltransferasa --- Gl ucosa 6-P
(UDP-Glucosa + Galactosa 1-P para dar UDP-
Galactosa + Glucosa 1-P) y la UDP-glucosa 4-
epimerasa (convierte la UDP-Galactosa en
UDP-Glucosa). Finalmente la Glucosa 1-P
continua la glucólisis con la enzima
fosfohexosa mutasa que la convierte en
Glucosa 6-P.
o Deficiencia en alguna de estas tres enzimas
causa galactosemias
o Causa cataratas, retardo en el crecimiento,
anormalidades en el habla o deficiencias
mentales. Generalmente se trata eliminando
Gal de la dieta. Los casos más severos son las
deficiencias en la transferasa, a veces fatales
incluso con restricción de Gal en la dieta

Fermentación

En condiciones aerobias el piruvato pasará a Acetil-CoA y posteriormente irá al Ciclo de

Krebs. Se necesita regenerar NAD+ para continuar obteniendo energía. En organismos
anaerobios o en condiciones de anoxia (músculo en ejercicio intenso y prolongado,
plantas sumergidas...) no se puede usar el O 2 para hacerlo. En estas condiciones se usan
con frecuencia moléculas orgánicas como aceptores de esos electrones (fermentación).
La variedad de fermentaciones es amplia. Los sistemas eucarióticos usan la
fermentación láctica y la alcohólica.

1. Fermentación láctica: En esta fermantación el piruvato es el aceptor último de

electrones. Se da en eritrocitos (no tiene orgánulos) y el músculo en ejercicio, el
piruvato es catalizado por la lactato deshidrogenasa, secretando lactato al torrente
sanguíneo. Este lactato es reciclado en el hígado de vuelta a glucosa (ciclo de Cori).
Esta enzima es un tetrámero con dos tipos de subunidades (M y H). M predomina
en el músculo esquelético y H en el corazón. El patrón de estas enzimas en la sangre
se usa(ba) para determinar infartos de miocardio, hepatitis infecciosa y otras
enfermedades, puesto que son enzimas celulares y su aparición en sangre implica
la lisis celular.

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2. Fermentación alcohólica: Lo llevan a cabo levaduras y algunos otros
microorganismos. Conlleva una descarboxilación del piruvato con la ayuda de
tiamina pirofosfato (TPP) y la posterior reducción del acetaldehído en etanol. El
primer paso es catalizado por la piruvato descarboxilasa (no presente en
vertebrados) y el segundo por la alcohol deshidrogenasa (presente en la mayoría de
organismos).

 TPP: Es una coenzima derivada de la vitamina B1, su deficiencia causa beriberi.

Juega un papel importante en la rotura de enlaces adyacentes a carbonilos
(descaboxilación de α-cetoácidos, o transferencia de de grupos acetaldehído).

 Piruvato descarboxilasa • Alcohol deshidrogenasa

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Gluconeogénesis

La glucosa es central como esqueleto carbonado para sintetizar moléculas orgánicas. En

animales, hay tejidos que dependen exclusivamente de obtener energía de la glucosa
(tejido nervioso, eritrocitos, médula renal,...). Ha de existir una maquinaria biosintética
capaz de asegurar un aporte estable de glucosa: gluconeogénesis
En mámíferos ocurre principalmente en el hígado y en córtex renal (puesto que en el
riñon se produce la eliminación de compuestos nitrogenados, estos compuestos se
llevan en sangre mediante glutamina, tras perder dos grupos amonios se formara
oxalacetato ). Tiene lugar en el citosol, aunque algunos precursores pueden venir de la
mitocondria. Existen procesos como el ciclo de Cori o el ciclo de la Alanina cuyo fin es
volver a recuperar glucosa de los residuos de otras rutas metabólicas :

 Ciclo de Cori: involucra la utilización del lactato producido por músculo y eritrocitos)
como fuente de carbono para la gluconeogénesis hepática. De esta forma el hígado
transforma el lactato en
glucosa para ser utilizada en
otros tejidos. El lactato
producido por fermentación
difunde por el torrente
sanguíneo, es incorporado al
hígado y convertido en
glucosa, la cual es liberada a la
circulación sanguínea.

 Ciclo de la Alanina: La alanina procede mayormente de proteínas de masa muscular

y su degradación da lugar a piruvato y un grupo amino (juntos forman Alanina). Se
da en músculos esqueléticos sometidos a una contracción vigorosa donde se
produce piruvato y lactato, además de amoníaco a partir de la degradación de
proteínas. El Ciclo de la Alanina es
una ruta muy activa en condiciones
de ayuno crónico o en dietas ricas en
proteínas. No obstante este ciclo
tiene dos inconvenientes ya que el
grupo amino es muy tóxico y debe
ser transportado por la alanina. A la
llegada al hígado la Alanina se
produce Piruvato que seguirá la
gluconeogénesis y amonio que se
convertira en urea y será eliminada
pasando por los riñones.

La gluconeogénesis se produce de manera similar a la glucólisis pero de manera inversa,

únicamente difiere en las enzimas que no realizan reacciones reversibles:
DHAP
⇅

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Gluc → Gluc-6-P ⇄ Fruc-6-P → Fruc-1,6-BP ⇄ GA3P ⇄ 1,3BPG ⇄ 3PG ⇄ 2PG ⇄ PEP → Pir.

Bypass 1: Conversión de Piruvato en PEP

En eucariotas require de enzimas mitocondriales y citosólicas. Existen dos vías; una

predomina cuando el precursore es piruvato o alanina y la otra cuando el precursor es
lactato.

La alanina se convierte en piruvato por transaminación y luego

la piruvato carboxilasa (mitocondrial) convierte el piruvato en
oxalacetato (usando biotina unida covalentemente como
cofactor) La biotina actúa como carrier de bicarbonato
activado. La piruvato carboxilasa es la primera enzima
regulatoria de la gluconeogénesis, requiriendo acetil-CoA
como efector positivo.

La piruvato carboxilasa tiene dos centros activos:

Sitio 1: activación del CO2 . El bicarbonato pasa a CO2, que se une
a la biotina.
Sitio 2: incorpora CO2 en el piruvato, el anillo de la biotina gira
180º y pone el CO2 en el sitio activo 2

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La mitocondria no tiene transportadores de oxalacetato
(OAA), por lo que para exportarlo ha de ser reducido a
malato por la malato deshidrogenasa consumiendo
NADH, sólo posible a concentraciones muy bajas de OAA.
El malato sale de la mitocondria con transportadores
específicos donde se reoxida a OAA por una malato
deshidrogenasa citosólica formando NADH en el citosol.
Esta vía indirecta permite sacar equivalentes redox de la
mitocondria que luego serán necesarios para progresar
en el gluconeogénesis.
El OAA se convierte a PEP por la
fosfoenolpiruvato carboxikinasa,
donde el GTP dona un Pi

Existe un segundo bypass cuando predomina lactato. Usa el

lactato producido en el músculo y eritrocitos, lo que ya deja
equivalentes redox en el citosol (oxidación de lactato a piruvato).
El piruvato es transportado a la mitocondria y allí la piruvato
carboxilasa lo lleva a OAA. Este OAA se lleva directamente a PEP
por una PEP carboxikinasa mitocondrial y el PEP sale de la
mitocondria. PEPCK sirve para reciclar los esqueletros
nitrogenados de glutamina en el riñon y en adipocitos el OAA se
lleva hasta DHAP que permitirá en última estancia formar triacilglicéridos.
Bypass 2: Conversión de Fru 1,6- bisfosfato a Fru 6-fosfato
Está catalizada por la Fructosa 1,6-bisfosfatasa (FBPase-1), hidrolizando
irreversiblemente el P en C1, es decir, se libera Pi

Bypass 3: Conversión de Glu 6-fosfato a Glucosa

Procede por hidrólisis del fosfoéster catalizada por la glucosa 6-fosfatasa. Se encuentra
en la cara del luminal del RE (si estuviese en el citosol convertiria toda la glucosa 6-P) de

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hepatocitos y células renales. Así evitamos gartar ATP de forma innecesaria entre la
hexokinasa y la glucosa 6-fosfatasa.

Otros sustratos gluconeogénicos

 Aminoácidos. Todos los aminoácidos, salvo Leu y Lys, son glucogénicos
integrándose en el ciclo de Krebs y siendo llevados a OAA.
 Glicerol. Procede del catabolismo de triglicéridos. Requiere de una fosforilación
seguida de una deshidrogenación para dar DHAP
 Propionato. Procede del catabolismo de ácidos grasos de número impar de C e
integrándose en el ciclo de Krebs como succinil-CoA. Los ácidos grasos de número
de C par en animales NO es gluconeogénico, en plantas si gracias al ciclo del
glioxalato.

Consumo de EtOH
El EtOH produce hipoglucemia. Se cataboliza en el hígado por la alcohol deshidrogenasa,
aumentando la concentración de NADH. Esto aumenta el ratio NADH/NAD+ y desplaza
el equilibrio de la lactato deshidrogenasa, de la GA3P deshidrogenasa, y de la malato
deshidrogenasa citosólica. Así ni lactato ni OAA están disponibles para la
gluconeogénesis.

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