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Respuestas diferenciales de azúcar, ácidos orgánicos y antocianinas a la

modulación fuente-sumidero en las uvas Cabernet Sauvignon y Sangiovese


La composición de bayas de uva se compone principalmente de metabolitos primarios y secundarios. Ambos son
sensibles al medio ambiente y a la gestión vitícola. Como consecuencia, el cambio climático puede afectar la
composición de las bayas y modificar la calidad y la tipicidad del vino. Las técnicas de eliminación de hojas pueden
afectar la composición de las bayas al modular el equilibrio de la fuente al sumidero y, a su vez, pueden mitigar
algunos efectos no deseados debido al cambio climático. El presente estudio investigó el equilibrio entre los
parámetros tecnológicos de madurez, como los azúcares y los ácidos orgánicos, y los parámetros de madurez
fenólica, como las antocianinas, en respuesta a la modulación fuente-sumidero. Los perfiles de azúcar, ácido
orgánico y antocianinas se compararon bajo dos niveles de suministro de carbono contrastantes en bayas de cv.
Cabernet Sauvignon y Sangiovese se recolectaron en 9 y 14 etapas de desarrollo respectivamente.
Adicionalmente, Se monitoreó la tasa de intercambio de carbono neto de la cubierta completa para las vides
Sangiovese y se usó un modelo matemático para calcular el equilibrio entre la fijación de carbono y la acumulación
de azúcar en las bayas. La limitación de carbono no afectó ni el tamaño de la baya ni la concentración de ácidos
orgánicos en la cosecha. Sin embargo, redujo significativamente la acumulación de azúcares y antocianinas totales
en ambos cultivares. Lo más interesante es que la limitación de carbono disminuyó la concentración total de
antocianinas en un 84,3% en comparación con el control sin limitación de fuente, mientras que disminuyó la
concentración de azúcar solo en un 27,1%. Esto sugiere que la limitación de carbono condujo a un fuerte
desequilibrio entre azúcares y antocianinas. Además, la limitación de carbono afectó los perfiles de antocianinas
de una manera dependiente de cultivar. El análisis matemático del balance de carbono indicó que las bayas usaron
una mayor proporción de carbono fijo para la acumulación de azúcar bajo limitación de carbono (76.9%) que bajo
suficiencia de carbono (48%). Por lo tanto, bajo limitación de carbono, la baya de uva puede manejar el destino
metabólico del carbono de tal manera que la acumulación de azúcar se mantenga a expensas de los metabolitos
secundarios.

Introducción

La vid es un cultivo perenne importante que se El cambio climático ya afecta la fisiología de la vid (
cultiva en muchos países (7519 mha en 2013; OIV, Schultz, 2000 ), causando una mayor concentración
2014 ). Sus frutos se utilizan principalmente para la de azúcar y, en consecuencia, un mayor contenido de
elaboración del vino, pero también para jugos, pasas alcohol en los vinos ( Duchêne y Schneider, 2005 ;
y consumo fresco. La composición de las bayas de Bock et al., 2013 ), ácidos orgánicos reducidos y
uva, que es importante para los viticultores y la antocianinas ( Barnuud et al., 2013 , 2014 ) y perfiles
industria del vino, está determinada principalmente de aroma modificados ( Keller, 2010a ). A largo plazo,
por azúcares, ácidos orgánicos y diversos la sostenibilidad de la producción de vino en varias
metabolitos secundarios (por ejemplo, taninos, regiones vitivinícolas puede verse amenazada por el
flavonoles, antocianinas, precursores de aromas y cambio climático ( Schultz y Jones, 2010 ; Hannah et
compuestos volátiles; Conde et al., 2007 ). La al., 2013) Para enfrentar tales desafíos, los
acumulación de estos componentes a lo largo del mecanismos que controlan la acumulación de
desarrollo y maduración de las bayas depende del metabolitos relacionados con la calidad en las uvas
genotipo y del medio ambiente ( Jackson y Lombard, deben entenderse mejor. Esto permitirá promover
1993 ). prácticas vitícolas innovadoras que resulten en una
adaptación más fácil de la producción de vino al ajuste fino de la composición de antocianinas tiene
cambio climático ( van Leeuwen et al., 2013 ). importantes impactos en el tono del color y la
estabilidad del color de los vinos resultantes ( Mazza,
Entre las diferentes prácticas vitícolas que afectan la
1995 ). La modulación fuente-sumidero afecta la
composición de las bayas ( Keller, 2010a ; Dai et al.,
coloración de las bayas (Weaver, 1963 ; Kliewer y
2011 ; Kuhn et al., 2014 ), la modulación fuente-
Weaver, 1971 ; Petrie et al., 2000a ), y recientemente
sumidero por poda de verano (es decir, eliminación
sus efectos sobre el contenido y la composición de
de hojas o brotes y adelgazamiento de racimos) es
antocianinas ( Guidoni et al., 2008 ; Pastore et al.,
una herramienta importante eso puede controlar la
2011 , 2013 ; Filippetti et al., 2015 ) llamaron la
relación entre rendimiento y calidad, y ajustar la
atención de muchos grupos de investigación. Por
composición química compleja de la uva ( Kliewer y
ejemplo, Wu et al. (2013) mostraron que retener dos
Dokoozlian, 2005 ). Por ejemplo, la concentración de
hojas solo en un brote ceñido con un racimo inhibía
azúcar de bayas a menudo se correlaciona
completamente la coloración de las bayas. Además,
positivamente con la relación área / rendimiento de
Guidoni et al. (2008)informaron que las antocianinas
la hoja cuando la relación está por debajo de un valor
totales se redujeron por limitación de fuente, con
umbral de aproximadamente 1 m 2 / Kg de masa de
antocianinas dihidroxiladas más sensibles que las
fruta ( Kliewer y Dokoozlian, 2005 ; Duchêne et al.,
trihidroxiladas en el cv. Bayas Nebbiolo. Sin
2012) Por encima de este valor, la concentración de
embargo, otros autores recientemente demostraron
azúcar generalmente alcanza una meseta y se vuelve
que una limitación de la fuente posterior al envero
menos sensible a la modulación fuente-sumidero (
resultante del recorte de brotes ( Filippetti et al.,
Kliewer y Dokoozlian, 2005 ). Las respuestas de los
2015 ), la eliminación de las hojas por encima de los
ácidos orgánicos a la modulación fuente-sumidero se
racimos ( Palliotti et al., 2013b ; Poni et al., 2013 ) o
han estudiado menos a fondo, y los informes
tarde de temporada de antitranspirantes ( Palliotti et
contradictorios mostraron que una proporción
al., 2013a) redujo significativamente la velocidad de
menor de área foliar / rendimiento causó un
acumulación de azúcar, pero no afectó la
aumento ( Wolpert et al., 1983 ; Ollat y Gaudillere,
concentración de antocianinas de bayas en la
1998 ; Wu et al. al., 2013 ), disminución ( Bravdo et
cosecha. Como las técnicas de modulación fuente-
al., 1985 ) o falta de respuesta ( Reynolds et al., 1994
sumidero también producen modificaciones
; Parker et al., 2015 ) de ácidos orgánicos en
concomitantes en el microclima de la zona de fruta
comparación con una alta relación hoja /
(es decir, los regímenes de luz y temperatura), los
rendimiento.
resultados deben interpretarse con precaución. Está
Además de los metabolitos primarios, los bien establecido que la temperatura afecta
metabolitos secundarios (p. Ej., Taninos, flavonoles, significativamente la acumulación de antocianinas (
antocianinas, precursores de aroma y compuestos Spayd et al., 2002 ; Pereira et al., 2006 ; Mori et al.,
volátiles) también juegan un papel esencial en la 2007 ). Por lo tanto, los experimentos que se
configuración de la calidad y tipicidad del vino. En controlan con mayor precisión y evitan la confusión
particular, las antocianinas son responsables del entre los efectos de la modulación fuente-sumidero
color de la uva, que es un determinante importante y el microclima son necesarios para cuantificar la
del color del vino. Las antocianinas de uva derivan de respuesta real de las antocianinas a la disponibilidad
cinco antocianidinas: cianidina (Cy), delfinidina (Dp), de carbono.
peonidina (Pn), petunidina (Pt) y malvidina (Mv).
La acumulación de carbono en los metabolitos
Tienen diferentes patrones de hidroxilación (formas
primarios y secundarios está interconectada y
di o trihidroxiladas), metilación, y pueden
resulta de una red metabólica complicada. Por
modificarse aún más por acilación ( Mazza, 1995 ). El
ejemplo, los niveles de azúcar se correlacionan
positivamente con los niveles de antocianinas totales influencias negativas del cambio climático ( Keller,
( Vitrac et al., 2000 ; Dai et al., 2014 ), pero se 2010a ).
correlacionan negativamente con los ácidos
Por lo tanto, el presente estudio tiene como objetivo
orgánicos ( Keller, 2010b ). Curiosamente, la
cuantificar las sensibilidades relativas de los
acumulación de azúcares y antocianinas puede ser
diferentes compuestos de bayas (azúcares, ácidos
desacoplada por condiciones ambientales como la
orgánicos y antocianinas) a los cambios en la
alta temperatura ( Sadras y Moran, 2012 ). En
modulación fuente-sumidero bajo condiciones
contraste, el efecto de la modulación fuente-
controladas o semi-controladas. El monitoreo de la
sumidero en el desacoplamiento de azúcar-
tasa de fijación de carbono de todo el dosel y el perfil
antocianina parece más complicado ( Sadras y
dinámico de los metabolitos nos permitió realizar un
Moran, 2012 ). Se ha informado que la relación
análisis cuantitativo de la demanda y el suministro de
antocianina: azúcar aumenta ( Guidoni et al., 2002),
carbono, y obtener información detallada sobre el
disminuido ( Sadras et al., 2007 ), o sin cambios (
equilibrio fuente-sumidero. Además, un análisis
Petrie y Clingeleffer, 2006 ) al aumentar la relación
detallado de HPLC nos permitió comparar los efectos
fuente-sumidero. Los mecanismos subyacentes a
de la modulación fuente-sumidero en los cambios de
esta diversidad de respuestas justifican una mayor
desarrollo en los perfiles de antocianinas en dos
investigación. Se han desarrollado varias teorías en
cultivares distintos, Cabernet Sauvignon y
la literatura para describir la relación entre los
Sangiovese.
metabolitos primarios y secundarios en las plantas, y
las dos más relevantes son la hipótesis del balance de
carbono-nutrientes (CNB) y la hipótesis del balance
de diferenciación de crecimiento (GDB) (revisado en Materiales y métodos
Koricheva et al. al., 1998) El CNB predice que las Se realizaron dos experimentos con cv. Cabernet
concentraciones de metabolitos secundarios Sauvignon en Burdeos (latitud 44 ° 46 ′ 46 ′ ′ N,
basados en carbono disminuirán en los casos en que longitud 00 ° 34 ′ 01 ′ ′ O), Francia, y cv. Sangiovese
la fijación de carbono sea más reducida que el en Piacenza (latitud 45 ° 02 ′ 52 ′ ′ N, longitud 9 ° 42 ′
crecimiento, como resultado de la disminución de la 2 ′ ′ E), Italia.
reserva de carbono disponible para la asignación a la
producción de metabolitos secundarios. GDB Material vegetal y muestreo
proporciona una predicción similar, y un metanálisis Exp 1. Cabernet Sauvignon
mostró que ambas hipótesis parecen ser válidas para
describir la dependencia de los metabolitos Esquejes fructíferos hechos de un brote vertical con
secundarios basados en C totales, particularmente un racimo de cv. El Cabernet Sauvignon se preparó
los compuestos derivados de fenilpropanoides como se describe en Mullins y Rajasekaran (1981) y
(incluidas las antocianinas) en la disponibilidad de se cultivó en un invernadero con luz natural y semi-
carbono en las hojas de la planta leñosa ( Koricheva controlado con control químico de enfermedades
et al., 1998) Si los azúcares y las antocianinas tienen aplicado cada 2 semanas. Las condiciones
sensibilidades diferentes a la modulación fuente- ambientales (temperatura del aire, radiación a nivel
sumidero, dicha desincronización puede ayudar a del dosel y humedad relativa) se registraron cada
definir una ventana de relaciones fuente-sumidero, hora durante todo el experimento (Figura
dentro de la cual los azúcares se reducen mientras complementaria S1).
las antocianinas no se ven afectadas. Esto
Treinta esquejes de fructificación homogéneos se
proporcionaría pistas valiosas para mitigar las
sometieron a dos proporciones de fuente a sumidero
1 semana antes del envero; un grupo de 15 plantas
tenía 12 hojas por racimo por vid (12L) mientras que uniformes en un diseño completamente al azar a los
las vides restantes tenían tres hojas por racimo por siguientes dos tratamientos 1 semana antes del
vid (3L). A los 63 días después de la floración (DAF), envero: tres hojas por racimo (brote) o 12 hojas por
las hojas debajo del racimo basal se eliminaron en racimo (brote). Como en el experimento de Cabernet
ambos tratamientos para estandarizar los efectos del Sauvignon, a 40 DAF, las hojas debajo del racimo
microclima; por lo tanto, sobre el racimo, se basal se eliminaron en ambos tratamientos para
mantuvieron 3 y 12 hojas, produciendo un total de 7 estandarizar los efectos del microclima; por lo tanto,
y 16 nodos por brote para los tratamientos de 3L y sobre el racimo, se mantuvieron 3 y 12 hojas, para el
12L, respectivamente. Las hojas restantes y todos los tratamiento de 3L y 12L, respectivamente. Los brotes
brotes secundarios se eliminaron durante el período se recortaron a 8 y 16 nodos por brote, para
de medición. Las plantas se asignaron tratamiento de 3L y 12L, respectivamente. Las hojas
aleatoriamente a tres bloques y cada bloque estaba restantes y todos los brotes secundarios se
compuesto por cinco plantas de cada tratamiento. eliminaron durante todo el período de medición.

Las bayas se tomaron muestras nueve veces a Se tomaron muestras de bayas 14 veces a intervalos
intervalos de 1 semana desde 1 semana después del de 1 semana desde 1 semana antes del tratamiento
tratamiento (70 DAF) hasta 126 DAF. Para asegurar hasta 8 semanas después del tratamiento, y luego a
la captura de la madurez en las vides tratadas con 3L, intervalos de 4 días para una mejor madurez de
la última fecha de muestreo correspondió a una captura. En cada fecha de muestreo, se tomaron
etapa de madurez excesiva. En cada fecha de muestras de tres bayas de la parte superior y media
muestreo, se tomó una muestra de una baya de la de un solo grupo y se agruparon las 24 o 27 bayas de
parte superior y la mitad de un solo grupo, y las 10 8 o 9 grupos (brotes) de una vid determinada bajo un
bayas resultantes de cinco grupos (vides) de un tratamiento para formar una réplica biológica. Se
tratamiento dado dentro de una parcela se obtuvieron cuatro réplicas biológicas para cada
agruparon para formar una réplica biológica. Se tratamiento en cada fecha de muestreo. En la
obtuvieron tres réplicas biológicas para cada cosecha, todas las bayas restantes de una vid fueron
tratamiento en cada fecha de muestreo. En la muestreadas, contadas y pesadas.
cosecha, todas las bayas restantes fueron
Pretratamiento de bayas
muestreadas, contadas y pesadas.
Las bayas muestreadas de ambos experimentos se
Exp 2. Sangiovese
colocaron inmediatamente en un tubo previamente
El experimento se realizó en cv. Podados con caña de pesado y se colocaron en nitrógeno líquido. Los
4 años de edad. Vides Sangiovese injertadas en tubos se volvieron a pesar después de una
portainjertos M3 y cultivadas al aire libre en macetas congelación profunda para calcular el peso fresco de
de 40 L. Las macetas se llenaron con una mezcla de las bayas y luego se almacenaron a -80 ° C para su
arena, marga y arcilla (65, 20 y 15% en volumen, posterior análisis bioquímico. Las bayas almacenadas
respectivamente) y se mantuvieron bien regadas en -80 ° C se descongelaron ligeramente y se
durante la temporada de prueba. Cada vid tenía una separaron rápidamente en la piel, pulpa y semillas en
caña fructífera de 1 m de largo con 8–9 yemas el laboratorio. La piel y la pulpa se trituraron
latentes. Se aplicó el adelgazamiento de los brotes inmediatamente en polvo fino en nitrógeno líquido
para retener un brote principal por nodo y, en cada usando un molino de bolas MM200 (Retsch, Haan,
brote, solo se mantuvo el grupo basal. Las vides se Alemania).
organizaron a lo largo de una sola fila, orientada
Azúcares y ácidos orgánicos
verticalmente, orientada hacia el NE-SW de 35 ° y
con formación de seto. Se asignaron ocho vides
Una parte alícuota de 500 mg de polvo fino de pulpa determinó midiendo la superficie de cada lámina con
se extrajo secuencialmente con etanol (80 y 50%), se un medidor LA (LI-3000A, LI-COR Biosciences,
secó en Speed-Vac y se redisolvió en 2,5 ml de agua Lincoln, NE, EE. UU.).
desionizada. El contenido de glucosa y fructosa se
Concentración de clorofila
midió enzimáticamente con un lector automático de
microplacas (Elx800UV, Biotek Instruments Inc., Se midieron seis hojas por planta para vides de 12 l y
Winooski, VT, EE. UU.) De acuerdo con el método de tres hojas por planta para vides de 3 l utilizando el
Gomez et al. (2007) . El contenido de ácido tartárico medidor portátil de clorofila SPAD 502 (Minolta
se evaluó mediante el método colorimétrico basado Corp., Ramsey, NJ, EE. UU.). En cada hoja, se tomaron
en reacciones de vanadato de amonio ( Pereira et al., cinco lecturas SPAD en cada lóbulo de la hoja y luego
2006 ). El ácido málico se determinó utilizando un se promediaron.
método espectrofotométrico acoplado a enzimas
que mide el cambio en la absorbancia a 340 nm Intercambio de gas de una hoja
desde la reducción de NAD + a NADH ( Pereira et al., Las tasas netas de fotosíntesis (P n ),
2006 ). evapotranspiración (E) y conductancia estomática (g
Análisis de antocianinas s ) de seis hojas por planta se midieron solo en el
experimento Sangiovese a 95 DAF usando un sistema
Una parte alícuota de 500 mg de polvo de piel de de fotosíntesis portátil CIRAS-2 (PP Systems,
bayas se liofilizó durante 72 h y el polvo seco (\ sim Amesbury, MA, ESTADOS UNIDOS). En cada parra, se
50 mg) se extrajo en 1,0 ml de metanol que contenía eligieron dos brotes en posiciones basales y apicales
HCL al 0,1% (v / v). Los extractos se filtraron a través a lo largo de la caña y, en cada brote, se midieron en
de un filtro de jeringa de polipropileno de 0,45 μm secuencia rápida tres hojas maduras ubicadas en las
(Pall Gelman Corp., Ann Harbour, MI, EE. UU.) Para el posiciones basal, mediana y apical del tallo principal.
análisis por HPLC. Cada antocianina individual se Las lecturas se realizaron en las horas de la mañana
analizó como se describe en Hilbert et al. (2003) y (10 h 00–12 h 00) bajo luz de saturación constante
Acevedo De la Cruz et al. (2012) con HPLC. La (≈1500 μmol m -2 s -1) impuesta con una lámpara
cuantificación se llevó a cabo mediante la integración externa adicional montada en la parte superior de la
del área de pico a 520 nm, y se usó el estándar cámara de la hoja. Las mediciones se tomaron a
Malvidin-3-glucósido (Extrasynthèse, Lyon, Francia) humedad relativa ambiental y el flujo alimentado a
para cuantificar la concentración de antocianina. la cámara de hoja ancha ( tamaño de ventana de 4,5
cm 2 ) fue de 300 ml min -1 . Para asegurar la
Medición del área de la hoja
estabilidad de la entrada de referencia CO 2
Para el experimento de Cabernet Sauvignon, se concentración [CO 2 ], un CO 2 minicartridge se
estimó el área foliar (LA) utilizando la relación entre utilizó para proporcionar control automático de
el LA específico (m 2 área fresca gDW -1 ) y el peso entrada [CO 2 ] en 380 mmol L -1 .
seco total de la hoja como se describe en Castelan-
Intercambio de gas de toldo entero
Estrada et al. (2002) . Los LA de las hojas eliminadas
para el tratamiento con 3L se determinaron al inicio Las mediciones de la tasa de cambio de CO 2 neta del
del tratamiento y los LA completos de la planta se dosel completo (NCER) se realizaron solo en el
determinaron para ambos tratamientos al final del experimento Sangiovese utilizando el sistema
experimento. multicámara reportado en Poni et al. (2014) con
soplantes centrífugos de corriente alterna (Vorticent
Para el experimento Sangiovese, se midió LA en las
C25 / 2M Vortice, Milán, Italia) que suministran un
hojas que se retiraron el día del tratamiento y
flujo de aire máximo de 950 m 3 h -1 ; Cámaras de
después de la cosecha de todas las bayas. LA se
polietileno de plástico flexible que permiten 88% de la salida de cada cámara se midieron mediante un
transmisión de luz, 6% de enriquecimiento de luz sensor de humedad HIH-4000 (Honeywell, Freeport,
difusa y sin alteración del espectro de luz. El sistema IL, EE. UU.) Montado aguas arriba del EGM4.
también presenta un CO 2 absoluto de canal único
Análisis de los datos
CIRAS-EGM4analizador de gas infrarrojo (PP
Systems, Amesbury, MA, EE. UU.) con un rango de Todos los análisis de datos se realizaron con el
medición de 0–1000 partes por millón y un software R ( R Development Core Team, 2010 ).
registrador de datos CR1000 conectado a un Student t -test fue usado para verificar las diferencias
multiplexor AM16 / 32B (Campbell Scientific, entre las dos relaciones fuente-sumidero en cada
Shepshed, Reino Unido). Para facilitar la mezcla de etapa de desarrollo.
aire y asegurar una mayor estabilidad en la
concentración de entrada de CO 2 , el aire fue El análisis de asignación de carbono se realizó como
forzado a través de un tanque de almacenamiento sigue. Primero, el carbono acumulado en las bayas
(500 L) antes de ser dirigido a las cámaras. El cambio durante el desarrollo se calculó en función de la
del muestreo de aire de una cámara a otra se logró a concentración de hexosa y el peso fresco de la baya
intervalos de tiempo programados (90 s) utilizando con un coeficiente de transformación de carbono de
un conjunto de válvulas solenoides (SIRAI, Padova, 0.4 g de carbono g -1 de hexosa. En segundo lugar, el
Italia); El caudal de aire a cada cámara se controló carbono total acumulado (C) en las bayas por vid se
mediante una válvula de mariposa (Ghibson, ajustó a la siguiente curva sigmoidea ( Sadras et al.,
Monteveglio, Italia) y se midió con un manómetro 2008 ):
digital Testo 510 (Farnell, Lainate, Italia) utilizando el C = Cm a x1 + mi[t0 0- tsi]
método de restricción de flujo ( Osborne, 1977) El
caudal alimentado a las cámaras se ajustó a 7,1 l / sy donde t es el número de días después de la floración,
se mantuvo hasta el tratamiento de eliminación de la C max es la cantidad máxima de carbono (g), t 0 es el
hoja, cuando el caudal se cambió a 5 l / s. El NCER de número de días después de la floración cuando la
dosel completo por vid (μmol de CO 2 / s) y por cantidad de carbono es la mitad del máximo, y b
unidad LA (μmol de CO 2 / m 2 s) se calculó a partir representa la duración de la acumulación de carbono
de los caudales y los diferenciales de CO 2 de 0.25 C max a 0,75 C máx . Tercero, la tasa de
posteriores. acumulación de carbono (g de carbono / día) se
calculó utilizando la derivación de primer orden de la
Las cámaras se instalaron en cada parra y se curva sigmoidea. Finalmente, la relación entre el
operaron continuamente las 24 horas del día desde carbono acumulado de las bayas y el carbono
una semana antes del tratamiento (2 de julio) hasta fotosintetizado (obtenido de la medición del
95 días después de la floración (1 de septiembre). La intercambio de gases del dosel completo) se
temperatura del aire ambiente (entrada) y la cuantificó por su relación para estimar el equilibrio
temperatura del aire en la salida de cada cámara se de carbono de la oferta frente a la demanda.
midieron mediante termopares blindados tipo PFA-T
de 1,2 mm de diámetro con aislamiento de teflón
(Omega Engineering, Stamford, CT, EE. UU.), Y se Resultados
midió la radiación directa y difusa con un sensor de
luz solar BF2 (Delta-T Devices, Ltd, Cambridge, Relación de hoja a fruta
Inglaterra) colocado horizontalmente en la parte
Como se esperaba, la remoción de hojas redujo
superior de una estaca de soporte al lado de las
efectivamente el LA total por vid en el tratamiento
cámaras que encierran los toldos. La humedad
de 3L en Cabernet Sauvignon y Sangiovese (Tablas 1
relativa ambiental (entrada) y la humedad relativa en
y 2 ). También resultó en una relación hoja-fruta (LA en las bayas Sangiovese (Figura 1B) En la cosecha, las
/ F) significativamente menor en tratamientos de 3L bayas Sangiovese eran más grandes que las de
que en 12L en ambos cultivares. Todas las vides de FIGURA 1. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre el peso de la baya
estacional de las vides Cabernet Sauvignon (A) y Sangiovese (B) que tienen tres
hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L) . La flecha sólida indica la fecha de la
modulación fuente-sumidero. Las barras verticales indican SE ( n = 3 para
Cabernet Sauvignon y n = 4 para Sangiovese).

TABLA 1. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre el área


de la hoja (LA), la relación área-rendimiento de la hoja y el
contenido de clorofila de la hoja (SPAD) de las vides Cabernet
Sauvignon.

3L tenían una relación LA a rendimiento inferior a 1,0


m 2 / Kg. Por otro lado, tanto las lianas Cabernet Cabernet Sauvignon. Las bayas de ambos cultivares
Sauvignon de 12 l como las vides Sangiovese tuvieron duplicaron su tamaño desde el envero hasta la
un LA / F de 3.98 m 2 / Kg y 1.15 m 2 / kg, madurez. Además, se produjo la deshidratación de
respectivamente (Tablas 1 y 2 ). las bayas en las bayas de Cabernet Sauvignon, como
lo indica la disminución en el peso fresco de las bayas
de 112 DAF a 126 DAF (Figura 1A ).
Peso de la baya
En Cabernet Sauvignon, el tratamiento de 3L limitó Concentración de azúcar
el aumento en el tamaño de la baya que Las concentraciones de hexosa (glucosa + fructosa)
normalmente ocurre entre 80 y 90 días después de de las bayas Cabernet Sauvignon y Sangiovese se
la floración (DAF), pero extendió la duración del redujeron significativamente por la limitación de la
crecimiento a 110 DAF, cuando las bayas en fuente (Figura 2 ). Los efectos negativos de la
condiciones de 12L ya alcanzaron su máximo peso limitación de la fuente se observaron 1 semana
fresco (Figura 1A ) La mayor duración del después del tratamiento con Cabernet Sauvignon y 2
crecimiento compensó la disminución de la tasa de semanas después del tratamiento con
crecimiento y dio como resultado un peso de bayas Sangiovese. En la cosecha, el tratamiento de 3L
muy similar en ambas condiciones de crecimiento en causó una reducción del 17.5% de la concentración
la cosecha. Por el contrario, el tratamiento con 3L no de hexosa en Cabernet Sauvignon y una reducción
afectó el perfil de desarrollo del tamaño de la baya

TABLA 2. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre el área de la hoja (LA), la tasa de intercambio de carbono neto total (NCER) por vid y por
unidad de área de la hoja, la fijación neta de carbono acumulada (gCO 2 / vid) durante el período de prueba, y la hoja -rendimiento de la vid
Sangiovese.
del 36.7% en Sangiovese en comparación con las un suministro de fuente adecuado (Figura 4 ), con
bayas tratadas con 12L. derivados de malvidina dominantes en el primero y
cianidina-3-glucósido dominante en el
segundo. Además, todas las formas aciladas de
antocianinas estaban ausentes en Sangiovese
(Figura 4A ). Estas diferencias en la composición se
vieron aún más afectadas por la limitación de la
FIGURA 2. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre las FIGURA 3. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la
concentraciones estacionales de hexosa de bayas Cabernet concentración de ácido málico estacional (A, B) y ácido tartárico (C,
Sauvignon (A) y Sangiovese (B) muestreadas de vides que tienen tres D) de bayas Cabernet Sauvignon (A) y Sangiovese (B) de vides que
hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L) . La flecha sólida indica la fecha tienen tres hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L) . Las flechas
de la modulación fuente-sumidero. Las barras verticales indican SE continuas indican la fecha de la modulación fuente-sumidero. Las
( n = 3 para Cabernet Sauvignon y n = 4 para Sangiovese). barras verticales indican SE ( n = 3 para Cabernet Sauvignon y n = 4
para Sangiovese).

Ácidos orgánicos
Los perfiles de desarrollo de los ácidos málico y
tartárico se vieron ligeramente afectados por la
modulación fuente-sumidero en las bayas de
Cabernet Sauvignon (Figuras 3A, C ). Desde el envero
hasta la cosecha cercana, las concentraciones de
ácidos málico y tartárico fueron mayores en el
tratamiento de 3L que en el de 12L, mientras que no
se encontraron diferencias significativas en la
cosecha. Por otro lado, los perfiles de desarrollo de fuente (Figuras 4B, C ). En la cosecha, la proporción
los ácidos orgánicos en las bayas Sangiovese no se de derivados de malvidina se incrementó a 93.7% en
vieron significativamente afectados por la bayas tratadas con 3L en comparación con 79.7% en
modulación fuente-sumidero (Figuras 3B, bayas tratadas con 12L de Cabernet Sauvignon
D ). Además, la tendencia plana de los ácidos (Figura 4B ). Sangiovese se vio menos afectado por la
tartáricos en las bayas de Cabernet Sauvignon se limitación de la fuente, con 55.6% de cynidin-3-
debe al hecho de que el muestreo comenzó en una glucoside en bayas tratadas con 3L y 42.4% en bayas
etapa posterior (Figura 3C) En la cosecha, las tratadas con 12L (Figura 4C)
concentraciones de ácido málico fueron 1.78 y 1.5 g
/ L y las de ácidos tartáricos fueron 6.61 y 7.13 g / L
para Cabernet Sauvignon y Sangiovese,
respectivamente.

Composición y concentración de antocianinas


Las bayas Cabernet Sauvignon y Sangiovese
mostraron diferentes perfiles de antocianinas bajo
FIGURA 4. Cromatogramas de HPLC típicos de antocianinas en pieles FIGURA 5. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la
de bayas de uvas Cabernet Sauvignon y Sangiovese cultivadas bajo acumulación de antocianinas totales (A, B) , antocianinas
suministro de carbono no limitado (A) ; y los efectos de la modulación dihidroxiladas (C, D) , antocianinas trihidroxiladas (E, F) y la relación
fuente-sumidero en la composición de antocianinas de las pieles de de dii a tri- antocianinas hidroxiladas (G, H) en la piel de Cabernet
bayas Cabernet Sauvignon (B) y Sangiovese (C) en la cosecha de vides Sauvignon (panel izquierdo) y bayas Sangiovese (panel derecho) . Los
con tres hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L) . Dp, delfinidina; Mv, dos niveles de suministro de carbono se obtuvieron tratando las vides
malvidina; Pt, petunidina; Cy, cianidina; Pn, peonidina; glc, con tres hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L). Las flechas continuas
glucósido; ac, acetato; Cou, Coumarate. indican la fecha de la modulación fuente-sumidero. Las barras
verticales indican SE ( n = 3 para Cabernet Sauvignon y n = 4 para
Sangiovese).

Los perfiles de desarrollo de la composición y


concentración de antocianinas se vieron
significativamente afectados por la limitación de la
fuente en ambos cultivares (Figuras 5 y 6 ). En
Cabernet Sauvignon, la cantidad de antocianinas
totales fue sistemáticamente mayor en las bayas
tratadas con 12L que en las bayas tratadas con 3L
durante el desarrollo de la baya (Figura 5A) Las bayas
tratadas con 12L aumentaron bruscamente sus
antocianinas de 70 a 77 DAF, permanecieron en una
meseta hasta 98 DAF, y posteriormente
disminuyeron progresivamente. Las bayas de 3L
exhibieron un perfil de desarrollo similar pero con
una meseta mucho más baja que las bayas de 12L. En
Sangiovese, las bayas de 12L comenzaron a acumular
antocianinas de 68 DAF y alcanzaron un máximo en
la cosecha. Por el contrario, el tratamiento con 3L
deprimió casi por completo la acumulación de
antocianinas totales, con solo un ligero aumento
entre 95 y 105 DAF (Figura 5B ). En la cosecha, el
tratamiento con 3L causó una reducción del 74.8% 5.27 mg / g FW en 12L) y una reducción del 94.5% en
en la concentración de antocianinas totales en Sangiovese (0.22 mg / gFW en 3L versus 3.32 mg /
Cabernet Sauvignon (1.32 mg / g FW en 3L versus gFW en 12L).
FIGURA 6. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la antocianinas aciladas en bayas tratadas con 3L que
cantidad (A, C) y la proporción (B, D) de antocianinas no aciladas (A, con bayas tratadas con 12L (Figura 6D ). La
B) y antocianinas aciladas (C, D) en relación con la concentración total
proporción de antocianinas aciladas alcanzó 58.4%
en el piel de bayas de Cabernet Sauvignon de vides con tres hojas (3L)
o 12 hojas por racimo (12L) . Las barras verticales indican SE ( n = 3). en 3L y fue 46.1% en 12L en la cosecha (Figura 6D ).

Fijación de hoja de carbono y utilización de carbono


de bayas
Los tipos de cambio netos de CO 2 (NCER) se
midieron en Sangiovese y se muestran en la Figura 7
. El NCER por unidad LA (μmol m -2 s -1 ) fue muy
similar (≅ 4.5 μmol m -2 s -1 ) para los dos grupos de
vides antes del tratamiento (Figura 7A y Tabla 2 ).
Después del tratamiento, se volvió ligeramente más
alto en 3L (en promedio 6.30 μmol m -2 -1 ) que en
el tratamiento de 12L (en promedio 5.56 μmol m -2
s -1 ), sin alcanzar una diferencia significativa (Tabla
2) Sin embargo, cuando se acumularon esas
diferencias marginales en cada día, el carbono fijado
por una unidad de AL durante el período
experimental fue claramente mayor en el
tratamiento de 3L que en el de 12L (Figura 7C ). La
tasa de fotosíntesis de una sola hoja en la cosecha,
Las antocianinas trihidroxiladas y dihidroxiladas medida en condiciones óptimas con luz saturada, fue
mostraron diferentes perfiles de desarrollo y significativamente mayor en las hojas tratadas con 3L
respuestas distintas a la limitación de la fuente (15.1 μmol m -2 s -1 ) que en el tratamiento con 12L
(Figuras 5C-H ). Las bayas de Cabernet Sauvignon (13.8 μmol m -2 s -1 ). Además, tanto para Cabernet
tenían antocianinas trihidroxiladas más altas que las Sauvignon (Tabla 1 ) como para Sangiovese (Tabla 3
dihidroxiladas en ambos tratamientos (Figuras 5C, E, ), las hojas de las plantas de 3L tenían un mayor
G ), mientras que se observó lo contrario en contenido de clorofila que el de las plantas de 12L
Sangiovese (Figuras 5D, F, H ). En Cabernet (Tabla 3 ).
Sauvignon, el tratamiento 3L disminuyó más
dihidroxilado (Figura 5C ) que las antocianinas TABLA 3. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la
trihidroxiladas (Figura 5F ), lo que resultó en una transpiración (E), la conductancia estomática (g s ), la fotosíntesis
proporción más baja de antocianinas dihidroxiladas neta (Pn) y el contenido de clorofila (SPAD) medido en seis hojas
por vid en Sangiovese.
(Figura 5G)) Por el contrario, el tratamiento con 3L
disminuyó igualmente las antocianinas di y
trihidroxiladas en Sangiovese, sin afectar la
proporción de antocianinas di y trihidroxiladas
(Figura 5H ).

El efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la


acilación de antocianinas se investigó más a fondo en
las bayas de Cabernet Sauvignon (Figura 6 ). El El NCER por vid se calculó como el producto de NCER
tratamiento con 3L disminuyó más fuertemente las por LA y LA total por vid (Figura 7B ). Antes del
antocianinas no aciladas que las aciladas en
comparación con las bayas tratadas con 12L (Figuras
6A, B ). Esta modificación desequilibrada causó un
aumento significativo en la proporción de
FIGURA 7. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la tasa neta de intercambio de carbono (NCER) por unidad de área foliar (A) y por vid (B) , así
como la fijación de carbono acumulada por unidad de área foliar (C) y por vid ( D) , registrado diariamente con un sistema de intercambio de gases de dosel
completo durante todo el período experimental en vides Sangiovese, ya sea con tres hojas (3L) o 12 hojas por racimo (12L) . Los valores de las cámaras
vacías también se indicaron (A, B) como referencia. Las flechas continuas indican la fecha de la modulación fuente-sumidero. Las barras verticales indica
SE ( n = 4).

tratamiento, las hojas de ambos grupos tenían NCER primeros 3 días después del tratamiento (Figura 7B ).
/ vid muy similar (promedio de 3L y 12L a 8.12 μmol Posteriormente, las vides reaccionaron a sus
s -1 ). Durante el tratamiento, se eliminaron 40 y tratamientos, y las plantas de 3L mostraron una
83.3% de LA en comparación con el pretratamiento reducción del 66.1% en NCER / vid en paralelo con
para las vides 12L y 3L, respectivamente (Tabla 2 ). una reducción del 69.6% en LA por vid, en
Estas reducciones en el LA total por vid dieron como comparación con las plantas de 12L (Figura7B y Tabla
resultado una disminución proporcional abrupta de 2 ). Cuando el NCER por vid se acumuló durante el
NCER / vid del 38.8% para las vides de 12L y del 82.4% período posterior al tratamiento, el carbono
para las vides de 3L, promediada durante los
acumulado por vid en la cosecha en el tratamiento Considerando la tasa de acumulación de carbono
de 3L solo se redujo en un 55,8% en comparación con como la utilización de carbono y el NCER por vid
12L (Figura 7D ). como suministro de carbono, se calculó la
proporción de la primera a la última (Figura 8C) El
Para investigar el equilibrio de la oferta y la demanda carbono total acumulado por día en bayas de 3L
de carbono, también se calculó la tasa de representó ∼76.9% del fijado por la fotosíntesis
acumulación de carbono en todas las bayas de una durante el período de acumulación rápida de azúcar
vid y se comparó con el carbono fijado por la (es decir, de 54 a 81 DAF), mientras que solo
fotosíntesis (Figura 8 ). Como se esperaba, las bayas representó ∼48% en bayas de 12L durante el mismo
de 3L acumularon mucho menos carbono (43.4 g) período. Curiosamente, esta proporción saltó a
que las del tratamiento de 12L (81.9 g) en la cosecha niveles muy altos, incluso más del 100%, en varios
(Figura 8A ). Paralelamente, la tasa de acumulación días específicos en ambos tratamientos. Un análisis
de carbono en las bayas (g de carbono por día) posterior reveló que esos días correspondían a días
también disminuyó en las bayas de 3L en nublados (Figura complementaria S1) cuando los
comparación con las bayas de 12L (Figura 8B ). NCER por vid eran muy bajos (Figura 7B ).
recorte de brotes en el cuajado y envero ( Poni y
FIGURA 8. Efecto de la modulación fuente-sumidero sobre la Giachino, 2000 ; Heuvel et al., 2005 ; Stoll et al., 2010
asignación de carbono en Sangiovese cultivado con tres hojas (3L) ; Palliotti et al., 2013b ; Poni et al., 2013 ; Filippetti et
o 12 hojas (12L) por racimo . Carbono acumulado en todas las
al., 2015 ; Parker et al., 2015) Sin embargo, también
bayas por vid (A) , tasa de acumulación de carbono en todas las
bayas por vid por día (B) , y la proporción de carbono hay estudios que muestran que la acumulación de
fotosintetizado utilizado para la acumulación de azúcar de bayas azúcar no se ve afectada ( Percival et al., 1994 ; Chorti
durante el período de desarrollo (C) . Las flechas continuas et al., 2010 ; Sabbatini y Stanley Howell, 2010 ;
indican la fecha de la modulación fuente-sumidero.
Pastore et al., 2013 ) o incluso aumentaron
ligeramente ( Bledsoe et al. ., 1988 ; Percival et al.,
1994 ; Guidoni et al., 2002 ; Poni et al., 2006a , 2008
; Palliotti et al., 2011 , 2012 ; Pastore et al., 2011 ,
2013 ; Bubola y Persuric, 2012 ; Gatti et al., 2012)
después de una relación LA / Fruta decreciente. Estas
observaciones contradictorias son muy
probablemente el resultado de las diferencias en el
tiempo y la gravedad de la fuente para hundir las
modulaciones. De hecho, Kliewer y Dokoozlian
(2005) han demostrado que un LA / Fruit por encima
de 0.8 m 2 / Kg es crítico para la maduración
completa de las uvas. Los estudios que no
informaron ningún efecto de las modulaciones
fuente-sumidero sobre la acumulación de azúcar a
menudo no fueron inferiores a este valor umbral. En
el presente estudio, LA / Fruit fue inferior a 0,8 m 2 /
Kg en vides de origen limitado para ambos cultivares.
Por lo tanto, es de suma importancia considerar la
magnitud de LA / Fruit cuando se comparan los
ensayos sobre el efecto de las modulaciones fuente-
sumidero en los azúcares de bayas.

En contraste con la disminución en la concentración


de azúcar bajo limitación de fuente, no se
encontraron diferencias significativas en el
contenido de ácidos orgánicos en la cosecha en los
dos cultivares estudiados en este trabajo. En un
reciente análisis detallado del desarrollo, Parker et
al. (2015) también observaron una pérdida de
Discusión sincronización entre el azúcar y el ácido orgánico en
respuesta a la reducción de las relaciones LA / Fruta,
La limitación de la fuente inducida por la eliminación con una reducción de la acumulación de azúcar, pero
severa de las hojas en Cabernet Sauvignon y los ácidos orgánicos en gran medida no se vieron
Sangiovese causó una reducción significativa en la afectados. Algunos otros estudios ( Bledsoe et al.,
acumulación de azúcares en las bayas. Este resultado 1988 ; Poni et al., 2006a , 2009 ; Tardaguila et al.,
confirma muchos estudios previos con diferentes 2010 ; Pastore et al., 2013) informaron que una
otros cultivares de Vitis vinifera L., que informaron disminución en la relación fuente-sumidero por la
una disminución en la acumulación de azúcar eliminación de la hoja conduce a una disminución de
después de la limitación de carbono inducida por la la acidez total y el ácido málico, mientras que los
eliminación tardía de la hoja (manual o mecánica), ácidos tartáricos no se vieron afectados o incluso
aumentaron en comparación con las vides sin primarios (azúcares) y secundarios (antocianinas)
eliminación de la hoja. Los autores de estos estudios compiten por el sustrato de carbono cuando el
con frecuencia señalaron un probable efecto de sustrato es escaso. Nuestros resultados
confusión de la eliminación de la hoja y el microclima proporcionan una evidencia de la validez de las
modificado, lo que hace que su resultado no sea hipótesis de CNB y GDB en un sumidero productivo
realmente comparable con los encontrados en el (bayas) y allanan el camino para modelar las
presente estudio. Nuestros resultados y los de Parker acumulaciones de azúcares y antocianinas en la baya
et al. (2015) ambos confirman que los ácidos de uva bajo varias proporciones fuente-sumidero.
orgánicos son menos sensibles a la limitación de Curiosamente, ( Sadras y Moran, 2012) también
carbono que los azúcares. informaron el desacoplamiento entre la acumulación
de azúcares y antocianinas en condiciones de altas
Además de la sensibilidad relativa de azúcares y temperaturas. Sin embargo, los mecanismos
ácidos orgánicos, también estudiamos la respuesta biológicos subyacentes a este efecto de
de metabolitos secundarios importantes como las desacoplamiento deberían ser diferentes de los que
antocianinas. La limitación de la fuente causó se encuentran bajo limitación de carbono, porque la
reducciones de 75 y 93.5% en las concentraciones de temperatura tiene un efecto directo sobre la
antocianinas en las bayas Cabernet Sauvignon y biosíntesis y degradación de antocianinas al modular
Sangiovese en la cosecha, en paralelo con solo la expresión génica y las actividades enzimáticas de
reducciones de 17.5 y 36.7% en azúcares, en las enzimas relacionadas ( Mori et al., 2007 ). Se han
comparación con las bayas sin fuente limitada. realizado pocos estudios para comprender el efecto
Después del recálculo del conjunto de datos de inhibitorio de la limitación de la fuente sobre la
informes recientes, encontramos que la limitación de acumulación de antocianinas a niveles de proteína y
la fuente causó una reducción del 99.2% en las / o transcripción. Dos análisis recientes de
antocianinas con una reducción del 38.5% en los transcriptomas de todo el genoma mostraron que la
azúcares en el cv. Jingyan ( Vitis vinifera ; Wu et al., limitación de carbono redujo la abundancia de
2013 ), y una reducción de 17.5 o 19.1% en transcripción de glucosa UDP: flavonoide-3- O-
antocianinas con una reducción de 8.4 o 6.8% en glucosiltransferasa (UFGT) y GST4, que se conocen
azúcares en el cv. Sangiovese ( Pastore et al., 2011 , como reguladores importantes de la acumulación y
2013) Estos resultados indican claramente que la el transporte de antocianinas ( Pastore et al., 2011 ,
acumulación de azúcares y antocianinas se 2013 ). Un análisis proteómico mostró que las
desacopla bajo la limitación de la fuente, y que el abundancias de chalcona sintasa y dihidroflavonol
carbono se asigna preferentemente para la reductasa, ambas involucradas en la vía de
acumulación de azúcar en lugar de las antocianinas. antocianinas, se redujeron fuertemente por la
Como se mencionó en la introducción, se han limitación de la fuente ( Wu et al., 2013 ). Nuestra
desarrollado varias teorías (CNB y GDB) en la reducción observada en la antocianina total en
literatura para describir la relación de competencia ambos cultivares bajo limitación de fuente también
entre los metabolitos primarios y secundarios en las debería ser el resultado de modificaciones en los
plantas (revisado en Koricheva et al., 1998 ). Arnold reguladores clave de las vías de antocianina, aunque
y col. (2004) confirmaron, con una serie de elegantes se necesitan más experimentos transcriptómicos y
experimentos, que el contenido fenólico y la proteómicos para confirmar estas especulaciones.
coloración del álamo ( Populus nigra x P. deltoides)
las hojas del sumidero se reducen por el flujo de Como se sabe que diferentes moléculas de
carbono interrumpido desde la fuente al sumidero, antocianinas tienen diferentes tonalidades y
es decir, la disponibilidad reducida de carbono. En estabilidades de color ( He et al., 2010 ), también
suspensiones celulares de cv. Gamay Freaux que estudiamos la alteración de la composición de
produce antocianinas de forma constructiva, antocianinas en respuesta a la limitación de carbono.
Guardiola et al. (1995) demostraron con un enfoque La concentración y composición de las antocianinas
de modelado matemático que los metabolismos son diferentes entre las bayas Cabernet Sauvignon y
Sangiovese en condiciones normales (con suficiente mejorar la estabilidad de las antocianinas ( Sarni et
carbono); Las bayas de Cabernet Sauvignon tenían al., 1995 ; He et al., 2010 ). Estas respuestas
una mayor concentración de derivados de malvidina diferenciales entre antocianinas di y trihidroxiladas y
(trihidroxilados) y antocianinas aciladas, mientras entre antocianinas aciladas y no aciladas pueden
que las bayas de Sangiovese eran más ricas en proporcionar implicaciones potenciales valiosas en la
cianidin-3-glucósido (dihidroxilado) y no se modulación de la calidad del vino. Se requieren
encontraron antocianinas aciladas. Estos resultados esfuerzos adicionales para investigar por qué las
están de acuerdo con un informe anterior ( Mattivi actividades o la expresión de F3 ′ H y F3 ′ 5 ′H
et al., 2006) La limitación de carbono aumentó la responde a la limitación de la fuente de manera
proporción de cianidina-3-glucósido en Sangiovese. diferente entre los cultivares y por qué las
En el mismo cultivar, otros autores ( Filippetti et al., antocianinas aciladas se acumulan preferiblemente
2007 ; Pastore et al., 2011 , 2013 ) también bajo la limitación de la fuente.
encontraron que una disminución en la relación
fuente-sumidero aumentó la proporción de Fuente y sumidero pueden comunicarse de forma
cianidina-3-glucósido. Por el contrario, la proporción interactiva y ejercer influencias mutuas entre sí.
de antocianina predominantemente peonidina-3- Cuando se reduce la relación fuente-sumidero, las
glucósido (dihidroxilada) en el cv. Nebbiolo se redujo hojas (fuente) en la vid pueden aumentar la
por la baja relación fuente-sumidero ( Guidoni et al., eficiencia de la hoja hacia una compensación de su
2002) En Cabernet Sauvignon, encontramos que la tasa fotosintética para satisfacer la demanda de
proporción de antocianinas dihidroxiladas bayas (sumidero; Candolfi-Vasconcelos y Koblet,
(derivados de cianidina y peonidina) se redujo por la 1990 ; Petrie et al. ., 2003 ; Kliewer y Dokoozlian,
limitación de carbono. Estos resultados indican que 2005) Observamos que las vides de origen limitado
la modificación en la composición de antocianinas en aumentaron su NCER por unidad de LA en
respuesta a la limitación de la fuente depende del comparación con las vides de origen suficiente. Esto
cultivar. Se sabe que la relación entre las se confirmó aún más por un mayor contenido de
antocianinas di y trihidroxiladas está bajo el control clorofila (7% más en las vides Sangiovese y 13.5%
de la actividad relativa de la flavonoide 3 ′ - más en las vides Cabernet Sauvignon), y una mayor
hidroxilasa (F3 ′ H) y la flavonoide 3 ′ , 5 ′ -hidroxilasa capacidad de fotosíntesis medida en una sola hoja en
(F3 ′ 5 ′ H) ( Castellarin et al., 2006 ). El análisis de condiciones óptimas. Otros autores han observado
transcriptoma mostró que la limitación de carbono efectos similares de la limitación de la fuente sobre
aumentó la abundancia de transcripción de F3 'Hb, el contenido de clorofila en las hojas ( Candolfi-
que es responsable de la biosíntesis de dihidroxilado, Vasconcelos y Koblet, 1990 ; Petrie et al., 2000b)
y explicó la modificación observada en la Dicha compensación fotosintética puede explicar por
composición de antocianinas ( Pastore et al., 2013 ). qué las vides de origen limitado perdieron el 69,6%
Además de la limitación de la fuente de carbono, la de su LA aunque la fijación de carbono se redujo solo
exclusión de la luz puede aumentar la proporción de el 55,8% durante la maduración de las bayas. Sin
antocianinas di- / trihidroxiladas ( Guan et al., 2014 ); embargo, está claro que la compensación es parcial,
tanto el estrés hídrico ( Castellarin et al., 2007a , b ) y esto puede deberse al hecho de que solo se
como la alta temperatura disminuyen esta relación ( retuvieron las hojas principales del brote primario y
Mori et al., 2007 ). También se sabe que la acilación se eliminó todo el nuevo crecimiento durante
de antocianinas se ve afectada por la exposición a la nuestro experimento. Las hojas maduras responden
luz y la temperatura ( Tarara et al., 2008) En Cabernet menos a la modulación fuente-sumidero ( Candolfi-
Sauvignon, también observamos que la limitación de Vasconcelos et al., 1994b ).
la fuente aumentó significativamente la proporción
de antocianinas aciladas en comparación con la La comparación de la fijación de carbono por las
condición de limitación sin fuente. La regulación hojas y la utilización de carbono por las bayas puede
molecular de la acilación de antocianinas es en gran proporcionar una estimación valiosa del equilibrio de
medida desconocida, aunque la acilación puede carbono entre la demanda y la oferta. Esta
información es esencial para comprender la fisiología proporciona un indicador cuantitativo de la
de las vides y puede ayudar a desarrollar modelos asignación de carbono. Por lo tanto, las proporciones
mecanicistas ( Poni et al., 2006b ; Cola et al., 2014 ). cercanas al 100% observadas entre 64 y 67 DAF en
Sin embargo, esta comparación a menudo falta en vides de 3L son apenas realistas en vides reales; en
los experimentos de modulación fuente-sumidero su lugar, indican fuertemente que las reservas de
debido a la falta de instalaciones adecuadas para carbono se removilizan para la acumulación de
medirla. El enfoque de intercambio de gases en todo azúcar en las bayas y / o el mantenimiento de la vid.
el dosel ( Poni et al., 2014) permite controlar el NCER Una remobilización de reserva similar podría explicar
estacional y cuantificar el carbono fijado después de la alta proporción de carbono que se observó cuando
la modulación fuente-sumidero. Además, seguimos estaba nublado y la tasa de fotosíntesis de la vid fue
la dinámica de la acumulación de azúcar de las bayas extremadamente baja. Aunque no cuantificamos la
y calculamos la cantidad de carbono utilizada en las remobilización de la reserva, Weaver (1963) informó
bayas a través de una función matemática de que las reservas (tanto de azúcares solubles como de
acumulación de azúcar ( Sadras et al., 2008 ). Esto almidón) en los brotes se redujeron
proporcionó una buena estimación de la utilización significativamente por la limitación de la fuente en el
de carbono en el sumidero más importante (bayas; cv. Vides Carignane y Zinfandel. Kliewer y Antcliff
Gutiérrez et al., 1985 ; Coombe, 1989) El análisis (1970)estimó que hasta el 40% del total de azúcares
matemático del balance de carbono indicó que la en las bayas puede provenir de los tejidos de
utilización de carbono de las bayas representaba una almacenamiento de la vid. Usando el etiquetado de
mayor proporción de carbono fijo para la 14 C, ( Candolfi-Vasconcelos et al., 1994a ) mostró
acumulación de azúcar bajo limitación de carbono que las reservas de carbono de los tejidos de
(73.4%) que bajo suficiencia de carbono (40.7%) almacenamiento leñosos pueden reasignarse
durante las etapas de acumulación de azúcar (54 a activamente en bayas bajo las limitaciones de la
81 DAF). Esto indica que la asignación de carbono no fuente. El uso futuro del etiquetado de 14 C, la
es proporcional a la oferta de carbono, pero con medición del índice de intercambio neto de carbono
prioridades para las bayas bajo limitación de fuente, (NCER) de la cubierta completa y la evaluación del
lo que proporciona evidencia directa para respaldar contenido de carbono en varios tejidos (hojas,
la suposición más aplicada en los modelos de brotes, madera, frutos y raíces) proporcionarían un
asignación de carbono de la vid ( Gutiérrez et al., valioso conjunto de datos para la cuantificación del
1985 ; Bindi et al., 1996 ; Poni et al., 2006a ; Pallas et carbono. Análisis de saldo y asignación.
al., 2008 ). Los mecanismos biológicos detrás de este
fenómeno han sido poco investigados. Pastore y col. Conclusión
(2011)mostró que la abundancia de transcripción de
la isoenzima 2 de piruvato descarboxilasa implicada La limitación de la fuente inducida por la eliminación
en la glucólisis se redujo por una baja relación de la hoja 1 semana antes del envero redujo
fuente-sumidero. Sin embargo, encontramos que la significativamente la concentración de azúcares y
limitación de carbono aumentó las actividades antocianinas, pero no alteró la concentración de
enzimáticas involucradas en el metabolismo ácidos orgánicos en Cabernet Sauvignon y
primario de carbohidratos (datos no publicados de Sangiovese. Además, la magnitud de la reducción fue
Dai et al.). Estos aumentos en las enzimas mucho mayor en las antocianinas que en los azúcares
metabólicas pueden conferir una mayor fuerza de en respuesta a la limitación de la fuente, lo que
hundimiento y, por lo tanto, permitir que las bayas demuestra un desacoplamiento entre azúcares y
atraigan una mayor proporción de carbono bajo antocianinas en ambos cultivares. Aunque los
limitación de fuente. Vale la pena señalar que patrones de respuestas para azúcares, ácidos
nuestro cálculo no considera la utilización de orgánicos y antocianinas totales a la limitación de la
carbono para el mantenimiento y las reservas, ni la fuente son bastante consistentes entre los cultivares,
contribución potencial de la movilización de carbono la modificación de las composiciones de antocianinas
de reserva ( Gutiérrez et al., 1985), sino que depende del cultivo. Por lo tanto, la baya de uva
maneja el destino metabólico del carbono de tal
manera que la acumulación de azúcar se mantiene al
máximo a expensas de los metabolitos secundarios
(por ejemplo, antocianinas) bajo limitación de
fuente.