TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLOGICO DE ORIZABA

Ingeniería Química

Materia
Análisis Instrumental
Catedrático
Sales Chávez Roger Manuel
Auxiliar de laboratorio
Candelario Estévez Pablo
Alumna
García Bermudez Viary Shadany
Practica no. 8

Clave de Lab: Horario:

AIB 17:00 – 19:00

FECHA DE ENTREGA:

1
García Bermudez Viary Shadany
 20 de mayo del 2020

2
García Bermudez Viary Shadany
 “DETERMINACION DE ACIDO BENZOICO EN REFRESCOS”
(Método de Espectroscopia UV)

METODOLOGÍA No. 8 FECHA DE REALIZACIÓN 20 de mayo del 2020

OBJETIVO

Llevar a cabo una determinación cualitativa y cuantitativa de un compuesto orgánico

utilizando un método espectroscópico en la región UV.

FUNDAMENTO

Los métodos de absorción están basados en la disminución de la potencia de la radiación

electromagnética como consecuencia de la absorción que se produce en su interacción con el
analito.

GENERALIDADES

Se han adoptado dos métodos generales para evitar la destrucción de alimentos por
microorganismos. El primero es el enlatado o envasado y posteriormente la esterilización, y el
segundo busca la conservación inhibiendo el desarrollo de los organismos productores de la
alteración, lo que puede conseguirse tratado los alimentos con conservadores.

Hay dos tipos de conservadores: los naturales (azúcar, sal, ácidos o especias) o los
conservadores químicos tales como el bióxido de azufre y el ácido benzoico.

El ácido benzoico como los benzoatos son muy empleados como conservadores en la
industria alimentaria. Son ácidos débiles que actúan fundamentalmente en su forma no disociada.
Al comparar la eficacia de éste conservador con otros se comprobó que el ácido benzoico en su
forma no disociada es más eficaz su acción conservadora a pH menores de 4.

La concentración máxima permitida de ácido benzoico en bebidas carbónicas es de 600

ppm, es incapaz de prevenir el desarrollo de ciertas levaduras incluso a pH menores de 3, en la
actualidad se ha permitido en algunas bebidas hasta una concentración de 800 ppm.

Las soluciones de ácido benzoico son incoloras por lo que para detectar su concentración es
necesario neutralizar un espectrofotómetro UV.

Los métodos espectroscópicos se consideran como una de las mejores y más utilizadas
técnicas instrumentales a disposición del científico, para la adquisición de información tanto
cualitativa como cuantitativa.

Los métodos espectroscopios se clasifican según la región del espectro; las regiones
utilizadas en ésta práctica son: la región visible y la región ultravioleta. Independientemente de la
región del espectro implicada, los instrumentos que miden la absorbancia o transmitancia de una
solución. Los instrumentos utilizados están constituidos de cinco componentes básicos:
a) Una fuente estable de energía radiante.
b) Un selector de longitudes de onda para aislar una determinada región de longitudes de
onda de la fuente.
c) Celdas transparentes para la muestra y el blanco.

3
García Bermudez Viary Shadany
 d) Un detector de radiaciones, o transductor para convertir la energía radiante que
recibimos en una señal medible (generalmente eléctrica).
e) Un dispositivo de lectura que muestre la señal convertida del detector.

En el siguiente diagrama de bloques se muestra la disposición usual de los componentes:

Fuente de Monocro- Po Celda P Detector Registrador

Poder mador (muestra)

OPERACIÓN DEL ESPECTROFOTOMETRO

(1) Botón de
encendido
(2) Interruptor de selección de la lámpara (Hidrógeno o tungsteno).
(3) Botón para encender la lámpara de hidrógeno
(4) Botón para seleccionar la longitud de onda. (Visible o Ultravioleta)
(5) Botón de selección (mode) (transmitancia, absorbancia, concentración y factor)
(6) Porta muestras
(7) Pantalla de lectura
(8) Botón (increase) para ajuste de absorbancia o transmitancia.
(9) Selector de sensibilidad
(10) Selector de concentración / factor (increase / decreace).
(11) Print (imprimir)

a) Conectar el instrumento a la toma de corriente y encenderlo con el botón marcado con el

número (1) y que se localiza en la parte inferior; dejar estabilizar la corriente por espacio de
30 a 40 minutos.

b) Encender la lámpara con el interruptor que se localiza en la parte superior y al lado derecho
marcado en el esquema con el número (2). Si se desea trabajar en el rango ultravioleta se
coloca el interruptor en la posición que indica ultravioleta y se enciende la lámpara de hidrógeno
con el botón (2) y se ajusta la posición de la lámpara con el botón de ajuste colocado en la parte
inferior derecha marcado con el número (3).

4
García Bermudez Viary Shadany
c) Seleccionar la longitud de onda con la que se desea trabajar, utilizando el botón de mayor
tamaño marcado en el esquema con el número (4). Presionar el botón que indica MODE
marcado con el número (5), que se utiliza para seleccionar que lectura que se va a realizar
(absorbancia, transmitancia, concentración, factor)

d) El número (6) del esquema corresponde al porta muestras, donde se colocará el tubo de vidrio
como se muestra en el esquema, celas de vidrio o plástico si se va a trabajar en la región
visible, y celdas de cuarzo si se va a trabajar en la región ultravioleta. Recordando que las
celdas siempre deben tomarse por la parte esmerilada, enjuagarlas únicamente con agua o
solventes empleados, y secarlas con paños que no dejen pelusas.

e) Para calibrar el instrumento se coloca agua destilada en la celda y se coloca en el porta

muestra, se oprime el botón Mode (5) y marcar lectura de transmitancia y de absorbancia
obteniendo los siguientes resultados:

Transmitancia = 90 %, Absorbancia = de 0.45 a 0.46 aprox.

f) Para trabajar con el problema se debe calibrar el instrumento con el blanco solvente
adicionándole los reactivos; si es que el problema lleva adición de reactivos, colocar el problema
en la celda y colocarla en el porta muestras; seleccionar la longitud de onda que señale el
método, y calibrar el instrumento a 100% transmitancia., 0 % absorbancia. Si no se conoce la
longitud de onda con la que se deba trabajar se procede de la siguiente manera: colocar en la
celda una muestra problema de la concentración más baja y se coloca en el porta muestras
marcado en el esquema con el número (6) y girar el botón selector de longitud de onda
marcado con el número (4) y girarlo para seleccionar la longitud de onda, aumentando éste
valor poco a poco, leyendo al mismo tiempo en la pantalla del instrumento (7) el valor de
absorbancia. Cuando se alcanza el valor de mayor absorbancia y disminuye en forma
proporcional, se habrá encontrado la longitud de onda requerida por la muestra. Esta misma
operación se hace con los valores de transmitancia, en éste caso se tomara en cuenta la
longitud de onda donde nos dé el valor más bajo, a ésta operación se le denomina barrido. Una
vez localizada la longitud de onda el espectrofotómetro se calibra con el blanco a 0 absorbancia,
100 % transmitancia, esto se consigue utilizando el botón increase marcado en el esquema con
el número (8) que se localiza en la parte inferior izquierda.

g) Verificar nuevamente si el instrumento nos da lecturas de 0 % absorbancia y 100 %

transmitancia, utilizando el botón de mode (5) para cambiar de absorbancia a transmitancia y
viceversa.

h) Una vez verificado el instrumento estará calibrado para trabajar, colocando las muestras en la
celda para problema y registrando el tipo de lectura que se desee, para posteriormente elaborar
una gráfica de absorbancia / concentración o de transmitancia / concentración, tomando como
abscisas la concentración expresada en ppm.

i) En el espectrofotómetro existen otros botones de control, como él (9) que es el selector de

sensibilidad de ajuste de transmitancia y absorbancia, el número (10) selector de concentración/
factor increase/ decreace, y el número (11) Print que sirve para dar la orden para imprimir
cuando nuestro espectrofotómetro esta adosado a una computadora.

APOYO DEL PROFESOR DURANTE LA PARTE EXPERIMENTAL

1.- Explicación general del desarrollo de la práctica

2.- Indicaciones de la parte operativa del espectrofotómetro

5
García Bermudez Viary Shadany
3.- Indicar y corregir que se lleve a cabo el manejo adecuado de los instrumentos volumétricos
4.- Resolver dudas generales durante la práctica
5.- Proporcionar bibliografía para consultar datos teóricos sobre:
a) Reacciones
b) Cálculos
c) Cuestionario
6.- Revisión final y calificación de la práctica

REACTIVOS MATERIAL
1 vaso de precipitados de 100 ml
Muestra: Refresco de limón de diferentes 1 Pipeta volumétrica de l0 ml
marcas 1 Pipeta volumétrica de 2 ml
Acido Benzoico 1 agitador
Metanol grado reactivo analítico 10 Matraces aforados de 10 ml
1 Matraz aforado de 100 ml
EQUIPO
1 Espectrofotómetro Spectronic 21 D.
2 Celdas de cuarzo

PROCEDIMIENTO

1.- Preparar una solución de 100 ppm. Pesando 0.01 g. y aforando a 100 ml con metanol.
2.- Preparar los estándares en los matraces aforados de 10 ml. Colocando 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5
ml y 6 ml etc. y aforando cada uno de ellos a 10 ml con metanol. Teniendo concentraciones de 10
a 100 ppm.
3.- Preparar el problema en primer lugar: se desgasifica un poco, colocando una pequeña porción
de refresco en un vaso de precipitados y se agita con cuidado, posteriormente se toma una
muestra de 2 ml con pipeta volumétrica y se coloca en un matraz aforado de 10 ml. se afora a 10
ml con metanol.
4.- De uno de los estándares preparados obtener el espectrograma y determinar las longitudes de
onda de máxima absorción. Una vez que se ha seleccionado la longitud de onda adecuada para el
análisis ( máx. = 269 nm).
5.- Leer la absorbancia de cada uno de los estándares a la longitud de onda seleccionada, con los
datos obtenidos hacer una gráfica de absorbancia contra concentración.
6.- Leer la absorbancia de cada uno de los problemas. Utilizando la tabla calcular la concentración
del problema tomando en cuenta la dilución. Reportar en ppm. De S ácido benzoico.

CÁLCULOS Y GRÁFICAS

1.- Se calcula la concentración en cada muestra con la siguiente fórmula:

Ca = ml. de S.T. x Concentración.
Volumen o aforo

0 x 100 4 ml x 100
C a 0= =0 PPM C a 4= =40 PPM
10 ml 10 ml

1 ml x 100 5 ml x 100
C a 1= =10 PPM C a 5= =50 PPM
10 ml 10 ml

6
García Bermudez Viary Shadany
 2ml x 100 6 ml x 100
C a 2= =20 PPM C a 6= =60 PPM
10 ml 10 ml

3 ml x 100 7 ml x 100
C a 3= =30 PPM C a 7= =70 PPM
10 ml 10 ml

8 ml x 100 9 ml x 100 10 ml x 100

C a 8= =80 PPM C a 9= =90 PPM C a 10= =100 PPM
10 ml 10 ml 10 ml

2.- Elabore una gráfica considerando el eje de la X para la concentración y el eje de las Y para las
lecturas de absorbancia. La curva de calibración estará comprendida en un rango de 0 a 100 ppm

3.-Representar en la gráfica que concentración de ácido benzoico tiene su problema

TABLA DE DATOS EXPERIMENTALES

MUESTRA ABSORBANCIA CONCENTRACIÓN

0 0 0 ppm
1 0.017 10 ppm
2 0.035 20 ppm
3 0.056 30 ppm
4 0.082 40 ppm
5 0.102 50 ppm
6 0.126 60 ppm
7 0.156 70 ppm
8 0.188 80 ppm
9 0.199 90 ppm
10 0.250 100 ppm
PROBLEMA 0.136 61.58333333 ppm

7
García Bermudez Viary Shadany
PARA EL MANEJO DEL PROGRAMA UV- WINLAB

1.- Checar, las características del equipo: como el voltaje, clavija, contacto etc. el tipo de
electricidad (110 ò 220) al que debe ser conectado.
2.- Encender el equipo con el botón de Off- On con un tiempo aproximado de 20 a 30 minutos de
precalentamiento antes de ejecutarlo con la finalidad de estabilizar la lámpara.
3.- Verificar que el equipo que esté instalado a la computadora contenga el programa Lambda 2S.
4.- Abrir el programa Lambda 2S, aparecerá la pantalla (Methode Files) donde se muestran los
siguientes iconos:

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO BENZOICO

Para determinar la concentración de ácido benzoico en una muestra, es necesario tener una
curva de calibración de la sustancia, la cual se elabora valorando la absorbancia del ácido en una
serie de muestras cuya concentración se conoce.

Para preparar la serie se utiliza una solución patrón de ácido benzoico disuelto en metanol,
lo que da una solución incolora por lo que su absorbancia se debe leer en el rango UV que va de
200 a 325 nm. Para determinar la longitud de onda (λ) a la que se debe correr una serie trabajar
es necesario hacer un barrido.

PARA EFECTUAR EL BARRIDO DE UNA MUESTRA

Para utilizar el equipo es necesario que haya estado prendido de 20 a 30 min. con el fin de
que se estabilice la lámpara y de resultados exactos.

El barrido se inicia sin colocar las celdas en el equipo y se hace del siguiente modo:

1.- Dar click con el mouse en el icono Aparece una ventana de diálogo.
2.- Dar click en la pestaña SCAN.
3.- Dar click con el mouse en SCAN 1.MSC. Aparece una ventana de diálogo.

8
García Bermudez Viary Shadany
4.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe anotar

Start Donde empieza el barrido 350 nm para el rango UV y 900
wavelength para el visible

End Hasta donde termina el barrido 200 nm para el rango UV y 300

wavelength para el visible

Number of El número de veces que 1

cycles realizará el barrido de cualquier
sustancia

Date interval Intervalo de datos 1 nm.

Autosave Guardar automáticamente el Si se desea guardar el espectro
espectro ( On- Off ) se activa On. Si no se desea
guardar se activa Off .
Autoprint Si se desea imprimir el espectro Si se desea imprimir el espectro
( On- Off ) se activa On. Si no se desea
imprimir se activa Off

Ordinate El valor máximo que puede 1.000

max. tener la ordenada (1.000)

Ordinate min. El valor mínimo (0.000) que 0.000

puede tener la ordenada. Nota
estos valores pueden ser
modificados después de que
finalice el barrido.

Display Cuenta con dos opciones serial Serial

y overlay.
Serial presenta un sólo espectro
en pantalla mientras que
overlay muestra dos ó mas
espectros a la vez, es decir
traslapados o superpuestos.
Method info. Es la información con la que se
identifica el método

5.- Dar click con el mouse en la pestaña INST. Aparece una ventana de diálogo.

9
García Bermudez Viary Shadany
 6.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe anotar

Ordinate Las unidades en que se mide la A
Mode ordenada. A ( Absorbancia ) ó T
( Transmitancia. )
Lamp UV Lámpara de Deuterio (200- 326 Si se trabaja en el rango visible
nm.) se apaga esta lámpara dando
click en Off. Si se trabaja en el
rango UV se enciende la
lámpara dando click en On
Lamp VIS Lámpara de Tungsteno ( 326- Si se trabaja en el rango visible
900 nm ) se enciende esta lámpara
dando click en On. Si se
trabaja en el rango UV se apaga
la lámpara dando click en Off
Scan speed Velocidad de barrido. Es 240 nm/min si solo recorre el
importante considerar los rango visible.
nanómetros a recorrer y buscar 480 nm/min si recorre el UV y
que se efectúen en el visible
aproximadamente 1 minuto.
( 240 nm/min.)
Ejemplo. Si se realiza un
barrido de 200-700nm son 500
nm a recorrer por lo que la
velocidad de barrido óptima es
la de 480 nm

10
García Bermudez Viary Shadany
 T= 500 nm
------------- = 1.04 min.
480 nm/min.

Smooth Es el aislamiento, generalmente 2

el número dos es el que se
recomienda, no debe ser muy
alto porque dejaría de leer
señales bajas ni tan bajo que
pudiera confundirse con ruido.

7.- Dar click con el mouse en la pestaña REFS. Aparece una ventana de diálogo.

8.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe

anotar
Result El nombre del archivo donde se Acbenz
guardarán nuestros resultados
Filename
Calculation Si la muestra tuvo algún Factor
factor tratamiento, indicar:
Dilución-muestra liquida diluida.
Sólido disuelto-muestra sólida
disuelta en un líquido
Sólido disuelto y diluido-muestra
sólida disuelta en un líquido y diluida

11
García Bermudez Viary Shadany
 Number of El número de muestras a analizar 1
samples
Sample identify El nombre con el cual se identificará Acbenz
(n) la(s) muestra (s)

9.- Dar click con el mouse en la pestaña SAMPLE. Aparece una ventana de diálogo

10.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe anotar

Result El nombre del archivo donde se BENZ
Filename guardarán nuestros resultados
Calculation si la muestra tuvo algún Factor.
factor tratamiento, indicar:
Dilución- Muestra líquida diluida
Sólido disuelto- Muestra sólida
disuelta en un líquido
Sólido disuelto y diluido-
Muestra sólida disuelta en un
líquido y diluida
Number of El número de muestras a 1
samples analizar
Sample El nombre con el cual se BENZ1
identify identificará (n) la (s) muestra BENZ2
(s). Etc.

12
García Bermudez Viary Shadany
11.- Dar click con el mouse en el icono Setup, esperar a que el icono Start se ponga de color
verde.
12.- Dar click con el mouse en el icono Start, esperar a que el espectrofotómetro pida el blanco.
13.- Colocar las 2 celdas con el blanco. Revisar la posición de las celdas.
14.- Dar aceptar y esperar a que pida el tubo con la especie.
15.- Retirar la celda de adelante, vaciarla, enjuagarla 2 veces con un poco de la muestra central de
la serie y colocarla en el espectrofotómetro.
16.- Dar aceptar y esperar a que se forme la gráfica.
17.- Dar click en el icono para que de las longitudes de onda de los picos. Se toma la del
pico mayor.

CORRIDA DE UNA SERIE

El espectrofotómetro no debe tener ninguna celda. Para realizar la corrida se siguen los
siguientes pasos:
1.- Dar click con el mouse en el icono Se despliega una ventana de diálogo.

2.- Dar los datos:

Función Indica Dato que se debe anotar

Ordinate Selecciona la forma de la Single wavelength
mode ordenada.
Baseline Puede realizar la correción de la No correction
correction línea base o no.
Curve/factor El comportamiento de la curva: Lineal

13
García Bermudez Viary Shadany
 lineal, cuadrática o cúbica.
Intercept Si se quiere que pase por el No
cero o no.
Analytical 1 La longitud de onda a la que se Se anota la longitud de onda
realiza la curva. que haya indicado el barrido
Number de Número de estándares con la 1
replicates misma concentración.
Number of Número de muestras que tiene 10
samples to la serie.
average
Method info Información con la que se
identifica el método.

3.- Dar click con el mouse en la pestaña INST. Aparece una ventana de diálogo.

4.- Dar los siguientes datos.

Función Indica Dato que se debe anotar

Response Tiempo en que realizará cada
lectura.
Lamp UV Lámpara de Deuterio (200- 326 Si se trabaja en el rango visible
nm.) se apaga esta lámpara dando
click en Off. Si se trabaja en el
rango UV se enciende la
lámpara dando click en On
Lamp VIS Lámpara de Tungsteno ( 326- Si se trabaja en el rango visible
900 nm ) se enciende esta lámpara

14
García Bermudez Viary Shadany
 dando click en On. Si se
trabaja en el rango UV se apaga
la lámpara dando click en Off
Scan speed Velocidad de barrido. Es 240 nm/min si solo recorre el
importante considerar los rango visible.
nanómetros a recorrer y buscar 480 nm/min si recorre el UV y
que se efectúen en el visible
aproximadamente 1 minuto.
( 240 nm/min.)
Ejemplo. Si se realiza un
barrido de 200-700nm son 500
nm a recorrer por lo que la
velocidad de barrido óptima es
la de 480 nm

T= 500 nm
------------- = 1.04 min.
480 nm/min.

Smooth Aquí no tiene sentido 2

5.- Dar click con el mouse en la pestaña REFS. Aparece una ventana de diálogo.

6.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe anotar

Use old Opción de utilizar una curva

15
García Bermudez Viary Shadany
 calibration construida.
Enter Opción de utilizar una curva de
calibration calibración.
edit mode
Recalibration Recalibrar
Calibration Modo de la calibración
mode
Concentració Unidades en las que se mide la ppm
n unit concentración.
Number of Número de estándares que se 10
references van a introducir en la curva de
calibración.
References Nombre con el que se Benz 1 , Benz 2 , Benz 3
name identifican los estándares.
Concentration Valor de la concentración del 100 ppm
estándar.

7.- Dar click con el mouse en la pestaña SAMPLE. Aparece una ventana de diálogo.

8.- Dar los siguientes datos:

Función Indica Dato que se debe

anotar
Result Filename El nombre del archivo AcBenz
donde se guardarán
nuestros resultados

16
García Bermudez Viary Shadany
 Calculation factor Si la muestra tuvo algún Factor.
tratamiento, indicar:
Dilución- Muestra líquida
diluida
Sólido disuelto- Muestra
sólida disuelta en un
líquido
Sólido disuelto y diluido-
Muestra sólida disuelta
en un líquido y diluida
Number of samples El número de muestras a 10
analizar

Sample identify El nombre con el cual se AcBenz 1

identificará (n) la (s) AcBenz 2
muestra (s). AcBenz 3

9.- Dar click con el mouse en la pestaña OUTPUT. Aparece una ventana de diálogo.

10.- Dar los siguientes datos:

Autoprint Tiene varias opciones para la curva de calibración que se pueden imprimir. Se marca el
que se necesite:

□ Tabla de resultados.
□ Datos de la curva.
□ Lista de las muestras.
□ Resultados de la calibración.
□ Curva de calibración con parámetros.

17
García Bermudez Viary Shadany
 □ Lista de referencia.

Autosave La opción de auto guardar los resultados.

11.- Dar click con el mouse en Setup y esperar a que Start se ponga verde.
12.- Dar click con el mouse en Start y esperar a que el espectrofotómetro pida el blanco. Se ponen
las dos celdas con el blanco.
13.- Dar aceptar y esperar a que pida la 1ª muestra.
14.- Retirar la celda de adelante, vaciarla, enjuagarla 2 veces con un poco de la 1ª muestra de la
serie y colocarla en el espectrofotómetro.
15.- Dar aceptar y esperar a que pida la 2ª muestra.
16.- Retirar la celda de adelante, vaciarla, enjuagarla 2 veces con un poco de la 2ª muestra de la
serie y colocarla en el espectrofotómetro.
17.- Dar aceptar y esperar a que pida la 3ª muestra así continúa hasta terminar las muestras.
18.- Imprimir los datos.

CORRIDA DE LOS PROBLEMAS

1.- Seguir los mismos pasos que para la corrida de la serie, excepto que no se le da que haga una
gráfica con los resultados, sino únicamente que los enliste.
Adicionar hoja milimétrica y luego quitar la nota.

OBSERVACIONES

El ácido benzoico es un ácido carboxílico aromático que tiene un grupo carboxilo unido a un anillo
fenílico. En condiciones normales se trata de un sólido incoloro con un ligero olor característico. Es
poco soluble en agua fría pero tiene buena solubilidad en agua caliente o disolventes orgánicos.
El ácido benzoico es poco soluble en agua debido a que este ácido es un grupo carbonilo conectado
a un anillo bencénico. La parte polar de la molécula, o la que es soluble en agua, es el grupo

18
García Bermudez Viary Shadany
carbonilo, que es muy pequeño en comparación al anillo bencénico. Debido a que el anillo
bencénico es insoluble en agua y ocupa la mayor parte de la molécula no deja que el agua disuelva
la molécula que encuentra dificulta desde llegar al grupo carbonilo.
C6H5COOH + H2O ===== C6H5COO(-) + H3O(+)
Las soluciones de ácido benzoico son incoloras por lo que para detectar su concentración es
necesario neutralizar un espectrofotómetro UV.

Es un conservante utilizado tanto como ácido como en forma de

sus sales de sodio, de potasio o de calcio.
El ácido benzoico y sus derivados sólo se pueden utilizar para
conservar alimentos con un pH ácido. Protege sobre todo contra el
moho (también las variantes que producen las aflatoxinas) y
fermentaciones no deseadas, a veces se utiliza conjuntamente con
el dióxido de azufre (SO2) o los sulfitos para atacar un espectro
más amplio de microorganismos.
También es producto de partida en la producción de ésteres del ácido benzoico que se utilizan en
perfumería.
Algunos ésteres con alcoholes de cadena más larga se utilizan también para ablandecer plásticos
como el PVC.
El peróxido del ácido benzoico se utiliza como iniciador de reacciones radicalarias.
Se usa para condimentar el tabaco, para hacer pastas dentífricas, como germicida en medicina y
como intermediario en la fabricación de plastificantes y resinas.
Los productos enlatados usan ácido benzoico derivado del tolueno como preservante.

CONCLUSIONES

El ácido benzoico es un ácido débil que actúan fundamentalmente en su forma no disociada, en

esta práctica pude darme cuenta que el benzoato se encuentra en una región no visible porque es
traslucida y se debe usar por lo consecuente el rango uv, es por eso que para poder detectar su
concentración en las muestras se hacen todos los cálculos necesarios, así como también el
espectrofotómetro nos da las absorbancia de las soluciones de acuerdo a sus concentraciones de
ácido benzoico en metanol, en mi grafica se puede mostrar que se encuentra por así decirlo dentro
del rango de o a 1.
El ácido benzoico solo se utiliza para conservar alimentos, protegiendo contra el moho y
fermentaciones no deseadas, pero el consumo excesivo es dañino para la salud provocando

19
García Bermudez Viary Shadany
alergias hasta cáncer, en la actualidad la gran parte de las comidas que consumimos tienen este
conservante.

CUESTIONARIO

1.- Establezca la diferencia entre un fotómetro y un espectrofotómetro.

La diferencia fundamental entre un espectrofotómetro y un fotómetro o fotocolorímetro, consiste

en que el fotocolorímetro trabaja únicamente en el espectro de luz visible y selecciona una longitud
de onda determinada mediante filtros fijos.

En cambio, un Espectrofotómetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras
regiones del espectro electromagnético (ultravioleta e infrarrojo). Además posee un monocromador
para seleccionar la longitud de onda deseada.

2.- ¿Cómo se obtiene la luz monocromática?

La luz monocromática es aquella que está formada por componentes de un solo color. Es decir, que
tiene una sola longitud de onda, correspondiente a ese color.
Esto quiere decir que para producir radiación monocromática, se generan los electrones por medio
del calentamiento de un filamento y luego los aceleramos en un campo electromagnético, los
electrones de alta energía chocan contra un ánodo con suficiente velocidad para penetrar las capas
electrónicas externas del material del ánodo. Cuando el electrón choca con la capa de electrones K,
el electrón incidente remueve su órbita al electrón de la capa K. El átomo pierde uno de sus
electrones de la capa K y está en condición meta estable, en consecuencia el electrón de la capa L
entra a llenar la capa K.

3.- ¿En qué Leyes se fundamentan los métodos espectroscópicos?

Ley de Lambert – Beer

Ley de Maxwell

4.- ¿Qué rangos de longitud de onda comprende la región UV?

UV-Vis se denomina una técnica general porque la mayoría de las moléculas se absorbe en el rango
de longitud de onda de UV-Vis. La UV se extiende de 100 – 400 nm y el espectro visible de 400-
700 nm. El rango de 100 – 200 nm se llama UV profundo. 

5.- ¿Qué tipo de lámpara emplea un espectrofotómetro en UV?

Las lámparas de deuterio y las lámparas halógenas de tungsteno (VIS, visible) se emplean en la
espectroscopia ultravioleta/visible. En este proceso se mide la absorción de luz visible (390 - 800
nm) y luz ultravioleta (190 – 390 nm). También se utilizan lámparas de mercurio que solo emiten
un espectro de línea.

6.- ¿Qué tipo de celdas se utilizan en la región ultravioleta?

Las celdas son un pequeño tubo de sección circular o cuadrada, sellado en un extremo, fabricado
en plástico, vidrio o cuarzo (transparente a la luz ultravioleta) y diseñado para mantener las

20
García Bermudez Viary Shadany
muestras durante los experimentos de espectroscopia. Las celdas deben ser tan claras o
transparentes como sea posible, sin impurezas que puedan afectar a una lectura espectroscópica.
Al igual que un tubo de ensayo, una cubeta puede estar abierta a la atmósfera por la parte superior
o tener una tapa para sellarla. También se puede utilizar Parafilm para sellarla.

7.- ¿Cómo afecta la muestra al ser sometida a una radiación UV?

El comportamiento de la muestra es donde tiene lugar la interacción con la materia (debe

producirse donde no haya absorción ni dispersión de las longitudes de onda). Es importante
destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, con
base en sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula de fundamental-
excitado.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.cenunez.com.ar/archivos/51-Comentariossobresolventesysolubilidades.pdf

https://www.studocu.com/pe/document/universidad-nacional-san-luis-gonzaga/farmacologia/practica/solubilidad-
del-acido-benzoico/3260243/view

https://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1027

https://es.wikipedia.org/wiki/Luz_monocrom%C3%A1tica

Vo. Bo. del Maestro

Calificación

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García Bermudez Viary Shadany