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INDICE............................................................................................................................................1
INTRODUCCIÓN...........................................................................................................................2
ADN.................................................................................................................................................3
ADN SATELITAL..........................................................................................................................7
BANCO DE ADN...........................................................................................................................7
SISTEMA CODIS...........................................................................................................................8
Límites de CODIS....................................................................................................................9
Análisis de RFLP...................................................................................................................10
AmpFLP.................................................................................................................................11
Análisis mitocondrial.............................................................................................................13
BIBLIOGRAFÍA...........................................................................................................................14
INTRODUCCIÓN
Las pruebas de ADN son consideradas el estándar de oro como evidencia en cierto tipo de casos,
especialmente en la identificación.
La parte positiva del efecto CSI tiene que ver con el creciente interés de los jóvenes por los
temas forenses y el incremento exponencial en el número matriculados en este tipo de cursos de
especialización.[ CITATION Ant11 \l 2058 ]
ADN
ADN es el nombre químico de la molécula que contiene la información genética en todos los
seres vivos. La molécula de ADN consiste en dos cadenas que se enrollan entre ellas para formar
una estructura de doble hélice. Cada cadena tiene una parte central formada por azúcares
(desoxirribosa) y grupos fosfato. Enganchado a cada azúcar hay una de de las siguientes 4 bases:
adenina (A), citosina (C), guanina (G), y timina (T). Las dos cadenas se mantienen unidas por
enlaces entre las bases; la adenina se enlaza con la timina, y la citosina con la guanina. La
secuencia de estas bases a lo largo de la cadena es lo que codifica las instrucciones para formar
proteínas y moléculas de ARN.
Además de este ADN autosómico heredado al 50% de nuestros progenitores, otros dos tipos de
ADN humano tienen gran interés en las investigaciones forenses.
El estudio del ADN del cromosoma Y, implica que todos los miembros varones de un grupo
familiar que compartan la línea paterna tienen el mismo haplotipo de cromosoma Y. El análisis
de sus regiones STR (Y-STR) permite obtener un patrón genético específico del varón, lo que
resulta muy útil en la identificación genética de restos de semen y otros fluidos biológicos en los
casos de agresiones sexuales a mujeres.
Cada ser vivo es como es porque cada una de sus células se ha formado a partir de unas
“instrucciones biológicas” que determinan sus propiedades y características de todo tipo (grupo
sanguíneo, el color del cabello, los rasgos faciales, el ritmo metabólico. Estas instrucciones
biológicas son lo que se denomina información genética, cuyo soporte físico es el ácido
desoxirribonucleico (ADN).
Lo más característico y esencial es que esa información está contenida en el ADN mediante lo
que se conoce como código genético, una serie de instrucciones de lectura que permiten, “leer”
un fragmento de ADN para obtener la información necesaria para, por ejemplo, determinar el
color del cabello.
3. Pese a esta sencillez, le material genético humano, por ejemplo, consta de unos 3.000
millones de nucleótidos, que se reparten en un conjunto de 23 pares de cromosomas.
7. La gran mayoría (>99%) de la secuencia genética es común a todos los seres humanos.
Una persona recibe la mitad de su material genético de cada uno de sus progenitores, cuya
combinación da un resultado único y absolutamente diferente. A su vez, será el material genético
que transferirá a sus descendientes. Esa combinación de material genético recibido de los
progenitores y transmitido a los descendientes es lo que se ha llamado “herencia genética” y
constituye el proceso básico mediante el cual las especies biológicas se perpetúan en el tiempo.
[ CITATION Uni \l 2058 ]
ADN SATELITAL
La DNA por satélite está principal presente en heterocromatina o las regiones apretado cargadas
de cromosomas en los centrómeros, telomeres, y a veces incluso en la región del euchromatin
(región activa del genoma). Aunque la DNA convencional por satélite se haya sabido para ser
no-codificación del `' (es decir no codifica la proteína), las pruebas recientes sugieren que algo
de la DNA por satélite experimente la transcripción. [ CITATION LBa91 \l 2058 ]
Las regiones entre dos repeticiones o microsatellite simples de la serie se llaman como las
repeticiones simples interes de la serie del `' o ISSRs. Debido a la presencia de gran número de
repeticiones, el régimen de la mutación es alto en la DNA por satélite. Se especula que como la
mayor parte de estas series no cifran para las proteínas, las consecuencias perjudiciales del alto
régimen de la mutación son inferiores. Así, no hay presión de la selección contra ella.
Aunque la DNA por satélite sea popular probablemente parte de DNA de los desperdicios del `' o
de la DNA egoísta del `' que ocupen el genoma pero no tenga ningún efecto sobre la aptitud
física de un organismo, demostración reciente de los estudios varias funciones biológicas
distintas. [ CITATION DrS19 \l 2058 ]
BANCO DE ADN
De especial importancia son las bases de datos de ADN con fines de investigación criminal, en
las que los perfiles de ADN anónimos obtenidos de vestigios biológicos de la escena del delito
pueden ser comparados de forma sistemática entre sí, así como con los obtenidos de individuos
que son sospechosos o condenados en una causa penal, ofreciendo una herramienta muy eficaz
de identificación humana con una alta potencialidad para reducir el índice de criminalidad de
determinados delitos sin autor conocido y, especialmente, aquellos en los que existe una alta
reincidencia.
La utilización de estas bases de datos cobra también una vital importancia en los procesos de
identificación de desaparecidos en conflictos bélicos o en grandes catástrofes que afectan a un
gran número de víctimas cuyo estado de conservación puede limitar, o incluso imposibilitar, la
identificación de los cuerpos por los métodos forenses convencionales. Los perfiles genéticos
obtenidos pueden ser comparados de forma sistemática con un índice de perfiles de referencia de
familiares (saliva o sangre), u obtenidos de muestras ante-mortem de las víctimas (Cepillos de
dientes, peines,...).[ CITATION DrS19 \l 2058 ]
SISTEMA CODIS
Este programa permite que los agentes de la ejecución de la ley a nivel estatal, local y nacional
comparen los perfiles de ADN de un delito específico con todos los perfiles de ADN que se
encuentran en la base de datos.
1. El Índice de Condenados contiene los perfiles de ADN de las personas que fueron
condenadas de ciertos delitos. En Massachusetts, el perfil de ADN de cada adulto condenado
de un delito mayor se añade a la base de datos. Cada estado promulga sus propias leyes sobre
quién se añade al banco de datos.
2. El Índice Forense contiene los perfiles de ADN hallado en el lugar de los hechos.
CODIS realiza búsquedas en ambos índices para ver si aparece el perfil de ADN en cuestión. Si
existe el mismo perfil de ADN en el Índice Forense como en el Índice de Condenados, puede
que los agentes de la aplicación de la ley tengan la identidad del/los sospechoso(s).
Límites de CODIS
No todos los perfiles de ADN que se obtuvieron del lugar de los hechos se encuentran en
el Índice Forense. Después de que se publicó el CODIS en 2000, los laboratorios de
criminalística solo incluían los perfiles de ADN que fueron obtenidos con estuches de
violación sexual y que reunieron las siguientes condiciones:
El análisis consiste en hacer un ensayo Southern (o Southern blot, un método que sirve para
verificar si una determinada secuencia de ADN está o no presente en una muestra de ADN
analizada) y usar sondas específicas para detectar los VNTR (número variable de repeticiones en
tándem).
En primer lugar el ADN que se va a analizar se separa de otros materiales. A continuación, debe
cortarse en fragmentos de diferentes tamaños usando enzimas de restricción, que son proteínas
que cortan el ADN sin dañar las bases. Los fragmentos se ordenan por tamaño empleando la
electroforesis en gel. El ADN, que tiene carga negativa, avanza en el campo eléctrico. Las
moléculas más pequeñas se mueven más rápidamente a través del gel, por lo que se localizarán
más alejadas del origen que los fragmentos más grandes. Luego por calor o solución alcalina, se
aplica gel con el fin de desnaturalizar el ADN y se separa en fragmentos individuales. Una vez
realizado esto el ADN esta ahora listo para ser analizados utilizando una sonda radiactiva de
reacción de hibridación.
Para hacer la sonda radiactiva, se necesita la polimerasa del ADN. El ADN que se va someter a
la radiactividad se coloca en un tubo de ensayo. A continuación se agrega la polimerasa en el
tubo. Se disuelve y se espera a que comience a funcionar. Como los parches de polimerasa de
ADN rompen el ADN, los actuales son sustituidos por los nuevos nucleótidos en el tubo. Cada
vez que la muestra tenga una base guanina, la citosina será puesto en radiactividad. En la
repetición del ADN, la polimerasa también se vuelve radioactiva. Las piezas radioactivas están
listas para su utilización. Ahora la sonda radioactiva puede ser usada para crear una reacción de
hibridación. La hibridación sucede cuando dos secuencias genéticas se unen a causa del
hidrógeno que se encuentra en los pares de las bases. Hay dos de estos entre adenina (A) o timina
(T) y tres de citosina (C) o guanina (G). Para realizar la hibridación el ADN tiene que estar
desnaturalizado.
El ADN desnaturalizado radioactivo y la sonda deben ser puestos en una bolsa de plástico con
líquido salino y sellado fuertemente. La sonda se adherirá a la desnaturalización de ADN
dondequiera que se encuentre de forma apropiada. La sonda y el ADN no tienen que encajar de
forma exacta. Este proceso termina haciendo un patrón de ADN de las huellas digitales. Toda
persona tiene un VNTR que ha heredado de uno de sus padres y los VNTR son únicos para cada
persona.
Análisis por PCR
Consiste en aplicar la técnica de PCR para amplificar regiones específicas con los cebadores
adecuados. Con la invención de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) la tecnología
genética tuvo un importante avance en la capacidad de recuperación de información a partir de
muestras muy pequeñas. PCR consiste en la amplificación de regiones específicas de ADN
usando temperatura y una enzima polimerasa termoestable junto con fluorescencia etiquetada en
una secuencia específica del ADN. Existen kits comerciales que utilizan polimorfismos de
núcleotido único (SNP) de discriminación disponible, estos kits de uso de PCR usados para
amplificar regiones específicas con variaciones conocidas e hibridación con sondas de anclado
en tarjetas, lo que resulta en una mancha de color correspondiente a una orden en particular.
Las principales críticas al método RFLP inciden en su lentitud y en las grandes cantidades de
ADN que requiere para obtener resultados útiles. Esto llevó a métodos basados en PCR que
requieren menores cantidades de ADN que pueden ser también más degradados que los
utilizados en análisis de RFLP.
AmpFLP
Este método usa regiones altamente polimórficas que tienen secuencias cortas repetidas de ADN
(el más común es de 4 bases repetidas, pero hay otras longitudes en uso, incluyendo bases 3 y 5).
Porque diferentes personas tienen diferentes números de unidades de repetición y estas regiones
de la DNA se puede utilizar para diferenciar entre las personas. Estos STR loci (lugares) son
atacados con primers específicos de secuencia y se amplifican mediante PCR. Los fragmentos de
ADN que son resultado entonces detectados y separados mediante electroforesis. Existen dos
métodos de separación y detección, la electroforesis capilar (CE) y la electroforesis en gel.
Este método usa regiones altamente polimórficas que han repetido secuencias cortas de ADN (el
más común es de 4 bases repetidas, pero hay otras longitudes en uso, incluyendo bases 3 y 5).
Porque diferentes personas tienen diferentes números de unidades de repetición, estas regiones
de la DNA se puede utilizar para discriminar entre las personas. Estos STR loci (lugares) son
atacados con primers específicos de secuencia y se amplifican mediante PCR. Los fragmentos de
ADN que son resultado entonces detectados y separados mediante electroforesis. Existen dos
métodos de separación y detección, la electroforesis capilar (CE) y la electroforesis en gel.
Análisis del cromosoma Y[
Análisis mitocondrial
Se usa en muestras muy degradadas, ya que el DNA mitocondrial posee más copias que el
nuclear. Se amplifican las regiones HV1 y HV2 y se comparan siempre con familiares por parte
materna ya que las mitocondrias son herencia exclusiva de la madre. Los científicos forenses
amplían la región HV1 y HV2 del ADNmt y luego cada región es secuenciada en un único
nucleótido y se compara las diferencias con la referencia.
BIBLIOGRAFÍA
Dr. Surat P, P. (26 de Febrero de 2019). NEWS MEDICAL LIFE SCIENCES. Obtenido de
https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Satellite-DNA-(Spanish).aspx