MÉTODOS CUALITATIVOS PARA LA

IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS
Bernal, J. Bernal, L. Contreras, L. Mora, A. Quevedo, D.

Laboratorio #1, Grupo 3, Programa profesional en ciencias del deporte, Universidad de Ciencias
Aplicadas y Ambientales U.D.C.A.

BIOQUÍMICA

Martha Margarita González Beltrán

23 de Octubre del 2019

RESUMEN

El presente laboratorio de métodos cualitativos para la identificación de biomoléculas, se dividió en tres partes
fundamentales, donde la primera parte se basó en la explicación del procedimiento a seguir, en cuanto a la
segunda parte, se llevó a cabo la ejecución de la toma de muestras para la identificación de carbohidratos,
lípidos y proteínas. Finalmente, en la tercera parte se evidenciaron los resultados positivos de las muestras
utilizadas para la identificación de biomoléculas.

Palabras clave: ​Carbohidratos, lípidos, proteínas, biomoléculas, reactivos

ABSTRACT

The current qualitative methods laboratory for the identification of biomolecules, was divided in three
fundamental parts, where the first part was based on the explanation of the process to follow, as to the second
part, the sampling was carried out for the identification of carbohydrates, lipids and proteins. Finally, in the third
part, the positive results of the samples that we used for the identification of biomolecules were evidenced.

Keywords: ​Carbohydrates, lipids, proteins, biomolecules, reagents.

INTRODUCCIÓN hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, sulfuro y fósforo.

En la práctica de laboratorio se utilizarán diversos
compuestos orgánicos los cuales están constituidos
por carbohidratos, lípidos y proteínas. Para
identificar cual pertenece a cada uno, se utilizaran
diversos reactivos, obteniendo como resultado
colores que identificaran si son pruebas positivas y
negativas. Asimismo, para su total comprensión se
llevará a cabo la solución de un cuestionario.
MARCO TEÓRICO
Biomolécula
Son compuestos químicos que se encuentran en los
organismos vivos. Están formadas por sustancias
químicas compuestas principalmente por carbono,
(GreenFacts, 2007)
Las biomoléculas se encuentran desde niveles
micro hasta niveles macro y cumplen papeles
fundamentales en pro del funcionamiento del
individuo.
Carbohidratos
Biomoléculas compuestas por carbono, hidrógeno
y oxígeno, cuya función en los seres vivos es
proporcionar energía. (Castaño, J)
Son una de las tres formas principales que tiene el
cuerpo para obtener energía o calorías por lo que
son indispensables en la dieta de cualquier persona.
Generalmente son considerados carbohidratos los
azúcares, los almidones y las fibras, ya están Procedimientos:
presentes en una enorme variedad de alimentos A. Prueba Benedict:
1. Se marcaron 4 tubos de ensayo
Proteínas del 1 al 4.
Las proteínas son elementos esenciales para el 2. Se pelo y trituró un fragmento de
crecimiento y la reparación, el buen la papa y de la pera para extraer
funcionamiento y la estructura de todas las células el zumo.
vivas. Sin proteínas es imposible la vida, porque 3. Se adiciono a los tubos de
son la base de diferentes estructuras vitales. ensayo lo siguiente:
(Sanitas) Tubo 1: 3 ml de agua destilada.
Las proteínas son una de las macromoléculas más Tubo 2: 3 ml de zumo de papa.
importantes del organismo ya que participan en Tubo 3: 3 ml de zumo de pera.
casi todos los procesos biológicos y están presentes Tubo 4: 3 ml de solución de
en todas las células, la unidad estructural de las glucosa al 20% .
proteínas son los aminoácidos. 4. A cada tubo ensayo se le
adiciono 1 ml de reactivo de
Lípidos Benedict.
Denominamos lípidos a un conjunto muy 5. Mezclar cada tubo de ensayo.
heterogéneo de biomoléculas cuya característica 6. Se calentaron los tubos de
distintiva aunque no exclusiva ni general es la ensayo en baño maría durante 10
insolubilidad en agua, siendo por el contrario, minutos.
solubles en disolventes orgánicos. (Raisman, J. 7. Observar los resultados
2004) obtenidos.
Su constitución está basada en mayor medida en 8. Registrar los resultados
carbono, hidrógeno, y oxígeno, aunque también se obtenidos.
hace presente el nitrógeno, el fósforo y el azufre ​ B. Prueba de Lugol:
variando esto según el tipo de lípido. 1. ​Se marcaron 4 tubos de ensayo
del 1 al 4.
METODOLOGÍA 2. Se pelo y trituró un fragmento de
Materiales: la papa y de la pera para extraer
● 13 tubos de ensayo. el zumo.
● Vasos de precipitado de 50 y 200 ml. 3. Se adiciono a los tubos de
● Gradillas. ensayo lo siguiente:
● Pinzas para tubos de ensayo. Tubo 1: 3 ml de agua destilada.
● Mortero de porcelana. Tubo 2: 3 ml de zumo de papa.
● Bisturí. Tubo 3: 3 ml de zumo de pera.
● Goteros. Tubo 4: 3 ml de almidón.
● Pipetas de 10 ml. 4. A cada tubo ensayo se le
● Mezclador. adiciono 1 ml de Lugol.
● Agua destilada. 5. Mezclar cada tubo de ensayo.
● Una papa. 6. Observar los resultados
● Una pera. obtenidos.
● Un sobre de gelatina sin sabor. 7. Registrar los resultados
● Un huevo. obtenidos.
● Aceite. ​ C. Prueba detección de lípidos:
Reactivos: 1. ​Se marcaron 4 tubos de ensayo del
● Reactivo de Benedict. 1 al 4.
● Lugol. 2. ​Se pelo y trituró un fragmento de la
● Reactivo Biuret. papa y de la pera para extraer el zumo.
● Reactivo Sudan. ​3. ​Se adiciono a los tubos de ensayo lo
● Solución de glucosa al 20%. siguiente:
 Tubo 1: 1 ml de agua destilada y
1 ml de aceite.
Tubo 2: 2 ml de zumo de papa o
pera y 1 ml de agua destilada.
Tubo 3: 2 ml de agua destilada.
Tubo 4: 2 ml de aceite.
En este punto, no hay ningún cambio
​4. A ​ cada tubo ensayo se le adiciono 1
significativo en la coloración de las
ml de Sudan.
sustancias, teniendo en cuenta que
​5. ​Mezclar cada tubo de ensayo. aquí las reacciones de Benedict con
​ 6. ​Observar los resultados obtenidos. agua y Benedict con solución de
​7.​ Registrar los resultados obtenidos. glucosa al 20% son usadas como
​ D. Prueba detección de proteínas: reacciones de control negativo y
1. ​Se preparó ¼ de sobre de gelatina positivo respectivamente.
sin sabor y se puso en el baño María.
​ 2. ​ Se separó la clara del huevo. -Después del baño maria
​3. Se marcaron 5 tubos de ensayo del
1 al 5.
​4. Se adiciono a los tubos de ensayo lo
siguiente:
Tubo 1: 2 ml de agua destilada.
Tubo 2: 2 ml de solución de Una vez finalizado el baño maría,
gelatina. podemos apreciar un cambio
significativo en la mayoría de
Tubo 3: 2 ml de clara de huevo.
coloraciones. El agua no cambió su
Tubo 4: 3 ml de zumo de pera o
coloración al ser el control negativo
papa.
de la reacción, mientras que nuestro
Tubo 5: 2 ml de albúmina.
control positivo, la solución de
​5. A cada tubo ensayo se le adiciono 1
glucosa al 20%, se tornó de color
ml de Biuret. rojo. Basándonos en esto podemos
​ 6.​ Mezclar cada tubo de ensayo. observar que el zumo de papa se
​7. ​ Observar los resultados obtenidos. torno de un color amarillo opaco
​8.​ Registrar los resultados obtenidos. mientras que el zumo de pera
cambio su coloración a un amarillo
RESULTADOS intenso​.
1. DETECCIÓN DE CARBOHIDRATOS
a. Prueba de Benedict b. Prueba de Lugol
Para la prueba de Benedict se
tomaron cantidades similares de
cuatro sustancias: agua, zumo de
pera, zumo de papa y solución de
glucosa al 20%. Luego cada
sustancia se mezclaba con 1 ml Para la prueba de lugol se tomaron
de reactivo de Benedict y se cantidades similares de cuatro
dejaba en baño maría durante 10 sustancias: Agua, zumo de pera,
minutos para observar los zumo de papa y almidón. Luego
resultados. cada sustancia se mezclaba con 1 ml
de Lugol y se observaban las
reacciones.
Las reacciones de Lugol con agua y
-Antes del baño maria almidón se usaban como reacciones
de control negativo y positivo
respectivamente, donde el agua se
 tornó de color amarillo y el almidón
se torno de un color marrón
completamente oscuro. Basándonos
en esto pudimos observar que el
zumo de pera se torno de un color
amarillo semi oscuro y el zumo de
papa se tornó de color marrón fuerte
similar a la reacción del almidón.
2. DETECCIÓN DE LÍPIDOS
Para la prueba de detección de lípidos se
tomaron tres sustancias, pero se ocuparon
cuatro tubos de ensayo ya que algunas de estas
fueron mezcladas: agua y aceite, zumo de papa
y agua, aceite y finalmente agua. El agua y el
aceite se usaron como reacciones de control
negativo y positivo respectivamente, donde el
negativo no presentaba un cambio notable en
su coloración y el positivo presentaba un ligero
color rojo. Luego tenemos a la mezcla entre
agua y aceite que presentaba un fuerte color
rojo y la mezcla de zumo de papa y agua que
presentaba un color medio anaranjado parecido
al de un melón.
3. DETECCIÓN DE PROTEÍNAS
Para la prueba de detección de proteínas se
usaron cinco sustancias: agua, clara de huevo,
zumo de pera, solución de gelatina, donde el
agua y la albúmina se usaron como reacciones
de control negativo y positivo
respectivamente, donde el agua solo tomaba un
tono azul muy ligero y la albúmina adquiere
un tono violeta. La solución de gelatina y la
clara de huevo adquirieron este mismo tono
violeta mientras que el zumo de pera solo
oscurece su color un poco.
ANÁLISIS Y CUESTIONARIO
En esta prueba se usaron diferentes reactivos para
lograr la identificación de biomoléculas
(Carbohidratos, Lípidos y proteínas).Se usó el
reactivo de benedict el cual según Paternina,Peralta
y Doria (2016)nos dicen que ”La reacción o prueba
de benedict identifica azúcares reductores como la
lactosa, glucosa, entre otras.”, esa prueba se usa
para la detección de carbohidratos junto con la
prueba de lugol la cual es una solución de yodo
molecular. Para la detección de lípidos se usó el
reactivo de sudan que según Paternina et
al.(2016)”es un tinte soluble en grasa usado para
marcar triglicéridos en secciones congeladas,
lípidos y lipoproteínas.”y para la detección
proteínas se usó el reactivo de biuret que según
Paternina et al.(2016)” ​Es aquel que detecta la
presencia de proteínas, péptidos y otros
compuestos con dos o más enlaces”.
DETECCIÓN DE CARBOHIDRATOS:
a:Reactivo de benedict: En esta prueba pudimos
obtener 2 resultados diferentes pues se emplearon
dos partes del procedimiento la primera antes del
baño maría y la segunda después del baño
maría,donde antes del baño no se evidencio un
cambio en la coloración en nuestras muestras,
después del baño si se evidencio un cambio en la
coloración de las muestras debido a que se tuvo por
10 minutos un cambio de temperatura donde nos
dió control negativo con el agua pues esta no posee
ningún tipo de carbohidratos, en cambio con
nuestra muestra de glucosa al 20% nos dio positivo
sabiendo que la reacción cambiará de color si se
pone en contacto con carbohidratos.por tal motivo
en nuestra reaccion con el zumo de papa y de pera
obtuvimos una coloración parecida a nuestro
control positivo pues los dos poseen carbohidratos.
b. Reactivo de lugol:En esta prueba se usaron las
mismas que en la anterior cambiando la glucosa
por el almidón, el almidón en un tipo de
carbohidrato por tal motivo se utiliza para la
detección de carbohidratos,con diferencia a la
prueba anterior se usó otro tipo de reactivo.Este
reactivo nos sirve según paternina et al.(2016) nos
sirve para “identificar los almidones y
amilasa”.teniendo en cuenta esto cuando
realizamos la reacción de lugol con agua nos dio
un control negativo ya que esta no posee
almidón,en cambio al realizar la reacción de lugol
con almidón obtuvimos un control positivo pues
este reacciona con almidón o amilasa, con el zumo
de papa y de pera obtuvimos una coloración oscura
como la de nuestra prueba positiva pues estas dos
sustancias poseen almidón o amilasa por eso este
tipo de coloración
DETECCIÓN DE LÍPIDOS
Reactivo de Sudan:. El reactivo de sudan nos sirve
para identificar los lípidos reaccionando con
algunas sustancias de estas características, al
realizar la prueba con el agua no se evidencio un
cambio en la coloración pues esta no posee ningún
tipo de lípidos por lo tanto nos dio un control
negativo,en cambio al realizar la otra prueba de
control si se evidencio un cambio en la coloración
pues esta posee lípidos, igualmente se puede
evidenciar puntos en nuestra muestra pues estos
son la evidencia que existen lípidos. en las otras
dos muestras de ​agua y aceite y zumo de papa y agua
presentaron una coloración parecida a la muestra
positiva pues estas dos mezclas poseen algún tipo
de lípidos.
DETECCIÓN DE PROTEÍNAS: El reactivo que
usamos para esta prueba según Paternina et
al.(2016) nos dice que “Es aquel que detecta la
presencia de proteínas, péptidos y otros
compuestos con dos o más enlaces”.Cuando se
realizó la prueba de control del reactivo con el
agua nos dio un color azul clarito el cual nos dice
que es negativo, la segunda prueba de control se
realizó con la albúmina teniendo en cuenta que
esta es un tipo de proteína no dio una coloración
violeta el cual es control positivo,teniendo en
cuenta que el reactivo detecta las proteínas, al
realizar las mezcla de este con la gelatina y el
huevo se evidencio el mismo tono que en la
albúmina pues la gelatina es una proteína que
proviene del colágeno y el huevo posee lípidos y
proteínas por esta última el reactivo tuvo efecto en
la muestra, con la muestra del zumo se evidencio
que no tomo el color violeta sino que se oscurece
solo un poco esto debido a que posee proteínas en
muy pocas concentraciones.
CONCLUSIONES
-Estos metodos de identificacion son netamente
cualitativos, por lo que, a pesar de poder
determinar en qué sustancias está presente la
molécula en mayor cantidad que en otra, no
podemos determinar las cantidades exactas de
concentración.
-La pera es un alimento rico en hidratos de carbono
en forma de azúcares
-La papa es un alimento rico en hidratos de
carbono en forma de almidón
-La pera presenta una baja concentración de
proteínas en comparación al huevo y la gelatina
-El biuret no puede ser usado para la identificacion
de aminoacidos ya que solo reacciona con enlaces
peptídicos propios de las proteínas.
BIBLIOGRAFÍA
- Paternina,J., Peralta,A., Y
Doria,J.(2016)IDENTIFICACIÓN DE
CARBOHIDRATOS, PROTEÍNAS Y LÍPIDOS
POR REACCIONES QUÍMICAS, DE COLOR, Y
MICROSCOPÍA DE LUZ. PRÁCTICA N°4.
Recuperado de:
http://www.academia.edu/download/55132385/ID
ENTIFICACION_DE_CARBOHIDRATOS.docx