FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE INGENIERIA

AGRONOMICA
INFORME N4: ACTIVIDAD ENZIMATICA
Yorley katalina Álvarez Álvarez 1620692, Dina luz Montejo Rincón 1611571

RESUMEN:

La catalasa es una enzima que cataliza la

descomposición del H2O2 (residuo toxico del
metabolismo celular de muchos organismos vivos)
en oxígeno y agua. Con la práctica de laboratorio
se pretende determinar la influencia de la muestra de tejidos vegetales
temperatura en la acción catalítica de la catalasa, para ello se toman luz yineth Ortiz
muestras de rábano, yuca, papa y zanahoria y se les añade H2O2 a
diferentes concentraciones, observando su reacción y el tiempo que tarda esta, repitiendo el
procedimiento con las muestras cocidas, los materiales fueron suministrados por el almacén de
materiales de la universidad Francisco de Paula Santander. Al cocinar cada una delas muestras
estas no reaccionaron con el H2O2, ya que la catalasa se desnaturalizo al calentarse. Se encontró
que la papa contiene mayor cantidad de catalasa al durar más tiempo reaccionando con
H2O2.Palabras clave: catalasa, H2O2.

ABSTRACT

Catalase is an enzyme that catalyzes the breakdown of H2O2 (toxic waste from the cellular
metabolism of many living organisms) into oxygen and water. Laboratory practice aims to
determine the influence of temperature on the catalytic action of catalase, for this purpose
samples of radish, cassava, potato and carrot are taken and H2O2 is added at different
concentrations, observing their reaction and the time It takes this, repeating the procedure with
the cooked samples, the materials were supplied by the materials warehouse of the University of
Francisco de Paula Santader. When cooking each of the samples, these did not react with H2O2,
since the catalase became denatured when heated. Potatoes were found to contain more catalase
by lasting longer reacting with H2O2. Key words: catalase, H2O2.
MARCO TEÓRICO:
Los enzimas son biomoléculas
especializadas en la catálisis de las
reacciones químicas que tienen lugar en la
célula. Son muy eficaces como catalizadores
ya que son capaces de aumentar la
velocidad de las reacciones químicas mucho
más que cualquier catalizador artificial
conocido, y además son altamente
específicos ya que cada uno de ellos induce
la transformación de un sólo tipo de
sustancia y no de otras que se puedan
encontrar en el medio de reacción.
Factores que afectan la Actividad
Enzimática
Diferentes factores ambientales pueden
afectar a la actividad enzimática.
Destacaremos dos: el pH y la temperatura.
 Efecto del pH: El pH es otro factor
que influye en la actividad
enzimática, debido a que el pH influye
en la ionización de los grupos
funcionales de los aminoácidos que
forman la proteína enzimática. Cada
enzima realiza su acción dentro de un
determinado intervalo de pH, dentro
de este intervalo habrá un pH óptimo
donde la actividad enzimática será
máxima. Por debajo del pH mínimo o
por encima del pH máximo el enzima
se inactiva ya que se desnaturaliza.
En la mayoría de las enzimas el pH
óptimo está próximo a la neutralidad,
aunque hay excepciones.
La mayoría de los enzimas presentan
un pH óptimo para el cual su actividad
es máxima; por encima o por debajo
de ese pH la actividad disminuye
bruscamente.
Este efecto se debe a que, al ser los
enzimas de naturaleza proteica, al
igual que otras proteínas, se
desnaturalizan y pierden su actividad
si el pH varía más allá de unos límites
estrechos. De ahí la conocida
importancia biológica de los sistemas
tampón.
En la mayor parte de los casos el pH
óptimo está próximo a la neutralidad,
en consonancia con el pH
intracelular, pero existen enzimas
con pH óptimo muy diverso según
sea el pH del medio en el que
habitualmente actúan (los enzimas
proteolíticos del jugo gástrico tienen
pHs óptimos próximos a 2 ya que
este es el pH de dicho jugo). Por
último existen algunos enzimas a los
que el pH no afecta en absoluto.
 Efecto de la Temperatura: Al igual
que ocurre con la mayoría de las
reacciones químicas, la velocidad de
las reacciones catalizadas por
enzimas se incrementa con la
temperatura. La variación de la
actividad enzimática con la
temperatura es diferente de unos
enzimas a otros en función de la
barrera de energía de activación de la
reacción catalizada. Sin embargo, a
 diferencia de lo que ocurre en otras
reacciones químicas, en las
reacciones catalizadas por enzimas
se produce un brusco descenso de la
actividad cuando se alcanza una
temperatura crítica. Este efecto no es
más que un reflejo de la
desnaturalización térmica del enzima
cuando se alcanza dicha
temperatura.
La Temperatura influye en la
actividad enzimática. En general por
cada 10ºC que aumente la
temperatura la velocidad de la
reacción aumenta de 2 a 4 veces.
Esta regla se cumple hasta que la
temperatura alcanza un valor máximo
(T° óptima) donde la actividad es
máxima. Esto se debe a que al
aumentar la T° aumenta el
movimiento de las moléculas y, por
tanto aumenta la probabilidad de
encuentro entre el S y el E.
 Inhibidores: Son compuestos
químicos que se unen al enzima, en
distintos puntos del mismo y
disminuyen o incluso impiden su
actividad. Estos compuestos pueden
ser de distintos tipos: iones,
moléculas orgánicas y a veces el
producto final de la reacción. A la
acción que realizan se la denomina
inhibición. La inhibición puede ser:
a) Inhibición irreversible: Cuando
el inhibidor impide
permanentemente la actividad
enzimática, bien porque se une
de forma permanente con grupos
funcionales importantes del
centro activo o bien porque altera
su estructura. A estos inhibidores
se les denomina venenos y a la
inhibición que realizan se la
denomina envenenamiento del
enzima. Ej. La penicilina que
inhibe las enzimas que sintetizan
la pared bacteriana. El ión cianuro
actúa sobre la citocromo oxidasa
(enzima respiratorio).
b) Inhibición reversible: El
inhibidor se une al enzima de
forma temporal mediante enlaces
débiles e impide el normal
funcionamiento del mismo, pero
no la inutiliza permanentemente.
Puede ser de dos tipos:
Competitiva: El inhibidor es similar al
sustrato y se puede unir al centro
activo del enzima impidiendo que lo
haga el sustrato. Es decir ambos,
inhibidor y sustrato compiten por
unirse al centro activo del enzima. La
acción suele anularse aumentando la
concentración del sustrato
No competitiva: El inhibidor no
compite con el sustrato, puede actuar
de 2 formas:
-Sobre el enzima, uniéndose a el en
un lugar diferente al centro activo y
modificando su estructura lo que
dificulta que el enzima se pueda unir
con el sustrato.
-Sobre el complejo E-S uniéndose a
él y dificultando su desintegración y
por lo tanto la formación de los
productos.
Enzima Catalasa desprendimiento de oxígeno de la reacción
catalizada por la enzima catalasa. Este
La catalasa en una enzima que la podemos
sencillo experimento puede repetirse con
encontrar en muchos organismos vivos,
distintos tejidos animales y vegetales, en los
y cataliza la reacción de descomposición del
cuales encontraremos diferentes
peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.
intensidades de burbujeo, dependiendo de la
El peróxido de hidrógeno es uno de los cantidad de catalasa presente en el tejido.
productos del metabolismo celular en
diversos organismos, pero dada su potencial
toxicidad, es transformado enseguida por la
enzima catalasa.
𝐻2 𝑂2 → 𝐻2 𝑂 + 𝑂2
En la industria, se también se utiliza la
enzima catalasa, para diferentes fines. Por
ejemplo, se usa en la industria textil, para
eliminar residuos de peróxido de hidrógeno.
Además, la catalasa cumple una función
protectora contra determinados
microorganismos patógenos, sobre todo
anaerobios. Las bacterias anaerobias,
mueren al estar en contacto con oxígeno, es
por esta razón que el oxígeno producido por
esta enzima tiene efecto bactericida sobre
estos microorganismos. Tanto es así, que la
Todas las enzimas son proteínas. Por lo
ausencia de dicha enzima por defectos
tanto, todas las enzimas sufren
genéticos, llamada acatalasemia o
desnaturalización frente al calor. Esto quiere
enfermedad de Takahara, causa importantes
decir que cuando la temperatura es muy
infecciones en la mucosa bucal, pudiendo
elevada, la enzima pierde su estructura
llegar a causar la pérdida de dientes y graves
terciaria, por lo tanto su sitio activo también
lesiones en los maxilares y tejidos blandos
se desnaturaliza, y ya no puede cumplir su
de la cavidad bucal.
función. Este hecho se puede demostrar
La reacción catalizada por esta enzima, repitiendo el experimento anterior, pero
ocurre en dos etapas, en las cuales habiendo hervido previamente los trocitos de
interviene el hierro del grupo hemo de la hígado. Cuando añadimos el agua
hemoglobina como cofactor. oxigenada, no se observa el burbujeo.

La presencia de la enzima catalasa en los

tejidos de los organismos, se puede
demostrar en un sencillo experimento de
laboratorio. Tomamos un trocito de hígado, y
lo colocamos en el fondo de un tubo de
ensayo. Luego añadimos 5 ml de agua
oxigenada (que es lo mismo que peróxido de
hidrógeno). Inmediatamente observaremos
un intenso burbujeo, que se debe al
 TUBO 1 TEJIDO DE TUBO 5 TEJIDO DE
PROCEDIMIENTO: RABANO RABANO
TUBO 2 TEJIDO DE TUBO 6 TEJIDO DE
TEJIDOS VEGETALES HERVIDOS YUCA YUCA
TUBO 3 TEJIDO DE TUBO 7 TEJIDO DE
PAPA PAPA
Tejidos vegetales TUBO 4 TEJIDO DE TUBO 8 TEJIDO DE
ZANAHORI ZANAHORIA
A
Cortar trozos unifomes

4 tubos de ensayo

Agregar agua
Hervir

Placa de laboratorio

1 ml de peróxido
d

TEJIDOS VEGETALES SIN HERVIR FIGURA 1. TEJIDOS VEGETALES SIN HERVIR

Tejidos vegetales

Cortar trozos unifomes

4 tubos de ensayo

Placa de laboratorio
FIGURA 2. TEJIDOS VEGETALES SIN HERVIR
EN REACCION AL PEROXIDO
1 ml de peróxido
d
FIGURA 3. TEJIDOS VEGETALES HERVIDOS

FIGURA 4. TEJIDOS VEGETALES HERVIDOS EN

REACCION CON PEROXIDO
ANALIS Y RESULTADOS
Todas las enzimas trabajan en un rango de
temperaturas específicas del organismo al que
pertenecen, al aumentar la temperatura de los
tejidos este se desnaturaliza y pierde su función
como se muestra en la grafica 1 al diferenciar la
muestra de tejido que se llevo a cocción y la que
no, se demostró lo dicho anteriormente, que al
aumentar la temperatura la actividad enzimática
perdió su función totalmente a diferencia de la
muestra que no se llevo a cocción, la cual tuvo
una reacción inmediata formando un burbujeo al
agregar el peróxido de hidrogeno.
 Tubo 1: En este tubo la reacción fue
muy lenta, observándose poca
producción de burbujas.
 Tubo2: En esta parte se observó una
reacción abundante de la enzima
catalasa o peroxidasa y se evidenció
por la producción de burbujas de
aire.
 Tubo 3: al igual que el tejido 2 esta
parte se observó una reacción
abundante de la enzima catalasa o
peroxidasa y se evidenció por la
producción de burbujas de aire en la
superficie del tubo.
 Tubo 4: En este tubo la reacción fue
muy lenta, observándose poca
producción de burbujas.

TEJIDOS VEGETALES HERVIDOS

(100°C)
al aumentar la temperatura de los tejidos
grafica 1. Relación de la actividad enzimática
vegetales, presento un cambio drástico de los
en tejidos vegetales crudos y sometidos a
tejidos y este hizo que la muestra se
calentamiento.
desnaturalizara y por lo cual al agregar el
peróxido de hidrogeno a las muestras estas no
presentaron ningún tipo de reacción ya que el
TEJIDOS VEGEALES SIN HERVIR
tejido se encuentra muerto.(desnaturalizado).
La papa y la yuca contienen una concentración
 Tubo 5: en este tubo no se observó
de la enzima (Catalasa) mayor que el rabano y la
zanahoria,la cual es un poderoso antioxidante, reacción así como tampoco
es decir, que impide la oxidación de las producción de burbujas.
sustancias químicas. Si agregamos Peróxido de  Tubo 6: en este tubo no se observó
Oxigeno (H2O2) a una de estos crudo, la reacción así como tampoco
catalasa separará el Oxigeno del Peróxido de producción de burbujas.
Oxigeno, liberando una gran cantidad de gas  Tubo 7: en este tubo no se observó
(O2), esto es lo que produce el burbujeo que reacción así como tampoco
observamos en nuestro experimento, por el
producción de burbujas.
contrario cuando esta cocinado (sancochado) no
 Tubo 8: en este tubo no se observó
sepodría liberar el oxígeno porque esta se
desnaturalizó en la cocción. reacción así como tampoco
producción de burbujas.

CONCLUSIONES
Los resultados de la prueba determinaron
que hubo una diferencia significativa en
algunos de los niveles de temperatura.
Esto podría explicarse con el hecho de
que la temperatura es uno de los factores
directamente influyentes en la actividad
enzimática. Según Franco (2007) “La
temperatura, junto con el pH, es uno de los
principales factores que intervienen en las
actividades enzimáticas” (p. 413). Por lo
que, los diferentes grados de temperatura
causaron efectos en la actividad enzimática.
Todas las enzimas tienen una temperatura
óptima en la cual su actividad enzimática es
mayor. Tal fenómeno se puede explicar por
medio del aumento de temperatura de los
otros niveles. “La velocidad de una
reacción catalizada por una enzima se
incrementa al aumentar la temperatura a la
cual se lleva a cabo la reacción”. (Franco
2007 p. 414). Al aumentar la temperatura,
las moléculas del sustrato (H2O2)
comienzan a “moverse” con mayor
velocidad; por lo que, aumenta la
posibilidad de que estas lleguen al sitio
activo de la enzima y se conviertan en el
producto (H2O y O2). Cuando la
temperatura de una enzima empieza a
incrementarse mucho, esta comienza a
tener problemas porque “las enzimas son
inestables a altas temperaturas, a valores
extremos de pH, etc., lo que eleva el costo al
reducir la vida útil de la enzima. (Franco
2007 p. 414). Así mismo, “la actividad
enzimática decrece cuando la enzima
sobrepasa su temperatura óptima” (Franco
2007 p. 416). Por lo que, al sobrepasar la
temperatura óptima de la catalas, su
liberación de oxigeno comenzó a disminuir.
La elevación de la temperatura incrementa la
velocidad de una reacción catalizada por
enzimas. Al principio la velocidad de
reacción aumenta cuando la temperatura se
eleva debido al incremento dela energía
cinética de la energía de las moléculas
reactantes. Sin embargo, al final, la energía
cinética de la enzima excede a la barrera
energética para romper los enlaces débiles
de hidrogeno que conservan su estructura
secundaria y terciaria. El p óptimo de una
enzima puede guardar relación con cierta
carga eléctrica de la superficie, o con
condiciones óptimas para la fijación de la
enzima a su sustrato. (Cuando hay un exceso
de iones de hidrogeno, las enzimas los unen
a sus moléculas y ante un déficit los ceden.)
Este cambio tiene una doble consecuencia
sobre la molécula. (Como todas las
proteínas, las
enzimas desempeñan su función por
los residuos de aminoácidos; algunos confier
en a su superficie una distribución de cargas
eléctricas.
(Cuando la temperatura cambia, el pH de la s
olución a medir también cambia, debido alde
splazamiento en los equilibrios de los ácidos
débiles, sin embargo esto no es un error,
dado que la lectura obtenida es el pH a esa
temperatura.
BIBLIOGRAFIA

 https://www.researchgate.net/publica
tion/330982458_Efecto_de_diferente
s_niveles_de_temperatura_en_la_acti
vidad_enzimatica_de_la_catalasa_pr
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 http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/d
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Practica_1_Acitivad_peroxidasa