FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO

INMUNOLOGIA - 202010

GUÍA N° 6
HEMOCLASIFICACIÓN DIRECTA E INDIRECTA

OBJETIVOS
 Conocer e interpretar el fundamento y procedimiento de la hemoclasificación.
 Identificar los diferentes grupos sanguíneos presentes en la
hemoclasificación.
 Interpretar los resultados obtenidos y correlacionar la importancia de la
hemoclasificación en la salud humana.

MARCO TEORICO

El grupo ABO fue descubierto en 1990 por Karl Landsteiner, siendo un gran
descubrimiento, ya que hasta ese año se consideraba que la sangre era la misma
en todas las personas; esto empezó a permitir la comprensión de las reacciones por
las transfusiones; se detectan a partir de la semana quinta y sexta del embrión,
desarrollándose completamente después del nacimiento. El grupo sanguíneo ABO
es utilizado para pruebas de paternidad, medicina forense y estudios de
poblaciones. Los antígenos ABO son los más inmunogénicos de todos los antígenos
de los grupos sanguíneos; estos antígenos se encuentran en la superficie de los
eritrocitos.

La hemoclasificación tiene mayor relevancia en la determinación del grupo

sanguíneo y factor de Rh de un individuo, con base en la presencia y ausencia de
antígenos eritocitarios de membrana. Esta determinación se utiliza como referente
de identidad y aplicable a protocolos clínicos (trasfusiones y trasplantes).

La clasificación sanguínea se realiza mediante la reacción de los glóbulos rojos con

antisueros específicos y así identificar el antígeno presente del eritrocito. Estas
células pueden clasificarse en A, B, O (sistema mayor) y Rh (anti-D) +/-, permitiendo
la diferenciación sanguínea. Los antígenos responsables de esto son
oligosacáridos, además su producción es controlada genéticamente por locus en el
cromosoma 9 para ABO y cromosoma 1 para Rh.

La clasificación de los antígenos eritrocitarios se realiza por la detección in vitro de

la reacción antígeno-anticuerpo por técnicas como hemoclasificación directa e
indirecta. La hemoclasificación directa busca identificar los antígenos eritrocitarios
que expresan en su membrana celular los glóbulos rojos presentes en la muestra a
analizar, para ello se usan anticuerpos monoclonales anti-A, anti-B y anti-D, los
cuales se unirán a su antígeno correspondiente generando una reacción de
aglutinación visible macroscópicamente. En cambio, la hemoclasificación indirecta
busca identificar anticuerpos de tipo IgG, presentes en el suero analizar que tengan
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la capacidad de reaccionar con antígenos eritrocitarios, especialmente antígenos

del sistema ABO y Rhesus.

Muestra: Suero y sangre con anticoagulante.

PRE-LAB:

1. Identify the antigens present in the red blood cells by drawing them.

A B

AB O

2. Define what the immune response to ABO antigens consists of, making a flow
chart.
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3. Why do you have to be carefully with the blood type classification of premature
baby?
Porque llegado el caso de necesitar una transfusion sanguineda y si no se
clasifica correctamente y se usa la sangra de la madre para esto puede causar
una producción de anticuerpos anti-Rh por si el Rh de él bebe y de la madre no
son los mismos.

MATERIALES

 Elementos de bioseguridad (bata, gorro, guantes, tapaboca, gafas)

 Toallas de papel
 Micropipetas de 5µl – 50 µl y 20 µl - 200 µl
 Puntas
 Laminas
 Centrifuga
 Solución salina
 Recipiente con hipoclorito de sodio
 Palillos
 Reactivo anti-A, anti-B y anti-D
 Material para venopunción (jeringas, sistema al vacío, tubos tapa amarilla y
lila, algodón y alcohol)
 Células A1, A2, B y O

HEMOCLASIFICACIÓN DIRECTA

Procedimiento

En tres laminas (marcadas
con A,B y Rh) agregar tres
gotas de sangre a anlizar.
En la misma lamina a
agregar un gota de reactivo
Observar la presencia o
anti-A, anti-B y anti-D.
ausencia de aglutinacion
Agitar cuidadosamente por
1 minuto.

Interpretación de resultados
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Una vez realizado el procedimiento se observa la lámina donde hubo aglutinación y

este corresponde al antígeno presente en los eritrocitos, es decir, el grupo
sanguíneo de la muestra analizada. Esta hemoclasificación permite determinar el
Rh del paciente.

Tomado de: https://www.slideshare.net/iltaitDes/banco-de-sangre-e-inmunohemato

HEMOCLASIFICACIÓN INDIRECTA

Procedimiento
 La muestra que se utiliza es sangre total, la cual se centrifuga a 3500 rpm por
10 min.
 Marque 4 tubos como A1, A2, B y O
 En cada uno de los tubos agregue 3 gotas (150µl) del suero analizar,
posteriormente agregue 3 gotas (150µl) de glóbulos rojos tipificados.
 Lleve a centrifugar a 2500 rpm por 30 segundos.
 Lea tubos: Re suspender el botón de células formado (agitando suavemente
cada tubo).
 Si el botón sigue presente (aglutinación) significa que hubo unión antígeno-
anticuerpo.

Interpretación de resultados
Al ser una técnica que identifica el anticuerpo en suero, en el tubo que se observe
aglutinación se presentan anticuerpos sobre los antígenos agregados, la
hemoclasificación indirecta se lee de la siguiente manera:
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Tubo A B O Grupo
sanguíneo
0 III 0 A

Resultad
III 0 0 B

o
III III 0 O
0 0 0 AB
III= Tubo donde se observó aglutinación
O= tubo donde no se observó aglutinación

POST-LAB:

1. Complete the following table:

Blood type Can donate blood to Can receive blood from

A Puede donar a A y AB Puede recibir de A y O
B Puede donar a B y AB Puede recibir de B y O
AB Puede donar a AB Puede recibir de A, B, AB y O
O Puede donar a A, B, AB y O Puede recibir de O

2. Draw the results they obtained in carrying out the procedure.

HEMOCLASIFICACIÓN DIRECTA

HEMOCLASIFICACIÓN INDIRECTA
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3. What are the requirements to transfuse blood?

Requisitos
 El donante debe comunicar siempre que se
encuentra en buen estado de salud.
 EDAD:Ser mayor de 18 años y menor de 65 años
 PESO:Tener un peso mínimo de 50 Kilogramos
 PULSO: Entre 50 a 100 pulsaciones por minuto en forma
regular; en atletas se aceptan hasta 40 pulsaciones por
minuto como mínimo
 PRESION ARTERIAL: No debe tener presión sistólica
mayor a 180 mm de Hg ni menor de 90 mm de Hg.
No debe tener presión diastólica mayor a 100 mm. de
Hg ni menor de 60 mm de Hg.
 HEMATOCRITO O HEMOGLOBINA: Preferible el
hematocrito por su exactitud y facilidad de
procedimiento.
Donante  VALORES DE HEMATOCRITO: Entre 40 a 54 % para
hombres y entre 38 a 47 % para mujeres.
 VALORES DE HEMOGLOBINA: Entre 13.5 g/dl hasta 18
g/dl para hombres: entre 12.5 g/dl hasta 16 g/dl para
mujeres.
 EMBARAZO: No se acepta como donante la mujer que
presente cualquier signo o síntoma de embarazo;
terminado éste, luego de 6 meses y hasta 1 año si está
lactando.
 MENSTRUACIÓN: Se difiere por 24 horas a la donante
cuando presenta cólico menstrual; en caso de sangrado
profuso se acepta luego de 24 horas de que éste haya
cesado.
 FRECUENCIA DE LA DONANCION: Hombres y mujeres no
deben ser donantes nuevamente antes de 4 meses.

 APARIENCIA GENERAL: Aparentemente en buen estado

de salud.
 TEMPERATURA: No puede ser aceptado el donante que
Receptor tenga más de 37.5 C°
 VACUNAS E INMUNIZACIONES:Son aceptables como
donantes luego de tres días de estar afebriles y sin otros
síntomas, los que han recibido vacunas de virus
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muertos, bacterianas incluyendo rickettsias y toxoides,

son ejemplo las vacunas contra el cólera, difteria, fiebre
tífoidea y paratifoidea, influenza, tosferina, tétanos,
tifo, peste, hepatitis B recombinante, polio parenteral,
rabia de células diploides humanas o de embrión de
pato como profilaxis, pero si ésta es administrada luego
de mordedura de animal, se debe diferir por un año a
partir del contacto con el animal rabioso.
Se defiere por dos semanas sarampión, paperas, polio
oral, varicela y fiebre amarilla. Por cuatro semanas
vacunas para rubéola. Inmunoglobulina Rh: Se defiere
por 6 semanas. Globulina Inmune contra hepatitis B
(HBIG) por 1 año
 RECEPTORES DE SANGRE O SUS COMPONENTE: Quienes
hayan recibido sangre, componentes o derivados por la
posibilidad de ser fuentes de agentes infecciosos, deben
ser excluidos por un año.
 DONACIONES ANTERIORES DIFERIDAS: El donante que
haya sido diferido en oportunidades anteriores debe
investigarse el motivo por el cual no se aceptó como tal
y comunicarlo al médico del Banco de Sangre
 LICENCIA SANITARIA DE FUNCIONAMIENTO
ESPECIFICA: Todo Banco de Sangre requiere Licencia
Sanitaria de Funcionamiento “Decreto 1571- Capítulo
XII” o aquellas disposiciones que lo sustituyan.
 PLANTA FISICA: Disponer de espacio suficiente para
distribuir adecuadamente las áreas del Banco Sangre de
acuerdo con su categoría.
 RECURSO HUMANO: Disponer de suficiente recurso
humano con experiencia y requisitos exigidos por el
Para los bancos de Ministerio de Salud. ( ver capítulo 8)
sangre  DOTACION Y SUMINISTROS: Contar con los equipos
establecidos en los Artículos 5, 13 y 14 del Decreto 1571
según la categoría.

4. What are the most immunogenic blood groups and why?

Los grupos A, B, o AB debido a los antígenos fuertemente inmunogénicos en la superficie
de los glóbulos rojos de estos
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BIBLIOGRAFÍA

Valdés A., Hernández A. Procedimientos para la detección e identificación de

anticuerpos eritrocitarios. Revista cubana de inmunología y hematología. 2011; 17
(2): 98-107.

ROJAS W. INMUNOLOGÍA. Editorial corporación para investigaciones biológicas.

Décimo sexta edición. 2012.p. 447- 448

Ossio E., Solis J, Castellon N, Davalos M, Jarro L. Tipificación del grupo sanguíneo
A B O y el factor Rh en la población de Totora-Cochabamba gestión 2012. Rev Cient
Cienc Méd [Internet]. 2013 [citado 2019 Abr 24] ; 16( 1 ): 25-27. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S181774332013000100
007&lng=es.

Arbeláez A. Carlos. Sistema de grupos sanguíneos ABO. Banco de sangre. [citado

el 24 de mayo de 2019]. Disponible en:
http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2009/myl097-8c.pdf

BIBLIOGRAFÍA Pre y Post laboratorio

1. Ossio E., Solis J, Castellon N, Davalos M, Jarro L. Tipificación del grupo sanguíneo A B O
y el factor Rh en la población de Totora-Cochabamba gestión 2012. Rev Cient Cienc
Méd [Internet]. 2013 [citado 2019 Abr 24] ; 16( 1 ): 25-27. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1817743320130001000
07&lng=es.

2. Arbeláez A. Carlos. Sistema de grupos sanguíneos ABO. Banco de sangre. [citado el 24

de mayo de 2019]. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-
2009/myl097-8c.pdf

3. Bonache Tur Débora, Romero Baltodano Kelly, Quintela Martínez Marta, Sobrado
Sobrado Mª Pilar, Caamaño Lado Carina, Montoya Echeverry Alba Luz. Resultados de la
inmnoadsorción en el trasplante ABOi y el rechazo humoral en una unidad de
hemodiáisis hospitalaria. Enferm Nefrol [Internet]. 2018 Dic [citado 2020 Mayo 17] ;
21( 4 ): 386-392. Disponible en:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2254-
28842018000400386&lng=es. http://dx.doi.org/10.4321/s2254-28842018000400008.