BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

MC. PATRICIA CATALINA GARCIA CERVANTES

UNIVERSIDAD
AUTONOMA DE
SINALOA
FACULTAD DE CIENCIAS
QUIMICAS BIOLOGICAS
LIC. BIOTECNOLOGIA GENOMICA
MC. PATRICIA CATALINA GARCIA CERVANTES
BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

LUIS GERARDO GARCIA MEDINA

“HIDROCARBUROS”
3-2

MAYO 2020

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índice
Introducción ........................................................................................................... 3
Descripción del problema ....................................................................................... 4
Obtención de muestras en tierras y Análisis químico de hidrocarburos .................. 4
Esquema y tipo de biorremediación a utilizar ......................................................... 5
Solución del problema ............................................................................................ 6
Fuentes .................................................................................................................. 7
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Introducción

La contaminación ambiental por hidrocarburos derivados del petróleo se ha

incrementado debido a su uso como combustible para vehículos, petroquímicos,
plaguicidas y herbicidas, entre otros, dada la creciente demanda de la población
mundial, la industrialización y la urbanización (Daverey & Pakshirajan, 2011).
Algunos de estos hidrocarburos resultan ser contaminantes ya que se acumulan en
los organismos vivos y pueden tener efectos carcinogénicos, además de
permanecer en el agua y el suelo (Maliyekkal et al., 2004), aumentando el riesgo de
contaminación ambiental (Goulart et al., 2014).
En este sentido, es necesaria la búsqueda de alternativas para degradar estos
compuestos mediante el desarrollo de estrategias como la biodegradación
microbiana, mediante la cual se aprovecha la capacidad de los microorganismos
para transformar compuestos contaminantes en otros menos tóxicos (Daverey &
Pakshirajan, 2011), como dióxido de carbono y agua, a través de procesos de
oxidación bajo condiciones aeróbicas y anaeróbicas (Goulart et al., 2014). En este
sentido egresados en biotecnología genómica de la facultad de ciencias químicas
biológicas se preocuparon de estos compuestos que provocan un efecto toxico en
las tierras agrícolas, siendo Sinaloa el primer exportador de tomate se han
identificado y caracterizado bacterias, hongos filamentosos y levaduras, para su uso
en ambientes contaminados por hidrocarburos a niveles acuático y terrestre, con la
finalidad de limpiar las tierras agrícolas y el aire en donde se cosechan estos
productos para evitar un brote de tumores a los principales países de importación
por estos tomates contaminados. Estos microorganismos tienen la capacidad de
transformar mediante complejas estrategias metabólicas sustancias contaminantes
como hidrocarburos, cuya presencia, en un ambiente con disponibilidad de agua y
minerales, les provee un entorno que permite su desarrollo y crecimiento.

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Descripción del problema

La sobre explotación de las tierras agrícolas finalmente provocaron un desequilibrio

en la producción de un fruto, en este caso el tomate, tiene un gran contacto con el
medio ambiente ya sea por la tierra o el aire.
La contaminación de estos suelos y aires se debe al mal uso de los plaguicidas,
herbicidas y el mas importante el uso de estos combustibles de los vehículos. Es
por ello que países extranjeros demandan a Culiacán, Sinaloa por exportar tomates
que no cumplen las medidas sanitarias contra sustancias orgánicas provocando una
posible bioacumulación en los consumidores, es por ello que los egresados en
biotecnología realizaron una investigación para encontrar el punto de partida del
problema al igual que una solución. Esta investigación fue realizada en el Centro de
Investigación en Alimentación y Desarrollo (CIAD) con el asesoramiento del Dr.
Cristóbal Chaidez Quiroz.

Obtención de muestras en tierras y Análisis químico de hidrocarburos

El suelo se obtuvo de las tierras agrícolas “campo el Diez”. El análisis químico de la

muestra de suelo incluyó la determinación de la textura (granulometría), humedad,
capacidad de campo, pH, conductividad eléctrica, nutrientes inorgánicos (nitratos,
nitritos, amonio y fosfato) y carbono orgánico total (COT).

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Para obtener los hidrocarburos totales de petróleo (TPH) se llevó a cabo un

fraccionamiento del extracto orgánico total (EOT) por cromatografía en columna
según el método 3611b de la EPA. Para determinar la concentración de TPH por
GC-FID, previamente se realizó una recta patrón con la fracción TPH del mismo
suelo con 5 concentraciones conocidas, calculadas gravimétricamente y por
duplicado. Posteriormente se aplicó la calibración a las muestras reales. Para ello,
se utilizó un cromatógrafo modelo Trace 2000 (Termoquest) equipado con una
columna capilar DB5 (J&W) de 30 metros longitud por 0,25 mm de diámetro interno
y 0,25 µm espesor de fase. El detector y el inyector se programaron a una
temperatura constante de 310ºC y 280ºC respectivamente. Los resultados arrojaron
una gran concentración de TPH en el campo agrícola “el Diez”.

Esquema y tipo de biorremediación a utilizar

Se realizaron ensayos que llevan como objetivo purificar las tierras de estos
hidrocarburos mediante el uso de rizorremediación con estas mismas plantas de
tomate con la finalidad de no para la producción, pero al mismo tiempo estar filtrando
las tierras evitando que estos compuestos viajen por las raíces, se involucren a nivel
celular y lleguen hasta los tejidos vasculares de las plantas (Xilema y floema) siendo
estos la principal vía de contaminación los frutos.

Prototipo de una planta de tomate modificada genéticamente para metabolizar

hidrocarburos mediante Genes aislados de levaduras o de otros
microorganismos

Rizorremediación

Tierras
contaminadas
con
Hidrocarburos

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Debido a que el aire también está contaminado por estos compuestos que son
combustible de los vehículos, se vio a la tarea de tomar muestras de automóviles
de antigüedad igual o mayor de 8 años, dado que el asentamiento de esporas en
condiciones de baja humedad del tanque puede tomar un tiempo considerable, y
teniendo en cuenta que ocurre únicamente durante los procesos de
reabastecimiento de combustible). Para la toma de muestras del ducto y tanque de
gasolina, se realizó un frotis de las paredes y/o del tubo de ingreso de la gasolina
con hisopos de algodón estéril (uno por cada tanque), los cuales se introdujeron en
tubos de ensayo con caldo nutritivo como medio de transporte. Las muestras fueron
conservadas a 4°C hasta ser procesadas en el laboratorio. Se realizaron ensayos
de crecimiento de los aislamientos utilizando benceno y tolueno (Sigma, EUA), al
ser éstos los hidrocarburos aromáticos más simples.
En cada caja de Petri, se sembraron tres micro gotas del inóculo estandarizado, e
inmediatamente, se sellaron con papel Parafilm® y una película plástica para evitar
al máximo la pérdida del vapor del hidrocarburo. Para evaluar el crecimiento de los
aislamientos con hidrocarburos aromáticos policíclicos (naftaleno, fenantreno y
pireno. Sigma, EUA), se realizó el mismo procedimiento descrito anteriormente,
pero agregando 0,1 g del hidrocarburo en la tapa de la caja Petri. Los ensayos se
dejaron en incubación de 10 a 15 días a 27°C. Simultáneamente, se sembraron
inóculos estandarizados de los aislamientos en medio PDA con gasolina al 1%, con
las mismas condiciones de incubación, con el fin de comparar el crecimiento en un
medio rico en carbono.

Solución del problema

Debido a que las levaduras pueden vivir en depósitos de gasolina y biodiesel,

aprovechando estos compuestos como su fuente de alimento y energía. Su
presencia en este ambiente sugiere adaptaciones para sobrevivir en condiciones
hostiles, con baja disponibilidad de agua, donde los microorganismos estarían en
contacto directo con el combustible, aprovechando los hidrocarburos aromáticos y
alifáticos que se encuentran presentes en la gasolina, este grupo de egresados
aprovecharon estas levaduras para estudiar su comportamiento en los vehículos
que utilizan este combustible para mitigar los gases de efecto invernadero y
proponer un proyecto a las agencias KIA, HONDA, AUDI, CHEVROLET, TOYOTA
para que implemente una línea de vehículos con estas características, apoyando el
medio ambiente y de igual manera proponer las plantas sin fines de lucro a las
semilleras mas importantes, teniendo un gran impacto en las tierras como filtro de
hidrocarburos al igual que evitando la contaminación de los productos de
exportación como el tomate.

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Fuentes

• Adams, R., Zavala-Cruz, J. & Morales-García, F. (2008). Concentración

residual de hidrocarburos en el suelo del trópico. II: Afectación a la fertilidad
y su recuperación. Interciencia. 33, 483-48
• Arias, S., Betancur, M., Gómez, G., Salazar, J.P. & Hernández, M. L. (2016).
Fitorremediación con humedales artificiales para el tratamiento de aguas
residuales porcinas. Informador técnico (Colombia). Vol 74.
• Balderas-León, I., Sánchez-Yáñez, J.M. (2015). Biorremediación de suelo
contaminado con 75000 ppm de aceite residual automotriz por
bioestimulación y fitorremediación con Sorghum vulgare y Bacillus cereus y/
o Burkholderia cepacia. Journal of the Selva Andina Research Society. 6, 26-
32.
• Pan, F., Yang, Q., Zhang, Y., Zhang, S., & Yang, M. (2004). Biodegradation
of polycyclic aromatic hydrocarbons by Pichia anomala. Biotechnology
Letters, 26(10), 803–806. https://
doi.org/10.1023/B:BILE.0000025882.33234.91.
• Sangabriel W, Ferrera-Cerrato R, Trejo-Aguilar D, Mendoza-López MR, Cruz-
Sánchez J, López-Ortiz C, et al. Tolerancia y fitorremediación de suelo
contaminado con combustóleo por seis especies vegetales. Rev Int Contam
Ambient. 2006. 22: 63-73.
• Vallejo V, Salgado L, Roldan F. Evaluación de la bioestimulación en la
biodegradación de TPH en suelos contaminados con petróleo. Rev Colomb
Biotecnol. 2005. 2:67-78
• Zand AD, Bidhendi GN, Mehrdadi N. Phytoremediation of total petroleum
hydrocarbons (TPHs) using plant species in Iran. Turk J Agric For. 2010. 34:
429-438.