EXTRACCION DE CROMOSOMAS DE
CELULAS VEGETALES
Fontalvo Mauren1; González Lina1;
Paternina Sebastián1; Peña Manuel1
1 Programa de Biología, Departamento de
Biología y Química, Facultad de Educación y
Ciencias, Universidad de Sucre, Colombia.
RESUMEN
El proceso de división celular o Mitosis es el
proceso mediante el cual una célula se divide
y da origen a dos células con igual carga
genética e igual contenido. Durante esta
práctica de laboratorio se utilizaron los
ápices de las raíces de cebolla Allium cepa
con el fin de visualizar el proceso de división
celular en las diferentes fases que lo
conforman. Mediante la utilización de
técnicas para la observación de del material
cromosómico como lo es la tinción con
Orceína acética, la realización de la técnica
“squash” y bajo el objetivo 40X fue posible
hacer un conteo de las células en división y
calcular el índice mitótico (IM)= 29,31 y el
índice por fases (IF) siendo este; Profase:
80,8, Metafase 9,58, Anafase 4,10 y Telofase
5,4.
PALABRAS CLAVE: Mitosis, índice mitótico,
índice por fases.
ABSTRACT
The process of cell division or Mitosis is the
process by which a cell divides and gives rise
to two cells with equal genetic load and
equal content. During this laboratory
practice the apices of the Allium cepa onion
roots were used in order to visualize the
process of cell division in the different phases
that comprise it. By using techniques for the
observation of chromosomal material such
as staining with acetic Orcein, the
performance of the squash technique and
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under the 40X objective it was possible to
count the dividing cells and calculate the
mitotic index (MI) = 29.31 and the phase
index (FI) being this; Prophase: 80.8,
Metaphase 9.58, Anaphase 4.10 and
Telophase 5.4.
KEY WORDS: Mitosis, mitotic index, phase
index.
INTRODUCCIÓN
Todos los organismos vivos utilizan la
división celular, bien como mecanismo de
reproducción, o como mecanismo de
crecimiento del individuo. Lo seres
unicelulares utilizan la división celular para
la reproducción y perpetuación de la
especie, una célula se divide en dos células
hijas genéticamente idénticas entre sí e
idénticas a la original, manteniendo el
número cromosómico y la identidad
genética de la especie (Godoy, 2016)
Cuando una célula se divide en dos, ambos
productos de la división pueden volver a
dividirse, estableciéndose de esta forma un
ciclo de división celular, el período entre
dos mitosis consecutivas, se denomina
interfase periodo durante el cual la célula
crece y el ADN se duplica. Comprende tres
períodos: G1, S y G2.
El primero es un período que se caracteriza
por ser genéticamente activo, el ADN se
transcribe y se traduce, dando lugar a
proteínas necesarias para la vida celular y
sintetizando las enzimas y la maquinaria
necesaria para la síntesis del ADN,
incluyendo la producción de los orgánulos.
Es la fase S, periodo en la cual se duplica
por entero el material hereditario, el
cromosoma pasa de tener una cromatide a
tener dos, cada uno de ellas compuesta por
una doble hélice de ADN producto de la
duplicación de la original, como la
replicación del ADN es semiconservativa (se
originan dos moléculas de ADN, cada una
de ellas compuesta de una hebra
 del ADN original y de una hebra
complementaria nueva), las dos dobles
hélices hijas serán exactamente iguales, y
por tanto los cromátidas hermanas,
genéticamente idénticas. En G2 se sintetiza
el material citoplasmático necesario para la
división celular, como por ejemplo las
moléculas de tubulina, proteína que
compone los microtúbulos para el huso
acromático, al final de esta fase se produce
una señal que dispara todo el proceso de la
división celular.
La Mitosis es el periodo en la cual se da la
división del núcleo en dos núcleos hijas y
división del citoplasma (Campbell,2007)
está compuesta por cuatro fases.
La primera es la Profase; en el cual, la
cromatina se condensa para formar los
cromosomas y los dos centríolos migran a
polos opuestos organizando un sistema de
microtúbulos (huso mitótico o huso
acromático) para permitir la migración de
los cromosomas, cada uno de estos está
constituido por dos cromatides unidas por
el centrómero. La envoltura nuclear se
desorganiza y sus fragmentos no se
distinguen del retículo endoplasmático y
desaparece el nucléolo.
La segunda fase del proceso de división
celular es la Metafase, en esta Los
cromosomas se alinean en el plano
ecuatorial, y cada uno está unido por su
centrómero a una fibra del huso mitótico.
La tercera fase es la Anafase, periodo en el
cual los centrómeros se dividen y las
cromátidas son entonces desplazadas a
polos opuestos de la célula en división por
el huso mitótico o meiótico, para que cada
célula hija herede una copia de cada
cromosoma.
La última fase de la mitosis es la Telofase la
cual consiste en la ascensión de los
cromosomas constituidos por solamente
una cromátida a los polos de la célula, se
empieza a formar la membrana nuclear y el
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ADN se desespiriliza, por lo tanto,
obtenemos cromatina y vuelve a aparecer
el nucléolo, desaparecen las fibras del huso
mitótico, el citoplasma se empieza a
invaginar y todos los orgánulos celulares ya
se han duplicado, las fibras del huso
desaparecen, los juegos de cromosomas se
agrupan en los polos opuestos y la
membrana nuclear se vuelve a formar a su
alrededor (Lacadena,1996)
Estas Fases son posibles observarlas bajo el
lente del microscopio gracias a la Orceína
Acética Clorhídrica, Es una sustancia que se
utiliza para teñir y ver las distintas fases de
los cromosomas en división celular. Con
esta técnica de tinción se pueden ver
los cromosomas impregnados por la orceína
acética en color morado y de esta manera
poder observar las diferentes etapas de la
mitosis; la orceína actúa sobre el proceso de
división matando las células y por ende
deteniendo el proceso celular; esto facilita
la visualización de las etapas del ciclo
celular.
Otra técnica rudimentaria que permite la
observación de estos cromosomas es la del
aplastamiento ("squash"): consiste en
aplastar el objeto de estudio entre el
portaobjetos y el cubreobjetos. De esta
forma se realiza a la vez una disociación y
una extensión del material celular
proveniente de los ápices de las raíces de
cebolla Allium cepa, esta tecnica es rápida,
útil y favorece a la observación de las
células en división.
MATERIALES Y METODOS
Se trabajó con los ápices de las raíces
jóvenes de Allium cepa, aproximadamente
siete días antes de la ejecución de la
práctica de laboratorio se puso en un
sistema (recipiente de vidrio) con agua un
espécimen de Allium cepa, sumergiendo la
base de esta en el sistema con agua.
 Una vez trascurridos los siete días y las
raíces tuvieron una longitud de
aproximadamente un centímetro se
llevaron al laboratorio en donde se
procedieron a cortar los ápices de estas, se
pusieron en un vidrio de reloj y posterior a
esto se cubrieron las raíces cortadas en
Orceína acética, esta se dejó actuar por diez
minutos sobre las raíces, transcurrido el
tiempo se colocaron las raíces por un borde
del vidrio y se sometió a calentamiento
evitando la ebullición.
Con unas pinzas se tomaron las raíces del
vidrio de reloj y se posicionaron en un
portaobjetos, encima se cubrieron estas
Fig.
raíces con un cubreobjetos y mediante la
técnica “squash” se aplasto la muestra y se 1.
sometió a la observación en el microscopio
bajo el observador 40X.
Mitosis de las células de los ápices de
Allium cepa
RESULTADOS Fig. 2. Células en Profase

Calculos
Fig. 3. Células en Metafase
Índice mitótico
Fig. 4. Células en Anafase
IM= (Número de células en mitosis / Total
de células observadas) x 100
Número de células en mitosis= 7
Total de células observadas= 24
IM= (73/249) x 100= 29,31

Índice por fases

IF= (Número de células en la fase/Número
de células en mitosis) x 100

IFP= (59/73) x 100 = 80,8

IFM= (7/73) x 100 = 9,58
IFA= (3/73) x 100 = 4,10
IFT= (4/73) x 100 = 5,4

Observación microscópica

[Escriba aquí]
Fig. 5. Células en Telofase
DISCUSIÓN
En la observación microscópica de los ápices
de las raíces de cebolla fue posible la
visualización de todas las fases de la mitosis
en las que se encontraban las células (Fig. 1)
gracias a la buena tinción de los cromosomas
realizada por la Orceína acética. A partir de
esta observación fue posible también
calcular el índice mitótico dando como
resultado 29,31 lo cual indica una medida
aproximada del número de células en
división. El índice por fases calculado indica
un aproximado de la división mitótica en
cada una de las fases observadas bajo el
microscopio, los resultados obtenidos
muestran que la fase que más estaba en
división al momento de realizar los cortes y
la tinción fue en la profase: 80,8 (Fig. 2) en
esta fase se se apreció la cromatina
condensada y los cromosomas como
filamentos delgados, la fase con un indice de
división menor al de la Profase fue Metafase:
9,58 (Fig. 3) en esta no se pudo apreciar
claramente la presencia de las dos
cromatides hermanas de cada cromosoma
pero si se distigue la diposicion de estos en el
plano ecuatorial.
En Anafase (Fig. 4) fue donde se encontro un
menor indice de division de las celulas: 4,10
pero a pesar de ello fue calaramente visible
el material cromosomico migrando hacia los
polos de la celula. En la ultima de las fases de
division, la Telofase: 5,4 (Fig. 5) en este
punto ya no se pueden apreciar los
croosomas y la cromatina comienza a
condensarse en ambos nucleos, se observa
alrededor de estos la division de la
membrana celular.
Fue posible la visualización y el
reconocimiento de algunas de las fases del
proceso de división celular, mediante el uso
de sustancias que impregnan el material
cromosómico y de técnicas que facilitan la
extracción de este como lo es la de squash.
El uso de estas técnicas es fácil y efectivo
para el propósito de reconocer los diferentes
pasos que se llevan a cabo para que la
reproducción de las células y por ende la
perpetuación de la información genética que
en los núcleos de estas se encuentran.
BIBLIOGRAFIA
Godoy, G. (2016) Mitosis y meiosis. Universidad
nacional del litoral.
Campbell, A. Jane B. Reece. (2007) Biología. Pág.
221.
Lacadena, JR (1996). Citogenética (1ª edición).
Universidad Complutense, Facultad de Biología.
pp.  215-216.
Audesirk, T. Audesirk, G Bruce, E. Byers. (2003)
Biología: la vida en la tierra. Pág. 194
Paniagua, R. (1999) Biología Celular. Primera
Edición. Editorial Interamericana. España. Pág.
310.
ANEXOS

CONCLUSIONES

[Escriba aquí]
 2) Distribución de las raíces cortadas en el
1) Corte de los ápices de las raíces jóvenes vidrio de reloj

2.1) Adición de la OrceÍna acética clorhídrica

3) Calentamiento de las raíces más la
Orceína

4) Selección de las raices y montaje sobre el

portaobjetos
6) Montaje después del squash

[Escriba aquí]
 7) Observación

5) Montaje antes del squash

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