Sei sulla pagina 1di 6

EXTRACCION DE CROMOSOMAS DE under the 40X objective it was possible to

CELULAS VEGETALES count the dividing cells and calculate the


mitotic index (MI) = 29.31 and the phase
Fontalvo Mauren1; González Lina1; index (FI) being this; Prophase: 80.8,
Paternina Sebastián1; Peña Manuel1 Metaphase 9.58, Anaphase 4.10 and
Telophase 5.4.
1 Programa de Biología, Departamento de
Biología y Química, Facultad de Educación y KEY WORDS: Mitosis, mitotic index, phase
Ciencias, Universidad de Sucre, Colombia. index.
RESUMEN INTRODUCCIÓN
El proceso de división celular o Mitosis es el Todos los organismos vivos utilizan la
proceso mediante el cual una célula se divide división celular, bien como mecanismo de
y da origen a dos células con igual carga reproducción, o como mecanismo de
genética e igual contenido. Durante esta crecimiento del individuo. Lo seres
práctica de laboratorio se utilizaron los unicelulares utilizan la división celular para
ápices de las raíces de cebolla Allium cepa la reproducción y perpetuación de la
especie, una célula se divide en dos células
con el fin de visualizar el proceso de división
hijas genéticamente idénticas entre sí e
celular en las diferentes fases que lo
idénticas a la original, manteniendo el
conforman. Mediante la utilización de número cromosómico y la identidad
técnicas para la observación de del material genética de la especie (Godoy, 2016)
cromosómico como lo es la tinción con
Orceína acética, la realización de la técnica Cuando una célula se divide en dos, ambos
“squash” y bajo el objetivo 40X fue posible productos de la división pueden volver a
dividirse, estableciéndose de esta forma un
hacer un conteo de las células en división y
ciclo de división celular, el período entre
calcular el índice mitótico (IM)= 29,31 y el
dos mitosis consecutivas, se denomina
índice por fases (IF) siendo este; Profase:
interfase periodo durante el cual la célula
80,8, Metafase 9,58, Anafase 4,10 y Telofase crece y el ADN se duplica. Comprende tres
5,4. períodos: G1, S y G2.
PALABRAS CLAVE: Mitosis, índice mitótico, El primero es un período que se caracteriza
índice por fases. por ser genéticamente activo, el ADN se
transcribe y se traduce, dando lugar a
ABSTRACT
proteínas necesarias para la vida celular y
sintetizando las enzimas y la maquinaria
The process of cell division or Mitosis is the necesaria para la síntesis del ADN,
process by which a cell divides and gives rise incluyendo la producción de los orgánulos.
to two cells with equal genetic load and Es la fase S, periodo en la cual se duplica
equal content. During this laboratory por entero el material hereditario, el
practice the apices of the Allium cepa onion cromosoma pasa de tener una cromatide a
roots were used in order to visualize the tener dos, cada uno de ellas compuesta por
process of cell division in the different phases una doble hélice de ADN producto de la
that comprise it. By using techniques for the duplicación de la original, como la
observation of chromosomal material such replicación del ADN es semiconservativa (se
as staining with acetic Orcein, the originan dos moléculas de ADN, cada una
de ellas compuesta de una hebra
performance of the squash technique and

[Escriba aquí]
del ADN original y de una hebra ADN se desespiriliza, por lo tanto,
complementaria nueva), las dos dobles obtenemos cromatina y vuelve a aparecer
hélices hijas serán exactamente iguales, y el nucléolo, desaparecen las fibras del huso
por tanto los cromátidas hermanas, mitótico, el citoplasma se empieza a
genéticamente idénticas. En G2 se sintetiza invaginar y todos los orgánulos celulares ya
el material citoplasmático necesario para la se han duplicado, las fibras del huso
división celular, como por ejemplo las desaparecen, los juegos de cromosomas se
moléculas de tubulina, proteína que agrupan en los polos opuestos y la
compone los microtúbulos para el huso membrana nuclear se vuelve a formar a su
acromático, al final de esta fase se produce alrededor (Lacadena,1996)
una señal que dispara todo el proceso de la
Estas Fases son posibles observarlas bajo el
división celular.
lente del microscopio gracias a la Orceína
La Mitosis es el periodo en la cual se da la Acética Clorhídrica, Es una sustancia que se
división del núcleo en dos núcleos hijas y utiliza para teñir y ver las distintas fases de
división del citoplasma (Campbell,2007) los cromosomas en división celular. Con
está compuesta por cuatro fases. esta técnica de tinción se pueden ver
los cromosomas impregnados por la orceína
La primera es la Profase; en el cual, la acética en color morado y de esta manera
cromatina se condensa para formar los poder observar las diferentes etapas de la
cromosomas y los dos centríolos migran a mitosis; la orceína actúa sobre el proceso de
polos opuestos organizando un sistema de división matando las células y por ende
microtúbulos (huso mitótico o huso deteniendo el proceso celular; esto facilita
acromático) para permitir la migración de la visualización de las etapas del ciclo
los cromosomas, cada uno de estos está celular.
constituido por dos cromatides unidas por
el centrómero. La envoltura nuclear se Otra técnica rudimentaria que permite la
desorganiza y sus fragmentos no se observación de estos cromosomas es la del
distinguen del retículo endoplasmático y aplastamiento ("squash"): consiste en
desaparece el nucléolo. aplastar el objeto de estudio entre el
portaobjetos y el cubreobjetos. De esta
La segunda fase del proceso de división forma se realiza a la vez una disociación y
celular es la Metafase, en esta Los una extensión del material celular
cromosomas se alinean en el plano proveniente de los ápices de las raíces de
ecuatorial, y cada uno está unido por su cebolla Allium cepa, esta tecnica es rápida,
centrómero a una fibra del huso mitótico. útil y favorece a la observación de las
La tercera fase es la Anafase, periodo en el células en división.
cual los centrómeros se dividen y las
cromátidas son entonces desplazadas a
polos opuestos de la célula en división por MATERIALES Y METODOS
el huso mitótico o meiótico, para que cada
Se trabajó con los ápices de las raíces
célula hija herede una copia de cada
jóvenes de Allium cepa, aproximadamente
cromosoma.
siete días antes de la ejecución de la
La última fase de la mitosis es la Telofase la práctica de laboratorio se puso en un
cual consiste en la ascensión de los sistema (recipiente de vidrio) con agua un
cromosomas constituidos por solamente espécimen de Allium cepa, sumergiendo la
una cromátida a los polos de la célula, se base de esta en el sistema con agua.
empieza a formar la membrana nuclear y el

[Escriba aquí]
Una vez trascurridos los siete días y las
raíces tuvieron una longitud de
aproximadamente un centímetro se
llevaron al laboratorio en donde se
procedieron a cortar los ápices de estas, se
pusieron en un vidrio de reloj y posterior a
esto se cubrieron las raíces cortadas en
Orceína acética, esta se dejó actuar por diez
minutos sobre las raíces, transcurrido el
tiempo se colocaron las raíces por un borde
del vidrio y se sometió a calentamiento
evitando la ebullición.
Con unas pinzas se tomaron las raíces del
vidrio de reloj y se posicionaron en un
portaobjetos, encima se cubrieron estas
Fig.
raíces con un cubreobjetos y mediante la
técnica “squash” se aplasto la muestra y se 1.
sometió a la observación en el microscopio
bajo el observador 40X.
Mitosis de las células de los ápices de
Allium cepa
RESULTADOS Fig. 2. Células en Profase

Calculos
Fig. 3. Células en Metafase
Índice mitótico
Fig. 4. Células en Anafase
IM= (Número de células en mitosis / Total
de células observadas) x 100
Número de células en mitosis= 7
Total de células observadas= 24
IM= (73/249) x 100= 29,31

Índice por fases


IF= (Número de células en la fase/Número
de células en mitosis) x 100

IFP= (59/73) x 100 = 80,8


IFM= (7/73) x 100 = 9,58
IFA= (3/73) x 100 = 4,10
IFT= (4/73) x 100 = 5,4

Observación microscópica

[Escriba aquí]
Fig. 5. Células en Telofase Fue posible la visualización y el
reconocimiento de algunas de las fases del
DISCUSIÓN proceso de división celular, mediante el uso
de sustancias que impregnan el material
En la observación microscópica de los ápices cromosómico y de técnicas que facilitan la
de las raíces de cebolla fue posible la extracción de este como lo es la de squash.
visualización de todas las fases de la mitosis El uso de estas técnicas es fácil y efectivo
en las que se encontraban las células (Fig. 1) para el propósito de reconocer los diferentes
gracias a la buena tinción de los cromosomas pasos que se llevan a cabo para que la
realizada por la Orceína acética. A partir de reproducción de las células y por ende la
esta observación fue posible también perpetuación de la información genética que
calcular el índice mitótico dando como en los núcleos de estas se encuentran.
resultado 29,31 lo cual indica una medida
aproximada del número de células en BIBLIOGRAFIA
división. El índice por fases calculado indica
un aproximado de la división mitótica en Godoy, G. (2016) Mitosis y meiosis. Universidad
cada una de las fases observadas bajo el nacional del litoral.
microscopio, los resultados obtenidos Campbell, A. Jane B. Reece. (2007) Biología. Pág.
muestran que la fase que más estaba en 221.
división al momento de realizar los cortes y
la tinción fue en la profase: 80,8 (Fig. 2) en Lacadena, JR (1996). Citogenética (1ª edición).
Universidad Complutense, Facultad de Biología.
esta fase se se apreció la cromatina
pp.  215-216.
condensada y los cromosomas como
filamentos delgados, la fase con un indice de Audesirk, T. Audesirk, G Bruce, E. Byers. (2003)
división menor al de la Profase fue Metafase: Biología: la vida en la tierra. Pág. 194
9,58 (Fig. 3) en esta no se pudo apreciar Paniagua, R. (1999) Biología Celular. Primera
claramente la presencia de las dos Edición. Editorial Interamericana. España. Pág.
cromatides hermanas de cada cromosoma 310.
pero si se distigue la diposicion de estos en el
plano ecuatorial.
En Anafase (Fig. 4) fue donde se encontro un ANEXOS
menor indice de division de las celulas: 4,10
pero a pesar de ello fue calaramente visible
el material cromosomico migrando hacia los
polos de la celula. En la ultima de las fases de
division, la Telofase: 5,4 (Fig. 5) en este
punto ya no se pueden apreciar los
croosomas y la cromatina comienza a
condensarse en ambos nucleos, se observa
alrededor de estos la division de la
membrana celular.

CONCLUSIONES

[Escriba aquí]
2) Distribución de las raíces cortadas en el
1) Corte de los ápices de las raíces jóvenes vidrio de reloj

2.1) Adición de la OrceÍna acética clorhídrica


3) Calentamiento de las raíces más la
Orceína

4) Selección de las raices y montaje sobre el


portaobjetos
6) Montaje después del squash

[Escriba aquí]
7) Observación

5) Montaje antes del squash

[Escriba aquí]