Ácidos Nucleicos e os processos de:

▪ Replicação/ Duplicação
▪ Transcrição
▪ Tradução
 Dogma central da biologia

Replicação

Transcrição

Tradução

Proteína
 Dupla hélice de DNA:
Watson-Crick, 1953

Sulco
menor

Sulco
maior
Ácidos Nucléicos
▪ São formados por subunidades chamadas
nucleotídeos.
▪ Cada nucleotídeo é composto por três partes: um
grupo fosfato, uma pentose (ribose no RNA e
desoxirribose no DNA) e uma base nitrogenada.
 Bases Nitrogenadas

Pirimidinas Purinas
Componentes dos Ácidos Nucleicos

Uracila Timina Ribose

Citosina 2´desoxirribose

Adenina Guanina

Ácido fosfórico
▪ Bases Púricas, ou Purinas: Adenina e Guanina.
▪ Bases Pirimídicas, ou Pirimidinas: Citosina, Timina e
Uracila.

DNA e RNA

DNA DNA e RNA RNA

um grupo metil a menos
Ligação Fosfodiéster:
Une os ácidos nucleico
Ligação Fosfodiéster:
Une os ácidos nucleicos

▪ O número 5’ indica a ligação do

fosfato (P) com o carbono 5 da
desoxirribose.
▪ O número 3’ indica a ligação da
hidroxila (OH) com o carbono 3
da desorribose.
▪ Por convenção, as bases de uma
sequência são sempre descritas
da extremidade 5’ para a
extremidade 3’.
▪ As ligações fosfodiéster podem
ser quebradas enzimaticamente
por enzimas chamadas
NUCLEASES.
 DNA RNA
Adenina

Guanina

Citosina

Timina Uracila
 AS PRINCIPAIS DIFERENÇAS ENTRE OS ÁCIDOS DNA E RNA

DNA RNA

Pentose Desoxirribose Ribose

Bases púricas Adenina e Guanina Adenina e Guanina
Bases pirimídicas Citosina e Timina Citosina e Uracila
Estruturas Duas cadeias Uma cadeia
Helicoidais
Enzima hidrolítica Desoxirribonuclease Ribonuclease
(DNAase) (RNAase)
Origem Replicação Transcrição
Enzima sintética DNA - polimerase RNA - polimerase
Função Informação genética Síntese de proteínas

http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_pos2003/const_microorg/%E1cidos_nucl%E9icos.htm
 Dogma central da biologia
▪Metabolismo celular é controlado pelos ácidos nucleicos,
compostos que coordenam uma série de reações em que
estão envolvidas inúmeras enzimas.

▪DNA → replicação → DNA → transcrição → RNAm →

tradução
Replicação/ Duplicação do DNA
Forquilha de replicação

Polaridade da síntese define fitas

líder e retardada (descontínua)
 Enzimas envolvidas na duplicação do
DNA
Enzima Função
DNA iniciase / Inicia a síntese do fragmento do DNA iniciador
primase
DNA helicase Desenrola a dupla hélice de DNA
DNA polimerase Adiciona ou remove nucleotídeos durante a
síntese
DNA ligase Une o nucleotídeo correto à fita em síntese
DNA Desfaz as “regiões de superdobramento” da
topoisomerase dupla hélice de DNA
 Tipos de DNA polimerase

▪DNA polimerase I
▪Descoberta em 1956 (Kornberg pai)
▪Função precisa descoberta apenas em 1969: remove o
primer de RNA da fita descontínua

▪DNA polimerase III

▪Descoberta em 1970 (Kornberg filho)
▪Principal enzima que realiza a replicação em procariotos
▪DNA polimerase II
▪Lenta, envolvida em reparo do DNA
 Replicação das fitas

•Fita líder (rápida, contínua)

–Primase age uma vez

•Fita retardada (lenta)

–Primase age várias vezes
–1967, Fragmentos de Okasaki
Okazaki R, Okazaki T, Sakabe K, Sugimoto K. Mechanism of DNA replication
possible discontinuity of DNA chain growth. Jpn J Med Sci Biol. 1967
Jun;20(3):255-60
Replicação semi-conservativa
Replicação semi-conservativa
I. Ação das Helicases (e das topoisomerases)
▪ Um complexo enzimático
contendo a enzima HELICASE se
liga à molécula de DNA em uma
região → sequência de
nucleotídeos → origem de
replicação.

▪ HELICASE → separa as duas

cadeias de DNA através da
quebra pontes de hidrogênio.
▪ TOPOISOMERASES: “força extra”
nas forquilhas de replicação.
II. Ação das SSBP
▪ Proteínas de ligação à cadeia simples (SSBP – single
strand binding proteins).

▪ Ligam-se às cadeias separadas

▪ Impedem que as fitas voltem a se unir.

III. Ação da Primase
▪ DNA polimerase não consegue iniciar a síntese de uma nova cadeia
de DNA do “zero”→ sintetiza a partir de uma cadeia pré-existente.

▪ Quem inicia a cadeia → região de iniciação→ enzima PRIMASE →

sintetizará um fragmento de cadeia simples de RNA → primer ou
iniciador de RNA
IV. Ação da DNA polimerase III

▪ Após a síntese do iniciador de RNA, a

primase se desliga/desassocia da
molécula de DNA.

▪ Enzima DNA POLIMERASE III se liga à

cadeia de DNA, na ponta do iniciador
de RNA.

▪ Inicia a leitura das bases

nitrogenadas da cadeia de DNA que
serve de molde, adicionando à nova
cadeia nucleotídeos com bases
nitrogenadas complementares
V. Ação da Ligase
▪ Na cadeia líder → complexo DNA polimerase só se desliga ao
término do processo de replicação → cadeia contínua → só um
primer.

▪ Cadeia lenta → descontínua → síntese de vários primers de RNA →

ligações repetidas de DNA polimerases III → fragmento de Okazaki
→ Antes do término do processo, DNA polimerase I remove os
primers de RNA (atividade exonuclease), a enzima LIGASE adiciona
nucleotídeos de DNA e liga todos os fragmentos das novas cadeias.
VI. Ação da DNA Polimerase II
A DNA polimerase II → efetua checagem de erros (adição de
nucleotídeo cuja base nitrogenada não seja o par correto daquele
lido na cadeia mãe).

Neste caso → remoção pela DNA POLIMERASE II do nucleotídeo

mal pareado → substituição pelo correto

Sistema de reparos → eficaz → taxa de erros: 1/1 a cada 1 bilhão

→ agentes mutagênicos diversos elevam esta taxa..
Reparo pela
Polimerase
•Mecanismo de verificação
(Proof-reading)

•DNA-polimerase possui
•Uma atividade de polimerização 5’
→ 3’
•Uma atividade de exonuclease 3’
→ 5’
Visão geral

Repare na
posição do
primer de
RNA
Eliminação
dos
fragmentos
de Okasaki

DNA Pol I
DNA Replication
•DNA Pol precisa de um molde
inicial

•Primase: gera um molde de

RNA complementar

•A DNA Pol III agora é capaz de

adicionar bases à extremidade
3’OH
 Doenças causadas por problemas no
mecanismos de replicação
•Ataxia de Friedreich's
•dano progressivo no sistema nervoso (problemas
musculares, na fala e doenças no coração)
•forma mais comum das ataxias herdadas
•A seqüência GAATTC se repete, quando existem mais de 40
repetições, o indivíduo apresenta a doença.

•Xeroderma pigmentosum
•envelhecimento precoce
•aumento na incidência de câncer
•Falha no mecanismo de reparação
do DNA causado pela luz UV
Resumo

▪ Replicação semi-conservativa
▪ Bolha de replicação avança em duas direções
▪ Fita líder e fita retardada
▪ Helicases (tb topoisomerases) desenrolam o DNA
▪ Primase faz o primer
▪ DNA polimerase III, DNA polimerase I
▪ DNA ligase
▪ Telomerase
Revisão da aula anterior

https://www.youtube.com/watch?v=TNKWg
cFPHqw
O “Dogma Central da Biologia”
(Watson & Crick, 60’s)
GENE → segmento de uma molécula de DNA que contém um
código para a produção dos aminoácidos da cadeia polipeptídica +
as sequências reguladoras para sua expressão.

No gene: sequências codificantes e não codificantes.

Sequências codificantes → são denominadas ÉXONS

Sequências não - codificantes → são denominadas ÍNTRONS

Os íntrons são inicialmente transcritos em RNA no núcleo, mas não

estão presentes no mRNA final no citoplasma.

Em muitos genes, o tamanho dos exons é muito menor que o de

íntrons.
Transcrição
▪ Transcrição é a primeira etapa da expressão do gene.

▪ Envolve a cópia da sequência de DNA de um gene para

produzir uma molécula de RNA.

▪ É realizada por enzimas chamadas RNA polimerases, que

ligam nucleotídeos para produzir uma cadeia de RNA
(usando uma cadeia de DNA como modelo).

▪ A transcrição tem três estágios:

- iniciação, alongamento e término.

▪ A transcrição é controlada separadamente para cada

gene em seu genoma.
 INICIAÇÃO
▪ A RNA polimerase liga-se a
uma sequência de DNA
chamada REGIÃO
PROMOTORA ou
PROMOTOR, encontrada
próximo ao início de um
gene.

▪ Cada gene tem seu próprio

PROMOTOR.

▪ Uma vez ligada, a RNA

polimerase separa as fitas de
DNA, provendo o molde de
cadeia simples, de um só
 ALONGAMENTO

▪ Um filamento de DNA →
molde para a RNA polimerase.

▪ Conforme "lê" esse molde uma

base por vez, a RNA polimerase
constrói uma molécula de RNA
feita de nucleotídeos
complementares, formando
uma cadeia que cresce de
5´para 3´.

▪ O transcrito de RNA carrega a

mesma informação que o
filamento não-molde
(codificador) de DNA , mas ele
 TÉRMINO
▪ Sequências chamadas finalizadores sinalizam que o transcrito de
RNA está completo.

▪ Uma vez transcritos os finalizadores, a fita de RNA transcrita se

libera da RNA polimerase.

▪ Um exemplo de um mecanismo de término envolvendo a

formação de um grampo no RNA é mostrado abaixo.
Modificações no RNA de eucariontes
Nas bactérias, os transcritos de RNA podem atuar imediatamente como RNAs
mensageiro (RNAms).

Nos eucariontes, o transcrito de um gene codificador de proteínas é chamado um

pré-RNAm → ainda no núcleo → processamento → antes da tradução.

Pontas modificadas: adição de um cap 5' (no começo) e uma cauda poli A 3' (no final).

Os pré-RNAms também sofrem splicing → íntrons são removidos e os éxons são

unidos.
Tradução
 “Decifra-me ou devoro-te.”
Édipo Rei - Sófocles

O código genético será decifrado.....

 A, O, M, R.

AMOR, ROMA, ORAM, MORA, RAMO.

Se uma das letras puder ser repetida:

MORRO e AMORA, por exemplo.

Observe que usamos as mesmas letras, porém formamos palavras

com significados diferentes.

A mesma idéia pode ser aplicada para o DNA.

Os 4 tipos de nucleotídeos se arrumam de diversas maneiras na

molécula de DNA, formando os diferentes seres vivos.
 RNAs necessários para efetuar a síntese
proteica
▪ mRNA (RNA mensageiro) processado: carrega a
“informação”(ou seja, a sequencia de bases) para a síntese da
proteína;

▪ rRNA (RNA ribossômico): um constituinte estrutural e

funcional dos ribossomos → onde acontece a síntese proteica;

▪ tRNA (RNA transportador): carrega os aminoácidos que serão

adicionados a proteína nascente, e faz a “leitura”da sequencia
de bases do mRNA. Isso quer dizer que o tRNA é a molécula
que decodifica o código genético.
RNAm
▪ Leva a informação da seqüência protéica a ser
formada do núcleo para o citoplasma, onde
ocorre a tradução. Ele contém uma seqüência
de trincas correspondente a uma das fitas do
DNA.

▪ Cada trinca (três nucleotídeos) no RNAm é

denominada códon e corresponde a um
aminoácido na proteína que irá se formar
1 códon 3 nucleotídeos no RNAm

7 códons 21 nucleotídeos
 Código Genético

• “Dicionário” → correspondência da sequencia

de nucleotídeos levando à sequencia de
aminoácidos;
• Códon → 3 bases nucleotídicas no RNAm que
codificam cada aminoácido (“palavra”);
• Códon:
–RNAm → A, G, C e U;
–“escrita” da direção 5’ para 3’;
–64 combinações diferentes de bases;
O código genético "padrão"

AUG é também sinal de iniciação

aminoácidos com um códon

aminoácidos com dois códons

aminoácidos com três códons

C O
É TI
aminoácidos com quatro códons
E N
G
G O
DI
CÓ
aminoácidos com seis códons
 CÓDIGO GENÉTICO

CÓDON DE INICIAÇÃO AUG:

• indica que a sequência de CÓDONS DE FINALIZAÇÃO:
aminoácidos da proteína começa a ser
UAA,UGA e UAG que indicam à
codificada ali. célula que a sequência de
aminoácidos destinada àquela
• codifica o aminoácido Metionina proteína acaba ali
(Met) de forma que todas as proteínas
começam com o aminoácido Met.
RNAt
▪ Levam os aminoácidos para o RNAm durante o
processo de síntese protéica. As moléculas de
RNAt apresentam, em uma determinada região,
uma trinca de nucleotídeos que se destaca,
denominada anticódon.

▪ É através do anticódon que o RNAt reconhece o

local do RNAm onde deve ser colocado o
aminoácido por ele transportado. Cada RNAt
carrega em aminoácido específico, de acordo
com o anticódon que possui
 Etapas da Tradução

1. Ativação do Aminoácido (metionina se liga ao tRNA)

2. Iniciação
3. Elongação ou Alongamento
4. Terminação e Liberação do complexo mRNA + rRNA + tRNA
5. “Folding” (moldagem) e Processamento proteico pós-tradução
A Iniciação da Tradução:

-A subunidade menor do
ribossomo tem três sítios de
ligação: um sítio de aminoácido
(A), um sítio polipeptídico (P) e
um sítio de saída (E).

-O tRNA iniciador carrega o

aminoácido metionina liga-se ao
códon start AUG.do RNAm,
correspondente à subunidade P
– onde os aminoácido serão
incorporados.

https://www.nature.com/scitable/topicpage/transl
ation-dna-to-mrna-to-protein-393
▪ A subunidade maior do
ribossomo se liga à
subunidade menor e
completa o complexo de
iniciação.

▪ A molécula tRNA iniciadora

– carregando o aminoácido
metionina (que servirá
como primeiro aminoácido
da cadeia polipeptídica –
liga-se ao sítio p do
ribossomo..

▪ O sítio A irá se alinhar com

o próximo anticódon do
https://www.nature.com/scitable/topicpage/transl
próximo tRNA ation-dna-to-mrna-to-protein-393
A Elongação da Tradução:
 Sítio de ligação
ao aminoácido

C G C códon
RNAm
 ▪ Quando o RNAm chega ao citoplasma,
ele se associa ao ribossomo.
▪ Nessa organela existem 2 espaços
onde entram os RNAt com
aminoácidos específicos (P e A).

UAC AAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA

▪ Somente os RNAt que têm sequência

AUG = aa
do anticódon complementar à
Metionina
Códon de sequência do códon entram no
iniciação ribossomo.
 ▪ Uma enzima presente na
subunidade maior do
ribossomo realiza a ligação
peptídica entre os
aminoácidos.

UAC AAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA
 ▪ O RNAt “vazio” volta para
o citoplasma para se ligar a
outro aminoácido.

UAC

AAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA
 ▪ O ribossomo agora se
desloca uma distância de 1
códon.
▪ o espaço vazio é
preenchido por um outro
RNAt com seqüência do
anti-códon complementar
à seqüência do códon.
UAC

AAA GAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA
 ▪ Uma enzima presente na
subunidade maior do
ribossomo realiza a ligação
UAC peptídica entre os
aminoácidos.

AAA GAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA
UAC AAA

GAA
AUG UUU CUU GAC CCC UGA

▪ O RNAt “vazio” volta para o

citoplasma para se ligar a outro
aminoácido.
▪ E assim o ribossomo vai se
deslocando ao longo do RNAm
A Terminação da
Tradução:
▪ Quando o ribossomo passa
por um códon de terminação
nenhum RNAt entra no
ribossomo, porque na célula
não existem RNAt com
sequencias complementares
aos códons de terminação.

GGG
Códon de
AUG UUU CUU GAC CCC UGA terminação

Fator de liberação:
não codifica
 GGG
▪ Então o ribossomo se solta
do RNAm, a proteína recém
formada é liberada e o
RNAm é degradado.

AUG UUU CUU GAC CCC UGA

Vários ribossomos podem traduzir simultaneamente uma molécula
de mRNA

Os ribossomos movem-se ao longo de

um mRNA na direção 5'→3'

O conjunto é conhecido como

polissomo ou polirribossomo
Cada ribossomo funciona
independentemente dos demais
https://youtu.be/Ikq9AcBcohA
Resumindo

▪ proteína + de 70 aminoácidos

▪ 1 códon 3 nucleotídeos no RNAm

▪ 1 códon 1 aminoácido na proteína

▪ Anticódon 3 nucleotídeos no RNAt

1. O processo de síntese de proteínas é denominado de tradução e
se baseia na união de aminoácidos a fim de se formar uma
proteína. Qual tipo de RNA está envolvido no processo?

a. Apenas RNA mensageiro e RNA transportador.

b. Apenas RNA mensageiro e RNA ribossômico.
c. Apenas RNA transportador e RNA ribossômico.
d. RNA mensageiro, transportador e ribossômico.
e. Nenhum tipo de RNA, pois a síntese de proteína ocorre graças a
moléculas de DNA.
2. A síntese proteica pode ser dividida em três etapas. A etapa
em que ocorre a junção dos aminoácido por ligações
peptídicas é chamada de

a. iniciação.
b. finalização.
c. conexão.
d. alongamento.
e. ligação
3. Na síntese proteica, observam-se os seguintes eventos:

I. o gene (segmento de DNA) é transcrito em RNA mensageiro;

II. o RNA mensageiro combina-se com um complexo de ribossomo,
RNAs transportadores e aminoácidos;
III. a proteína é sintetizada.

Num experimento de laboratório hipotético, realizou-se uma síntese

proteica utilizando-se: DNA de um gene humano, RNAs
transportadores de ovelha e aminoácidos de coelho. Ao final do
experimento, obteve-se uma proteína

a. humana.
b. de ovelha.
c. de coelho.
d. quimérica de homem e ovelha.
e. híbrida de homem e coelho.
4. Assinale a alternativa correta a respeito do processo de síntese
proteica.

a. Para sintetizar moléculas de diferentes proteínas é necessário que

diferentes ribossomos percorram a mesma fita de RNAm.
b. Se todo o processo de transição for impedido em uma célula, a
tradução não será afetada.
c. É a sequência de bases no RNAt que determina a sequência de
aminoácidos em uma proteína.
d. Se houver a substituição de uma base nitrogenada no DNA, nem
sempre a proteína resultante será diferente.
e. A sequência de aminoácidos determina a função de uma proteína,
mas não tem relação com sua forma.
1) Em grupos e assumindo que os “clips” distribuídos pelo
professor são nucleotídeos, construa uma sequência de 24
nucleotídeos (8 códons) de uma fita senso contendo:
2 códons de íntrons
Um start códon
Um stop códon

2) Construa a sequência da fita anti-senso de DNA

complementar.
3) Construa a sequência de RNA imaturo que será transcrito
a partir da fita anti-senso desse gene.
4) Faça o splicing desse RNA, para que ele se torne um
mRNA maduro.
5) Construa uma proteína a partir do mRNA construído pelo
grupo.