EXAMEN 7. TEMAS VARIADOS.

1. Cinética enzimática
A. Cuál sería el propósito de linearizar la ecuación de Michaelis-Menten?
Recuerda que la representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten [Vo vs. [S]] es una
hipérbola, en la cual la Vmax es un valor indefinido, que se alcanza en el infinito.  

La ecuación de Michaelis-Menten puede transfor-

marse algebraicamente en formas que son útiles
para la determinación práctica de Km y Vmax.
B. Ilustra ambas representaciones gráficas, la hiperbólica y la lineal,  indicando en ambas los
siguientes parámetros: Vmax, [S] y Km o los correspondientes parámetros inversos 1/Vo vs. 1/
[S].
 C. Representa linealmente inhibiciones enzimáticas de tipo competitivo (compiten sustrato e
inhibidor por el sitio activo de la enzima), no competitivo (descríbelo) e incompetitivo
(descríbelo), propias de enzimas con cinética hiperbólica de Michaelis-Menten.

Un inhibidor competitivo compite con el sustrato por el sitio activo del enzima. Mientras el inhibidor ocupa
el sitio activo ,impide la fijación del sustrato al enzima.

En presencia de un inhibidor
competitivo, la ecuación de Michaelis-
Menten pasa a ser.

Debido a que el inhibidor se une de manera

reversible al enzima, se puede cambiar el sentido de
la competición en favor del sustrato simplemente
añadiendo más sustrato. Cuando [S] excede a [I] se
minimiza la probabilidad de que se fije una molécula
de inhibidor, por lo que la reacción muestra una

Vmax normal. No obstante a la [ S ] a la cual l V 0=

l /2 de Vmax, la Km aparente, aumentará en
presencia del inhibidor en un factor a. Este efecto
sobre la Km aparente y la ausencia de efecto sobre la
Vmax, es diagnóstico de inhibición competitiva, y se
pone de manifiesto fácilmente en una gráfica de
dobles recíprocos
Un inhibidor acompetítívo (Fig. 6-15b) es el que se fija a un sitio distinto del que se fija el sustrato en el sitio
activo y que, a diferencia del inhibidor competitivo, sólo se une al complejo ES. En presencia de un inhibidor
acompetitivo, la ecuación de Michaelis-Menten cambia a

Así, un inhibidor acompetitivo disminuye

la Vmax observada. La Km aparente
también disminuye debido a que la [S]
necesaria para alcanzar la mitad del la
Vmax disminuye en un factor a’.
 Un inhibidor mixto. También se fija a un sitio distinto al del sustrato, pero se fija tanto a E como a ES. La
ecuación de velocidad que describe a la inhibición mixta es:

Donde a y a' se definen igual que

anteriormente. Normal mente, un
inhibidor mixto afecta tanto a como a´ .
D. Explica el significado de Km y de Vmax.
La Vmax. Es aquel punto de la reacción enzimática en la que se esta produciendo la mayor caridad de E-S y por lo tanto la mayor
cantidad de producto P. Esto como consecuencia de la saturación de la enzima por abundancia de sustrato. La Vmáx estima el
número de centros activos del enzima.
La Km es el valor de la concentración de sustrato al la que se ha alcanzado la mitad de la velocidad máxima. La Km nos da una idea
la afinidad que tiene el enzima por su sustrato, cuanto mayor es Km menor es la afinidad (predominan las formas E y S libres),
cuanto menor es Km mayor es la afinidad (predomina la forma ES)
.
2. Vía de las pentosas
A. Cuál es el producto de la fase OXIDATIVA de la vía de las pentosas que impacta sobre la síntesis de los
ácidos grasos. Explica.
Los tejidos que llevan a cabo activamente la síntesis de ácidos grasos (hígado, tejido adiposo, glándula mamaria lactante) o la
síntesis de colesterol y hormonas esteroideas (hígado, glándulas adrenales, gónadas) requieren el NADPH proporcionado por esta
ruta.
B. Cuál es el producto de la fase OXIDATIVA que es
precursor en la síntesis de los ácidos nucleícos?

El resultado neto es la producción de

NADPH, un reductor para las reacciones
biosintéticas, y ribosa 5-fosfato,
precursor de la síntesis de
nucleótidos.
C. Cuáles son las enzimas y
cofactores de
la fase OXIDATIVA de la vía de las
pentosas?

Glucosa 6 fosfato deshidrogenasa,

lactonasa, 6- fosofogluconato
deshidrogenasa, fosfopentosa
isómerasa.

Cofactores: NADP+ y Mg 2+
D. Como se forman y cuáles son los productos fosforilados (triosas y hexosas) reciclables de la
fase NO OXIDATIVA que pudieran alimentar a la glucólisis?

En los tejidos en los que se requiere principalmente NADPH, las pentosas fosfato producidas en la fase oxidativa de la
ruta se reciclan a glucosa 6-fosfato. En esta fase no oxidativa la ribulosa 5-fosfato se epimeriza en primer lugar a xilulosa
5-fosfato:

A continuación, en una serie de reordenamientos de los esqueletos carbonados; seis azúcares fosfato de cinco carbonos
se convierten en cinco azúcares fosfato de seis carbonos, completando el ciclo y permitiendo la oxidación continua de
glucosa 6-fosfato con producción de NADPH. El reciclado continuo conduce en último término a la conversión de glucosa
6-fosfato en seis moléculas de CO2.

Dos enzimas únicos de la ruta de las pentosas fosfato actúan en estas interconversiones de azúcares: la transcetolasa y
la transaldolasa.
E. Qué tipo de enzimas logran barajear el esqueleto carbonado de la glucosa en la fase NO
OXIDATIVA de la vía de las pentosas para formar los productos reciclables que alimentan la vía
glucolítica?
Estas enzimas canalizan las transferencias de
grupos carbonilo e hirdoxilo, para ello es
necesario la fractura de las moléculas.
3. Síntesis y beta-oxidación de ácidos grasos. 
A. De dónde conocen Uds. a la malonil-CoA? Describan la reacción en la que se genera la
malonil-CoA y nombren la vía metabólica donde ocurre esta reacción.

La formación del malonil-CoA

a partir del acetil-CoA es un
proceso irreversible catalizado
por la acetil-CoA carboxilsa .
B. Además de su acción directa en la síntesis de los ácidos grasos, SIMULTÁNEAMENTE, la
malonil-CoA es capaz de inhibir la degradación (beta-oxidación) de los ácidos
grasos. Ilustra y explica cómo lo hace. 

La concentración de malonil-CoA, el primer intermediario de la biosíntesis citosólica de ácidos grasos de cadena larga a
partir de acetil-CoA , aumenta siempre que el animal recibe un suministro abundante de glúcidos; el exceso de
glucosa que no puede oxidarse o almacenarse en forma de glucógeno se convierte en ácidos grasos en el citosol para su
almacenamiento como triacilgliceroles. La inhibición de la carnitina aciltransferasa I por el malonil-CoA garantiza la
inhibición de la oxidación de ácidos grasos siempre que el hígado reciba un suministro abundante de glucosa como
combustible y fabrique activamente triacilgliceroles a partir del exceso de glucosa.
4. Piruvato, su significado en:
>glucólisis (al final de la vía)
>gluconeogénesis (al inicio de la vía)
>su conversión a un aminoácido (cuál?) en reacción catalizada por una transaminasa (cuál;
indica cuál es el cofactor de esta reacción)

Transaminación con el
glutamato.
COFACTOR= NADPH
>su conversión a qué producto en la reacción catalizada por la piruvato deshidrogenasa
(tremendo complejo enzimático; si es posible busca su estructura cuaternaria).

El complejo de la PDH está formado por copias

múltiples de los tres enzimas: piruvato deshidrog
enasa , dihidrolipoiltransacetilasa y dihidro
lipoildeshidrogenasa. Cataliza la conversion del
piruvato a acetilCoA.

5. Ciclo de Krebs
> en qué compartimento celular ocurre este ciclo?

En la matriz mitocondrial.

> por qué se considera que es una vía anfibólica?

La primera reacción del ciclo, en el que el ácido oxalacético (un compuesto de cuatro carbonos)
condensa con acetato (un compuesto de dos carbonos) para formar citrato un compuesto de seis
carbonos (reacción anabólica)
Las siguientes reacciones, que son reorganizaciones intramoleculares, producen ácido isocítrico.
Las dos reacciones siguientes son catabólicas, en las que se pierde un grupo -COO en cada paso y es
producido ácido succínico.

>por qué es que reacciones anapleróticas lo mantienen abastecido de sus sustratos?

Durante el ciclo de Krebs se van generando diversos intermediarios de diferentes números de

carbonos (4, 6,5).   Aunque suele existir una idea general que estos intermediarios fluyen de
manera continua sin perturbación alguna durante la ruta, la realidad es que dichas moléculas
 pueden dejar el ciclo para ser convertidas en glucosa, ácidos grasos o aminoácidos no
esenciales. Asimismo, estos intermediarios que son “sacados” del Ciclo deben ser remplazados
eventualmente para permitir continuar la ruta  de manera normal con las concentraciones ideales
de dichos intermediarios.  A los procesos por los cuales se forman  estos intermediarios de
remplazo del ciclo se conocen como reacciones anapleróticas.
> en una vuelta del ciclo de Krebs se generan: 
2CO2 + 3NADH + 1FADH + 1GTP
Nómbralos y explica su función 
CO2
Dioxido de carbono: descarboxilaciòn oxidtiva del isocitrato.
NADH y FADH: dinucleótido de nicotinamida y adenina y flavín adenín dinucleótido
Poder reductor para la cadena respiratoria.
GTP.guanosín trifosfato 
Mólecula energetica.

> qué significa metabólicamente un excedente de citrato en la matriz mitocondrial? Por qué es
que inhibe a la citrato sintasa y a la fosfofructocinasa tipo 1(enzima que cataliza el paso limitante
de qué vía); además, hacia donde se dirige el excedente para no desaprovechar su alto valor
metabólico.

Un excedente de citrato es consecuencia de una ingesta alta en glucosa y por ende un

incremento de la vìa glucolìtica . La inhibición de la citrato sintasa y a la fosfofructocinasa tipo 1
se da para evitar un sobrecargo del Ciclo de Krebs y para detener. la via glucolìtica
respecivamnete.
El excedente de citrato se utiliza para la biosíntesis de ácidos grasos.

6. Metabolismo 101 (conceptos básicos)

El metabolismo es el conjunto de reacciones químicas catalizadas por enzimas (reacciones
biológicas) por un lado para obtener energía, poder reductor y compuestos simples de los
alimentos de estructura compleja y por el otro lado, utilizarlos para formar compuestos complejos
que utilizamos para todas nuestras actividades físicas y mentales. 

> Cómo se denomina el conjunto de reacciones biológicas en las que se degradan alimentos
complejos. Nombra 1 vía de degradación, indica los compuestos simples, el poder reductor y la
energía (potencial) que se obtienen.

Catabolismo de carbohidratos( glucòlisis), glucidos, poder reductor obtenido: NADH Y FADH,

energía potencial obtenida: gradiente de protones en la cadena respiratoria por el transporte
electrónico.

> Cómo se denomina el conjunto de reacciones biológicas en las que se transforman

compuestos sencillos en compuestos complejos, el poder reductor utilizado y la energía
requerida para dicha síntesis. Nombra 1 vía de transformación de compuestos simples en
compuestos complejos, sus requerimientos de poder reductor y de energía. 

Anabolismo, poder reductor: NADPH, se requiere de energía (ATP).

Biosinteisis de lipidos: sus compuesto simples son grupos acilo, y grupos malonil para sintetizar
el acido graso, se requiere de NADPH y ATP.
> Las vías metabólicas son reguladas por una red de hormonas. Describe el efecto sobre el
metabolismo de dos de ellas: el glucagon y la insulina.  Escoge una vía metabólica (la que tu
gustes) y muestra como la afecta el glucagon (hormona catabólica) comenzando desde su
interacción con su receptor en la membrana plasmática hasta obtenerse la respuesta celular
(una de ellas). 

En la via metabpolica:glucogénesis ; la glucógeno fosforilasa

del músculo esquelético se presenta en dos formas
interconvertibles: una forma catalíticamente activa, y otros
que es menos activa. Al unirse a receptores de superficie
específicos, el glucagón que actúa sobre un hepatocito activa
una proteína fijadora de CTP, que provoca un aumento en
cAMP activando la PKA. Esto pone en marcha una cascada
de fosforilaciones; la PKA activa la fosforilasa b quinasa, la
cual activa entonces la glucógeno fosforilasa.
 Haz el mismo ejercicio para la insulina (hormona anabólica): escoge una vía metabólica que
sea susceptible a la acción de la insulina, y sigue el modo en que la insulina la regula desde su
interacción con su receptor en la membrana y la respuesta celular (una de ellas).

La unión de la insulina a su receptor activa De igual modo en la glucogènesis..

una tirosina proteína quinasa en el receptor, la
cual fosforila el sustrato del receptor de
insulina (IRS-1). A continuación la fosfotirosina
de esta proteína se une a la fosfatidilinositol 3-
quinasa (PI-3K) que convierte el
fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) de la
membrana en fosfatidllinositol 3,4,5-trisfosfato
(PIPs). Una proteína quinasa (PDK-1) que es
activada por la unión de PIP3 activa una
segunda proteína quinasa (PKB), la cual
fosforila la glucógeno sintasa quinasa 3
(GSK3)
> Existe una red hiperextensa de microRNAs (estoy hablando de miles de estas partículas)
que se sabe regulan el metabolismo. Búscate un microRNA y explica muy brevemente la manera
en que ejerce un efecto sobre alguna vía metabólica (la que te agrade).  

EL miR-122 se expresa específicamente en el hígado y es el más abundante en este órgano .

En el tejido hepático, como ejemplo de papel regulador, entre las funciones conocidas de
miR-122 está el metabolismo lipídico. Su silenciamiento en ratones alimentados con dieta rica
en grasa produce una reducción significativa de la esteatosis hepática asociada a una reducción
de la síntesis de colesterol y a la estimulación de la oxidación de ácidos grasos.

> Con la diferenciación celular los tejidos van adquiriendo funciones metabólicas

especializadas. Comenta acerca de una función metabólica propia del hígado (la que tu gustes)
y de una función metabólica propia del músculo (la que te agrade). 
 En el metabolismo del aminoácido: alanina , este actúa
como transpoitador de amoníaco y del esqueleto
carbonado dei piruvato desde el músculo esquelético al
hígado. El amoniaco se excreta y el piruvato se utiliza
para producir glucosa, que vuelve al músculo.