Universidad Mayor de San Simon Facultad de Ciencias y Tecnologia

Docente:Catellon Reinaga Dilian Auxiliar: Daniel Villarroel

Materia: biología Celular Grupo:1
Carrera:Ing.de alimentos Horario: 10:30 am
Estudiantes:Leonardo Martin Rocha Ramirez,Maria Rene Ramos Choque,Esmeralda Villca Villegas
Practica #5 Observación de bacterias
2.Abstract
La mayoría de las bacterias no producen pigmentos por sí mismas, lo que las hace poco refráctiles. Esto
significa que al usar un microscopio de refracción, que son los de uso más común, su visualización se dificulta,
para solucionar este problema las células bacterianas deben ser teñidas y para esto existe una gran variedad
de colorantes. Dado que por lo general las bacterias reaccionan frente a los tintes, se plantea que es debido a
la composición de las paredes celulares que principalmente se componen de ácidos (acido nucléico, acido
polisacárido, proteínas, peptidoglicano.Otra explicación es que los colorantes tienen una carga positiva, o que
son catiónicos, y que son atraídos al citoplasma y la pared celular que tienen cargas negativas. En las tinciones
sencillas las células o su fondo (tinción negativa) son coloreadas con un único colorante, algunos son el Azul de
Metileno,pero existen una gran cantidad de reactivos que pueden ser utilizados como colorantes para una
tinción simple. Las tinciones diferenciales son más complejas e involucran el uso de tintes con diferentes
propiedades. Una tinción diferencial puede ser usada para distinguir diferentes tipos de bacterias que son
morfológicamente indistinguibles.
3.Resumen
“La palabra bacteria proviene de un término griego que significa “bastón”. Se trata de un microorganismo
unicelular procarionte que puede provocar enfermedades, fermentaciones o putrefacción en los seres vivos o
materias orgánicas.Por tratarse de células procariotas, carecen de núcleo u orgánulos internos. Por otra parte,
aunque el término proviene de bastón, las bacterias pueden tener forma de barra, esfera o hélice.
Las bacterias se pueden clasificar en diversos grupos partiendo de un criterio distinto. Así, por ejemplo, si
partimos de lo que es su forma nos encontramos con el hecho de que existen cuatro tipos claramente
delimitados: Bacilos. Son las bacterias que se definen por ser alargadas y porque tienen la posibilidad de ser
curvas o rectas. Leptothrix., de gran tamaño son las que se enmarcan bajo esta denominación y tienen como
principal seña de identidad que pueden presentar filamentos llamados tabicados. Espirilos, en este caso bajo
dicha categoría se incluyen las bacterias que tienen una apariencia curva helicoidal.Cocos. Las bacterias que
reciben dicho nombre son aquellas que poseen forma redondeada.Además de todo lo expuesto tenemos que
subrayar también el hecho de que las bacterias pueden clasificarse también en base a lo que es su respiración
En tercer lugar podemos determinar que las bacterias se pueden clasificar igualmente teniendo en cuenta lo
que es su necesidad de crecimiento.”[1]
“Pared celular: Con la tinción de Gram, una proporción importante de bacterias puede dividirse en dos
grandes grupos: grampositivas (se observan de color azul - debido al colorante cristal violeta) y gramnegativas
(pierden el cristal violeta y conservan la safranina - se aprecian de color rojo o rosado). La técnica se basa en
las diferencias físicas fundamentales de la pared celular y emplea colorantes catiónicos (cristal violeta y
safranina), que se combinan con elementos cargados negativamente.
Las bacterias grampositivas cuentan con tres capas externas: cápsula (en algunos casos), pared celular gruesa
y membrana citoplásmica. Las bacterias gramnegativas presentan cápsula (algunas), una pared celular
delgada, membrana externa (que equivale al lipopolisacárido) y una membrana interna (citoplasmática).
La pared celular le da forma a la bacteria y su composición varía entre bacterias. En bacterias grampositivas,
consiste de varias capas de peptidoglucano (formado por los azúcares N-acetilglucosamina más N-
acetilmurámico y un tetrapéptido) que retienen el cristal violeta utilizado en la tinción de Gram; otros
componentes de la pared incluyen redes de ácido teicoico y ácido lipoteicoico. Las bacterias gramnegativas
cuentan con dos membranas (una externa y una interna) así como una capa delgada de peptidoglucano entre
ambas, en el llamado espacio periplásmico”.[2]
1.Universidad Nacional Autonoma de Mexico.2017. Bacteriología.disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/bacteriologia_2017%20.pdf
2.Universidad Nacional Autonoma de Mexico.2017. GENERALIDADES DE BACTERIAS.disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/generalidades.html

4.Objetivos
4.1 Objetivo general
Identificar las bacterias que presenta el yogurt y del sarro por el método de tinción de Gram
4.2 Objetivos especificos
- Reconocer la forma,tipo de bacterias que se observara al microscopio por tinción de gram
-Conocer la importancia de las bacterias en la industria
5.Metodos y Materiales
5.1 Materiales
-yogurt natural
-sarro dentario
-gotero
-portaobjetos
-Cubreobjetos
-guantes de latex
-mondadientes
-mechero de alcohol
5.1.2 Reactivos
-alcohol etílico
-cristal violeta
-yodo
-safranina
-aceite de inmersión
-agua destilada
5.2 Metodos
Observación de bacterias presentes en un yogurt (Tinción de Gram)
-colocar con un gotero una gota de yogurt en un portaobjetos y realizar su extendido.
-lavar con alcohol la muestra y dejar secar la muestra por 1min
-colocar el colorante cristal violeta en la muestra por 2min.para luego lavarlo.
-añadir unas gotas de yodo de Gram para fijar el colorante a la pared celular por 1min. para después ser
lavado
-colocar el solvente orgánico: alcohol por solo 30 segundos exactos para la disolución del color de las
gramnegativas
-colocar a la muestra la colorante safranina por 1min para pintar rosado a las gramnegativas.y vertimos el
aceite de inmersión en el objetivo.
Bacterias presentes en el sarro dentario
-utilizar mondadientes para extraer sarro de los dientes
-colocar una gota de agua sobre el portaobjetos.
-mezclar la gota de agua con el sarro dentario para su extendido
-secar la muestra a la llama del mechero de alcohol.
6.Resultados
las bacterias que se observaron en el yogurt fueron los cocos simples,grampositivas con objetivo de 100X
en el sarro se observo los bacilos (alargados) grampositivas y cocos simples
7.Discusion
Aplicación del método de tinción de Gram
“Este método ha sido, y es en la actualidad, constantemente usado en microbiología pues es un proceso
básico en la caracterización de bacterias convirtiéndolo así en una herramienta fundamental en el desarrollo
de la academia y en el avance de la microbiología, tanto así que a través de este proceso de tinción se han
realizado clasificaciones serias de microorganismos utilizadas a nivel clínico e industrial. En la cotidianidad es el
método de mayor facilidad técnica, además más rápido y económico, comparado frente a métodos como
medios de cultivo cromógenos, pruebas antígeno-anticuerpo (ELISA), PCR (Polymerase Chain Reaction) y
electroforesis que aunque más específicos, requieren mayores inversiones de tiempo, económicas, y técnicas.
(3) Saber si una bacteria es Gram-positiva o Gram-negativa es importante por varias razones. No solo
microbiólogos sino también bacteriólogos, médicos, odontólogos y otros, a partir de los resultados de una
tinción de Gram pueden ayudarse a identificar una bacteria desconocida y poderla clasificar por ejemplo en el
manual de Bergey (Bergey´s Manual Trust) o determinar un tratamiento. Las bacterias Gram-positivas y Gram-
negativas además difieren en su susceptibilidad a sustancias químicas tales como antibióticos, las bacterias
Gram-positivas son más susceptibles a la Penicilina y las bacterias Gram-negativas son más susceptibles a la
Tetraciclina. Las bacterias Gram-negativas poseen paredes celulares más complejas, y entre otras, las bacterias
Gram-positivas y Gram-negativas producen diferentes tipos de toxinas”[3]
Los microorganismos y la resisitencia a los antibioticos
“Los antibióticos son medicamentos utilizados para prevenir y tratar las infecciones bacterianas. La resistencia
a los antibióticos se produce cuando las bacterias mutan en respuesta al uso de estos fármacos. Son las
bacterias, y no los seres humanos ni los animales, las que se vuelven resistentes a los antibióticos. Estas
bacterias farmacorresistentes pueden causar infecciones en el ser humano y en los animales y esas infecciones
son más difíciles de tratar que las no resistentes,la resistencia a los antibióticos hace que se incrementen los
costos médicos, que se prolonguen las estancias hospitalarias y que aumente la mortalidad.La resistencia a los
antibióticos está aumentando en todo el mundo a niveles peligrosos. Día tras día están apareciendo y
propagándose en todo el planeta nuevos mecanismos de resistencia que ponen en peligro nuestra capacidad
para tratar las enfermedades infecciosas comunes. Un creciente número de infecciones, como la neumonía, la
tuberculosis, la septicemia, la gonorrea o las enfermedades de transmisión alimentaria, son cada vez más
difíciles —y a veces imposibles— de tratar, a medida que los antibióticos van perdiendo eficacia”.[4].
Respuesta de la OMS
“La lucha contra la resistencia a los antibióticos reviste alta prioridad para la OMS. La Asamblea Mundial de la
Salud aprobó en mayo de 2015 un plan de acción mundial sobre la resistencia a los antimicrobianos, incluida la
resistencia a los antibióticos. Su finalidad es asegurar que se pueda seguir previniendo y tratando
enfermedades infecciosas por medio de fármacos eficaces y seguros.
El plan de acción contiene cinco objetivos estratégicos:
 mejorar la sensibilización y los conocimientos en materia de resistencia a los antimicrobianos;
 reforzar la vigilancia y la investigación;
 reducir la incidencia de las infecciones;
 optimizar el uso de medicamentos antimicrobianos;
 asegurar que se realicen inversiones sostenibles en la lucha contra la resistencia a los antimicrobianos.
En la Asamblea General de las Naciones Unidas de septiembre de 2016, los Jefes de Estado se
comprometieron a abordar de forma amplia y coordinada las causas profundas de la RAM en diferentes
sectores, en particular los de la salud humana, la salud animal y la agricultura. La OMS está prestando apoyo a
los Estados Miembros en la elaboración de planes de acción nacionales sobre la RAM basados en el plan de
acción mundial.
La OMS viene liderando múltiples iniciativas para luchar contra la resistencia a los antimicrobianos:
-Semana Mundial de Concienciación sobre el Uso de los Antibióticos:La campaña mundial plurianual, que
desde 2015 se celebra en el mes noviembre bajo el lema «Antibióticos: manéjalos con cuidado», tiene un
volumen cada vez mayor de actividades.
-Sistema Mundial de Vigilancia de la Resistencia a los Antimicrobianos.
-Alianza Mundial para la Investigación y el Desarrollo de Antibióticos :La Alianza, que es una iniciativa conjunta
de la OMS y la iniciativa Medicamentos para las Enfermedades Desatendidas, fomenta la investigación y el
desarrollo mediante colaboraciones público-privadas. Para 2023, la Alianza tiene como objetivo desarrollar y
proporcionar hasta cuatro nuevos tratamientos mediante la mejora de los antibióticos existentes y la
aceleración de la entrada de nuevos antibióticos.
-Grupo de coordinación interinstitucional sobre la resistencia a los antimicrobianos”[4]
Otros métodos de tinción para la identificación de microorganismos
“Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes
infecciosos –en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos–. La tinción de Gram se considera básica en la
valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico, mientras que la tinción de Wright se ocupa para el
diagnóstico de enfermedades muy particulares en el rubro de la parasitología. Hay técnicas tintoriales
específicas de gran utilidad, como la tinción de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el diagnóstico de
enfermedades crónicas como la tuberculosis o la actinomicosis, o la tinción de azul de lactofenol, que preserva
e identifica a los componentes estructurales de los hongos. Las diferentes tinciones en el laboratorio
microbiológico tienen una utilidad fundamental para el diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples
patologías de etiología infecciosa.”[5]
3.Pontificia universidad javeriana.2010, modelado e implementación de la tinción de gram.
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/7011/tesis459.pdf?sequence=1&isAllowed=y
4.Organizacion mundial de la salud.2018.Resistencia a los antibióticos.disponible en:
https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/resistencia-a-los-antibióticos
5. Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología,2014,investigación de discapacidad,Mexico,pp (10-
18) disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
8.Conclusiones
Se establecio que las bacterias que se encontraron en el yogurt si son iguales a otras pruebas de laboratorio
para observarlas y que con al ayuda de la tinción de gram se comprendio que son grampositivas y del sarro
dental son grampositivas igual.
El método de tinción de gram nos aydona diferenciar las manchas y microorganismos.
9.Referncias Bibliograficas
1.Universidad Nacional Autonoma de Mexico.2017. Bacteriología.disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/bacteriologia_2017%20.pdf
2.Universidad Nacional Autonoma de Mexico.2017. GENERALIDADES DE BACTERIAS.disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/generalidades.html
3.Pontificia universidad javeriana.2010, modelado e implementación de la tinción de gram.
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/7011/tesis459.pdf?sequence=1&isAllowed=y
4.Organizacion mundial de la salud.2018.Resistencia a los antibióticos.disponible en:
https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/resistencia-a-los-antibióticos
5. Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología,2014,investigación de discapacidad,Mexico,pp
(10-18) disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf