Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Bacilos Gram Positivos - 1

Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso U.T. 12 - 6 Bloque temático III

Bacilos gram positivos aeróbicos

Listeria monocytogenes

Taxonomía
Listeria monocytogenes es la especie más importante del género Listeria
En la anterior edición del Bergey's estaba incluida en la familia de las Corynebacteriaceae, y tras su
salida de este grupo se ha ubicado en una nueva familia: Listeriaceae.

Características morfológicas y de tinción

Listeria monocytogenes es una bacteria en forma de bastoncillo que no tiene cápsula y no forma
esporas. En cultivos jóvenes se encuentra en forma bacilar, con un tamaño de 0,5 µm de ancho por 1 a 2
µm de largo, para volverse predominantemente cocoide en cultivos viejos, y generalmente ésta es la forma
que se observa.
El agrupamiento no es característico; pueden encontrarse células aisladas, en pares (formando ángulo
agudo ) o en cadenas cortas. A veces pueden aparecer filamentos largos que pueden llegar a medir hasta
250 µm.
En los cultivos jóvenes, los bacilos son invariablemente gram positivos, pero, a medida que el cultivo
envejece, la reacción de gram se vuelve irregular.
Son bacterias móviles, con mejor movilidad a temperatura ambiente que a 37º C. Esto es debido a que
a 20º C las bacterias tienen flagelos peritricos, mientras que a mayor temperatura pierden casi todos sus
flagelos, quedando monotricas.

Características macroscópicas y culturales

Estos gérmenes son relativamente exigentes, creciendo mejor en medios enriquecidos. Son aeróbicos o
microaerófilos, creciendo mejor con baja tensión de oxígeno y tensión incrementada de CO2.
Es característico de estas bacterias su crecimiento en condiciones extremas: soportan medios con un
pH tan alcalino como 9,6; pueden crecer en presencia de hasta un 10% de NaCl y crecen, aunque
lentamente, a temperaturas de 4º C.
Su aislamiento a partir de productos patológicos es muy escaso y dificultoso, por lo que se utilizan
técnicas de enriquecimiento basadas en las características propias enumeradas en el párrafo anterior.
En medios sólidos enriquecidos aparecen colonias diminutas opacas, brillantes, con una tonalidad gris
azulada casi específica. Puede haber una pequeña zona de ß hemolisis.
En medios líquidos, el crecimiento es lento en ausencia de hidratos de carbono fermentables, y puede
retrasarse de una a dos semanas. Cuando en el medio hay hidratos de carbono, el crecimiento es mucho
más rápido, pero a medida que son fermentados los azúcares con la consiguiente producción de ácidos, el
pH disminuye y las bacterias mueren en poco tiempo.

Gustavo A. Díaz Martín. Profesor Técnico de Formación Profesional. Curso 2003-2004

I. E. S. Jaime Ferrán Clúa. San Fernando de Henares. (28830 Madr id) Código 28038616
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Características bioquímicas y antigénicas

Las pruebas bioquímicas más importantes para llegar a una correcta identificación son: prueba de la
catalasa positiva ( lo que las diferencia del género Streptococcus) y movilidad muy activa a temperatura
ambiente.
Otras pruebas como la hidrólisis de esculina positiva, la no producción de SH2 o la fermentación del
manitol, son útiles para diferenciarlas de otros bacilos gram positivos, como Erisipelothrix.
El análisis antigénico permite la diferenciación de cuatro serotipos principales numerados
correlativamente 1,2,3 y 4, así como la subdivisión en subtipos. La mayor parte de los aislamientos clínicos
pertenecen a los serotipos 1a, 1b y 4b.
Sin embargo se producen reacciones inmunológicas cruzadas con algunas bacterias comunes, tales
como Enterococcus faecalis, Staphilococcus aureus o Escherichia coli, lo cual significa que el
diagnóstico serológico no es muy fiable.

Patogenicidad
Es un importante patógeno animal que, en ocasiones puede infectar al hombre.
La infección humana puede presentarse como un cuadro inespecífico o fundamentalmente como
septicemias o meningitis. La mayor parte de los casos aparecen en recién nacidos, ancianos y pacientes
inmunodeprimidos, y tienden a ser infecciones oportunistas.
En mujeres embarazadas puede provocar abortos espontáneos.
La listeriosis no presenta un cuadro clínico distintivo, por lo que la única forma de diagnóstico cierto es
el aislamiento e identificación del microorganismo.
Es posible aislar el microorganismo de muestras intestinales y genitales en pacientes asintomáticos,
sobre todo en personas que trabajen con animales o sus despojos.

Diferenciación entre géneros Listeria y Erysipelothrix

Listeria Erysipelothrix
Fermentación de manitol + -
Produción de SH2 - +
Hidrólisis de esculina + -
Catalasa + -
Hemólisis ß No hemolítico
Movilidad + -

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Erysipelothrix rhusiopathiae

Características microscópicas y de tinción

Esta bacteria, poco habitual, aparece como un bacilo gram positivo con fácil tendencia a la
decoloración, por lo que a veces puede parecer un gram negativo.
Es algo más pequeña que los miembros del género Listeria. No tienen agrupamientos característicos,
aunque a veces se observan filamentos largos, no ramificados con aspecto granular.
No forman esporas, no son capsulados y son inmóviles.

Características macroscópicas y culturales

Crece bien en medios enriquecidos a una temperatura óptima de 30º C.
Es microaerófilo, creciendo bien tanto en aerobiosis como en anaerobiosis.
Las colonias en medio sólido pueden presentar dos formas:
- lisas, con un diámetro de 0,1 a 0,5 mm, convexas, circulares y transparentes.
- rugosas, algo más grandes, con superficie mate y borde fimbriado.
Este gérmen es muy resistente a los agentes externos, sobreviviendo hasta algunos años en el suelo y
resistiendo ante los mecanismos utilizados habitualmente para la conservación de las carnes y pescados,
como ahumado, salado y encurtido.

Características bioquímicas identificativas

Catalasa y oxidasa negativas.
La producción de SH2 es bastante característica.
No son habituales los métodos serológicos de identificación.

Patogenicidad
Igual que Listeria, Erysipelothrix es sobre todo un patógeno veterinario que afecta fundamentalmente
a cerdos, aves de corral y corderos, produciéndoles la erisipela porcina en el cerdo o la "cresta azul" en los
patos.
El hombre se infecta casi invariablemente por contacto con animales o productos relacionados, como
carnes, pieles, huesos o estiércol.
La enfermedad que produce, denominada erisipeloide, se caracteriza por un eritema edematoso, con
adenitis, linfangitis, artritis de proximidad y, a veces septicemia.
Aunque la enfermedad es autolimitada y desaparece por lo general en un mes, hay algunos casos
descritos de septicemias fatales.

Gustavo A. Díaz Martín. Profesor Técnico de Formación Profesional. Curso 2003-2004

I. E. S. Jaime Ferrán Clúa. San Fernando de Henares. (28830 Madr id) Código 28038616