Clase #6

27/4/2020
 El frotis se hace colocando una gotita de cultivo sobre el portaobjetos.
 Pasa el asa sobre los cultivos y se impregna sobre le portaobjetos. Dá ndolo de
forma circular y formar una moneda de 10 centavos.
 Se deja secando al aire libre.
 Se pasa el portaobjeto sobre el mechero, tres o cuatro veces. – Fijación
 Se agrega un tinte (Violeta cristal, azul de metileno, safranina)

 Un colorante á cido (anió nico) es aquel donde la balanza de la carga sobre el ion
colorante es negativa.
 Un colorante bá sico (catió nico) es aquel donde la carga llevada por el ion
colorante es positiva.
 Un colorante neutro es una sal compuesta de un colorante á cido y un colorante
bá sico, como el Eosianato de Azul de Metileno.

 Á reas periféricas de la bacteria

 Tinció n simple – 1 tinte
 Tinció n diferencial – 2 tintes

o Coloració n Gram
 Cristal violeta
 Solució n de Iodo de Gram (agente mordente)
 Alcohol-Acetona (agente decolorante)
 Safranina (colorante de contraste)

 Bacterias Gram Positivas, que retienen el cristal violeta y aparecen de color

violeta profunda.
 Bacterias Gram Negativas, que pierden el cristal violeta y por contraste de la
safranina aparecen rojas.

 El arreglo de las bacterias

 Las Gram negativas son delgadas, pero contienen má s grasas. El alcohol limpia
esos lípidos.
 En las Gram positivas se mantiene el color violeta.
 Soluciones aplicadas Gram Positivas (G+) Gram Negativas (G-)
por su orden

1. Cristal Violeta Las bacterias se tiñen en violeta Las bacterias se tiñen

en violeta

2. Solución Iodo Complejo CV-I se forma dentro Complejo CV-I se

de las bacterias; las bacterias forma dentro de las
permanecen violetas bacterias; las bacterias
permanecen violetas

3. Alcohol-Acetona Las paredes celulares se Extracción de lípidos

deshidratan hay retracción de de las paredes
los poros, la permeabilidad celulares, aumento de
disminuye, el complejo CV-I no porosidad, CV-I sale de
puede salir de la bacteria, la bacteria
permanece violeta

4. Safranina Las bacterias no afectadas Las bacterias toman

permanecen violetas este colorante y se
tiñen de rojo