Universidad de los llanos

Ciencias agrarias y recursos naturales

Ingeniería agronómica

Bioquímica laboratorio

“Carbohidratos-reacciones de identificación”

Presentado a:

Químico: Bustamante R., German-Docente

Presentado por:

Cruz C., Jhon-111003210

Villavicencio

03/05/2015
 OBJETIVOS

 Realizar las reacciones químicas que identifican carbohidratos.

 Determinar la presencia de carbohidratos en tejidos vegetales.
 Clasificar los diferentes tipos de carbohidratos.
 Diferenciar aldosas de cetosas.
 Reconocer monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
 Diferenciar e identificar azucares reductores y no reductores.

PROCEDIMIENTO
 Prueba de molish:

Tubo de ensayo con 10 gotas de solución carbohidratos 10 gotas del reactivo de MOLISH

Se repitió la misma prueba pero esta vez con muestras

10 gotas de H2SO4 concentrado
(m1, m2 y m3) en vez de solución de carbohidratos.

Ensayo del BENEDICT:

Tubo 1 con 3 ml de glucosa

Tubo 2 con 3 ml de fructosa
Tubo 3 con 3 ml de sacarosa
Tubo 4 con 3 ml de lactosa
Tubo 5 con 3 ml de m1 3 ml de reactivo de BENEDICT,
Prueba con 3,5 DNS:
Tubo 6 con 3 ml de m2 agita y se llevó a baño María.
Tubo
Tubo 71 con
con 3 ml de m3
Tubo 2 con Tubo 3 con Tubo 4 con Tubo 5 con Tubo 6 con Tubo 7 con
20 gotas 20 gotas 20 gotas de 20 gotas de 20 gotas de 20 gotas de 20 gotas de
de glucosa de fructosa sacarosa lactosa m1 m2 m3

Se adiciono 20 gotas de reactivo 3,5-DNS y se llevó a baño María

ENSAYO DE BALFOED:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Tubo 7

con gotas con 20 con 20 con 20 con 20 con 20 con 20
de glucosa gotas de gotas de gotas de gotas de gotas de gotas de
fructosa sacarosa lactosa m1 m2 m3
20 gotas 20 gotas 20 gotas 20 gotas 20 gotas 20 gotas 20 gotas
de de de de de de de
reactivo reactivo reactivo reactivo reactivo reactivo reactivo
de de de de de de de
barfoed barfoed barfoed barfoed barfoed barfoed barfoed
Coloración Coloración Coloración Coloración Coloració Coloración Coloración
entre 6-7 entre 6-7 entre 6-7 entre 6-7 n entre 6- entre 6-7 entre 6-7
min. min. min. min. 7 min. min. min.

ENSAYO DE SELIWANOFF:

Tubo 7 con 3 ml de fructosa

Tubo 6 con 3 ml de galactosa
Tubo 5 con 3 ml de xilosa Se adiciono 25 gotas del reactivo
SELIWANOOF
Tubo 4 con 3 ml de maltosa
Tubo 3 con 3 ml de glucosa
Tubo 2 con 3 ml de sacarosa RESULTADOS
Tubo 1 con 3 ml de seliwanoff Se agregó unas gotas de NaOH 1M y
se llevó a baño María. Comprobamos
Prueba de MOLISH: su pH 11-12
ENSAYO DE BENEDIET:

Carbohidratos Presencia Carbohidratos Presencia

si No si No
Glucosa X Glucosa X
Fructosa X Fructosa X
Sacarosa X Sacarosa X X
Galactosa X Galactosa X
Muestra problema X Prueba Muestra problema X
con 3.5
DNS: Carbohidratos Presencia
si No
ensayo de BERFOED:
Glucosa X
Carbohidratos Presencia Fructosa X
si No Sacarosa X
Glucosa X Galactosa X
Fructosa X Muestra problema X
Ensayo
Sacarosa X
Galactosa X de SELIWANOFF:
Muestra problema X
Carbohidratos Presencia
 si No
Glucosa X
Fructosa X
Sacarosa X
Galactosa X
Muestra problema X

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Prueba de molish

Esta reacción es general para todo carbohidrato que se encuentren en una disolución.
Para este trabajamos glucosa, fructosa, sacarosa, galactosa y una muestra problema
que es guayaba.

Dando positivo para todas las muestra trabajadas puesto que la acción hidrolizante y
deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En dicha reacción el
ácido sulfúrico cataliza la hidrolisis de los enlaces glucosúricos de las muestras y la
deshidratación a furfural (en las pentosas) o de hidroximetilfurfural (en las hexosas)
estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de molish dando una
coloración violeta por tanto se determina la presencia de carbohidratos en la fruta de
la guayaba.

ENSAYO DE BENEDICT

Esta reacción identifica azucares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C
anometrico) esta reacción radica en que en un medio alcalino el ion cúprico (otorgado
por el sulfato cúprico) es capaz de reducir por el efecto del grupo aldehído del azúcar
en su forma de Cu⁺. Todos los monosacáridos poseen grupo reductor libre. Los
disacáridos también poseen grupos reductores libres dando positivo para la glucosa,
galactosa y la muestra problema (guayaba).

La sacarosa da negativo en esta prueba, pues no posee grupos reductores libres, ya

que se pierden de sus componentes cuando esta es formada, ya que la sacarosa es la
unión por los extremos reductores de la glucosa y la fructosa por lo tanto no podrá
efectuar la reducción del ion cúprico.

La fructosa es capaz de dar positivo, puesto que las condiciones en que se realiza la
prueba en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautameriza (pasando por un
medio enorico) a glucosa (que es capaz de reducir el ion cúprico).

La guayaba en esta prueba se puede determinar la presencia de azucares reductores,

posee un grupo reductor libre como es el caso del monosacárido.

PRUEBA CON 3,5 DNS

En la prueba se determino la presencia de glucosa en los diferentes carbohidratos

estudiados dando positivo en la glucosa, fructosa y la muestra problema (guayaba)
negativo en la sacarosa y en la galactosa puesto que la naturaleza polisacárido del
glucógeno se pone de manifiesto demostrando el aumento de los grupos reductores
durante la hidrolisis, que se manifiestan mediante el reactivo 3,5 DNS que en presencia
de azucares reductores se reduce a acido 3-amino-s-di-nitrosalisilico, produciendo un
color rojizo que se absorbe a 540 mm.

Se determina que la muestra problema (guayaba) tiene gran cantidad de glucosa,

siendo detectada con esta prueba.

ENSAYO DE BARFOED

Los monosacáridos dan positivo como es el caso la fructosa y la galactosa, puede

demostrarse con el reactivo de barfoed ya que es débilmente ácido y solamente puede
ser reducido por monosacáridos. Si se deja hervir por largo tiempo existe la posibilidad
de hidrolasas polisacáridos dando reacciones falsamente positivas. El precipitado del
ácido cúprico es menos denso que en los métodos previos y se recomienda dejar el
tubo hasta que los precipitados sedimenten, el color del óxido cuproso también es
diferente tendiendo a dar un color rojizo ladrillo.

Esta reacción se basa en la velocidad de reacción de reducir el ion Cu⁺² por tanto del
monómero que debe ser más rápida que la del disacárido por ende reaccionan la
glucosa, glucosa y la galactosa dando un color rojo.

Los disacáridos también pueden reaccionar pero en forma más lenta por ello no
reconoce la sacarosa y la muestra problema (guayaba) siendo determinados como no
monosacáridos: la prueba experimental nos indica que no tiene monosacáridos la
muestra problema.

PRUEBA DE DELIWANOFF

La prueba experimental nos da para la fructosa, puesto que los azucares son
distinguidos a través de su función como cetona o aldehído, si el azúcar tiene un grupo
cetona es una cetosa; y si tiene un grupo aldehído es una aldosa esta prueba se basa
en el hecho de que al calentarlos las cetosas son deshidratadas más rápido que las
aldosas.

La sacarosa da negativo a esta prueba ya que la molécula si bien está constituida por
fructosa y glucosa en la unión alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras de la
glucosa y la fructosa.

Experimentalmente nos indica que la guayaba no tiene cetosas ya que da negativo

para esta prueba.

CONCLUSIONES

Los carbohidratos son muy importantes en nuestra dieta diaria pues son las
encargadas de proveernos de energía en nuestras actividades, las obtenemos al
consumir alimentos de origen vegetal. En nuestro cuerpo los encontramos como
glucógeno que esta presenta en la sangre, además encontramos quitina presente en
las uñas, siendo este un polisacárido además tenemos ácido ialuronico encargado de la
lubricación de las articulaciones.

La guayaba es un fruto de alto valor nutricional ya que contiene innumerables

vitaminas A, B y D contiene gran variedad de carbohidratos como glucosa, fructosa
siendo muy nutritiva.
 BIBLIOGRAFÍA

 morrison, J. Bayd, R (1976). Química orgánica. Bioquímica. Estados unidos.

 Ernesto luquet (2010). Bioquímica: carbohidratos sanjuán de pasto.
 Mc murry. John. Química organica. (2008) cengage learning editores, S.A.

TEMAS DE CONSULTA

1. consulte las reacciones (ecuaciones químicas) para cada uno de los ensayos de
carbohidratos realizados.

Ensayo de BARFOED

RCOH+ 2Cu⁺²+2H2O RCOOH+Cu2O +4H⁺

Ensayo de seliwanoff
Ensayo de benedict

Formula química: CUSO4 5H2O + Na2 CO3 + H2O

Prueba con 3,5-DNS

V1 C1=V2 C2

prueba de molish

2. desde el punto de vista agronómico indico la importancia al determinar los

carbohidratos en las distintas etapas del ciclo.

RTA: la importancia desde el punto de vista agronómico es de suma fundamentación

ya que hacen parte del ciclo de Calvin en las plantas también conocida como fase
luminosa y fase oscura en la cual surge el proceso de cloroplastos lo que nos lleva a la
pigmentación y también que nutrientes puede llegar a obtener determinada planta, en
que son ricos sus frutos y que nutrición puede aportar a la alimentación del ser
humano.

BIBLIOGRAFÍA

www.BIOQUIMICA-PRUEBA-DE-SELIWANOFF.HTML
(Manual de experimentación de laboratorio para bioquímica) (Quesada M., Silvia)
(editorial EUNED-san jose C.R.-2007) paguina 90.