1.

- Limpidez

2.- Compatibilidad de pH

3.- Isotonicidad

4.- Apirogenia

5.- Esterilidad
 1.- Limpidez
Ausencia de partículas en suspensión detectables por
métodos ópticos

No existe una solución ópticamente vacía.(metodología)

Posible contaminaci{on en el momento de su uso

Origen de las partículas:

Recipientes o materias primas

Proceso de elaboración y llenado
En el almacenamiento
En la manipulación durante su uso
Naturaleza de las partículas:

Vidrio: fabricación de la ampolla

apertura
degradación
Carbonización: esterilización
precintado
Polvo: fabricación
apertura
Precipitación: inestabilidad física
posible degradación
interacciones
Microorganismos
Otros: caucho, plástico, caolín, fibras de celulosa
(tapones, material de embalaje, tuberías de la
máquina de llenado, filtros)
 ¿Cómo lograr limpidez?:

Filtración clarificante

Las partículas son nocivas?

.- Via s.c. o i.m. se enquistan o digieren

.- Vía i.m.: flebotomías, hinchazón del bazo, hemorragias

renales, agregación plaquetaría, embolia
pulmonar por obstrucción de capilares y
granulomas pulmonares

CASOS GRAVES: partículas con severas aristas o

parículasentre 1 y 10 mm (granulomas y microtrombos)

IMP: administración muy lenta

Métodos de control
a.- Examen visual del 100% de las ampolletas: color y limpidez
(personal cualificado, seleccionado y entrenado)
“Ver montaje de control”
Lim. de observación: 100mm

b.- Equipo óptico (difusión de la luz).

Solo se ven las partículas en suspensión, aquellas que están en movimiento
(No precipitados)

c.- Examen profundo

Se eligen recipientes al azar y se filtran, se puede conocer número y naturaleza
si son superiores a 10 mm

d.-Métodos de dispersión luminosa (Efecto Tyndall o Mov. Browniano)

e.- Caso: soluciones inyectables para infusión

Controles al microscopio y equipos ópticos automatizados

 2.- Compatibilidad de pH

El pH puede determinara la tolerabilidad del preparado,

la estabilidad, crecimiento microbiano y la actividad del
principio activo
Características ácido-base del organismo:

a.- pH de los fluidos del organismo: 7.35-7.4

b.- Capacidad tampón para tolerar preparados con pHs distintos a éstos

Consecuencias de una mala formulación:

a.- Dolor, inflamación, lesión en los tejidos y/o endotelios

b.- Degradación: insulina (Intervalo de estabilidad:2.5-3.5)
vitamina C (5-6)

Solución: Disolución tamponada vs ajuste de pHs

Caso drástico: polvos

Gran volumen: NUNCA BUFFER

 Soluciones reguladoras

Características:

a.- Obtener pH que logre la mayor estabilidad del fármaco

b.-Capacidad tampón

c.-No toxicidad

d.-No incompatibilidad con otros excipientes

e.- Fácilmente metabolizable

f.- No dar complicaciones para el paciente

 Buffers más frecuentemente usados

.- Fosfatos: 5.4-8

.- Citratos: 3-6

.- Acetatos: 3.6-5.6

.- Carbonatos: 9.2-10.7
 Control de pH

.- pHmetro

.- Indicadores coloreados

.- Determinación del poder regulador mediante la medición de la

cantidad de HCl o NaOH necesaria para hacer virar un reactivo
coloreado.

OJO: Medir pH antes y después de filtración y/o esterilización

HAY QUE HACER ESTUDIOS DE CONSERVACIÓN A

DIFERENTES pHs Y EN DISTINTAS CONDICIONES DE
TEMPERATURA

REVISAR INCOMPATIBILIDADES
 3.- Isotonicidad

Solución de NaCl al 0.9%

Propiedades coligativas

Presión osmótica

Disminución de la presión de vapor

Aumento del punto ebulloscópico

Descenso del punto crioscópico

Presión osmótica

.- Membrana semipermeable o selectiva

.- Presión osmótica del líquido corporal= 0.9% de

NaCl
Isotonicidad vs isoosmoticidad

Ejemplo: Ácido bórico al 1.9%p/v

Isosomótica con NaCl al 09.%

Isotónica con fluido lacrimal

No isotónica con sangre

 Ajuste de tonicidad

.- Método basado en la determinación de la concentración

molecular.
(Osmolalidad plasma = 0.281osmol/Kg dvte)

.- Método del descenso crioscópico

(0.9% NaCl supone -0.52 °C)

.- Método de la dilución

.- Método de equivalentes de NaCl (E)

Clorhidrato de tetraciclina al 3.5 %
Agua purificada c.b.p. 5ml

0.9 % = .270 g de NaCl en 30 ml

E=0.14 g de NaCl por 1g de fármaco

Si tengo dextrosa y se que E=0.16, también lo

puedo usar
 Formulación: 175mg de clorhidrato de tetraciclina

(E=0.14), 24.5 mg de cloruro de magnesio (E=0.48) y

44 mg de ácido ascórbico (E=0.18). Calcular en que

volumen de agua ppi será necesario disolver el

contenido de cada vial para que el preparado sea

isotónico
 Control de la isotonicidad

a.- Estudio hemolítico

Se mezcla la disolución a estudiar con sangre

desfibrilada; se centrifuga y se mide el color del
sobrenadante en un colorímetro. (Calibrción con
distintas concentraciones de NaCl)

SE DETECTA REALMENTE COMPATIBILIDAD

b.- Método del hematocrito

Se determina volumen globular de los eritrocitos

 4.- Apirogenia

Pirógenos: Sustancias procedentes del metabolismo o la

destrucción de microorganismos y que son capaces de

provocar hipertermia (escalofríos, disnea, cefalea, mialgia y

aceleración del pulso)

 Origen y naturaleza de los pirógenos

Endogenas:
Hormonas tiroideas
Citoquinas
Adrenalina

Exógenas:
.- Algunos principios activos (atropina, anfotericina B,
vancomicina y azul de metileno)
.- Excipientes: EDTA
.- Partículas de sílice
.- Procedentes de microorganismos (endotoxinas de
la pared de bacterias gram -)
 Características

.- Son lipopolisacaridos

.- Solubles en agua

.- Muy estables a la temperatura. Termorresistentes

.- Pasan a través de la mayoría de los filtros

.- Baja volatilidad

Sensibilidad hombre vs conejo

 ¿Cómo evitar pirógenos?

Procedencia:
Fármaco, excipientes, disolvente (agua) y materiales

Agua:
No almacenarla
Conservación adecuada para evitar microorganismos
Evitar en el diseño los puntos de estancamiento
Limpiar regularmente canalizaciones y depósitos de agua
(antisépticos o vapor sobrecalentado)

Material
Lavar con ácidos y/o bases
Enjuagar con agua libre de pirógenos
Calentamiento a t > 200 °C y largos tiempos
¿Cómo eliminar pirógenos?
Agentes oxidantes: H2O2 o hipoclorito de sodio

Filtración: LPS (144 Da)

Filtros de 0.2 a 0.002 mm
(LPMNE 10000 ó 100000)
Cuidado: presencia de tensoactivos

Calentamiento en medio ácido o alcalino:

HCl 0.1N durante 30min a 100 °C (hidrólisis de LPS)
NaOH 0.1N en etanol al 95% o DMS al 80%
(saponificación de ácidos grasos)

Calor seco:
T > 250°C por media hora
Cuidado: estabilidad
 Control de pirógenos

A.- Medida del aumento de la temperatura en conejos tras

admon. IV

1.- Elegir conejos de 1.5 kg controlados por un semana y que muestren sensibilidad

2.- Todo el material a usar debe de ser esterilizado

3.- Las condiciones ambientales del animal se mantienen desde 4h antes de iniciar

4.- Se inyectan los preparados en la vena marginal de la oreja

5.- Los grupos a estudiar son formados por tres animales

6.-Se toma la temperatura cada 30 min

7.- Se repiten tres o cuatro veces

 B.- Coagulación del lisado de amebocitos de
Limulus poliphenus (LAL) por las endotoxinas

1.- Se basa en que una proenzima se convierte en enzima en presencia de endotoxinas

2.- Es un estudio in vitro

3.- Solo sirve para endotoxinas bacterianas

4.- La reacción es positiva si hay un aumento de viscosidad

5.- Puede ser cuantitativo por colorimetría

Manejo aséptico
 1.- Esterilización por calor

La sensibilidad de los m.o. al tratamiento térmico depende de:

Vs tiempo

.- pH
.- Humedad
 Ecuación que rige el proceso:

(Nt/No)=e-Kt
K=constante de destrucción dp de la temperatura
t=(2.303/K)log(N0/Nt)
D: Característica de esterilización de cada especie microbiana
.- Medida de su resistencia a la destrucción térmica
.- Tiempo de reducción decimal
.- Tiempo necesario para destruir el 90% de las esporas o
células vegetativas de un m.o.

A mayor sea D mayor la resistencia del germen

Z: Incremento de la temperatura necesario para disminuir
el tiempo de reducción decimal a la décima parte

A mayor Z mayor termoresistividad

Se usa como referencia Z=10 °C, Bacillus

stearothermophillus

F= D (log N0-logNt)

F: Letalidad total de un proceso, indica la eficacia de un

proceso sobre un germen determinado

Tiempo en minutos, a cierta temperatura, necesario

para destruir un número determinado de m.o. en espora.
Se quiere esterilizar un lote de inyectables del que

se conoce que su contaminación inicial es de 100

colonias por recipiente. Si la contaminación final

debe de ser 1e-6 colonias, cual será el tiempo

mínimo de esterilización en autoclave a 121 °C?

D (121 °C)= 1.5 min

 180 °C - 30min
170 °C -1h
160 °C -2h

Oxidación de componentes celulares

 Coagulación de proteínas

Calor húmedo vs calor seco

120 °C 170 °C
 Tiempo de seguridad
Tiempo de destrucción
2.- Esterilización química
 400-1000 mg/L
35-55 °C
40-60%
4-12 horas

Reacciona con moléculas proteicas (grupos sulfidrilo, hidroxilo y amino) y así

bloquea el metabolismo celular normal
 3.- Esterilización por radiaciones

Tipo electromagnético

(Tipo corpuscular)

Ionizan y excitan las moléculas, se forman radicales libres y se dan

efectos letales en los microorganismos
 Ventajas Inconvenientes

1. Gran eficacia germicida a 1. Elevado coste

temperatura ambiente
2.- Efectos secundarios en
2.- Posibilidad de aplicarla a el producto (c.o.l)
procesos continuos
Planta de Irradiación del Centro
Atómico Ezeiza - C.N.E.A.
4.- Filtración esterilizante
5.- Manejo aséptico

A.- Calidad del aire

Características del aire acondicionado
FEUM, 1993
Toma de muestra para los ensayos de esterilidad

Número de envases por lote Número mínimo de

muestras a examinar
Inferior a 100 unidades 10% o 4 unidades
(mayor)
Entre 100 y 500 10 envases

Mayor a 500 2% o 20 unidades

(menor)
 Cantidad de muestra a ensayar

Líquidos Sólidos
Volumen envase Toma de Cantidad por Toma de
muestra envase muestra
<1 mL Entero <50 mg Entero

1-4 mL 50% 50-200 mg 50%

4-20 mL 2 mL >200mg 100 mg
>20 mL 10%
 Agua Agua para
Agua potable
purificada inyectables
Límite de Límite de Límite de acción:
acción: 500 ufc acción: 100 ufc 10 ufc por 100
por ml por ml ml.
Recuento total
Límite de Límite de Límite de alerta:
alerta: 300 ufc alerta: 50 ufc Cualquier
por ml por ml resultado positivo
Bacterias
coliformes igual o menor Ausencia
NMP en 100 a3 en 100ml
ml
Escherichia ausencia Ausencia
coli: en 100 ml en 100ml

Pseudomonas ausencia Ausencia

aeruginosa: en 100 ml. en 100ml
Vehículos no acuosos
1.- Disoluciones
2.- Suspensiones y emulsiones
4.- Polvos
 Sistemas críticos: agua, aire, aire comprimido. Proceso
de purificación. Validación

Se validan procesos. Los sistemas y equipos se califican

Su finalidad: Asegurar la calidad de los resultados y los objetivos propuestos

Su base: estudio, conocimiento y aplicación de las normas nacionales e
internacionales de las GMPs

Sistemas críticos
Diccionario: Sistemas que si dejan de funcionar algo crítico ocurre

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-059-SSA1-1993, BUENAS PRACTICAS DE

FABRICACION PARA ESTABLECIMIENTOS DE LA INDUSTRIA QUIMICO
FARMACEUTICA DEDICADOS A LA FABRICACION DE MEDICAMENTOS. -
Sistemas críticos. Son aquellos que tienen impacto directo en los procesos y/o
productos.
9. CONTROL DE LA FABRICACION
9.5. CONTROL DE PRODUCCION
9.5.3. CONTROL DE LA PRODUCCION DE FORMAS FARMACEUTICAS ESTERILES
Título

9.5.3.1 La producción de formas farmacéuticas estériles debe realizarse en áreas

limpias a las que el personal, el producto y/o los materiales ingresen o salgan
cumpliendo con los requisitos que establezca el PNO correspondiente a fin de evitar
contaminación.

9.5.3.2 las áreas limpias deben mantenerse con el grado de limpieza que corresponda a
su clasificación (ver anexo 1), recibiendo aire que haya pasado a través de filtros con el
grado de eficiencia establecido en el diseño y construcción.

9.5.3.3 las diversas operaciones de preparación de materiales y productos, llenado y

esterilización, deben realizarse en zonas separadas dentro del área limpia.

9.5.3.4 para productos que se procesen por técnica de llenado aséptico debe cumplirse
con los parámetros que se establezcan en un protocolo de prueba de simulación de
proceso.

9.5.3.5 los procesos de esterilizacion deben estar validados.

9.5.3.6 En las áreas limpias debe estar presente el mínimo de personas necesarias;
esto es especialmente importante durante los procesos asépticos, en cuyo caso y en la
medida de lo posible, deben inspeccionarse y controlarse desde el exterior.
9.5.3.7 el personal empleado en estas áreas (incluyendo el de limpieza y el de
mantenimiento) debe recibir capacitación en: conceptos básicos de microbiología,
técnicas de vestido, técnicas asépticas, reglas de higiene y otros temas específicos
para productos estériles.

9.5.3.8 el material y diseño de la ropa debe ser confortable y generar el mínimo de

partículas. La utilizada en el área aséptica debe ser previamente esterilizada.

9.5.3.9 el sistema de aire debe controlarse de tal manera que cumpla con los
parámetros de su diseño (flujo, velocidad, diferenciales de presión, cantidad de
partículas, humedad, temperatura, biocarga y ruido).

9.5.3.10 se debe contar con indicadores y/o alarmas para detectar oportunamente fallas
en el sistema de aire, para tomar las medidas necesarias.

9.5.3.11 el equipo, los sistemas de aire, agua y esterilización, deben ser objeto de
mantenimiento y calificación de manera periódica y documentada.

9.5.3.12 deben tomarse en cuenta los resultados del control ambiental durante las
operaciones asépticas, para dictaminar un lote, como complemento al resultado
analítico final.
9.5.3.13 deben existir PNO's que establezcan tiempo limite entre:
- la esterilización y la utilización de los materiales,
- la preparación y esterilización/llenado del producto,
- la recolección de agua grado inyectable y su uso,
- el inicio y termino del llenado.
-Tiempo de permanencia del personal dentro de las áreas involucradas.

9.5.3.14 después del llenado, los productos parenterales deben inspeccionarse

para la detección de partículas y otros defectos de acuerdo con un PNO.

9.5.3.15 los operarios que realicen la inspección para el control de partículas de

productos estériles deben someterse a controles periódicos de agudeza visual.

9.5.3.16 se debe realizar la prueba de hermeticidad a los productos parenterales

de acuerdo con un PNO