1.

¿Cuál es el propósito de realizar una cromatografía y cuál es su

importancia?

El realizar una cromatografía permite separar las sustancias presentes en una

mezcla homogénea, basándose en propiedades físicas como la densidad, el punto
de ebullición, la solubilidad, el estado de agregación, polaridad, etc. Su importancia
radica en el hecho de que tras realizar una técnica cromatográfica (y analizar el
cromatograma obtenido), se puede obtener información para identificar qué
sustancias componen al analito y en qué concentración, así como la purificación de
diversos compuestos.

2. ¿Qué compuestos suelen ser empleados como eluyentes en la

cromatografía de partición?

Aquellos que sean de grado HPLC, es decir, que tengan un elevado grado de
pureza, como…

3. ¿Qué características deber poseer una fase estacionaria?

Ser una matriz porosa polimérica, especies enlazadas a superficies sólidas, tener
estructuras poliméricas rígidas, tener una superficie específica, el tamaño del poro
no debe variar en las condiciones cromatográficas, que sea un sólido finamente
dividido o una película líquida adherida a él, grado de pureza sumamente alto.

4. ¿Qué es el tiempo de retención?

Se refiere al tiempo que el analito permanece dentro de la columna

cromatográfica, siendo medido desde el momento de la introducción de la mezcla
hasta el momento del punto máximo de la señal del pico.

5. ¿A qué se refiere el término “elución empleando gradiente”?

Hay dos métodos para la utilización de los disolventes al llevar a cabo una
separación cromatográfica, siendo uno de ellos la “elución empleando gradiente”,
donde se pueden utilizar una mezcla de 2,3 o 4 disolventes, y la eficiencia con
respecto al tiempo se ve mejorada, se puede realizar a baja o alta presión.

Es el proceso mediante el cual se cambia la composición de la FM. Es normal

realizar un gradiente de composición del solvente a lo largo de la cromatografía
para mejorar la eficiencia y acortar la duración del proceso.

6. ¿Cuándo es necesario emplear gel de sílice de fase reversa?

Cuando se quiere efectuar un procedimiento de elución en cromatografía liquida

en el que se desee que la fase móvil sea significativamente más polar que la
estacionaria.

7. ¿Cuál es la principal diferencia entre la cromatografía líquido–líquido y

líquido–sólido?
En la cromatografía líquido-sólido, la FE es un sólido en el que los componentes de la muestra son
adsorbidos y la FM puede ser un líquido (cromatografía líquido-sólido) o un gas (cromatografía
gas-sólido); los componentes se distribuyen entre dos fases a través de la combinación de los
procesos de adsorción y desorción. Mientras que en la cromatografía líquido-líquido, la FE es un
líquido soportado en un sólido inerte, de nuevo, la FM puede ser un líquido (cromatografía de
partición líquido-líquido) o un gas (cromatografía de partición gas-líquido).

8. En HPLC, ¿Qué esperarías observar en un cromatograma al introducir la

muestra a una velocidad demasiado baja?

Separación de las sustancias que conformen la muestra, pero los picos tendrían
“colas”, se verían anchos.

p
9. ¿Qué técnica cromatográfica se caracteriza por separar muestras con
características
termosensibles, con masas elevadas y con gran polaridad?

La Electroforésis.

10. ¿En qué radica la ventaja de emplear un cromatógrafo de gases acoplado a un

espectrómetro de masas?

En que aparte de tener los compuestos separados, al estar acoplado, de acuerdo a

la relación m/z que tengan los fragmentos, se podrá obtener un espectro de masas
que dará información para conocer la estructura molecular de los compuestos.

11. ¿Qué tipo de mezclas se separan por cromatografía gas–sólido?

Mezclas que no se retienen en columnas de gas-líquido, tales como los componentes del aire,
sulfuro de hidrógeno, disulfuro de carbono, óxidos de nitrógeno, monóxido de carbono, dióxido de
carbono y los gases nobles.

12. ¿Qué características poseen los geles de acrilamida y agarosa para ser
empleados como soportes electroforéticos?
 Son geles porosos, formados por polímeros que constituyen una malla,
matriz o red tridimensional a través de la cual deben avanzar las moléculas
de la muestra.
 No reaccionan con las moléculas a analizar (son materiales inertes), no
pueden estar cargadas y no deben absorber las moléculas de la muestra.
 Evitan perturbaciones mecánicas y corrientes de convección.
 Separan, identifican y purifican fragmentos de dna o rna.
 Se pueden utilizar diferentes concentraciones de ellas.
 Tienen que permitir el paso de moléculas.