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LISTERIOSIS

Dra. Cecilia Casabonne


Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas
UNR
2019
Género Listeria

Listeria sensu strictu Listeria sensu lato

• L. monocytogenes • 11 especies
• L. ivanovii
• L. innocua
• L. seeligeri
• L. welshimeri
• L. grayi

Grupo de 6 especies con Incluye 3 grupos


características fenotípicas comunes: No incluyen patógenos
capacidad para crecer a bajas Ta. y
motilidad flagelar
Incluye el patógeno Listeria
monocytogenes
Listeria sensu stricto

 Bacilos Gram positivos


 Crecen a bajas temperaturas (4ºC)
 Móviles a menos de 30ºC
 Catalasa positivos
 No reducen nitratos a nitritos
 Voges-Proskauer positivo: producción de la acetoína
por fermentación de la glucosa- vía butanediólica
Fermentan D- arabitol, α -metil D- glucósido, celobiosa,
D- fructosa, D- manosa, N- acetilglucosamina , maltosa, y
lactosa
No fermentan inositol, L- arabinosa y D - manitol
Listeria monocytogenes: características

Bacilo corto Gram positivo (0,5-2 μm)


No esporulado
Anaerobio facultativo
Catalasa y peroxidasa: positivo
Posee flagelos perítricos
Móvil entre 10-25 ºC
“Tumbling motility” (movilidad tambaleante) a 20-25ºC
https://www.youtube.com/watch?v=fjD_ruKmSfA
Listeria monocytogenes: serotipos

13 serotipos diferentes de L. monocytogenes en


base a su Ag O y Ag H:

1/2a, 1/2b, 1/2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4ab, 4b, 4c, 4d, 4e
y7

1/2a, 1/2b y 4b Listeriosis humana


Condiciones de crecimiento de L. monocytogenes

Temperatura de crecimiento: Ta. óptima: 37ºC, Ta. mínima:


1-3ºC y Ta. máxima: 45ºC
Tiempo de generación en leche: a 4ºC: 1,2-1,7 días / a 8ºC:
8,7-14,6 h
pH: valor mínimo: 4,4 – 4,6 / óptimo: 6-8 / máximo: 9
Halotolerante: sobrevive a conc. > 25% de NaCl, crecimiento
a conc. 10-20% de NaCl
Resistencia condiciones de estrés: calor, desecado y
congelado, acidez y frío  adaptación mediante la producción
de biofilm
Película superficial o biofilm

Adherencia a Resistencia a
superficies y agentes
crecen químicos L.
formando Colonias
y físicos, monocytogenes
colonias protegidas
pudiendo puede sobrevivir
protegidas por por biofilm
una capa sobrevivir por como foco
resultan de
formada por largos continuo de
difícil acceso
polisacáridos periodos con contaminación
para limpieza
extracelulares aportes de alimentos
denominada mínimos de
biofilm nutrientes
Hábitat de L. monocytogenes

Microorganismo ubicuo
 Ampliamente distribuido en ambientes naturales: suelo, agua fresca
y salada, aguas residuales, vegetación en descomposición, pastos y
forrejes

 En plantas de producción de alimentos: suelo, paredes, techos, aguas


estancadas, equipos de procesamiento, cintas transportadoras,
cámaras de frío y túneles de congelación, etc.

 En heces de portadores asintomáticos:


- Animales: ganado, cerdos, ovejas, patos, pavos, pollos
- Hombre: 4,8% trabajadores de mataderos, 1,2% hospitalizados,
1% pacientes con diarrea, 26% familiares de enfermos
Alimentos involucrados en ETA por Listeria

1. Carne: pollo crudo y cocido, salchichas


2. Leche y derivados lácteos. Helados. La pasteurización es el
tratamiento adecuado pero podría ocurrir contaminación posterior
3. Pescado fresco, congelado y ahumado: la presencia y
supervivencia de L. monocytogenes en pescado fresco y congelado
es poco probable, en el pescado ahumado es variable dependiendo
del método de ahumado empleado (en frío o caliente)
4. Frutas y verduras: 10-20% de vegetales listos para su consumo:
semillas germinadas (brotes), lechugas, rábanos, tomates, cebollas,
pepinos, coliflores y setas cultivadas, productos ecológicos
abonados con estiércol
LISTERIOSIS
Enfermedad infrecuente, de elevada tasa de mortalidad (20-30%)

Población de riesgo de contraer Listeriosis


Microorg. Oportunista  afecta a inmunodeprimidos (diabéticos,
alcohólicos, SIDA, trasplantados, enfermos crónicos de diversas
afecciones), mujeres embarazadas, recién nacidos y adultos mayores

Transmisión de la enfermedad
(i). Vertical: madre-hijo
(ii). Zoonótico: contacto con animales enfermos
(iii). Nosocomial: adquisición hospitalaria
(iv). Alimentaria: 99% de casos de listeriosis humana
La mayoría de infecciones ocurre por
ingesta de alimentos contaminados y posterior
acceso del microorganismo a la circulación por
penetración intestinal

ENFERMEDAD NEONATAL ENFERMEDAD DEL ADULTO


Temprana: transplacentaria,
Síntomas de resfrío y
in utero (granulomatosus
enfermedad gastrointestinal
infantiseptica)
Causa: abscesos y granulomas Bacteriemia con escalofríos
y aborto y fiebre
Tardía: al nacer o días
Inmunosuprimidos:
después: meningitis o
meningitis
meningoencefalitis con sepsis
en 2-3 semanas
Detección de Listeria monocytogenes

Normativa internacional

Nivel de L. monocytogenes tolerado en los países es variable:

En EE.UU.: 0 UFC/25 g
En algunos países de la Comunidad Europea: hasta 100 UFC/g
Normativa Argentina
El CAA exige:

- salazones cocidas (art. 286 bis) y crudas (art. 286 tris)


- pernil de cerdo (art. 293 bis)
- chacinados (art. 302)
- quesos de mediana y alta humedad (art. 605)

ausencia de Listeria monocytogenes en 25 g de muestra

ISO 11290-1:1996, Amd 2004;


Carnes
Metodología BAM-FDA:2011; USDA-FSIS:2009
de ensayo
Lácteos FIL 143:1990
Estriado en placa
Enriquecimiento

-Agar OXM (agar oxford


modificado)
-Agar HL (agar sangre de
- Caldo UVM o University caballo/oveja)
of Vermont Medium -TSA-YE (agar tripteina
(USDA) soja + extracto de
-Caldo Fraser o FB (ISO) levadura)
-TSA-SBA (agar
-B-LEB (basal enrichment tripteina soja + 5% de
listeria broth) (FDA) sangre ovina)
-Agar Listeria según
Ottaviani y Agosti (ISO)
-Agar Palcam (ISO)
-Cromogénicos: agar
ALOA, BCM (FDA)
Características de los medios de cultivo para Listeria

ATB (para inhibir la flora


Capaces de detectar 1 acompañante): acido
UFC/25 g de muestra nalidíxico, acrilflavina y
cicloheximida

Esculina: evidencia la
capacidad de hidrólisis de
este glúsido por Listeria Incubación: 37°C / 24-48 h
mediante coloración negra
en el medio
Todas las especies de Listeria
hidrolizan la esculina
El producto de la hidrólisis de la
esculina, la esculetina, reacciona con
iones férricos hasta producir un
complejo de marrón a negro

Medio Oxford modificado Medio Palcam


COMPASS Listeria Agar
Basado en la detección simultánea de 2 actividades
enzimáticas: la β-glucosidasa, común en todas las
cepas de Listeria, y de la fosfatidil-inositol
fosfolipasa C (PI-PLC), que interviene en el proceso
de virulencia de L. monocytogenes.
β-glucosidasa = colonia azul-verdosa (sustrato
cromógeno)
fosfatidilinositol PI-PLC = halo transparente.

Confirm’ L.mono Agar:


Confirmación de L.
monocytogenes
• Acidificación de la
ramnosa: coloración amarilla
• Fosfolipasa C (PI-PLC): halo
opaco
L. monocytogenes: marcadores fenotípicos mínimos

Cocobacilos o bacilos
Movilidad positiva
Gram positivos

B- hemólisis positiva Catalasa Positiva

Este microorganismo presenta como particularidad una motilidad


tipo “tumbling” a los 20 - 25ºC pero es inmóvil a los 35ºC
Prueba de CAMP

Test rápido

API System para Listeria


Identificación definitiva

Una vez identificada como Listeria


monocytogenes enviar al Centro de Referencia
para:
- serotipifación: PCR, aglutinación (Método de
Referencia)
- subtipificación molecular (PFGE)
Métodos comerciales
Brote de L. monocytogenes entre las personas que vivían en el área
de Wiston-Salem (Carolina del Norte - año 2000)

Brote de
Listeriosis (2000)

Elaboración de 13 pacientes (11


queso comercial embarazadas)
manufacturado de Resultado:
estilo mexicano -5 partos con RN
Consumo del
muertos
producto
contaminado con L. -3 muertes
monocytogenes prematuras
- 3 RN infectados
Leche cruda o
pasteurizada
adulterada con
leche cruda
Brote de intoxicación alimentaria causado por L. monocytogenes en
Andalucía. Agencia Española Seguridad Alimentaria y Nutrición
05/08/2019
- Se declaró un brote de ETA en Sevilla
- Producto alertado: Carne mechada. Marca “La Mechá”,
Empresa fabricante: MAGRUDIS, SL
- Se considera afectado todo el producto fabricado desde
el mayo/19
- El producto se ha retirado de la venta y consumo
- Se tomaron muestras para su análisis

14/08/19
El laboratorio oficial de Sevilla informó del resultado positivo a L.
monocytogenes asociado a carne mechada de marca “La Mechá”

-193 afectados
-alrededor de 550 casos sospechosos
una anciana fallecida
-108 enfermos ingresados en hospitales:
25 en centros privados y 28 embarazadas
-1 aborto relacionado
Brote de intoxicación alimentaria causado por L. monocytogenes en
Andalucía. Agencia Española Seguridad alimentaria y Nutrición

AMPLIACIÓN DE LA ALERTA ALIMENTARIA A OTROS PRODUCTOS


ELABORADOS POR LA EMPRESA DE MARCA “LA MECHÁ”.
21/08/19
- chicharrón andaluz
- lomo al jerez
- lomo al pimentón
-lomo casero al pimentón
23/08/19
•Crema de carne mechada
•Manteca colorá
•Pringá estilo casero
•Zurrapa de hígado Se desconoce el foco de la contaminación de
•Zurrapa lomo blanca los productos, pero se ha detectado Listeria
•Zurrapa lomo roja en una de las mechadoras

Medida de precaución. Las personas que tengan en su domicilio algún envase


de carne mechada de la marca “La Mechá” se abstengan de consumirlo y
que, en caso de haberlo consumido y si presentan alguna sintomatología,
acudan a un centro sanitario.

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