Centro de ciencias básicas.

Departamento de Química.

Biología molecular.

Práctica 1: “Uso de material de laboratorio en biología molecular”.

Nombre: Fernanda Gabriela Esparza Salazar.

Lic. Químico Farmacéutico Biólogo. 6° semestre.

Nombre de la profesora: MC. Lucía Isabel Chávez Ortiz

Aguascalientes, Ags. 24 de febrero de 2020.

Manual de usuario.
Centrifuga.

Ilustración 1: Máquina de centrifuga.

Es una máquina que pone en rotación una muestra para –por fuerza centrífuga– acelerar la
decantación o la sedimentación de sus componentes o fases (generalmente una sólida y una
líquida), según su densidad.
Tiene dos pantallas, la de la izquierda es para la velocidad, el de la derecha es el tiempo.
Hay dos focos, el de abajo me da la velocidad en Hertz y el de arriba revoluciones por minuto. A
la derecha hay una leyenda que dice que todo se debe multiplicar por mil.
Para aumentar o disminuir la velocidad hay dos flechas, una hacia arriba y otra hacia abajo. La
que son dos flechitas es para cambiar de revolución por minuto a Hertz. A la derecha está para
el tiempo, igual, uno para subir y otro para bajar.
Abajo hay 4 botones: arriba a la derecha está el botón para abrir la tapa exterior del equipo. La
segunda tapa siempre debe estar colocada al momento de usar la centrifuga. Para sacarla hay
que oprimir el botón rojo para liberar el seguro y retirar la tapa, pero exclusivamente para
retirarla. Hay que balancear los tubos al momento de iniciar la centrifuga. El botón de abajo a la
izquierda, que es una sola flecha, es para iniciar el programa. Otro botón está abajo a la
derecha que es de color rojo, este es como el freno de emergencia, sólo se usará cuando se
crea que el equipo puede sufrir algún daño. El equipo “pita” cuando ya terminó de realizar la
centrifuga.
Hay una función que se llama golpe de centrifuga o “spin off” que es una centrifugación rápida.
Es para decantar el líquido que pueda quedar en las paredes del tubo. La velocidad se controla
dejando presionado el botón, entre más tiempo se deje presionado más rápido será la velocidad
de centrifugación; en cuanto se suelte el botón la velocidad disminuirá.

Micropipetas.
 Ilustración 2:Micropipeta azul (100-1000 µL), amarilla (10-100 µL), rosa (0.5-10 µL o 2-20 µL)

Son empleadas para succionar y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su

manejo en las distintas técnicas analíticas.
Cada una tiene un rango de volumen, el cual no debe excederse. Pueden ser de volumen
variable (rango) o de volumen estable (determinado). La del rango se puede elegir el volumen
entre los extremos permisibles mientras que la de volumen determinado no se puede mover ya
que se podría dañar el material. Por lo que es importante saber qué cantidad es la que se
quiere medir para poder seleccionar adecuadamente la micropipeta. También, de acuerdo con
la micropipeta que se va a utilizar, es la punta que se le tiene que poner a cada una.
Tienen dos topes: el primero que es para absorber el líquido, de preferencia presionar hasta
llegar al primer tope fuera del líquido; otro punto para tener en cuenta es que no debe tocar la
punta con el fondo del vaso, tubo, etc., ya que evita que suba correctamente el líquido y así
puede propiciar una mala medición. Se suelta despacio para absorber el líquido, esto para no
generar burbujas de aire. El segundo tope es para depositar el líquido donde sea necesario.

Cámara de electroforesis.

Ilustración 3: Cámara de electroforesis.

Es un dispositivo que permite la generación de un campo eléctrico alrededor de un gel donde se
depositan las muestras.
Es una cámara que contiene geles de agarosa. Para su preparación, se pesa la cantidad
adecuada, (0.8-2%) y se mezcla con una solución buffer (nunca en agua), esto se lleva a
calentar, puede ser en parrilla o microondas hasta que queda totalmente homogéneo
(transparente) y pueda ser colocado en la cuba.
Se colocan los topes que son los que detendrán la agarosa. Hay que impedir que se formen
burbujas de aire y una vez que se agrega el gel se ponen los “peines” que son los que formarán
los pozos. Se deja solidificar, entre más frío el ambiente más rápido será este proceso. Una vez
solidificado se vuelve agregar el buffer para cubrir la cuba y evitar que el gel se deshidrate. El
peine se retira hasta que se vayan a agregar las muestras, se debe retirar con cuidado para
evitar que los pozos colapsen. Todo este proceso se realiza dentro de la cámara. Teniendo todo
listo se colocan los electrodos y se conectan a una fuente de poder; rojo (polo positivo), negro
(polo negativo). Se pueden programar los Volts que se desea en la electroforesis. Los amperes
no deberán sobrepasar la mitad del voltaje, estos son la resistencia al paso de la corriente. El
voltaje siempre deberá mantenerse lo más estable posible.