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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
El reactivo de Fehling consta de dos disoluciones que se mezclan a partes
iguales en el momento de su utilización. La solución I esta formada por SO4Cu*
5H2O al 7% en agua y la solución II por tartrato sódico-potásico al 35% en
NaOH al 10% en agua. En un tubo se disuelven 500 mg de la sustancia a
ensayar en 5 ml de agua. Se procede de igual manera con otros tubos que
contengan azúcares reductores y no reductores conocidos. A continuación se
añaden a todos los tubos 5 ml del reactivo de Fehling. Finalmente se someten
a ebullición en baño de agua durante 5 minutos. La reacción debe considerarse
positiva si se forma un precipitado rojo de óxido cuproso.
https://acasti.webs.ull.es/docencia/practicas/5.pdf
LANE – EYNON
Este método se basa en la determinación del volumen de una disolución de la
muestra, que se requiere para reducir completamente un volumen conocido del
reactivo alcalino de cobre) el punto final se determina por el uso de un
indicador interno, azul de metileno, el cual es reducido a blanco de metileno por
un exceso de azúcar reductor)
Este método se puede aplicar en productos como leche evaporada y
condensada, productos lácteos, (jarabes, mieles, mermeladas, néctares y
(jugos,dulces y moles)-8eactantes, procedimiento)
http://www.academia.edu/12597452/METODOS_PARA_LA_DETERMINACION
_DE_CARBOHIDRATOS
MUNSON Y WALKER
Este método corresponde a la cantidad de cobre reducido en presencia de
azúcares reductores, en donde el peso de los miligramos de Cu 2O corresponde
a los miligramos de azúcares analizados "por medio de las tablas de Munson y
Walker que aparecen en el Cu 2O.6ara el resultado de la concentración final hay
que considerar las diluciones) AOAC.
*Para el resultado de la concentración final hay que considerarlas diluciones*
NaOH + Cu** + AZUCAR REDUCTOR Cu+ + Azucar (Cu2O) OXIDADO
La determinación del Cu2O puede ser gravimétrica, pero es generalmente (por
titular el óxido cuproso.
http://www.academia.edu/12597452/METODOS_PARA_LA_DETERMINACION
_DE_CARBOHIDRATOS
SUMOGY -NELSON
Azúcar reductor + Cu++ + Cu+ + AZUCAR REDUCTO
RACTIVO SOMOGY
-NaCO3 – Carbonato de sodio
-NaHCO3 -Bicarbonato de sodio
-KaNaCHO –Tartrato de sodio potasio 4H4O6 –Tartrato de sodio potasio
Reactivo de Nelson
- (NH 4) 6Mo 7 O24 - Molibdato de amonio
- Na2HAsO 7.H 2O - Arsenato de Sodio – H2SO4 -Ácido Sulfúrico
- CuSO4 . 5H 2O -Sulfato de cobre
http://www.academia.edu/12597452/METODOS_PARA_LA_DETERMINACI
ON_DE_CARBOHIDRATOS
CARBOHIDRATOS TOTALES.
Método de fenol-sulfúrico
Los carbohidratos serán destruidos por calor y por ácido, son particularmente
sensible a ácidos fuertes y altas temperaturas. Bajo estas condiciones una
serie de reacciones complejas toman lugar empezando con una deshidratación
simples, si se continúa el calentamiento y la catálisis ácida se producen varios
derivados del furano que condensan consigo mismos y con otros subproductos
para producir compuestos obscuros o compuestos coloridos producto de la
condensación de compuestos fenólicos y con heterociclos con el nitrógeno
como heteroátomo. La condensación más común es con fenol. Este método es
fácil, eficaz y rápido. Todos los azúcares como oligosacáridos y polisacáridos
pueden ser determinados, recordando que estos bajo hidrólisis ácida producen
monosacáridos. La forma en que procede la reacción no es estequiometrica y
depende de la estructura del azúcar, por lo tanto se realiza una curva patrón.
(Nielsen, 1998)
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/FUNDAMENTOSYTECNICASDEA
NALISISDEALIMENTOS_12286.pdf
REACCION RESORCINOL/CETONA
PRUEBA DE SELIWANOFF
Esta prueba es específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan más
rápidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el
resorcinol produciendo un complejo coloreado. Si el tiempo de ebullición se
prolonga, puede dar también positivo para otros azúcares.
Reacción de seliwanoff
La prueba de Seliwanoff es una prueba química que se usa para distinguir
entre aldosas y cetosas. Los azúcares son distinguidos a través de su función
como cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa,
y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está basada en el
hecho de que, al calentar las cetosas son deshidratadas más rápido que las
aldosas.(paul ipiales)
Los carbohidratos se clasifican como cetosas o aldosas. Vale decir, que las
cetosas en el carbono 2 tienen una función cetona, que en presencia de un
ácido fuerte producen rápidamente derivados furfúricos que reaccionan con un
difenol llamado resorcina que está contenido en el reactivo de Seliwanoff. La
sacarosa (un disacárido formado por glucosa y fructosa) y la inulina (un
polisacárido de la fructosa) dan positiva la reacción, ya que el HCl del reactivo
provoca en caliente la hidrólisis del compuesto liberando fructosa (responsable
de la reacción positiva).
http://bioquimicamarzo-julio.blogspot.com.co/2014/06/prueba-de-seliwanoff.html
REACCION CARBAZOL / BORATO / ACIDO SULFURICO
CARBAZOL
Útil para cuantificar ácido galacturonico, glucuronico y otros. Basado en la
reacción del carbazol, con el producto de la deshidratación ácida de los ácidos
urónicos, para formar complejos coloridos. La presencia de tetraborato
incrementa la intensidad del color producido, disminuyendo la interferencia del
color producido por otros azúcares.
Puede presentar interferencias por iones cloruro y diversas sustancias
orgánicas que dan un color inespecífico.
REACTIVOS
Tetraborato de sodio 0.025M en ácido sulfúrico concentrado. Carbazol 0.125%
en etanol absoluto (almacenar 4ºC)
PROCEDIMIENTO
Colocar en un tubo de ensayo: 5 mL de la solución de tetraborato de sodio en
H2SO4 conc. 1 mL de la solución problema Mezclar y calentar en baño de
agua hirviente por 10 min. Añadir 0.2 mL de carbazol, agitar y dejar en el baño
durante 5 min más. Dejar enfriar y leer en el espectrofotómetro a 530 nm.
Ajustar previamente con un blanco. La concentración se calcula a partir de una
curva patrón realizada de la misma forma con ácido galacturónico en
concentraciones de 4 a 40 ug/mL.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/PROCEDIMIENTOS13-I_20566.pdf
BORATO
Los boratos se caracterizan por poseer en su estructura cristalina un número
variable de moléculas de agua de hidratación. La calcinación de boratos es una
reacción sólido-gas, en la que se elimina esta agua de hidratación según la
ecuación: Borato.nH2O (s) → Borato.(n - n') H2O (s) + n'H2O (g) con n' < n La
anhidración corresponde al caso límite para el cual el número de moléculas de
agua n' = n (deshidratación total).
La temperatura de descomposición del borato se define como "la temperatura a
la cual la presión de disociación iguala a la presión atmosférica". Con la
suposición de operar a presiones cercanas a 1 atmósfera, se puede considerar
unitaria la actividad del sólido puro y la actividad del agua se puede reemplazar
por su presión parcial: aH2O = pH2O = Pd (presión de disociación).
De esta forma se tiene un método "directo" para la determinación de la
constante de equilibrio Kp. Esto es, midiendo el incremento en la presión que
ocurre por el paso del componente volátil (agua) a la fase vapor, cuando se
aumenta lenta y progresivamente la temperatura de la muestra colocada en un
recipiente cerrado y al vacío. La limitación del método radica en la
condensación del agua dentro del instrumento de medición, por encontrarse
éste último a temperatura ambiente.
En el presente trabajo se describe la construcción de un equipo especialmente
diseñado para medir presiones de disociación de boratos a distintas
temperaturas y se discuten los problemas provocados por la condensación del
agua en las zonas frías del equipo. Se presentan las curvas de presión
empleadas para su calibración.2O (s) → Borato.(n - n') H2O (s) + n'H2O (g) con
n' < n La anhidración corresponde al caso límite para el cual el número de
moléculas de agua n' = n (deshidratación total).La temperatura de
descomposición del borato se define como "la temperatura a la cual la presión
de disociación iguala a la presión atmosférica".
VALDEZ, S ; REDONDO, A ; KWOK ,L ; VILLAGRÁN,P ; FLORES, H,
2008, Construcción de un equipo para medir la descomposición
ACIDO SULFURICO
DIFENILAMINA (FRUCTOSA)