BD CDC ANAEROBE AGAR + 5% SHEEP BLOOD

ARNALDO SERNA DE LA HOZ

MICROBILOGIA GENERAL

HILDA GARCIA

UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR

FACULTAD CIENCIAS BÁSICAS Y BIOMÉDICAS

(MICROBIOLOGÍA II SEMESTRE)

BARRANQUILLA – ATLÁNTICO

2020 – 1
 BD CDC ANAEROBE AGAR + 5% SHEEP BLOOD

BD CDC Anaerobe Agar with 5% Sheep Blood (agar BD para anaerobios de los CDC con

sangre de carnero al 5%) es un medio no selectivo para el aislamiento y cultivo de bacterias

exigentes y anaerobias obligadas a partir de muestras clínicas y materiales no clínicos.

PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO

El agar para anaerobios de los CDC con sangre de carnero al 5% fue formulado por Dowell

et al de los Centers for Disease Control and Prevention como medio enriquecido no

selectivo para el aislamiento y cultivo de una amplia variedad de microorganismos

anaerobios obligados, en especial los que se encuentran en muestras clínicas1-4. El medio

contiene agar de soja Trypticase suplementada con agar adicional como base de nutrientes.

El cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico. La sangre de carnero, la hemina, la

cistina y la vitamina K1 proporcionan factores de crecimiento necesarios por determinados

anaerobios obligados. Este medio ha demostrado favorecer el crecimiento de Prevotella

melaninogenica, Fusobacterium necrophorum, Clostridium haemolyticum, además de

determinadas cepas de Actinomyces israelii y Bacteroides thetaiotaomicron. Asimismo, se

ha reseñado una variación de colonias de menos lisas a rugosas de Bacteroides fragilis en

comparación con el agar sangre Schaedler.

 COMPOSICION

CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO

Incubar durante 48 – 72 h en atmósfera anaerobia (por ejemplo, el sistema anaerobio BD

GasPak).
 PROCEDIMIENTO DE PRUEBA DE RENDIMIENTO

1. Reducir todas las placas de agar anaeróbico durante la noche a temperatura ambiente en

un sistema anaeróbico GasPakTM EZ.

2. Inocular muestras representativas con diluciones del cultivo que se indica a

continuación.

a. Rayar las placas para su aislamiento. Utilice cultivos diluidos para obtener un resultado

de 103-105 UFC/placa.

b. Incluir el agar de soja TrypticaseTM con placas de sangre de oveja al 5% (TSA5%SB)

como control para todos los organismos y placas de un lote previamente probado de Agar

de Sangre de Oveja Anaerobio al 5% del CDC como controles para los anaerobios

obligados.

c. Incubar los controles de la placa TSA5%SB aeróbicamente a 35 ± 2°C y todas las demás

placas anaeróbicamente (sistema anaeróbico GasPak EZ) a 35 ± 2°C.

3. Examinar todas las placas inoculadas a las 24-48 h para la cantidad de crecimiento,

tamaño de la colonia, pigmentación y reacciones hemolíticas.

 RESULTADOS

Después de la incubación, la mayoría de las placas mostrarán un área de crecimiento

confluente. Dado que el procedimiento de extensión de la muestra es, de hecho, una técnica

de “dilución”, se depositan cada vez menos microorganismos en las áreas en que se realiza.

Por consiguiente, una o más de estas áreas presentarán colonias aisladas de los organismos

que contenga la muestra. Por otra parte, el crecimiento de cada microorganismo podrá

medirse semi-cuantitativamente basándose en el crecimiento ocurrido dentro de las áreas en

que se realiza la extensión.

Clostridium perfringens
Fusobacterium nucleatum
 CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL

PROCEDIMIENTO

En BD CDC Anaerobe Agar with 5% Sheep Blood, que es uno de los medios estándar no

selectivos para el aislamiento de anaerobios estrictos, crecen los siguientes organismos:

Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Clostridium, Peptostreptococcus,

bacilos anaerobios estrictos no formadores de esporas (por ejemplo, el antiguo género

Eubacterium), Mobiluncus, Actinomyces y muchos otros. Tener en cuenta que la velocidad

de crecimiento de los anaerobios estrictos varía considerablemente: Mientras que

Bacteroides fragilis crecerá bien después de 24 horas, Mobiluncus o cepas de

Porphyromonas necesitan 4 – 5 días y Actinomyces puede necesitar 1 – 3 semanas o más

para producir colonias visibles en el pocillo. Si los cultivos son negativos después de 2 – 3

días de incubación, volver a incubar en atmósfera anaerobia durante 2 – 3 días más. Si se

sospecha Actinomyces, se deben inocular cultivos especiales que se examinan después de

1, 2 y finalmente 3 semanas de incubación. El medio no es selectivo específicamente de

organismos anaerobios estrictos. Cuando se incuba en atmósfera anaerobia, en este medio

crecerán también organismos facultativos. Por consiguiente es importante comparar el

resultado de los cultivos anaerobios con los de una placa incubada en atmósfera aerobia si

se obtienen cultivos mixtos. BD CDC Anaerobe Agar with 5% Sheep Blood no contiene

glucosa ni otros azúcares. Por tanto, los organismos muy asacarolíticos, tales como los

lactobacilos y determinados clostridios sacarolíticos crecerán muy lentamente en este

medio. BD Schaedler Agar with Vitamin K1 and 5% Sheep Blood es el medio de

preferencia para el aislamiento no selectivo de dichos organismos. Son altos el número y la

variedad de especies bacterianas que actúan como agentes infecciosos. Por tanto, antes de

utilizar sistemáticamente el medio para microorganismos de reciente descripción o

raramente aislados, el usuario debe analizar su conveniencia mediante cultivos puros del

microorganismo en cuestión.
 BIBLIOGRAFIA

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 Starr, S.E., G.E. Killgore, and V.R. Dowell, Jr. 1971. Comparison of Schaedler agar and
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 https://legacy.bd.com/europe/regulatory/assets/ifu/hb/ce/pa/es-pa-256506.pdf